miRNA-21、白细胞介素-17、缺氧诱导因子-1α在多发性骨髓瘤患者中的表达水平及临床意义

目的探讨微小RNA-21(miRNA-21)、白细胞介素-17(IL-17)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)在多发性骨髓瘤患者中的表达及临床意义。方法选取78例多发性骨髓瘤患者和64例健康体检者,分别作为研究组和对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测两组受试者miRNA-21水平,酶联免疫吸附试验检测两组受试者血清IL-17、HIF-1α水平。比较两组受试者、不同预后情况多发性骨髓瘤患者miRNA-21、IL-17、HIF-1α水平。采用Pearson相关分析法分析多发性骨髓瘤患者miRNA-21与IL-17、HIF-1α水平的相关性。采用Cox风险比例回归模型分析多发性骨髓瘤患者预后的影响因素。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析miRNA-21、IL-17、HIF-1α单独及联合检测对多发性骨髓瘤的诊断价值及对预后的预测价值。比较不同miRNA-21、IL-17、HIF-1α表达情况多发性骨髓瘤患者的生存情况。结果研究组患者miRNA-21、IL-17、HIF-1α水平均明显高于对照组,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。预后不良多发性骨髓瘤患者miRNA-21、IL-17、HIF-1α水平均明显高于预后良好患者,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。多发性骨髓瘤患者miRNA-21与IL-17、HIF-1α水平均呈正相关(r=0.447、0.462,P﹤0.05)。miRNA-21、IL-17、HIF-1α均是多发性骨髓瘤患者预后的独立危险因素(P﹤0.05)。ROC曲线显示,miRNA-21、IL-17、HIF-1α联合检测诊断多发性骨髓瘤的曲线下面积(AUC)、灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值均高于三者单独检测;miRNA-21、IL-17、HIF-1α联合检测预测多发性骨髓瘤患者预后的AUC、灵敏度、阴性预测值均高于三者单独检测。miRNA-21、IL-17、HIF-1α高表达组多发性骨髓瘤患者的2年累积生存率分别低于miRNA-21、IL-17、HIF-1α低表达组患者,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。结论多发性骨髓瘤患者中miRNA-21、IL-17、HIF-1α均高表达,且miRNA-21与IL-17、HIF-1α水平均呈正相关,三者联合检测可较好地诊断多发性骨髓瘤及预测预后,有助于临床及早采取有效的防治措施,改善多发性骨髓瘤患者的预后情况。

血清外泌体miRNA-21、miRNA-214联合检测在骨质疏松症诊断中的价值

目的探讨骨质疏松症(OP)患者血清外泌体中微小RNA(miRNA)-21和miRNA-214的相对表达水平及其对OP的诊断价值。方法选取重庆市人民医院2022年1月至2023年12月收治的77例OP患者作为OP组,另选取同期该院81例健康体检者为健康对照组。分离并鉴定血清外泌体,提取外泌体miRNA。采用实时荧光定量反转录-聚合酶链反应(RT-qPCR)检测两组血清外泌体中miRNA-21和miRNA-214的相对表达水平。采用受试者工作特征(ROC)曲线评估血清外泌体中miRNA-21和miRNA-214对OP的诊断价值。结果分离的血清外泌体中CD63标志蛋白呈高表达。OP组血清外泌体miRNA-21和miRNA-214相对表达水平分别为5.302(2.407,9.765)和1.875(1.605,2.450),明显高于对照组的1.338(0.801,2.088)和1.163(0.860,1.391),差异均有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,血清外泌体miRNA-21、miRNA-214相对表达水平升高是导致OP的危险因素(P<0.05)。ROC曲线结果显示,血清外泌体miRNA-21、miRNA-214诊断OP的AUC分别为0.853、0.811,灵敏度分别为80.5%、89.6%,特异度分别为79.0%、82.7%,二者联合诊断OP的AUC为0.919,灵敏度为90.9%,特异度为84.0%。结论血清外泌体miRNA-21和miRNA-214单独检测对诊断OP具有一定的价值,二者联合检测可提高诊断的准确性,有临床应用价值。

miRNA-223、miRNA-21及miRNA-27a与冠心病冠脉病变的关系

目的 探讨miRNA-223、miRNA-21及miRNA-27a与冠心病冠脉病变的关系。方法 选取2021年1月至2022年12月商丘市第一人民医院收治的CHD患者86例为观察组,选取70名同期院内健康体检者作为对照组。对比两组血清miRNA-223、miRNA-21、miRNA-27a水平;分析影响CHD冠脉病变的单因素,采用Logistic回归分析影响CHD冠脉病变的单因素、多因素;对比不同CHD冠脉病变类型的血清miRNA-223、miRNA-21、miRNA-27a水平;对比不同CHD冠脉病变支数的血清miRNA-223、miRNA-21、miRNA-27a水平。结果 观察组miRNA-223、miRNA-21、miRNA-27a表达水平比对照组高,差异有统计学意义(P<0.05);Logistic多因素分析显示,患有高血压、糖尿病以及miRNA-223>1.5、miRNA-21>6.0、miRNA-27a>5.5均是影响CHD冠脉病变的独立危险因素(P<0.05);miRNA-223、miRNA-21、miRNA-27a表达水平:急性心肌梗死>不稳定型心绞痛>稳定型心绞痛,差异有统计学意义(P<0.05);miRNA-223、miRNA-21、miRNA-27a表达水平:三支>双支>单支,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 不同冠脉病变CHD患者miRNA-223、miRNA-21、miRNA-27a表达水平不同,提示以上指标对判断CHD患者冠脉病变类型具有一定的临床价值。

血清FGF21、Sfrp5、miRNA-21对冠心病经皮冠状动脉介入治疗术后支架内再狭窄的预测价值

目的探讨血清成纤维细胞生长因子21(FGF21)、分泌型卷曲蛋白5(Sfrp5)、微小RNA-21(miRNA-21)对冠心病(CHD)经皮冠状动脉介入治疗术(PCI)后支架内再狭窄(ISR)的预测价值。方法选择商水县人民医院2021年1月至2022年9月间行PCI手术治疗的CHD患者218例为CHD组,同期非心血管疾病的住院患者97例为对照组,比较两组FGF21、Sfrp5及miRNA-21;CHD组术后随访6个月,以是否发生ISR分为ISR组(n=56)及无ISR组(n=162);分析CHD患者行PCI手术后发生ISR的影响因素,分析FGF21、Sfrp5及miRNA-21对ISR的预测价值。结果CHD组FGF21、miRNA-21均高于对照组,Sfrp5水平低于对照组,差异有统计学意义(t=11.196、15.030、13.685,P<0.05);ISR组低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、FGF21、miRNA-21均高于无ISR组,Sfrp5水平低于无ISR组,差异有统计学意义(t=7.093、7.216、6.388,P<0.05),ISR组吸烟、合并糖尿病比率高于无ISR组,差异有统计学意义(χ^(2)=6.015、11.295,P<0.05);多因素Logistic回归分析显示,LDL-C、合并糖尿病、FGF21、Sfrp5、miRNA-21是CHD患者行PCI术后发生ISR的影响因素(P<0.05);ROC曲线分析显示,FGF21、Sfrp5、miRNA-21三者单独及联合检测预测PCI术后发生ISR的AUC分别为0.772、0.758、0.763、0.905(P<0.05)。结论血清FGF21、Sfrp5、miRNA-21在行PCI手术后发生ISR的CHD患者中表达异常,联合检测三者水平对于预测CHD患者PCI术后发生ISR具有较好的应用价值。

恒温扩增检测miRNA-21-5p系统的构建和初步评价

目的建立一种基于滚环扩增和CRISPR-Cas9系统的荧光检测miRNA-21-5p方法,并对检测性能进行初步评价。方法设计一种特异性的锁式探针识别靶标miRNA-21-5p,在大肠杆菌DNA连接酶和Phi29 DNA聚合酶的作用下,进行滚环扩增,扩增形成一条长重复单链。在Cas9酶的辅助下进行特异性识别,并形成双链DNA,然后通过加SYBR GreenⅠ荧光染料与形成双链DNA产物结合,产生荧光信号的荧光强度与双链DNA产物浓度成正比,并对该系统进行特异性和灵敏度进行分析。用构建的方法对胃癌患者血清和健康人血清进行miRNA检测,是否成功检测miRNA,同时检测两组血清中胃蛋白酶原Ⅰ/胃蛋白酶原Ⅱ(PGⅠ/Ⅱ)水平,绘制受试者工作特征(ROC)曲线,根据曲线下面积(AUC)分析miRNA-21-5p、胃蛋白酶原对胃癌的诊断价值。结果构建的扩增系统能检测到血清中miRNA,胃癌血清中miRNA-21-5p荧光强度高于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05);ROC曲线结果显示,miRNA-21-5p、PGⅠ/Ⅱ单独诊断胃癌的AUC分别为0.72、0.80,两者联合检测诊断的AUC为0.85,高于任意单个指标诊断。结论用该方法直接检测miR-21-5p操作方便快捷,不需要复杂热循环仪器,适用范围广。

急性心肌梗死血清miRNA-21变化及其与细胞凋亡因子的相关性

目的 分析急性心肌梗死(AMI)患者血清微小RNA-21(miRNA-21)变化及其与细胞凋亡因子[半胱氨酸天冬酶-3(Caspase-3)、可溶性肿瘤坏死因子相关性凋亡诱导配体(sTRAIL)、可溶性凋亡相关因子(sFas)]的相关性。方法 选取北京市大兴区人民医院2020年4月至2022年4月112例AMI患者作为研究组,根据冠脉病变程度分为单支组(n=30)、双支组(n=48)及三支组(n=34),选取同期健康体检者70名作为对照组。采用实时荧光定量聚合链式反应技术检测血清miRNA-21水平,酶联免疫吸附法检测血清Caspase-3、sTRAIL及sFas水平。比较所有受试者血清miRNA-21、Caspase-3、sTRAIL及sFas水平,采用Pearson系数分析miRNA-21与Caspase-3、sTRAIL及sFas的相关性,采用ROC曲线分析血清miRNA-21、Caspase-3、sTRAIL及sFas对AMI的诊断价值,采用Spearman系数分析miRNA-21、Caspase-3、s TRAIL及s Fas与冠脉病变程度的相关性。结果 研究组血清miRNA-21、Caspase-3、sTRAIL及sFas水平均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);Pearson相关性分析显示,AMI患者血清miRNA-21均与Caspase-3、sTRAIL、sFas呈正相关(P<0.05);由ROC曲线可知,血清miRNA-21、Caspase-3、sTRAIL及s Fas联合诊断AMI的AUC为0.940,高于四者单独诊断的0.788、0.749、0.775、0.756(P<0.05);三组血清miRNA-21、Caspase-3、sTRAIL及sFas水平相比:三支组>双支组>单支组,差异均有统计学意义(P<0.05);Spearman相关性分析显示,miRNA-21、Caspase-3、sTRAIL及sFas均与冠脉病变程度呈正相关(P<0.05)。结论 miRNA-21与细胞凋亡因子在AMI患者血清中呈高表达,且均与冠脉病变程度相关,有望成为诊断AMI的参考指标。

miRNA-21对结直肠癌耐药细胞ATM/CHK2/CDC25A信号通路的影响

目的 探讨miRNA-21在结直肠癌奥沙利铂(L-OHP)耐药细胞株HCT116/L-OHP中对毛细血管扩张性共济失调突变基因(ATM)/细胞周期检测点激酶(CHK)2/细胞分裂周期素(CDC)25A信号通路的影响。方法 应用细胞转染技术干扰HCT116/L-OHP细胞中miRNA-21的表达,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测HCT116/L-OHP中ATM、CHK2、CDC25A和细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)2 mRNA表达,Western印迹检测该细胞株中miRNA-21表达变化后ATM、CHK2、CDC25A和CDK2蛋白表达。结果 转染miRNA-21 mimic使miRNA-21表达升高时,ATM、CHK2、CDC25A和CDK2 mRNA和蛋白的表达均随之升高,且与未转染组和阴性转染组相比较差异均具有统计学意义(P<0.05);转染miRNA-21 inhibitor使miRNA-21表达降低时,ATM、CHK2、CDC25A和CDK2 mRNA和蛋白的表达均随之降低,且与未转染组和阴性转染组相比较差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论 在结直肠癌耐药细胞株HCT116/L-OHP中,miRNA-21对ATM/CHK2/CDC25A信号通路有调控作用,抑制miRNA-21的表达可阻断ATM/CHK2/CDC25A信号通路,进而抑制耐药细胞的无限增殖。

miRNA-21-5p对光诱导的人视网膜色素上皮细胞氧化应激损伤的影响

目的研究miRNA-21-5p对光诱导的人视网膜色素上皮细胞氧化应激损伤的影响。方法将体外培养的人视网膜色素上皮细胞系ARPE-19细胞随机分为对照组(TransIntro EL Transfection Reagent转染液培养)、损伤组(TransIntro EL Transfection Reagent转染液+光损伤)、过表达组(TransIntro EL Transfection Reagent转染液+miRNA-21-5p mimics+光损伤)、阴性组(TransIntro EL Transfection Reagent转染液+miRNA-21-5p mimics NC+光损伤)、PI3K/Akt阻断剂组(TransIntro EL Transfection Reagent转染液+miRNA-21-5p mimics+LY294002+光损伤)。使用光照强度为(16500±200)lx的LED冷光灯建立ARPE-19细胞光损伤模型,利用TransIntro EL Transfection Reagent转染液行细胞转染。采用qRT-PCR法检测各组ARPE-19细胞miRNA-21-5p表达水平,采用CCK-8法检测各组ARPE-19细胞活力,流式细胞仪检测各组ARPE-19细胞活性氧(ROS)含量变化,ELISA法检测各组ARPE-19细胞超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量。结果与对照组相比,损伤组ARPE-19细胞miRNA-21-5p表达明显下降,细胞存活率明显下降,ROS含量显著升高,SOD活性明显降低,MDA含量明显增加(均为P<0.001);与损伤组相比,过表达组ARPE-19细胞miRNA-21-5p表达明显升高,细胞存活率明显上升,ROS含量明显降低,SOD活性升高,MDA含量减少(均为P<0.001),而阴性组ARPE-19细胞miRNA-21-5p表达、细胞存活率、ROS含量、SOD活性、MDA含量均无明显差异(均为P>0.05);与过表达组相比,PI3K/Akt阻断剂组ARPE-19细胞miRNA-21-5p表达明显降低,细胞存活率明显下降,ROS含量明显升高,SOD活性明显降低,MDA含量明显增加(均为P<0.01)。结论miRNA-21-5p能显著降低光诱导的ARPE-19细胞氧化应激水平,提高光诱导的ARPE-19细胞抗氧化能力。

miRNA-21提高骨髓间充质干细胞心肌样分化和旁分泌的作用

目的 探讨miRNA-21提高BMSC向心肌样细胞分化和促进旁分泌的作用。方法 分离培养骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cell,BMSC),行BMSC性质鉴定;通过构建缺血心肌动物模型;健康SD大鼠20只,随机分为miR-21-OE组、miR-21-KD组和对照组,每组各5只;将成功构建的miR-21-OE和miR-21-KD慢病毒载体侵染BMSC,使用western-blot检测cTnI、Ajuba、isl1的表达情况。分组将BMSC移植到急性缺血心肌SD大鼠动物模型中,western-blot鉴定各组中BMSC体内分化为心肌样细胞VEGF、bFGF等的表达情况。结果 成功分离培养BMSC,成功构建miR-21-OE和miR-21-KD慢病毒感染BMSC;WB检测到cTnI在miR-21-OE组高表达,当miR-21表达增高时,抑制Ajuba的表达,加强Isl1表达。生物细胞学技术检测miR-21-OE组心肌梗死区域缩小,VEGF及bFGF表达增高。结论 miRNA-21能够提高BMSC向心肌样细胞分化能力和促进BMSC的旁分泌作用,从而提高缺血心肌功能。

miRNA-21在胸腔积液中表达及临床意义

目的:了解miRNA-21在胸腔积液中的表达及临床意义。方法:选取蚌埠市第三人民医院呼吸内科住院治疗的60例胸腔积液患者,其中恶性胸腔积液45例(肺鳞癌、肺腺癌、小细胞肺癌各15例)、良性胸腔积液15例。每例取13 mL新鲜胸腔积液提取miRNA,采用RT-PCR法检测各组胸腔积液中miRNA-21的相对表达量,采用ROC曲线评价miRNA-21对恶性胸腔积液诊断效能。结果:恶性组胸腔积液中miRNA-21表达水平(7.46±1.16)高于良性组(6.16±0.60),差异有统计学意义(P<0.05)。肺鳞癌组(8.15±0.74)、肺腺癌组(8.08±0.78)、小细胞肺癌组(8.10±0.66)与良性组(6.16±0.60)比较,差异均有统计学意义(P<0.05),恶性胸腔积液各组之间两两比较差异无统计学意义(P>0.05)。ROC分析结果显示,miRNA-21诊断恶性胸腔积液,曲线下面积0.977,灵敏度为87.8%,特异度为86.70%。结论:miRNA-21高表达在恶性胸腔积液的诊断方面具有一定的诊断效能,可能成为一种有效的诊断标志物。

miRNA-21在糖尿病肾脏病的作用机制及中药干预新进展

糖尿病肾脏病是糖尿病的并发症之一,可进展至终末期肾脏病。近年研究发现,miRNA-21可通过调控转化生长因子-β1(TGF-β1)/Smads、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)、Wnt/β-连环蛋白等信号通路影响糖尿病肾脏病的进展。中药对miRNA-21表达具有调节作用,可以靶向miRNA-21调控TGF-β1/Smads、磷酸酶张力蛋白同源物/PI3K/AKT/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白、过氧化物酶体增殖物激活受体等信号转导,引发信号级联反应,干预纤维化、炎症、氧化应激、自噬等病理过程。就miRNA-21在糖尿病肾脏病中的作用机制及中药对其的干预作用进行综述。

miRNA-21对PI3K/Akt信号通路的调控及其对非小细胞肺癌预后的影响

miRNA-21是miRNA家族中十分重要的一个基因,在多种恶性肿瘤中高表达。研究表明,miRNA-21对PI3K/Akt信号通路的调控可影响相关靶点的表达情况,因此,miRNA-21可能为非小细胞肺癌临床诊断和疾病治疗提供新靶标。本文对miRNA-21对PI3K/Akt信号通路的调控及其对非小细胞肺癌预后的影响作一综述。

血清外泌体miRNA-21在肝癌诊断中的应用

目的探究血清外泌体miRNA-21的表达水平在肝癌诊断中的应用。方法收集2018年12月-2019年12我院收治肝癌患者30例为研究对象,另选取正常健康体检者30例做对照组,收集所有受试者外周血血清,提取血清外泌体,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测血清外泌体miRNA-21表达水平;分析血清外泌体miRNA-21表达水平与肝癌患者临床病理参数的关系。绘制ROC曲线分析miRNA-21检测对肝癌的诊断价值。Logistic回归分析影响肝癌患者发生的危险因素。结果与对照组比较,肝癌患者血清外泌体miRNA-21表达水平明显升高;miRNA-21表达水平与患者年龄、性别、AFP水平无关;血清外泌体miRNA-21-5p和miRNA-21-3p表达水平诊断的肝癌患者的AUC分别为0.711、0.977,特异度分别为80%、100%,灵敏度分别为66.7%、90%,miRNA-21诊断肝癌患者的AUC为0.982,特异度为90%,灵敏度为96.7%。结论miRNA-21-5p和miRNA-21-3p在肝癌患者血清外泌体中显著高表达,两者联合检测可提高对肝癌诊断的特异度及灵敏度,对肝癌的诊断有一定的诊断意义。

miRNA-21的循环放大检测及成像

报道了一种miRNA循环放大检测系统,该系统涉及红色发射碳量子点(CDs)以及聚多巴胺纳米球(PDANSs)。通过纳米材料与DNA的自组装,在激发光源410、542 nm的照射下,产生650、585 nm的荧光信号,通过荧光信号的关-开,可以实现对靶标miRNA-21循环放大的双荧光检测与细胞成像,极大提高检测的灵敏度与准确性。

膀胱癌组织miRNA-15a、miRNA-21表达预测经尿道膀胱肿瘤切除术后复发的效能分析

目的:探讨膀胱癌组织miRNA-15a、miRNA-21表达预测经尿道膀胱肿瘤切除术后复发的效能。方法:选取我院2019年3月—2021年6月收治的173例(均完成1年随访)经尿道膀胱肿瘤切除术治疗的膀胱癌患者为研究对象,根据术后1年复发情况将患者分为复发组(35例)和未复发组(138例)。比较两组及不同病理学参数患者术后切除癌组织miRNA-15a、miRNA-21表达水平,分析术后切除癌组织miRNA-15a、miRNA-21表达水平与病理学参数及复发相关性,以及对术后复发的危险度。结果:与复发组相比,未复发组术后切除癌组织miRNA-15a表达水平较高,miRNA-21表达水平较低(P<0.05);术后切除癌组织miRNA-15a表达水平比较:Ta期>T1期、G1/G2级>G3级、有淋巴结转移<无淋巴结转移(P<0.05);术后切除癌组织miRNA-21表达水平比较:Ta期<T1期、G1/G2级<G3级、有淋巴结转移>无淋巴结转移(P<0.05);术后切除癌组织miRNA-15a表达水平与肿瘤分期、肿瘤分级、淋巴结转移、复发呈负相关,术后切除癌组织miRNA-21表达水平与肿瘤分期、肿瘤分级、淋巴结转移、复发呈正相关(P<0.05);术后切除癌组织中miRNA-21高水平患者复发的危险度高于低水平,术后切除癌组织中miRNA-15a高水平患者复发的危险度低于低水平(P<0.05)。结论:膀胱癌组织miRNA-15a、miRNA-21表达与复发风险存在关联性,动态监测其水平变化有助于了解膀胱癌病情,为术后复发风险提供可参考数据。

黄芪总黄酮对特发性肺纤维化miRNA-21、let-7 d及TGF-β/smad信号干预作用

目的：研究黄芪总黄酮对BLM诱导的肺纤维化模型miRNA-21、let-7 d表达水平和TGF-β1/smad信号干预作用。方法：C57BL/6小鼠随机分为假手术组、模型组、黄芪总黄酮组。模型组及药物处理组小鼠气管内一次性滴注博莱霉素（10 mg/kg）,假手术组予等量生理盐水,造模后治疗组予黄芪总黄酮（43 mg/kg）灌胃,假手术组和模型组与等量生理盐水灌胃。第28天取材,进行HE、Masson染色分析肺组织形态及胶原蛋白表达水平,羟脯氨酸含量测定胶原蛋白含量,realtime-PCR分析miRNA-21、let-7 d表达变化,Western-Bloting检测TGF-β/smad信号及EMT相关蛋白表达。结果：BLM诱导肺纤维化miRNA-21明显上调,而let-7 d下调,在此过程中信号蛋白smad7表达增强mad3磷酸化水平减弱,EMT标记蛋白α-SMA表达增高而E-cadherin减少,黄芪总黄酮对上述改变具有逆转作用,但对let-7 d表达无影响。结论：黄芪总黄酮可通过抑制miRNA-21,增加smad7表达,使TGF-β1/smad激活能力下降,抑制肺纤维化EMT作用。

脓毒症患者血清miRNA-21和PCT动态表达及其临床意义

目的:观察血清miRNA-21和炎症因子PCT在脓毒症病程中的动态表达,并探讨与脓毒症病情以及预后的关系。方法:收集脓毒症患者58例、健康对照24例,其中一般脓毒症32例,脓毒性休克26例,按28 d病死率分为生存组48例和死亡组10例。检测研究对象在入组第1、3、5天血清miRNA-21表达量以及炎症因子PCT水平,并记录患者的临床信息。结果:(1)与健康对照组比较,脓毒症患者入组第1天血清miRNA-21表达量明显升高(Z=-7.061,P=0.000),做ROC曲线分析得出血清miRNA-21诊断脓毒症的曲线下面积为0.997(95%CI=0.991~1.000,P=0.000),且以miRNA-21≥0.875为截断点,其诊断脓毒症的特异度和灵敏度分别为91.7%、100%。(2)在脓毒症5 d病程中,不同时间点的miRNA-21表达差异具有统计学意义(F=67.778,P=0.000),且不同时间点两两比较均有统计学差异(P=0.000,P=0.000,P=0.000),入组第1天血清miRNA-21表达量(1.974±0.886)ng/μL高于第3天miRNA-21表达量(1.015±0.709)ng/μL,第3天血清miRNA-21表达量高于第5天miR NA-21表达量(0.531±0.312)ng/μL。(3)在脓毒症5 d病程中,不同时间点的PCT表达差异具有统计学意义(F=34.304,P=0.000),且不同时间点两两比较均有统计学差异(P=0.000,P=0.000,P=0.000),入组第1天PCT表达量(14.164±13.939)μg/L高于第3天PCT表达量(4.224±4.039)μg/L,第3天PCT表达量高于第5天PCT表达量(1.614±3.438)μg/L。(4)脓毒性休克组入组第1天,血清miRNA-21表达量、PCT水平及APACHEⅡ评分均高于一般脓毒症组(Z=-6.510,P=0.000;Z=-4.457,P=0.000;Z=-6.517,P=0.000),且miRNA-21表达量与APACHEⅡ评分成正相关(r=0.993,P=0.000)。(5)血清miRNA-21在死亡组中高表达,且在各个观测时间点两组表达量均具有统计学差异(Z=-2.823,P=0.005;Z=-3.664,P=0.000;Z=-4.942,P=0.000)。结论:血清miRNA-21在脓毒症中表达明显升高,可能为脓毒症潜在的早期诊断标记物。血清miRNA-21在脓毒症病程中的动态表达可能与机体炎症反应紧密相关,并在预警脓毒症严重程度以及评估预后方面具有积极的临床意义。

miRNA-21和miRNA-134在乳腺癌患者血清中表达情况及其临床意义

【目的】研究乳腺癌相关miRNA在正常人群及乳腺癌患者血清中的表达情况,统计分析其在乳腺癌诊断中的临床价值。【方法】收集47例乳腺癌及50例正常体检人群血清,通过实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测各组miR-630、miR-21、miR-195、miR-134、miR-200a、miR-381、miR-1228的表达情况。分析单个血清miRNA在乳腺癌诊断中的价值,进一步用统计学方法分析多个miRNA联合检测的诊断价值。【结果】相比正常体检人群,乳腺癌患者血清中miR134和miR-21表达增加,P<0.01;miR-134的表达在早期和晚期患者之间没有明显区别,P=0.143;miR-21在晚期患者中表达增加,P=0.004;miR-195、miR-630、miR-200a、miR-381、miR-1228的表达量在两组之间差异没有统计学意义。ROC曲线分析结果显示,miR-21在乳腺癌诊断中的AUC为0.82(95%CI,0.71-0.88),P<0.001;miR-134在乳腺癌诊断中的AUC为0.88(95%CI,0.80-0.94),P<0.001。miR-21联合miR-134在乳腺癌诊断中AUC值为0.95(95%CI,0.89-0.99),P<0.001;两者联合优于单一检测miR-21或者miR-134,P<0.05。【结论】miR-21和miR-134在乳腺癌患者血清中升高,血清中miR-21和miR-134的表达情况,可以作为乳腺癌诊断的理想标志物。

血浆miRNA-21和miRNA-29c水平对非小细胞肺癌的诊断意义

目的:探讨血浆miRNA-21、miRNA-29c水平对非小细胞肺癌(NSCLC)的诊断意义。方法:采用实时荧光定量PCR法检测56例NSCLC患者和47例良性肺病患者血浆miRNA-21和miRNA-29c的相对表达水平。建立受试者工作特征(ROC)曲线,根据ROC曲线下面积判断它们诊断NSCLC的效能。依据ROC曲线分析设定的临界值计算血浆miRNA-21和miRNA-29c诊断NSCLC的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值和准确性。并将这些结果与NSCLC患者血清癌胚抗原检测结果进行比较。结果:NSCLC患者血浆miRNA-21水平显著高于良性肺病患者(P<0.001),而血浆miRNA-29c水平明显低于良性肺病患者(P<0.001)。NSCLC患者血浆miRNA-21和miRNA-29c水平与肿瘤的临床(TNM)分期显著相关(P=0.008和P=0.011),血浆miRNA-21水平与肿瘤的分化程度也明显相关(P=0.001)。根据ROC曲线分析取miRNA-21和miRNA-29c诊断NSCLC的临界值分别为4.026和0.985,血浆miRNA-21诊断NSCLC的敏感性和特异性分别为76.8%和76.6%,血浆miRNA-29c诊断NSCLC的敏感性和特异性分别为78.6%和72.3%。血清癌胚抗原诊断NSCLC的敏感性明显低于miRNA-21和miRNA-29c,特异性相似。结论:血浆miRNA-21和miRNA-29c诊断肺癌的效能优于血清癌胚抗原,有可能成为诊断NSCLC的血液标志物。

靶向抑制miRNA-21提高白血病K562细胞对阿糖胞苷的敏感性

为研究以miRNA-21为靶标的反义核酸(AMO-miR-21)提高白血病K562细胞对阿糖胞苷(Ara-C)的敏感性及可能的作用机制,在LipofectamineTM2000介导下,将化学合成的AMO-miR-21转染K562细胞,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测单独使用AMO-miR-21、Ara-C以及两者联合使用对细胞增殖抑制作用,并计算抑制率和IC50;流式细胞仪检测细胞凋亡;实时定量PCR(Real-time PCR)检测miRNA-21及其候选靶基因Pdcd4 mRNA的表达水平;免疫印迹(Western blot)检测Pdcd4蛋白的表达水平.结果显示Ara-C与AMO-miR-21联合使用后,IC50从1.95μmol/L降低到0.84μmol/L,敏感性提高到单用Ara-C的2.3倍.AMO-miR-21联合Ara-C组细胞凋亡明显增加(P<0.05).AMO-miR-21显著抑制K562细胞中miRNA-21的表达水平(P<0.05),同时Pdcd4的表达明显增加(P<0.05).提示AMO-miR-21可以提高K562细胞对Ara-C的敏感性,其作用机制与靶向抑制miRNA-21,进而诱导细胞凋亡有关.