肺结核患儿外周血单个核细胞miRNA-31、miRNA-146a表达水平检测价值

目的分析肺结核(PTB)患儿外周血单个核细胞(PBMC)miRNA-31、miRNA-146a表达水平,以及上述指标与细胞免疫和炎症因子的相关性。方法选取该院2019年2月至2022年2月收治的75例PTB患儿作为观察组,另选取同期健康体检儿童70例作为对照组。比较两组PBMC miRNA-31、miRNA-146a表达水平,外周血T淋巴细胞亚群、血清炎症因子水平。采用Pearson相关分析PBMC miRNA-31、miRNA-146a表达水平与T淋巴细胞亚群、炎症因子的关系。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析miRNA-31、miRNA-146a联合检测诊断儿童PTB的效能。结果观察组PBMC miRNA-31、miRNA-146a表达水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)比值低于对照组,而CD8^(+)比例高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。观察组白细胞介素(IL)-2、IL-6、IL-8水平均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关分析发现,PTB患儿PBMC miRNA-31、miRNA-146a表达水平与CD3^(+)、CD4^(+)比例及CD4^(+)/CD8^(+)比值均呈负相关(P<0.05),与CD8^(+)比例及IL-2、IL-6、IL-8水平均呈正相关(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,PBMC miRNA-31、miRNA-146a表达水平联合检测诊断儿童PTB的曲线下面积均大于单项检测,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论儿童PTB PBMC miRNA-31、miRNA-146a均存在异常高表达,与细胞免疫、炎症因子均密切相关。

miRNA-31在高糖诱导内皮细胞功能障碍中的作用

目的探讨miRNA-31在高糖诱导的内皮细胞功能障碍中的作用机制。方法体外培养人冠状动脉内皮细胞系,不同浓度高糖刺激24 h后检测细胞内皮型一氧化氮合酶(eN OS)蛋白表达及培养上清液NO含量;Real-time PCR检测高糖刺激后miRNA-31表达变化;microRNA在线分析软件预测并应用双荧光素酶报告基因系统和Western blot验证eN OS是否为miRNA-31的直接靶基因;通过转染miRNA-31 antagomir观察miRNA-31对内皮细胞功能障碍的影响。结果不同浓度的高糖刺激内皮细胞24 h后,eN OS蛋白表达和培养液NO含量呈剂量依赖性下降。高糖刺激内皮细胞miRNA-31表达明显增加。microRNA在线分析软件及双荧光素酶报告基因实验提示eN OS的翻译水平受miRNA-31直接调控。转染miRNA-31 antagomir明显上调高糖刺激后内皮细胞eN OS蛋白和培养液NO含量。结论 miRNA-31上调进而抑制eN OS表达可能是高糖诱导内皮细胞功能障碍的作用机制之一。

miRNA-31和STAT-3在舌鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的:探讨miRNA-31和STAT-3在舌鳞状细胞癌中的变化及相关性。方法:收集137例舌鳞状细胞癌患者组织标本,利用荧光原位杂交法检测miRNA-31在组织中的表达情况,利用SP免疫组化法检测STAT-3在组织中表达情况,分析miRNA-31和STAT-3在不同分化程度舌鳞癌组织中表达,利用Kaplan-meier法分析miRNA-31和STAT-3表达与生存期的关系。结果:miRNA-31在低分化、中分化和高分化组织中阳性表达率分别为(80.6±14.3)%、(58.5±15.7)%和(23.7±9.4)%,STAT-3分别为(85.9±12.7)%、(51.7±16.3)%和(17.6±9.1)%,差异均具有统计学意义(P<0.05);Spearman等级相关分析显示,舌鳞癌组织中miRNA-31和STAT-3表达呈正相关(r=0.614,P<0.05);生存分析显示,miRNA-31高表达组患者中位生存期37个月,低表达组患者中位生存期65个月,STAT-3高表达组患者中位生存期38个月,低表达组患者中位生存期66个月,差异均具有统计学意义(P<0.001)。结论:miRNA-31和STAT-3舌鳞癌组织中表达与组织分化程度有关,且miRNA-31和STAT-3呈正相关,高表达可影响患者预后。

miRNA-31在肿瘤研究中的新进展

微小RNAs（microRNAs,miRNAs）是一类长度为19～23个核苷酸的可调控基因表达的内源性非编码单链RNA分子,广泛存在于真核生物中。多数的人miRNAs位于蛋白编码基因的内含子或非编码miRNA转录片段中,其余miRNAs在基因组中离其他转录本较远,如位于非编码miRNA基因的外显子中,或miRNA基因的3＇端非翻译区（UTR）或成群聚集在其他miRNAs基因中[1]。

miRNA-31、转录因子C／EBP-β与子宫内膜容受性的相关性

子宫内膜容受性是决定胚胎成功着床的重要因素。临床上常通过对子宫内膜容受性的评估判断胚胎最佳着床期，从而提高辅助生殖技术的成功率。对人类来说，胚胎在多种细胞因子、生长因子及黏附分子等调控下完成其在子宫内膜的定位、黏附及植入过程。许多因子在子宫内膜的胚胎植入窗期出现，其中部分因子与子宫内膜容受性密切相关，而被提议作为监测子宫内膜容受性的分子标记物。本文将对目前评估子宫内膜容受性的两种最新手段，即测定血清 miRNA-31（miR-31）或测定子宫内膜转录因子 C ／EBP-β（CCAAT 增强子结合蛋白β）的研究进展进行综述。

miRNA-31在结直肠癌细胞中的表达及其作用机制的研究

目的探讨miRNA-31在结肠癌细胞生长及转移过程中的作用,为结直肠癌发生、转移机理提供实验依据。方法采用miRNA检测芯片分析10例结直肠癌患者癌组织和癌旁正常组织的miRNA表达谱;RT-PCR检测结直肠癌细胞系与正常结肠细胞miRNA的差异表达;用RT-PCR和免疫印迹等方法进行miRNA-31生物学功能验证;观察结直肠癌细胞系中miRNA-31及其调控靶基因对细胞增殖、周期和侵袭能力的调控作用。结果与癌旁对照组织相比,miRNA-31在结直肠癌组织中高效表达,并与另外39例患者结直肠癌组织标本检测一致,同时miRNA-31的表达水平与结直肠癌患者肿瘤组织的转移性和TNM分期有关。miRNA-31可促进结直肠癌细胞系HCT-116细胞的增殖和侵袭。结论 miRNA-31可作为结直肠癌发生发展的潜在分子标志物,为结直肠癌的临床检测提供新的检测靶点。

食管鳞癌miRNA-31表达与临床因素相关分析

目的食管鳞癌miRNA-31表达水平与各临床因素的关系分析。方法收集本院胸外科2012年1月-2013年1月手术切除的经病理医生确诊的食管鳞癌患者的癌组织以及相应癌旁组织冷冻标本40例,采用RT-PCR法检测各组织标本的miRNA-31表达水平,分析其与临床特征之间的关系。结果食管鳞癌组织miRNA-31相对表达量与癌旁组织表达量差异显著,具有统计学意义(P<0.05)。TNM分期(Ⅲ/Ⅳ)食管鳞癌的miRNA-31表达水平较TNM分期(Ⅰ/Ⅱ)明显上升,差异具有同意学意义(P<0.05)。局部浸润(T3/T4)食管鳞癌miRNA-31表达水平较局部浸润(T1/T2)明显上升(P<0.05)。结论食管鳞癌组织miRNA-31表达与食管鳞癌的转移性和TNM有关。

miRNA-31生物学功能及其与肿瘤关系的研究进展

微小RNA(miRNA)是一类长20~25个核苷酸的单链RNA分子,能调节靶基因的表达及相关信号通路,发挥抑癌基因或原癌基因的功能,从而影响肿瘤的发生发展。miRNA-31在多种肿瘤中异常表达,在不同类型的肿瘤中发挥不同甚至完全相反的作用,其异常表达与肿瘤的发生发展密切相关。此外,miRNA可能成为肿瘤早期诊断的标志物,对肿瘤的诊断和预后具有潜在的应用价值。目前一些研究提供了与miRNA-31失调相关的上游和下游事件的信息,有助于揭示恶性肿瘤发生的分子机制。本文对miRNA-31在恶性肿瘤发生发展、转移及治疗等方面的研究进展进行综述。

胸腔积液DNA异倍体及血清miRNA-31在肺癌诊断中的临床研究

目的研究胸腔积液中DNA异倍体及血清中miRNA-31表达在肺癌诊断中的临床研究。方法选择2013年8月至2015年8月在该院治疗的疑似肺癌伴有胸腔积液的患者65例,根据患者最终病理结果分为肺癌组(30例)、非肺癌组35例。收集患者临床资料,探讨DNA异倍体及miRNA-31对肺癌的诊断价值。结果胸腔积液DNA异倍体的诊断效能较高,优于miRNA-31,其诊断的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别为86.5%、97.7%、78.5%、98.2%。胸腔积液DNA异倍体、血清中miRNA-31是肺癌的独立危险因素(P<0.05)。结论胸腔积液中DNA异倍体和血清mi-RNA水平诊断肺癌具有较好的特异度和灵敏度。

miRNA-31对类风湿关节炎患者病情活动的评估效果研究

目的探究miRNA-31对类风湿关节炎(RA)患者病情活动的评估效果。方法选取68例RA患者作为实验组,另选取年相仿的32名健康体检者作为对照组,比较两组miRNA-3l水平。RA患者参照世界卫生组织(WHO)1999年标准,分为青年组及中老年组。比较青年RA患者、中老年RA患者的miRNA-3l水平;依据患者病情活动分组,对比RA患者不同病情活动中miRNA-31的水平。结果 RA患者的miRNA-3l相对表达水平高于健康对照组,为其7.66倍,差异有统计学意义(P <0.05)。RA患者中青年组患者12例,中老年组患者56例,中老年组的miRNA-3l水平均高于青年组(P <0.05)。RA患者高疾病活动期和中疾病活动期miRNA-31水平显著较高,与缓解期差异有统计学意义(P<0.05);RA患者缓解期及RA患者低疾病活动期的miRNA-31水平差异无统计学意义(P> 0.05)。结论 miRNA-31水平的表达可能会评估出RA患者的不同病情活动。

miRNA-31-5p和SATB2的表达对乳腺癌细胞增殖和迁移的影响机制

目的:探讨微小RNA-31-5p(microRNA-31-5p,miRNA-31-5p)和核基质结合蛋白质2(special AT-rich sequence-binding protein 2,SATB2)在乳腺癌中的表达,以及其对乳腺癌细胞增殖和迁移的影响。方法:选取2017年3月至2020年12月于天津医科大学总医院收治行外科切除的80例乳腺癌患者的临床病理资料,定量反转录-聚合酶链反应(qRT-PCR)检测乳腺癌组织标本和各细胞系中miRNA-31-5p和SATB2 mRNA表达。双荧光素酶实验证明miRNA-31-5p和SATB2的关系。细胞实验分为正常组(未行任何干预),miRNA-31-5p-agomir-对照组(细胞转染miRNA-31-5p-agomir-NC),miRNA-31-5p激动剂组(细胞转染miRNA-31-5p-agomir),pcDNA3.1组(细胞转染miRNA-31-5p-agomir+pcDNA3.1-SATB2)。EDU染色、Transwell小室实验检测各组细胞的体外增殖与转移活性;裸鼠皮下种植乳腺癌模型检测细胞的体内生长、转移能力;Western blot检测SATB2、E-钙黏蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)的表达。结果:与癌旁组织和乳腺正常细胞相比,miRNA-31-5p在乳腺癌组织和乳腺癌细胞中的表达下降,SATB2 mRNA表达升高;miRNA-31-5p能靶向调控SATB2表达;与正常组相比,miRNA-31-5p激动剂组细胞的体外增殖与转移以及体内生长与转移能力均明显下降,SATB2和Vimentin的表达降低,E-cadherin的表达升高,而转染pcDNA3.1-SATB2后可部分逆转这一抑制作用,差异均具有统计学意义(均P<0.05)。结论:miRNA-31-5p在乳腺癌中的表达降低,SATB2的表达升高,过表达miRNA-31-5p后能明显抑制MDA-MB-231细胞的体外增殖与转移、体内生长与转移能力,但转染pcDNA3.1-SATB2可部分逆转这一抑制作用。

月白散对瘘管模型大鼠创面miRNA-31表达及修复的影响

目的探讨月白散对大鼠瘘管术后创面组织中miRNA-31、miRNA-31靶向作用蛋白EMP1表达水平和创面愈合的影响。方法选用45只雄性SD大鼠,随机分为正常组(n=15)、模型组(n=15)和月白散组(n=15),除正常组外,其余大鼠采用体表瘘管造模术结合瘘管切除术造模,模型组每天用生理盐水冲洗创面,月白散组每天用生理盐水冲洗创面后外敷月白散,分别于第3 d、7 d和10 d每组随机抽取5只大鼠处死取样,比较创面肉芽组织miRNA-31及其靶向调控蛋白EMP1的表达水平,并观察伤口的愈合情况。结果月白散组术后miRNA-31表达水平显著高于正常组和模型组(P<0.01),且表达量随着治疗时间增加而升高,于第10天达到最高值;月白散组miRNA-31靶向调控蛋白EMP1表达水平均较正常组和模型组显著降低(P<0.01);组织形态学检测发现,月白散组大鼠肉芽组织TGF-β1水平、胶原蛋白合成速度优于模型组,这与HE结果趋势一致。结论月白散能通过促进瘘管创面肉芽组织miRNA-31的表达来加快创面的愈合。

miRNA-31-5p在过量维甲酸抑制C2C12细胞增殖中的调控机制研究

目的探讨miRNA-31-5p在过量维甲酸(Retinoic acid,RA)抑制小鼠肌原细胞系C2C12增殖中的作用机制。方法在10μmol/L RA及无RA条件下,q PCR检测C2C12细胞增殖过程中miRNA-31-5p及抗肌营养不良蛋白(dystrophine,Dmd)表达的水平;分别转染miRNA-31-5p mimics(miRNA-31-5p mimics组)、miRNA-31-5p inhibitor(miRNA-31-5p inhibitor组)、Duplex N.C(Duplex N.C组)及N.C inhibitor(N.C inhibitor组)。用细胞增殖/毒性检测实验(CCK-8)检测0 h,24 h,36 h及48 h的OD值,5-溴脱氧尿嘧啶核苷掺入实验(Brd U)检测48 h细胞中Brd U阳性细胞比率。在10μmol/L RA条件下,q PCR检测C2C12细胞在下调miRNA-31-5p后,Dmd表达水平变化。结果在10μmol/L RA条件下,细胞中miRNA-31-5p在36 h及48 h的表达水平均明显高于相同时间点正常条件下的表达水平,P<0.01;Dmd在36 h及48 h的表达水平均明显低于相同时间点正常条件下的表达水平,P<0.01。CCK-8结果显示在0μmol/L RA条件下,miRNA-31-5p过表达抑制C2C12细胞增殖,10μmol/L RA条件下,细胞的增殖活性进一步降低;0μmol/L RA条件下,miRNA-31-5p低表达促进C2C12细胞增殖,10μmol/L RA作用下,miRNA-31-5p inhibitor组细胞增殖活性在第48 h显著高于N.C inhibitor组,P<0.01。10μmol/L RA的作用下,miRNA-31-5p mimics组细胞Brd U阳性率与Duplex N.C组比降低27.6%,P<0.05;miRNA-31-5p inhibitor组细胞Brd U阳性率与N.C inhibitor组相比升高24.1%,P<0.05。转染48 h后,miRNA-31-5p inhibitor组Dmd的相对表达量较N.C inhibitor组明显上调,P<0.01;在10μmol/L RA作用下,miRNA-31-5p inhibitor组细胞Dmd的表达升高,与N.C inhibitor组相比差异具有显著性意义。结论 miRNA-31-5p可参与10μmol/L RA导致的C2C12细胞增殖抑制,而其可能的分子机制是通过对Dmd靶向作用实现的。

灌肠方抑制晚期肠癌生长及对血清VEGF和miR-NA-31表达的临床研究

目的观察灌肠方联合化疗和单用化疗治疗肠癌病人外周血miRNA-31和血管内皮生长因子(VEGF)表达的变化。方法将符合纳入标准的患者随机分为20例实验组和20例对照组,实验组采用仙鹤草、败酱草、龙葵组成的灌肠方联合化疗治疗,对照组单用FOLFOX方案化疗,观察灌肠方联合化疗对晚期肠癌患者治疗后临床疗效评价、中医证侯疗效判定、生活质量评分标准及毒性反映等影响,采用荧光定量PCR法检测灌肠方干预后患者血清miRNA-31表达水平的变化,采用ELISA检测其对人VEGF表达水平的影响,探索灌肠方的作用机理。结果联合治疗组缓解率明显大于单用化疗组(P<0.05);2组临床证候疗效比较,P>0.05;经卡氏评分,联合治疗组生活状况优于单用化疗组(P<0.05);联合治疗组VEGF、miRNA-31均低于单用化疗组(P<0.01)。结论灌肠方联合化疗治疗晚期大肠癌能提高临床客观疗效及疾病控制率,降低晚期大肠癌患者血清VEGF水平,其作用机制可能与miRNA-31水平下调有关。

MiR-31促进人牙髓间充质干细胞增殖和迁移

牙髓炎和根尖周炎是口腔科目前较为常见的2种疾病,现有的治疗方案主要包括根管治疗和牙髓血运重建,能有效控制住炎症进而保存患牙,然而同时也会导致牙髓组织的永久失活,发生结构故障和继发感染。近年来,结合干细胞和生物材料等的组织工程技术使牙髓再生的研究逐渐进入人们的视野,其中从恒牙或乳牙中分离的牙髓间充质干细胞(dental pulp stem cells,DPSCs),因其多向分化和高增殖等特性已成为牙本质或者髓样组织再生的重要的干细胞来源。但是由于干细胞不能高效募集到损伤区域,影响受损区的活细胞数量和存活时间,显著降低了其应用疗效,因此,需要提高牙髓干细胞的迁移和增殖能力,本研究旨在探讨微核糖核酸31(microRNA-31,miR-31)能否有效提高DPSCs的增殖迁移能力。通过组织块酶消化法从牙髓组织中成功分离培养了DPSCs,比较了分别取自健康牙与炎症牙的牙髓组织和DPSCs中miR-31水平的差异,利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)技术检测的结果显示,与健康牙比较,炎症牙来源的牙髓组织和DPSCs中miR-31表达水平明显降低(P<0.05)。干扰和过表达DPSCs中的miR-31表达,具体分为NC组、miR-31 agomir(过表达)组和miR-31 antagomir(抑制剂)3个组,RTq-PCR结果显示,其转染成功(P<0.001)。CCK-8、细胞划痕以及Transwell迁移结果表明,与对照组相比,过表达miR-31成功提高了牙髓干细胞的增殖和迁移能力(P<0.05),且进一步通过Western印迹结果发现,过表达miR-31后增殖关键蛋白质增殖抗原(Ki67)、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)以及迁移关键蛋白质CXC趋化因子受体4型(CXC chemokine receptor type 4,CXCR4)、基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase2,MMP2)的蛋白质水平均显著升高(P<0.05)。本研究表明,miR-31能有效提高DPSCs的增殖迁移能力,以期为DPSCs更好应用于再生医学提供了有力的理论支持。

miR-31与miR-182在结直肠癌中表达及临床意义

目的分析miRNA-182与miRNA-31在直肠癌组织内定位与表达状况.方法选取2016-12/2017-12间在丽水市人民医院因手术切除的结直肠癌组织标本和正常结直肠黏膜组织20对;同时收集本院病理科在2010-12/2012-12间保存结直肠癌石蜡标本142例,分析miRNA-182与miRNA-31在肿瘤组织、正常组织及有无转移肿瘤组织内表达状况.结果结直肠癌6株细胞内miR182及miR-31表达间差异有统计学意义(P<0.05),转移灶内miR182及miR-31表达量高于原发灶,差异有统计学意义(P<0.05);结直肠癌组织内m i R-31表达量高于正常组织,m i R-182表达量低于正常组织,伴发转移结直肠癌组织内miR-31、miR-182表达量高于无转移,差异均有统计学意义(P<0.05);142例结直肠癌石蜡标本中,miRNA-31高表达有75例,阳性率为52.82%,miRNA-182高表达有81例,阳性率为57.04%;miR-31及miR-182表达量和患者Dukes’s分期、远处转移及淋巴结转移方面差异有统计学意义(P<0.05).结论 m i R-182和m i R-31可加速结直肠癌产生与进展,具有成为判别结直肠癌转移和预后潜在靶点可能.

miR-26b-5p靶向RAB31对膀胱癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的 探讨miRNA-26b-5p对膀胱癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响,并分析其可能作用机制。方法 膀胱癌T24细胞随机分为对照组(不转染)、miRNA-26b-5p NC组(转染miRNA-26b-5p NC)、miRNA-26b-5p mimics组(转染miRNA-26b-5p mimics)、miRNA-26b-5p inhibitor组(转染miRNA-26b-5p inhibitor)。CCK-8法、划痕实验和Transwell实验分别检测细胞增殖、迁移和侵袭能力,RT-qPCR检测细胞中miRNA-26b-5p和Ras相关蛋白31(RAB31)mRNA表达水平,双荧光素酶实验检测miRNA-26b-5p对RAB31的靶向性,Western blot检测细胞中RAB31蛋白表达水平。结果 与对照组和miRNA-26b-5p NC组比较,miRNA-26b-5p mimics组细胞24 h、48 h、72 h吸光度值减小,24 h、48 h划痕距离增加,穿膜细胞数减少,miRNA-26b-5p表达水平升高,RAB31 mRNA和蛋白表达水平降低(P<0.05),miRNA-26b-5p inhibitor组上述指标趋势与miRNA-26b-5p mimics组相反。双荧光素酶实验结果显示,miRNA-26b-5p靶向调控RAB31表达。结论过表达miRNA-26b-5p可通过靶向抑制RAB31表达,抑制膀胱癌T24细胞增殖、迁移和侵袭。

microRNA-31在原发性肺癌组织中的表达及临床意义

目的检测肺癌组织及癌旁正常组织中miR-31的表达情况与肺癌的诊断、肿块大小、淋巴结转移、吸烟及分期的关系。方法采用quantitative real-time RT-PCR方法对75例肺癌患者术后癌组织及癌旁正常组织中miR-31的表达量进行检测。结果 miR-31在癌组织中的相对表达量是癌旁正常组织的6.48倍(P<0.001)。吸烟患者miR-31的表达量是不吸烟患者的3.06倍(P=0.033)。在NSCLC中,与肿瘤长径≤3 cm肿瘤相比,长径>3 cm肿瘤中miR-31的表达量较高(P=0.045)。无论淋巴结转移与否,其表达量差异无统计学意义(P=0.703)。结论 miR-31在肺癌组织中高表达、在不同肿块中表达的差异以及与吸烟的关系,提示其可能成为肺癌的筛查、诊断及预测肿块大小的一个生物标志物。

miR-31在结直肠癌患者血清中的表达及对结肠癌HCT116细胞增殖及凋亡的影响

背景与目的:micro RNA与肿瘤关系密切,血清mi RNAs可以作为筛选和监测结直肠癌的有效指标。该研究旨在检测结直肠癌患者血清中mi R-31的表达水平,并分析mi R-31对结肠癌细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响。方法:收集40例结直肠癌患者和35例健康人群作为对照,采用实时荧光定量聚合酶链反应(realtime fluorescent quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR),检测其血清mi R-31的表达水平,并分析结直肠癌患者血清mi R-31的表达水平与临床病理特征之间的关系。采用脂质体转染将mi R-31模拟物(mi R-31 mimics)和抑制剂(mi R-31 inhibitor)转染到HCT116细胞,采用CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡及周期改变。结果:结直肠癌患者血清中mi R-31的表达显著高于健康对照组,mi R-31表达与结直肠癌分化程度有关。转染mi R-31mimics组HCT116细胞生长增快,而转染mi R-31抑制剂后细胞增殖能力明显降低(P<0.01);同时mi R-31mimics组细胞凋亡所占比例较mi R-31抑制剂组和阴性对照组(mi R-control,NC)明显减少,尤其是晚期凋亡细胞减少为著;转染mi R-31抑制剂组,G_1期细胞较mi R-31 mimics组和NC组明显增多。结论:mi R-31在结直肠癌患者血清中表达显著上调,mi R-31可能通过促进结肠癌细胞增殖、抑制细胞凋亡而参与了结直肠癌的发展进程,有望成为结直肠癌诊断的标志物。

家蚕miRNA Novel-31＊上调溶血素基因的表达

【目的】Novel-31*是在家蚕质型多角体病毒(Bombyx mori cytoplasmic polyhedrosis virus,Bm CPV)感染的家蚕中发现的一个差异表达miRNA。本研究旨在验证Novel-31*对其靶基因表达的调控作用,以便进一步研究miRNA及其靶基因在昆虫免疫调节中的作用。【方法】用生物信息学方法预测Novel-31*的靶基因,荧光定量PCR分析Novel-31*及其靶基因在家蚕感染Bm CPV后不同时间点的表达变化;构建miRNA慢病毒表达载体和靶基因慢病毒表达载体,转染293T细胞,同时合成Novel-31*mimics转染家蚕培养细胞Bm N,使用荧光定量PCR检测Novel-31*对靶基因表达的调控作用。【结果】生物信息学方法预测发现,溶血素基因是Novel-31*的靶基因,其结合位点位于溶血素基因的5'UTR区域。荧光定量PCR分析表明,Novel-31*及溶血素基因在感染Bm CPV的家蚕血淋巴细胞中呈现明显的上调表达。荧光定量PCR检测表明,在Novel-31*慢病毒表达载体和溶血素基因5'UTR慢病毒表达载体转染的293T细胞中和在转染Novel-31*mimics的家蚕Bm N细胞中,溶血素基因都上调表达。【结论】溶血素基因是miRNA Novel-31*的靶基因,Novel-31*与溶血素基因5'UTR结合,上调溶血素基因的表达。