circLRP6调节miR-31-5p/HMGA1轴对高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤的影响

目的分析circLRP6调节miR-31-5p/高迁移率族蛋白A1(HMGA1)轴对高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤的影响。方法体外培养人肾小管上皮HK-2细胞,分为对照组、高糖组、高糖+si-NC组、高糖+si-circLRP6组、高糖+si-circLRP6+miR-NC组、高糖+si-circLRP6+miR-31-5p inhibitor组、高糖+si-circLRP6+miR-31-5p inhibitor+si-NC组、高糖+si-circLRP6+miR-31-5p inhibitor+si-HMGA1组,对照组置于含5.5 mmol/L葡萄糖的DMEM培养基内培养,其余各组置于含25 mmol/L葡萄糖的DMEM培养基内培养,并通过Lipofectamine 2000将相应质粒转染至HK-2细胞内,实时定量PCR测定细胞circLRP6、miR-31-5p、HMGA1 mRNA水平,试剂盒测定细胞上清液白细胞介素-6(IL-6)水平、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平、乳酸脱氢酶(LDH)活性以及丙二醛(MDA)含量;流式细胞仪观察细胞凋亡;Western blotting测定细胞HMGA1、Bax、Bcl-2蛋白表达;双荧光素酶报告基因实验分析miR-31-5p与circLRP6、HMGA1的靶向关系。结果与对照组相比,高糖组HK-2细胞circLRP6水平升高,细胞增殖抑制率、IL-6、TNF-α、LDH、MDA、细胞凋亡率、Bax蛋白表达升高,Bcl-2蛋白表达降低(均P<0.05);与高糖组相比,高糖+si-circLRP6组HK-2细胞增殖抑制率、IL-6、TNF-α、LDH、MDA、细胞凋亡率、Bax蛋白表达降低,Bcl-2蛋白表达升高(均P<0.05);与高糖+si-circLRP6组相比,高糖+si-circLRP6+miR-31-5p inhibitor组HK-2细胞增殖抑制率、IL-6、TNF-α、LDH、MDA、细胞凋亡率、Bax蛋白表达升高,Bcl-2蛋白表达降低(均P<0.05);与高糖+si-circLRP6+miR-31-5p inhibitor组相比,高糖+si-circLRP6+miR-31-5p inhibitor+si-HMGA1组HK-2细胞增殖抑制率、IL-6、TNF-α、LDH、MDA、细胞凋亡率、Bax蛋白表达降低,Bcl-2蛋白表达升高(均P<0.05)。miR-31-5p与circLRP6、HMGA1均具有靶向关系。结论沉默circLRP6可能通过上调miR-31-5p,抑制HMGA1表达,对高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤发挥保护作用。

血清miR-31在主动脉狭窄致心肌肥厚患者中的作用价值

目的探究血清microRNA-31(miR-31)在主动脉狭窄致心肌肥厚患者中的作用。方法选取2020年1月至2020年10月就诊于新疆医科大学第一附属医院的主动脉狭窄致心肌肥厚患者150例为观察组,并选取同期健康志愿者150例为对照组,比较两组患者miR-31、舒张末期左心室后壁厚度(LVPWTd)、室间隔舒张末期厚度(IVSTd)、左心室舒张末期内径(LVEDD)、左心室射血分数(LVEF)和左心室重量指数(LVMI)。同时对150例主动脉狭窄致心肌肥厚患者进行随访3年,观察其是否发生不良心血管事件,分析miR-31对不良心血管事件的预测价值。结果与对照组比较,观察组miR-31显著增加(1.25±0.26 vs.0.71±0.23,P<0.001)。血清miR-31与主动脉狭窄致心肌肥厚患者LVPWTd、IVSTd、LVEDD、LVMI均呈显著正相关(r=0.372、0.401、0.362和0.452,P<0.05),而与LVEF呈显著负相关(r=-0.317,P=0.010)。对150例主动脉狭窄致心肌肥厚患者随访3年发现,与未发生不良心血管事件的患者相比,发生不良心血管事件的患者血清miR-31显著增加(1.44±0.17 vs.1.21±0.26,P<0.001)。血清miR-31对主动脉狭窄致心肌肥厚患者不良心血管事件具有较好的预测价值,曲线下面积0.752(95%CI:0.668~0.837,P<0.001)。结论血清miR-31在主动脉狭窄致心肌肥厚患者中可能具有重要潜力,是主动脉狭窄致心肌肥厚的潜在生物学指标。

lncRNA TUG1靶向调节miR-31-5p对急性胰腺炎小鼠炎症反应的影响

目的:探讨长链非编码RNA牛磺酸上调基因1(lncRNA TUG1)在急性胰腺炎(AP)中的作用机制。方法:体外培养小鼠胰腺腺泡细胞系(MPC-83),用脂多糖(LPS,10μg/ml)和雨蛙素(Caerulein,100 nmol/L)处理3 h,建立AP模型。实验分为对照组(control组)、AP组、AP+sh-NC组、AP+sh-TUG1组、AP+sh-TUG1+inhibitor-NC组、AP+sh-TUG1+miR-31-5p inhibitor组。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测细胞中lncRNA TUG1和miR-31-5p表达水平;CCK-8法检测细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡;ELISA检测细胞上清液中IL-1β、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;双荧光素酶报告基因实验验证lncRNA TUG1和miR-31-5p之间的靶向关系。构建AP小鼠模型,给予相应的干预后,qRT-PCR检测胰腺组织中lncRNA TUG1和miR-31-5p表达水平;试剂盒检测血清中炎症因子IL-1β、TNF-α含量和淀粉酶(AMY)和脂肪酶(Lipase)活性;HE染色观察胰腺组织病理学变化;TUNEL检测胰腺组织中细胞凋亡。结果:在Caerulein和LPS共同处理的MPC-83细胞中lncRNA TUG1水平、细胞凋亡率、IL-1β和TNF-α水平升高,miR-31-5p水平、细胞活力降低(均P<0.05);敲低lncRNA TUG1可上调miR-31-5p,增加细胞活力,降低IL-1β和TNF-α水平,抑制细胞凋亡(均P<0.05);下调miR-31-5p表达可减弱敲低lncRNA TUG1对细胞炎症反应的抑制作用。miR-31-5p是lncRNA TUG1的直接靶标。在体内敲低lncRNA TUG1表达可上调AP小鼠胰腺组织中miR-31-5p表达,降低IL-1β、TNF-α水平,减少细胞凋亡,改善胰腺组织损伤。结论:敲低lncRNA TUG1可能通过上调miR-31-5p表达水平,抑制炎症反应,改善AP。

miR-31在气道慢性炎症性疾病中的研究进展

气道慢性炎症性疾病是一类由感染或变态反应引起的长期持续的呼吸系统疾病,这类疾病包括慢性阻塞性肺疾病(COPD)、哮喘和支气管扩张症等,这些疾病的发病机制不同,可能是遗传以及环境等多种因素相互作用的结果,其共同特点是慢性气道炎症导致的气道重构、气流受限和肺功能下降。在严重情况下,气道慢性炎症性疾病还可能导致呼吸衰竭和心脏疾病等并发症,对患者的健康和生活质量造成严重影响。

炎症性肠病患者血清和肠黏膜组织中miR-31-3p的表达水平及临床意义

目的观察炎症性肠病(IBD)患者血清和肠黏膜组织中miR-31-3p的表达情况,并分析其在疾病诊断和病情评估中的应用价值。方法随机选取2019年6月至2021年6月成都大学附属医院消化内科收治住院的符合纳入及排除标准的95例IBD患者(设为IBD组),其中克罗恩病(CD)有33例(设为CD组),溃疡性结肠炎(UC)有62例(设为UC组);同期招募67名健康志愿者作为对照组。收集受试对象的肠黏膜组织及血清样本,采用实时荧光定量PCR技术检测血清和肠黏膜组织中miR-31-3p的表达水平,并分析其在IBD组与对照组,以及不同活动度IBD患者间的差异。采用Pearson相关系数法分析血清和肠黏膜组织中miR-31-3p的表达水平与IBD患者疾病活动度的相关性;采用ROC曲线分析血清和肠黏膜组织中miR-31-3p对IBD的诊断及病情评估的价值。结果CD组和UC组患者血清和肠黏膜组织中miR-31-3p的表达水平均显著高于对照组(P<0.05)。轻度活动期、中度活动期、重度活动期的CD和UC患者血清和肠黏膜组织中miR-31-3p的表达水平均依次升高,组间比较差异均有统计学意义(P均<0.05)。相关性分析结果显示,CD组和UC组患者血清miR-31-3p的表达水平均与疾病活动度呈显著正相关(r=0.654,P<0.05;r=0.672,P<0.05),肠黏膜组织中miR-31-3p的表达水平也与疾病活动度呈显著正相关(r=0.623,P<0.05;r=0.631,P<0.05)。对于CD和UC,联合血清和肠黏膜组织中miR-31-3p的表达水平诊断疾病和评估病情的效能均高于单项检测(P<0.05)。结论IBD患者血清和肠黏膜组织中miR-31-3p表达上调,并与疾病活动度呈显著正相关,两者联合检测对IBD的诊断和病情评估具有较高的临床应用价值。

清热凉血方治疗寻常型银屑病血热证的临床疗效观察及对外周血miR-31表达的影响

银屑病是一种以皮损部位表皮过度增殖和毛细血管过度增生为特征的红斑鳞屑性皮肤病[1],属中医学“白疕”范畴,历代医家多从血热、血瘀、血虚论治,目前基本形成了“辨血为主、从血论治”的基本思路和经典理论体系,以“理血”为治疗总纲[2-3]。其中血热证被认为是本病的重要起始环节和疾病转化的关键期[4-6]。

虎杖苷通过调控circ0084043/miR-31轴对高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤的影响

目的:探讨虎杖苷对高糖诱导的肾小管上皮细胞(HK-2)损伤的影响和机制。方法:RT-qPCR检测circ_0084043和miR-31在糖尿病肾病患者和健康对照者血清中的表达。将HK-2细胞分为正常糖(NG)组、高糖(HG)组、HG+虎杖苷低、中、高剂量组、HG+si-NC组、HG+si-circ_0084043组、HG+虎杖苷+pcDNA组和HG+虎杖苷+pcDNA-circ_0084043组。CCK-8法、流式细胞术检测HK-2细胞抑制率和凋亡率。试剂盒分析MDA水平以及LDH释放量。circ_0084043和miR-31的靶向关系通过双荧光素酶报告实验来验证。结果:与健康对照者比较,糖尿病肾病患者血清中circ_0084043表达显著升高(P<0.05),miR-31表达显著降低(P<0.05)。与NG组比较,HG组HK-2细胞抑制率、凋亡率、MDA水平、LDH释放量、circ_0084043表达升高(P<0.05),miR-31表达降低(P<0.05)。与HG组比较,HG+虎杖苷低、中、高剂量组HK-2细胞抑制率、凋亡率、MDA水平、LDH释放量、circ_0084043表达降低(P<0.05),miR-31表达升高(P<0.05)。circ_0084043与miR-31直接结合。与HG+si-NC组比较,HG+si-circ_0084043组HK-2细胞抑制率、凋亡率、MDA水平、LDH释放量降低(P<0.05)。与HG+虎杖苷+pcDNA组比较,HG+虎杖苷+pcDNA-circ_0084043组HK-2细胞抑制率、凋亡率、MDA水平、LDH释放量升高(P<0.05)。结论:虎杖苷能够减轻高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤,其机制可能是通过下调circ_0084043/miR-31轴实现的。

miR-31促进骨髓间充质干细胞的增殖和迁移

背景:骨髓间充质干细胞已被广泛应用于临床治疗神经退行性相关疾病,但由于细胞在受损伤部位的存活率和迁移率低,从而降低了其疗效。目的:探讨miR-31是否能提高骨髓间充质干细胞的迁移和增殖能力。方法:培养和鉴定C57BL/6小鼠骨髓间充质干细胞,将细胞分为对照组、miR-31 agomir组和miR-31 antagomir组。将第3代骨髓间充质干细胞接种于6孔板(1×105/孔),待细胞达到50%-80%融合度,将miR-31 agomir和miR-31 antagomir用不含血清的DMEM/F12培养基稀释后添加到6孔板,转染24 h后,用CCK-8分析细胞的增殖水平以及Transwell实验分析细胞的迁移能力,Western blot检测基质金属蛋白酶2和CXC趋化因子受体4的蛋白表达。结果与结论:①在不加转染试剂的情况下将miR-31成功转染至骨髓间充质干细胞,并发出红色荧光;②转染后,与对照组相比,miR-31 agomir组细胞的增殖能力增强,与时间呈正比(P<0.05);与对照组相比,miR-31 agomir组细胞的迁移能力增强(P<0.05),基质金属蛋白酶2和CXC趋化因子受体4蛋白表达上调(P<0.05);③结果表明,miR-31可以提高骨髓间充质干细胞的增殖能力,并且促进骨髓间充质干细胞的迁移,这为间充质干细胞高效靶向迁移至损伤部位奠定了基础。

miR-31与头颈部肿瘤关系的研究进展

头颈部肿瘤(HNC)是全身最常见的恶性肿瘤之一,主要发生在口腔、咽部和喉部,具有异质性高和病死率高的特点。非编码RNA调控的表观遗传改变在HNC的发生发展中起着重要作用。微小RNA(microRNA,miRNA)是一种小的非编码RNA,通过干扰基因表达来调节细胞周期、增殖、发育、分化和凋亡等。miR-31是一种在恶性肿瘤中研究较为深入的miRNA之一。近年来,愈来愈多的研究探索了miR-31在HNC发生机制、诊断、预后和作为治疗靶点等方面的潜力。本文就miR-31在HNC中的最新研究进展做一综述。

肺结核患儿外周血单个核细胞miRNA-31、miRNA-146a表达水平检测价值

目的分析肺结核(PTB)患儿外周血单个核细胞(PBMC)miRNA-31、miRNA-146a表达水平,以及上述指标与细胞免疫和炎症因子的相关性。方法选取该院2019年2月至2022年2月收治的75例PTB患儿作为观察组,另选取同期健康体检儿童70例作为对照组。比较两组PBMC miRNA-31、miRNA-146a表达水平,外周血T淋巴细胞亚群、血清炎症因子水平。采用Pearson相关分析PBMC miRNA-31、miRNA-146a表达水平与T淋巴细胞亚群、炎症因子的关系。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析miRNA-31、miRNA-146a联合检测诊断儿童PTB的效能。结果观察组PBMC miRNA-31、miRNA-146a表达水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)比值低于对照组,而CD8^(+)比例高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。观察组白细胞介素(IL)-2、IL-6、IL-8水平均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关分析发现,PTB患儿PBMC miRNA-31、miRNA-146a表达水平与CD3^(+)、CD4^(+)比例及CD4^(+)/CD8^(+)比值均呈负相关(P<0.05),与CD8^(+)比例及IL-2、IL-6、IL-8水平均呈正相关(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,PBMC miRNA-31、miRNA-146a表达水平联合检测诊断儿童PTB的曲线下面积均大于单项检测,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论儿童PTB PBMC miRNA-31、miRNA-146a均存在异常高表达,与细胞免疫、炎症因子均密切相关。

MiR-31促进人牙髓间充质干细胞增殖和迁移

牙髓炎和根尖周炎是口腔科目前较为常见的2种疾病,现有的治疗方案主要包括根管治疗和牙髓血运重建,能有效控制住炎症进而保存患牙,然而同时也会导致牙髓组织的永久失活,发生结构故障和继发感染。近年来,结合干细胞和生物材料等的组织工程技术使牙髓再生的研究逐渐进入人们的视野,其中从恒牙或乳牙中分离的牙髓间充质干细胞(dental pulp stem cells,DPSCs),因其多向分化和高增殖等特性已成为牙本质或者髓样组织再生的重要的干细胞来源。但是由于干细胞不能高效募集到损伤区域,影响受损区的活细胞数量和存活时间,显著降低了其应用疗效,因此,需要提高牙髓干细胞的迁移和增殖能力,本研究旨在探讨微核糖核酸31(microRNA-31,miR-31)能否有效提高DPSCs的增殖迁移能力。通过组织块酶消化法从牙髓组织中成功分离培养了DPSCs,比较了分别取自健康牙与炎症牙的牙髓组织和DPSCs中miR-31水平的差异,利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)技术检测的结果显示,与健康牙比较,炎症牙来源的牙髓组织和DPSCs中miR-31表达水平明显降低(P<0.05)。干扰和过表达DPSCs中的miR-31表达,具体分为NC组、miR-31 agomir(过表达)组和miR-31 antagomir(抑制剂)3个组,RTq-PCR结果显示,其转染成功(P<0.001)。CCK-8、细胞划痕以及Transwell迁移结果表明,与对照组相比,过表达miR-31成功提高了牙髓干细胞的增殖和迁移能力(P<0.05),且进一步通过Western印迹结果发现,过表达miR-31后增殖关键蛋白质增殖抗原(Ki67)、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)以及迁移关键蛋白质CXC趋化因子受体4型(CXC chemokine receptor type 4,CXCR4)、基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase2,MMP2)的蛋白质水平均显著升高(P<0.05)。本研究表明,miR-31能有效提高DPSCs的增殖迁移能力,以期为DPSCs更好应用于再生医学提供了有力的理论支持。

miR-31通过下调FIH和上调VEGF-A/VEGFR-2促进大鼠主动脉内皮细胞增殖

目的探讨miR-31对大鼠主动脉内皮细胞(rat aortic endothelial cells,RAECs)增殖的影响及其潜在的作用机制。方法分离RAECs,鉴定为目的细胞后,观察miR-31激动剂(miR-31 agomir)和抑制剂(miR-31 antagomir)对RAECs增殖以及缺氧诱导因子抑制因子(hypoxia inducible factor inhibitor,FIH)、血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A,VEGF-A)和血管内皮生长因子受体2(vascular endothelial growth factor receptor 2,VEGFR-2)水平的影响。通过CCK-8实验测定miR-31对细胞增殖能力的影响,qRT-PCR检测细胞中miR-31的相对表达水平,Western blot检测细胞中FIH、VEGF-A和VEGFR-2水平。结果在无特殊器械、不添加营养因子的情况下成功培养出RAECs;转染miR-31 agomir显著促进RAEC的细胞增殖,降低FIH水平,上调VEGF-A和VEGFR-2水平,转染miR-31 antagomir则相反。结论miR-31可能通过下调FIH、上调VEGF-A和VEGFR-2的表达促进主动脉内皮细胞增殖。

miR-26b-5p靶向RAB31对膀胱癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的 探讨miRNA-26b-5p对膀胱癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响,并分析其可能作用机制。方法 膀胱癌T24细胞随机分为对照组(不转染)、miRNA-26b-5p NC组(转染miRNA-26b-5p NC)、miRNA-26b-5p mimics组(转染miRNA-26b-5p mimics)、miRNA-26b-5p inhibitor组(转染miRNA-26b-5p inhibitor)。CCK-8法、划痕实验和Transwell实验分别检测细胞增殖、迁移和侵袭能力,RT-qPCR检测细胞中miRNA-26b-5p和Ras相关蛋白31(RAB31)mRNA表达水平,双荧光素酶实验检测miRNA-26b-5p对RAB31的靶向性,Western blot检测细胞中RAB31蛋白表达水平。结果 与对照组和miRNA-26b-5p NC组比较,miRNA-26b-5p mimics组细胞24 h、48 h、72 h吸光度值减小,24 h、48 h划痕距离增加,穿膜细胞数减少,miRNA-26b-5p表达水平升高,RAB31 mRNA和蛋白表达水平降低(P<0.05),miRNA-26b-5p inhibitor组上述指标趋势与miRNA-26b-5p mimics组相反。双荧光素酶实验结果显示,miRNA-26b-5p靶向调控RAB31表达。结论过表达miRNA-26b-5p可通过靶向抑制RAB31表达,抑制膀胱癌T24细胞增殖、迁移和侵袭。

灌肠方抑制晚期肠癌生长及对血清VEGF和miR-NA-31表达的临床研究

目的观察灌肠方联合化疗和单用化疗治疗肠癌病人外周血miRNA-31和血管内皮生长因子(VEGF)表达的变化。方法将符合纳入标准的患者随机分为20例实验组和20例对照组,实验组采用仙鹤草、败酱草、龙葵组成的灌肠方联合化疗治疗,对照组单用FOLFOX方案化疗,观察灌肠方联合化疗对晚期肠癌患者治疗后临床疗效评价、中医证侯疗效判定、生活质量评分标准及毒性反映等影响,采用荧光定量PCR法检测灌肠方干预后患者血清miRNA-31表达水平的变化,采用ELISA检测其对人VEGF表达水平的影响,探索灌肠方的作用机理。结果联合治疗组缓解率明显大于单用化疗组(P<0.05);2组临床证候疗效比较,P>0.05;经卡氏评分,联合治疗组生活状况优于单用化疗组(P<0.05);联合治疗组VEGF、miRNA-31均低于单用化疗组(P<0.01)。结论灌肠方联合化疗治疗晚期大肠癌能提高临床客观疗效及疾病控制率,降低晚期大肠癌患者血清VEGF水平,其作用机制可能与miRNA-31水平下调有关。

miR-31在结直肠癌患者血清中的表达及对结肠癌HCT116细胞增殖及凋亡的影响

背景与目的:micro RNA与肿瘤关系密切,血清mi RNAs可以作为筛选和监测结直肠癌的有效指标。该研究旨在检测结直肠癌患者血清中mi R-31的表达水平,并分析mi R-31对结肠癌细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响。方法:收集40例结直肠癌患者和35例健康人群作为对照,采用实时荧光定量聚合酶链反应(realtime fluorescent quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR),检测其血清mi R-31的表达水平,并分析结直肠癌患者血清mi R-31的表达水平与临床病理特征之间的关系。采用脂质体转染将mi R-31模拟物(mi R-31 mimics)和抑制剂(mi R-31 inhibitor)转染到HCT116细胞,采用CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡及周期改变。结果:结直肠癌患者血清中mi R-31的表达显著高于健康对照组,mi R-31表达与结直肠癌分化程度有关。转染mi R-31mimics组HCT116细胞生长增快,而转染mi R-31抑制剂后细胞增殖能力明显降低(P<0.01);同时mi R-31mimics组细胞凋亡所占比例较mi R-31抑制剂组和阴性对照组(mi R-control,NC)明显减少,尤其是晚期凋亡细胞减少为著;转染mi R-31抑制剂组,G_1期细胞较mi R-31 mimics组和NC组明显增多。结论:mi R-31在结直肠癌患者血清中表达显著上调,mi R-31可能通过促进结肠癌细胞增殖、抑制细胞凋亡而参与了结直肠癌的发展进程,有望成为结直肠癌诊断的标志物。

系统性红斑狼疮患者外周血细胞miR-31的表达

目的探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血细胞微小RNA(miR-31)的表达及其临床意义。方法以36例SLE患者和23名健康对照者作为研究对象,采集外周静脉ACD抗凝血,Real-TimePCR检测miR-31表达。分析SLE患者疾病活动指数(SLEDAI)、肾脏受累程度指标(Renal-SLEDAI积分)及临床用药与外周血细胞miR-31表达的相关性。结果 SLE患者的外周血细胞miR-31表达显著低于健康对照者,差异有统计学意义(P<0.001)。SLE患者的外周血细胞miR-31表达与SLEDAI积分和Renal-SLEDAI积分呈显著负相关(r=-0.330,P=0.043;r=-0.337,P=0.044),与临床用药情况无显著相关性(P>0.05)。结论 SLE患者外周血细胞miR-31表达水平与疾病活动及肾脏损害程度相关,作为重要生物标志物有可能为SLE的早期诊断、治疗和预后评估提供一定的依据。

SATB2与miR-31、182对结直肠癌的靶向调控

目的探讨结直肠癌中靶向调控特定富含AT碱基DNA序列结合蛋白(SATB)2有关的miR-31和miR-182表达水平,并分析其与SATB2的关系。方法根据候选miRNAs的预测结果,构建SATB2基因3′UTR突变性和野生型的荧光素酶载体,与miRNA抑制物转染、报告基因检测和miRNA模拟物等技术手段相结合,检验候选miRNA是否对SATB2基因的表达具有靶向调控作用,确定miRNA对调控结直肠癌转移相关基因SATB2的靶效性。结果 miR-31和miR-182是靶向调控SATB2的候选基因。结直肠癌组织中miR-31和miR-182表达明显增高(P<0.05),与未转移比较,结直肠癌转移的miR-31和miR-182表达明显增高(P<0.05)。慢病毒感染结直肠癌细胞SW480得到稳定过表达。miR-31和miR-182的结直肠癌细胞株SW480/miR-31和SW480/miR-182的增殖能力明显高于对照SW480/Con(P<0.05)。SW480/miR-31和SW480/miR-182细胞形成的克隆较对照SW480/Con细胞明显多(P<0.05),SW480/miR-31,停留在G0/G1期的细胞减少,S期的细胞增多,G2/M期细胞增多,SW480/miR-182,G0/G1期的细胞减少,S期细胞增多,G2/M期细胞增多。与对照SW480/Con细胞比较,SW480/miR-31和SW480/miR-182的细胞内荧光素酶的活性明显降低(P<0.05)。SATB2基因转染后,miR-31和miR-182细胞体外增殖能力均明显降低(P<0.05)。SATB2基因转染后,SW480/miR-31和SW480/miR-182细胞进入G0/G1期,S期细胞减少,G2/M期细胞减少,SATB2基因转染后,miR-31和miR-182细胞运动能力明显降低(P<0.05)。与对照组比较,实验组裸鼠的瘤体积和瘤重量均明显增高(P<0.05)。与对照组比较,实验组裸鼠瘤的miR-31和miR-182表达均明显增高(P<0.05)。结论结直肠癌中靶向调控SATB2细胞的miR-31和miR-182在结直肠癌中的表达水平高低与癌细胞转移、克隆及预后相关,miR-31和miR-182能反向调控SATB2的表达。

鼻咽癌患者外周血中循环miR-31-5p表达及临床意义

目的探讨miR-31-5p在鼻咽癌患者外周血中的表达及临床意义。方法应用荧光定量PCR检测55例鼻咽癌患者和55例健康人外周血miR-31-5p相对表达量,分析两者之间的表达差异,探讨其与鼻咽癌患者临床病理特征以及放疗的关系。结果 miR-31-5p在鼻咽癌患者外周血中的表达水平明显低于健康人(P <0.01);鼻咽癌患者外周血miR-31-5p的表达水平与肿瘤T分期、局部有无淋巴转移、临床分期相关,但与性别、年龄及是否发生远处转移不相关。同时,放疗抵抗组miR-31-5p表达水平较放疗敏感组下降(P <0.01)。结论 miR-31-5p的低表达与鼻咽癌的发展及放疗有关,它可能成为鼻咽癌新的肿瘤标志物和治疗靶点。

miR-31通过激活NF-κB信号通路而促进结肠癌细胞增殖

微小RNA(microRNA)在肿瘤的发生发展中发挥重要作用。有研究表明,在结肠癌患者肿瘤组织中,miR-31表达水平增高。然而,定量PCR只能检测所在组织miR-31的整体表达水平,而无法观察miR-31在特定组织与特定细胞中的表达分布。目前,尚未见关于miR-31在结肠癌中原位表达的报道。本文从研究miR-31在结肠癌中的原位表达入手,进一步探究miR-31在结肠癌细胞中的功能及作用机制。原位杂交实验结果显示,miR-31在结肠癌肿瘤细胞中的原位表达明显升高;体外过表达或敲减miR-31证实,其可以促进结肠癌细胞增殖和集落形成;荧光定量PCR与Western印迹和双荧光素酶报告基因实验证实,在结肠癌细胞中,NF-κB通路的抑制因子丝氨酸/苏氨酸激酶40(STK40)是miR-31下游靶基因,miR-31靶向作用于STK40而激活NF-κB通路;反之,抑制NF-κB通路,miR-31的促增殖能力明显下降。上述结果提示,miR-31可能通过激活NF-κB信号通路而促进结肠癌的细胞增殖。

miRNA-31在高糖诱导内皮细胞功能障碍中的作用

目的探讨miRNA-31在高糖诱导的内皮细胞功能障碍中的作用机制。方法体外培养人冠状动脉内皮细胞系,不同浓度高糖刺激24 h后检测细胞内皮型一氧化氮合酶(eN OS)蛋白表达及培养上清液NO含量;Real-time PCR检测高糖刺激后miRNA-31表达变化;microRNA在线分析软件预测并应用双荧光素酶报告基因系统和Western blot验证eN OS是否为miRNA-31的直接靶基因;通过转染miRNA-31 antagomir观察miRNA-31对内皮细胞功能障碍的影响。结果不同浓度的高糖刺激内皮细胞24 h后,eN OS蛋白表达和培养液NO含量呈剂量依赖性下降。高糖刺激内皮细胞miRNA-31表达明显增加。microRNA在线分析软件及双荧光素酶报告基因实验提示eN OS的翻译水平受miRNA-31直接调控。转染miRNA-31 antagomir明显上调高糖刺激后内皮细胞eN OS蛋白和培养液NO含量。结论 miRNA-31上调进而抑制eN OS表达可能是高糖诱导内皮细胞功能障碍的作用机制之一。