MicroRNA-101对肺尘埃沉着病肺纤维化影响的研究

目的 研究microRNA-101(miR-101)对肺尘埃沉着病肺纤维化的作用机制,为肺尘埃沉着病的二级预防提供新的策略和方法。方法 通过体外实验初步探讨miR-101在SiO_(2)粉尘诱导肺纤维化中的调节作用。选取SPF级健康成年雄性小鼠18只,将其分为空白对照组、生理盐水组和SiO_(2)组,每组6只。采用SiO_(2)粉尘混悬液构建小鼠肺尘埃沉着病模型,HE染色观察大鼠肺组织形态学改变;采用实时定量PCR、蛋白质印迹法检测各组小鼠肺组织中miR-101和Ⅰ型胶原蛋白(ColⅠ)表达水平。结果 模型组在28 d形成肺尘埃沉着病模型。空白对照组及生理盐水组小鼠肺组织结构完整,肺泡间隔均匀,无间质纤维组织增生,SiO_(2)组小鼠肺部组织发生纤维化,肺部结构被破坏,肺间质和肺泡内有大量的细胞浸润,并伴有炎症反应,血管壁增厚。SiO_(2)组的miR-101表达水平低于空白对照组,而ColⅠ蛋白水平高于空白对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 miR-101通过参与抑制炎症因子的释放,从而实现对肺尘埃沉着病模型细胞的纤维化的抑制。

CircBACH1调节miR-101-3p/KPNA2轴对骨肉瘤细胞增殖、凋亡和侵袭的影响

目的:探究环状RNA BACH1(circBACH1)靶向微小RNA-101-3p(miR-101-3p)/核转运蛋白α2(KPNA2)轴对骨肉瘤(OS)细胞增殖、凋亡和侵袭的影响。方法:qRT-PCR法分析OS组织中circBACH1和miR-101-3p表达水平。双荧光素酶检测circBACH1和miR-101-3p及KPNA2和miR-101-3p的靶向关系。在OS细胞MG-63中转染相应质粒记为si-NC组、si-circBACH1组、si-circBACH1+anti-NC组、si-circBACH1+anti-miR-101-3p组、miR-NC组、miR-101-3p mimics组、miR-101-3p mimics+pcDNA组、miR-101-3p mimics+KPNA2组。平板克隆检测细胞增殖;Annexin V-FITC/PI法检测细胞凋亡;Transwell实验检测细胞侵袭能力。Western blot法检测细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、裂解的胱天蛋白酶-3(C-caspase-3)、上皮细胞钙黏蛋白(E-cadherin)、神经性钙黏附蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)的蛋白表达变化。小鼠移植瘤实验验证circBACH1对OS肿瘤生长及miR-101-3p/KPNA2的影响。结果:在OS组织中,circBACH1表达上调,miR-101-3p表达下调(P<0.05)。抑制circBACH1表达,可显著抑制OS细胞增殖与侵袭,诱导凋亡(P<0.05)。抑制miR-101-3p表达可促进OS细胞增殖与侵袭,抑制细胞凋亡(P<0.05)。miR-101-3p过表达可下调KPNA2表达,抑制OS细胞增殖与侵袭,诱导凋亡(P<0.05)。KPNA2过表达可以逆转过表达miR-101-3p对OS细胞增殖与侵袭的抑制作用(P<0.05)。小鼠移植瘤实验结果显示,抑制circBACH1表达,移植瘤体积及质量降低,miR-101-3p表达水平升高,KPNA2表达水平降低(P<0.05)。结论:circBACH1在OS组织中高表达,抑制circBACH1表达,可抑制OS细胞增殖与侵袭,诱导凋亡,其与调节miR-101-3p/KPNA2轴有关。

microRNA-101增强紫杉醇诱导非小细胞肺癌细胞凋亡

目的研究micro RNA-101(mi R-101)对紫杉醇诱导非小细胞肺癌细胞凋亡的影响,并探讨其潜在机制。方法将mi R-101mimics、si RNA-EZH2转染到非小细胞肺癌细胞中;应用流式细胞学annexin V/PI双染法检测细胞凋亡;应用Western blot检测凋亡相关蛋白EZH2,Bim和cleaved PARP的表达。结果 mi R-101过表达或EZH2基因沉默促使紫杉醇诱导的非小细胞肺癌细胞凋亡,与相应的阴性对照组相比凋亡细胞数量分别为2.4倍及2.2倍,;mi R-101抑制EZH2表达并增强凋亡相关蛋白Bim和cleaved PARP的表达,,与相应的阴性对照组相比Bim和cleaved PARP的表达分别为1.8倍及2.7倍。结论 mi R-101增强紫杉醇诱导非小细胞肺癌细胞凋亡。其机制可能为mi R-101介导的EZH2低表达诱导凋亡相关蛋白Bim生成,因此促进紫杉醇诱导肺癌凋亡。

Effect of Pouring Temperature by a Novel Micro Fused-Casting on Microstructure and Properties of ZL101 Semisolid Slurry

A novel micro fused-casting(MFC)process is developed for semisolid aluminum alloy slurry.The microstructure evolution and properties of semisolid ZL101 aluminum alloy slurry with difierent pouring temperature by MFC are investigated in this paper.During the cooling process,the effects of the pouring temperature on microstructure and properties is primarily analyzed.The microstructure of the semisolid ZL101 aluminum alloy is more homogeneous and the grain is smaller under proper pouring temperature.Temperature of liquids and solids of ZL101 aluminum alloy is measured by difierential scanning calorimetry(DSC).Distribution and characteristics of the microstructure of samples are examined by optical microscope(OM),scanning electron microscopy(SEM)equipped with energy dispersive spectrometer(EDS).The results show that the ZL101 semisolid slurry fabricated by MFC presents uniform shape and good grain size under the pouring temperature of 594°C and the stirring velocity of 600 r/min,and the fine grains of the primary a-Al phase with average grain size of 55μm and shape factor up to 0.67 were obtained.Besides,the ultimate tensile strength and the average Vickers hardness for semisolid ZL101 aluminum slurry are 178.19±1.37 MPa and 86.15±1.16 HV,respectively.

LncRNA XIST和miR-101-3p在SLE患者外周血单核细胞中的表达及临床应用价值

目的分析长链非编码RNA(Lnc RNA)X染色体失活特异转录本(XIST)和微小RNA-101-3p(mi R-101-3p)在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单核细胞中的表达及临床应用价值。方法选取2019年4月至2021年10月在新乡市中心医院治疗的180例SLE患者作为观察组,选择同期180例健康体检者作为对照组。根据SLE疾病活动指数(SLEDAI)评分将观察组分为稳定期组80例和活动期组100例。采用实时荧光定量聚合酶链反应(q RT-PCR)法对患者外周血单核细胞中Lnc RNA XIST、mi R-101-3p的相对表达水平进行检测。分析Lnc RNA XIST与mi R-101-3p的相关性以及二者与SLEDAI评分的相关性;对影响SLE的因素进行logistic回归分析;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析Lnc RNA XIST、mi R-101-3p的表达对SLE的诊断价值。结果与对照组相比,观察组患者外周血单核细胞Lnc RNA XIST水平升高,mi R-101-3p水平降低,差异均有统计学意义(P<0.05);活动期组患者较稳定期组外周血单核细胞中Lnc RNA XIST水平升高,mi R-101-3p水平降低,差异均有统计学意义(P<0.05);患者外周血单核细胞Lnc RNA XIST与mi R-101-3p水平呈负相关(r=-0.410,P<0.05);Lnc RNA XIST水平与SLEDAI评分呈正相关(r=0.425,P<0.05),mi R-101-3p水平与SLEDAI评分呈负相关(r=-0.454,P<0.05);logistic回归分析显示,Lnc RNA XIST是影响SLE的危险因素(P<0.05),mi R-101-3p是影响SLE的保护因素(P<0.05);Lnc RNA XIST、mi R-101-3p联合诊断SLE的ROC曲线下面积为0.960,均优于其各自单独诊断(Z_(二者联合-Ln-c RNA XIST)=3.268,P=0.001;Z_(二者联合-mi R-101-3p)=2.584,P=0.005)。结论SLE患者外周血单核细胞Lnc RNA XIST水平升高,mi R-101-3p水平降低,与SLE疾病活动性有关,对SLE具有一定的诊断价值。

miR-101-5p通过靶向ATAD2抑制肺鳞癌细胞的侵袭

目的 探讨微小RNA-101-5p(miR-101-5p)影响肺鳞癌(lung squamous cell carcinoma,LUSC)细胞增殖、侵袭的分子机制。方法 从癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库下载肺鳞癌TCGA-LUSC的miRNA成熟体表达数据和总RNA的测序数据,鉴定差异表达基因;分析富集于ATAD2的信号通路。培养LUSC细胞,qRT-PCR检测细胞中miR-101-5p和ATAD2的mRNA表达,MTT实验、克隆形成实验和侵袭实验检测miR-101-5p对LUSC细胞增殖和侵袭的影响,流式细胞术检测ATAD2对LUSC细胞周期的影响,Western blotting检测ATAD2蛋白的表达。双荧光素酶实验验证miR-101-5p能否与ATAD2靶向结合,最后通过LUSC细胞共转染oe-ATAD2和miR-101-5p模拟物(mimic),检测细胞增殖、克隆、侵袭能力的变化,进一步探究miR-101-5p能否通过ATAD2调节LUSC细胞的生物学功能。结果 miR-101-5p在LUSC组织及培养LUSC细胞中显著下调。过表达miR-101-5p的LUSC增殖和侵袭能力显著抑制。其下游调控靶基因ATAD2在LUSC中显著上调,且miR-101-5p和ATAD2表达呈负相关,单基因富集分析(GSEA)结果显示ATAD2显著富集于细胞周期信号通路。双荧光素酶实验结果显示,miR-101-5p靶向结合ATAD2,并通过MTT和侵袭实验发现miR-101-5p通过靶向结合ATAD2调控LUSC细胞的增殖和侵袭。结论 miR-101-5p在LUSC中低表达,miR-101-5p通过靶向抑制ATAD2降低LUSC细胞的增殖、侵袭。

溃疡性结肠炎患者血清miR-101-3p、PTX3水平变化及其与病情的关系

目的探讨溃疡性结肠炎(UC)患者血清中微小RNA-101-3p(miR-101-3p)和正五聚蛋白3(PTX3)的水平变化及其与UC病情的关系。方法选取该院2020年3月至2023年7月收治的124例UC患者作为UC组,另选取同期124例体检健康者作为对照组。根据Mayo评分分为活动期71例、缓解期53例,并将活动期患者分为轻度组20例、中度组28例、重度组23例。采用双抗夹心酶联免疫吸附试验检测血清PTX3水平;采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测血清miR-101-3p水平。采用Pearson相关分析血清miR-101-3p水平与PTX3水平的相关性;采用多因素Logistic回归分析影响UC患者病情的因素;通过受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-101-3p、PTX3对UC患者病情的诊断价值。结果UC组血清miR-101-3p水平低于对照组,PTX3水平高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关分析显示,UC患者血清miR-101-3p水平与PTX3水平呈负相关(r=-0.482,P<0.05)。活动期患者血清miR-101-3p水平低于缓解期,PTX3水平高于缓解期,差异均有统计学意义(P<0.05)。在活动期UC患者中,血清miR-101-3p水平轻度组>中度组>重度组,任意两组间比较,差异均有统计学意义(P<0.05);血清PTX3水平为轻度组<中度组<重度组,任意两组间比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,血清miR-101-3p水平升高是UC患者病情处于活动期的保护因素(P<0.05),PTX 3水平升高是UC患者病情处于活动期的危险因素(P<0.05)。血清miR-101-3p、PTX3单项及联合检测诊断UC患者病情处于活动期的曲线下面积(AUC)分别为0.820(95%CI:0.741~0.884)、0.853(95%CI:0.778~0.910)、0.977(95%CI:0.933~0.996),联合检测诊断的AUC明显高于miR-101-3p、PTX3单项检测(Z=4.010、3.663,均P<0.05)。结论UC患者血清miR-101-3p水平明显降低,PTX3水平明显增加,二者与UC患者病情有关,并且2项指标联合检测诊断UC患者病情处于活动期的价值更佳。

呼吸机相关肺炎患者病原菌分布及血清miR-101-3p、斯钙素1的检测分析

目的 探究呼吸机相关肺炎(ventilator-associated pneumonia,VAP)患者病原菌分布及血清微小RNA-101-3p(microRNA-101-3p,miR-101-3p)、斯钙素1(stanniocalcin 1,STC1)表达水平在VAP诊断中的临床意义。方法 选取2020年1月至2023年4月在安徽医科大学附属六安医院进行机械通气治疗,发生VAP的患者121例作为VAP组,未发生VAP的患者87例为非VAP组,同期健康体检者83例为对照组。采集VAP组患者下呼吸道分泌物进行病原菌鉴定;测定所有研究对象的血清STC1、降钙素原(procalcitonin,PCT)、C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、miR-101-3p水平。采用Pearson法分析血清miR-101-3p、STC1与炎症因子PCT、CRP、TNF-α的相关性;采用受试者操作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC曲线)分析血清miR-101-3p、STC1对VAP的诊断价值。结果 121例VAP患者共检测分离出病原菌218株,其中革兰氏阴性菌124株(56.88%),革兰氏阳性菌86株(39.45%),真菌8株(3.67%);VAP组的血清miR-101-3p、PCT、CRP、TNF-α水平均显著高于非VAP组和对照组(P<0.05),STC1水平显著低于非VAP组和对照组(P<0.05);VAP患者的血清miR-101-3p水平与PCT、CRP、TNF-α呈正相关(P<0.05),STC1水平与PCT、CRP、TNF-α呈负相关(P<0.05);ROC曲线显示血清miR-101-3p、STC1单独及联合诊断VAP患者的曲线下面积(area under curve,AUC)分别为0.766、0.750、0.841,联合诊断价值高于二者单独诊断(Z二者联合-miR-101-3p=2.275、P=0.023,Z二者联合-STC1=2.856、P=0.004)。结论 VAP患者以革兰氏阴性菌感染为主,血清miR-101-3p呈高表达、STC1呈低表达,血清miR-101-3p、STC1联合诊断对于VAP的发生具有一定的诊断价值。

微小RNA-101对人骨肉瘤细胞自噬和侵袭性的影响

目的探讨微小RNA-101(micro RNA-101,mi R-101)的表达对人骨肉瘤细胞自噬和侵袭性的影响。方法采用实时荧光定量PCR(q RT-PCR)检测骨肉瘤组织和人骨肉瘤细胞系MG-63细胞以及成骨细胞mi R-101的相对表达,蛋白免疫印迹(Western blot)检测两种细胞自噬相关蛋白Beclin1和LC3B的表达;经脂质体转染将mi R-101模拟物和mi R-101阴性对照转染MG-63细胞,并设立空白对照,通过q RT-PCR、Western blot和侵袭实验(Transwell)检测以上三组细胞mi R-101的表达、Beclin1和LC3B的表达以及三组细胞侵袭能力的变化。结果与癌旁骨组织和正常骨组织或成骨细胞相比,mi R-101在骨肉瘤组织和MG-63细胞中表达明显下降(P<0.01);模拟物转染组mi R-101的表达较空白对照组上调了255%,但该组自噬相关蛋白的表达较空白组却显著降低(P<0.01);Transwell侵袭实验显示,模拟物转染组细胞迁移数目较阴性对照组和空白对照组分别减少了60%和67.67%(P<0.01)。结论 mi R-101在骨肉瘤组织和骨肉瘤细胞中呈现低表达,可能与骨肉瘤的发生发展相关。mi R-101抑制骨肉瘤细胞侵袭,其机制可能是通过抑制细胞自噬而发挥作用。

微小RNA-101在心房颤动心房纤维化中的作用

目的:探讨微小RNA-101(mi RNA-101)在心房颤动心房纤维化中的作用。方法:59例开胸手术患者(心脏瓣膜病47例,先天性心脏病12例),分为房颤组30例、窦律组29例。q PCR及锁定核苷酸原位杂交技术检测两组右心耳mi RNA-101表达;q PCR检测两组右心耳转化生长因子βⅠ型受体(TGFβRⅠ)、Ⅰ型胶原(COL1)m RNA表达;免疫印迹法检测两组右心耳TGFβRI、COL1蛋白表达;Masson染色观察两组右心耳胶原的沉积。结果:房颤组右心耳mi RNA-101表达明显低于窦律组(P<0.05),原位杂交显示mi RNA-101主要分布于心房结缔组织,房颤组mi RNA-101表达较窦律组下降24.9%;房颤组TGFβRⅠm RNA表达与窦律组无明显差异(P>0.05),但蛋白表达明显高于窦律组(P<0.05);COL1m RNA及蛋白表达均明显高于窦律组(P<0.05);房颤组右心耳胶原沉积明显多于窦律组(P<0.05)。结论:mi RNA-101下调在心房颤动心房纤维化过程中起重要作用,其可能通过调控TGFβRⅠ而参与心房纤维化。

糖尿病肾病患者血清microRNA-21含量及其与氧化应激指标的相关性

目的分析糖尿病肾病(DN)患者血清micro RNA-21(mi R-21)含量及其与氧化应激指标的相关性。方法选择在该院接受治疗的DN患者82例作为观察组,根据病情严重程度分为轻度DN组(47例)、中重度DN组(35例),另取同期体检健康人60例作为对照组。检测各组患者的血清mi R-21含量,超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、晚期蛋白氧化产物(AOPP)等氧化应激指标水平,进一步分析两者之间的相关性。结果 1早期DN组、中晚期DN组患者血清mi R-21含量低于对照组,中晚期DN组患者血清mi R-21含量低于早期DN组;2早期DN组、中晚期DN组患者血清SOD、MDA、AOPP水平高于对照组,中晚期DN组患者血清SOD、MDA、AOPP水平高于早期DN组;3血清mi R-21含量与SOD、MDA、AOPP等氧化应激指标水平呈负相关。结论 DN患者的血清mi R-21含量降低,且与患者的氧化应激指标水平相关,有望成为诊断及指导疾病治疗的有效指标之一。

红景天苷通过micro RNA-370改善2型糖尿病小鼠糖代谢的作用机制

目的观察红景天苷改善2型糖尿病小鼠血糖作用,探讨红景天苷改善2型糖尿病小鼠糖代谢紊乱的分子机制。方法采用高脂饮食联合腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立2型糖尿病小鼠模型,检测血糖相关指标、血清和肝脏micro RNA-370表达,以及肝组织糖异生关键酶(PEPCK/G6Pase)蛋白表达水平,观察红景天苷对2型糖尿病小鼠糖代谢紊乱的改善作用。分离培养小鼠原代肝细胞,采用瞬时转染技术将micro RNA-370沉默或过表达,观察micro RNA-370对糖代谢的影响及红景天苷调节糖代谢的分子机制。结果与模型对照组比较,红景天苷各剂量组小鼠血糖相关指标均明显改善(P<0.05);血清和肝组织micro RNA-370表达水平以及肝组织PEPCK/G6Pase蛋白相对表达水平均不同程度降低,且呈剂量依赖性,中、大剂量组降低较明显(P<0.05),小剂量组有降低趋势,但差异无统计学意义。细胞实验中,与空白对照组比较,红景天苷组和micro RNA抑制剂组PEPCK/G6Pase表达均被抑制(P<0.05),micro RNA-370激动剂组PEPCK/G6Pase表达明显促进(P<0.05),红景天苷与micro RNA-370激动剂联用能逆转micro RNA-370激动剂所致PEPCK/G6Pase蛋白表达增高(P<0.05)。结论红景天苷能明显改善2型糖尿病小鼠糖代谢紊乱,且该作用至少部分通过抑制micro RNA-370实现。

MicroRNA-126和血管内皮生长因子在胚胎停育绒毛组织中的表达及相关性研究

目的通过分析孕早期胚胎停育与正常胚胎绒毛组织中microRNA-126(miR-126)、血管内皮生长因子(VEGF)的表达差异,探讨其在早期胚胎停育中的相关性。方法收集孕早期胚胎停育和正常胚胎绒毛组织各28例作为胚胎停育组和对照组,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测两组miR-126和VEGF mRNA表达水平的变化。结果 1两组绒毛组织中均有miR-126表达,胚胎停育组绒毛组织中miR-126的表达高于对照组,但差异无统计学意义。2胚胎停育组绒毛组织中VEGF的表达低于对照组,差异有统计学意义。3胚胎停育组绒毛组织中miR-126与VEGF的表达呈负相关;对照组绒毛组织中miR-126与VEGF的表达呈正相关。结论 1胚胎停育绒毛组织中VEGF的表达低于正常胚胎。2VEGF的表达变化与胚胎停育的发生有一定的相关性。

microRNA-133a拮抗苯肾上腺素诱导的小鼠心肌肥大

目的利用心肌细胞肥大体外模型研究mi R-133a抗心肌肥大的作用机制。方法构建mi R-133a腺病毒表达载体,导入293细胞并收获高表达mi R-133a的病毒;取12只出生1~3 d内的小鼠心脏,采用酶消化及梯度离心法获得心肌细胞,分为对照组和模型组,模型组加入苯肾上腺素（PE）诱导;将高表达mi R-133a的腺病毒感染模型组的心肌细胞,观察细胞面积的变化,RTPCR检测Acta1、Actc1、Actb、Myh6、Myh7、BNP基因的表达。结果模型组心肌细胞加入PE培养后,较对照组面积增大3倍以上,Acta1等基因表达显著增高;肥大后模型组的心肌细胞采用mi R-133a病毒感染后较未加入mi R-133a病毒的模型组的心肌细胞的面积缩小,Acta1等基因表达显著降低。结论 mi R-133a是心肌肥大的重要调节因子,有拮抗心肌肥大的作用。

microRNA-155在类风湿关节炎外周血中的表达及临床意义

目的通过研究micro RNA-155(mi R-155)在类风湿关节炎(RA)患者外周血的表达水平,分析mi R-155与疾病临床特征的相关性,探讨其在RA发病及疾病进展中的意义。方法抽取50例初发RA患者及36例健康对照组外周血分离PBMC(外周血单个核细胞),提取和纯化mi RNA,实时定量PCR检测mi R-155的表达,以小分子RNA U6作为内对照,对mi R-155的表达量进行相对定量分析。同时收集RA患者有关的临床参数,统计分析mi R-155的表达水平与RA合并临床参数的相关性。对RA活动组中,随机分为甲氨蝶呤(MTX)单药治疗组,肿瘤坏死因子(TNF)-α抑制剂单药治疗组,两组随访观察12周,收集患者治疗前后外周血。实时荧光定量PCR法检测RA患者治疗前后外周血mi R-155的表达水平变化。结果RA患者中PBMC中mi R-155的表达水平较健康对照组明显升高,(P<0.01);同时RA患者mi R-155的表达与患者活动度有关,与肺间质病变等无明显相关,RA患者TNF-α抑制剂单药治疗组中,mi R-155的表达较治疗前下降,而在甲氨蝶呤治疗组中无明显下降。结论 mi R-155在RA的PBMC中异常高表达,且与RA的活动度相关,提示mi R-155可能可作为RA诊断及RA活动的一个预测指标。mi R-155在RA的发病机制中可能参与了TNF-α的致炎过程。

血清microRNA-375在非小细胞肺癌中的表达水平及其临床意义

目的：探讨micro RNA-375（mi R-375）在非小细胞肺癌（non small-cell lung cancer,NSCLC）患者血清中的表达水平及临床意义。方法：采用实时荧光定量PCR方法检测82例非小细胞肺癌患者和对照组100例健康人血清的mi R-375的表达水平,分析其与临床病理参数之间的关系。结果：NSCLC组血清mi R-375表达水平显著低于对照组,并且其表达与临床分期和淋巴结转移有关（P〈0.05）。血清mi R-375在ROC曲线下面积（area under the ROC curve,AUC）为0.905（95%CI：0.860~0.950）。当血清mi R-375临界值取0.995时,对NSCLC诊断的灵敏度为92.0%,特异度为78.0%。结论：血清mi R-375可能作为一种新型NSCLC诊断的分子标志物和潜在的基因靶向治疗靶点。

microRNA-21通过促进成纤维细胞的增殖和分化调节心肌梗死后的心脏重塑

目的探讨小鼠心肌梗死模型中microRNA-21(miR-21)对心脏成纤维细胞增殖和分化的影响。方法利用左前降支结扎法构建小鼠心肌梗死模型(心肌梗死组),以心电图及病理改变作为建模成功的观察指标。采用荧光定量PCR检测各组心肌组织miR-21的表达。利用miR-21的模拟物(miR-21 mimic)转染小鼠成纤维细胞(miR-21 mimic组),使其在细胞中呈过表达状态,然后标记5-乙炔基-2′脱氧尿嘧啶核苷(EdU),通过荧光显微镜观察成纤维细胞的增殖情况,蛋白质印迹法检测成纤维细胞α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和小鼠Smad同源物7(Smad7)的表达,并与随机对照组及空白对照组比较。结果与假手术组比较,心肌梗死组梗死交界区的miR-21的表达量明显上调[(6.043±0.231)×10-4vs(1.620±0.451)×10-4,P<0.01],miR-21 mimic组成纤维细胞miR-21基因表达较随机对照组和空白对照组显著上调[(4.839±0.705)×10-4vs(1.143±0.064)×10-4vs(1.017±0.201)×10-4,P<0.01],miR-21mimic组成纤维细胞EdU染色阳性率较随机对照组和空白对照组显著增加[(27.892±1.645)%vs(12.553±1.227)%vs(13.946±1.550)%,P<0.01];同时,miR-21 mimic组成纤维细胞Smad7蛋白的表达明显下调,而α-SMA的表达显著上调。结论心肌梗死后,上调的miR-21可以通过调节转化生长因子(TGF)-β信号通路中Smad7的表达促进成纤维细胞的增殖和分化,进而调节心梗后的心脏重塑。

MicroRNA-146a与风湿性疾病

MicroRNAs（miRNAs）是一类短小（20～24nt）的非编码RNA,通过对基因表达的转录后调节参与很多生物学过程。越来越多的研究证明,miRNAs尤其miRNA-146a在免疫和自身免疫中发挥着重要作用。本文将miRNA-146a在风湿性疾病中的生物学功能及研究进展作一综述。

抑制microRNA-21表达降低HCT-116细胞侵袭转移能力的实验研究

目的:探讨抑制人结肠癌细胞HCT-116 micro RNA-21表达降低结肠癌细胞侵袭转移能力作用机制。方法:应用表达反义micro RNA-21的质粒mi RZip21转染HCT-116细胞,检测micro RNA-21的变化,Target Scan和Pic Tar等工具筛选与侵袭转移相关的靶基因,实时定量PCR方法检测转染前后靶基因m RNA的变化,Western blot检测靶基因蛋白表达变化,平皿划痕和Transwell实验观察抑制micro RNA-21与否HCT-116细胞转移和侵袭能力。结果:筛选出4种与侵袭转移相关的micro RNA-21靶基因:TIMP-3,RECK,BMPRⅡ和PCDH17;mi RZip21质粒转染HCT-116后,micro-RNA 21表达水平下降约40%,靶基因TIMP-3和RECK的m RNA及靶蛋白表达上升明显,有统计学意义(P<0.05);平皿划痕和Transwell实验结果表明抑制micro RNA-21后,HCT-116细胞转移侵袭能力明显减弱,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:抑制micro RNA-21的表达能够减弱HCT-116细胞的侵袭和转移能力。

微小RNA-101及髓细胞白血病因子-1在子痫前期中的表达及对胎盘滋养层细胞的影响

目的:探讨微小RNA-101(miR-101)和髓细胞白血病因子-1(MCL1)在子痫前期(PE)中的表达及对胎盘滋养层细胞增殖、凋亡及侵袭的影响。方法:收集2018年6月至2020年12月在郑州大学第二附属医院妇产科就诊的56例PE孕妇(PE组)和60例正常孕妇(对照组)的相关资料,采用荧光定量PCR(qRT-PCR)检测其胎盘组织中miR-101的相对表达水平,蛋白免疫印迹法及免疫组织化学法检测MCL1的表达,分析二者表达的相关性;采用双荧光素酶报告基因实验验证人滋养层细胞HTR8/SVneo中miR-101与MCL1的靶向关系;通过转染分别抑制HTR8/SVneo细胞中miR-101和MCL1的表达,并采用CCK8法、流式细胞仪及细胞侵袭实验检测细胞增殖、凋亡及侵袭能力的变化。结果:PE组胎盘组织中miR-101水平明显高于对照组,MCL1蛋白水平明显低于对照组(P<0.05),且二者表达呈负相关(r<0,P<0.05);miR-101与MCL1之间存在靶向关系,体外抑制miR-101后HTR8/SVneo细胞的增殖和侵袭活性升高,凋亡率下降(P<0.05),与单独抑制miR-101相比,共抑制miR-101和MCL1的表达后细胞的增殖和迁移能力降低,凋亡率升高(P<0.05)。结论:miR-101在PE胎盘组织中高表达,并通过靶向MCL1引起滋养层细胞增殖、浸润不足和异常凋亡,参与PE的发生进展。