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Functional Role of Micro RNA-19b in Acinar Cell Necrosis in Acute Necrotizing Pancreatitis 被引量:5
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作者 胡明星 张宏伟 +5 位作者 付强 秦涛 刘传江 王玉柱 唐强 陈雨信 《Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences)》 SCIE CAS 2016年第2期221-225,共5页
The expression of micro RNA-19b(mi R-19b) in acute necrotizing pancreatitis(ANP) and its functional role in acinar cell necrosis of SD rats were investigated. Twelve SD rats were divided into two groups randomly, ... The expression of micro RNA-19b(mi R-19b) in acute necrotizing pancreatitis(ANP) and its functional role in acinar cell necrosis of SD rats were investigated. Twelve SD rats were divided into two groups randomly, including control group and ANP group. The rat ANP models were established by intraperitoneal injection of L-arginine(2400 mg/kg body weight), and equal volume of 0.9% Na Cl was injected in the control group. Mi RNA chip assay was performed to examine the expression of mi RNAs in the pancreas in two different groups. Besides, to further explore the role of mi R-19 b in ANP in vitro, taurolithocholic acid 3-sulfate disodium salt(TLC-S)(200 μmol/L) was administrated to treat the rat pancreatic acinar cell line, AR42 J, for establishing the ANP cells model. The quantitative real-time PCR(q RT-PCR) was adopted to measure the mi R-19 b expression. Moreover, the mimic mi RNA, mi RNA antisense oligonucleotide(AMO) and control vector were used to transfect AR42 J cells, the expression of mi R-19 b was confirmed by q RT-PCR and the necrotizing rate of AR42 J cells was detected with AO/EB method. The expression of mi R-19 b was significantly higher in ANP group than in control group as displayed by the mi RNA chip assay. Furthermore, after inducing necrosis of AR42 J cells in vitro, the expression of mi R-19 b was significantly increased by 2.51±0.14 times in comparison with the control group. As revealed by q RT-PCR assay, the expression of mi R-19 b was 5.94±0.95 times higher in the mimic mi RNA group than in the control vector group, companied with an obviously increased acinar cell necrotizing rate(50.3%±1.5% vs. 39.6%±2.3%, P〈0.05). Moreover, the expression of mi R-19 b in the mi RNA AMO group was 0.38±0.15 times lower than in the control vector group, and the cell necrosis rate was much lower accordingly(23.1%±3.3% vs. 39.6%±2.3%, P〈0.05). Besides, there was no significant difference between the control vector cells and the cells without treatment(P〈0.05). The expression of mi R-19 b was significantly induced in ANP. In addition, up-regulation of mi R-19 b could promote the necrosis of pancreatic acinar cells and mi R-19 b deficiency could decrease the rate of pancreatic acinar cell necrosis. 展开更多
关键词 mi rna-19b acute pancreatitis acinar cells NECROSIS
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血清微小RNA-19b-3p、微小RNA-933水平对老年慢性心力衰竭患者心功能及预后的评估价值
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作者 马存亮 耿庆亚 《实用临床医药杂志》 CAS 2024年第3期63-67,共5页
目的 探讨血清微小RNA-19b-3p(miR-19b-3p)、微小RNA-933(miR-933)水平对老年慢性心力衰竭患者心功能、预后的评估价值。方法 选取收治的108例老年慢性心力衰竭患者作为研究组。研究组中,根据纽约心脏学会(NYHA)分级,分为Ⅱ级患者35例,... 目的 探讨血清微小RNA-19b-3p(miR-19b-3p)、微小RNA-933(miR-933)水平对老年慢性心力衰竭患者心功能、预后的评估价值。方法 选取收治的108例老年慢性心力衰竭患者作为研究组。研究组中,根据纽约心脏学会(NYHA)分级,分为Ⅱ级患者35例,Ⅲ级患者40例,Ⅳ级患者33例。选择同期体检的90例健康人群作为对照组。入院后检测血清miR-19b-3p、miR-933水平。采用超声心动图测量心功能指标[左心室射血分数(LVEF)、左室舒张末期内径(LVEDD)]。采用Pearson相关分析法分析血清miR-19b-3p、miR-933水平与心功能的关系。根据老年慢性心力衰竭患者入院1年内是否发生终点事件分为发生组(n=34)和未发生组(n=74)。采用受试者工作特征(ROC)曲线评估血清miR-19b-3p、miR-933对老年慢性心力衰竭预后的预测价值。采用多因素Cox回归分析法分析老年慢性心力衰竭患者预后的影响因素。结果 研究组血清miR-19b-3p、miR-933水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。心功能分级Ⅳ级患者血清miR-19b-3p、miR-933及LVEF水平低于心功能Ⅲ级患者、心功能Ⅱ级患者和健康人群,LVEDD大于心功能Ⅲ级患者、心功能Ⅱ级患者和健康人群,差异有统计学意义(P<0.05)。老年慢性心力衰竭患者血清miR-19b-3p水平与LVEF呈正相关,与LVEDD呈负相关(r=0.554、-0.368,P<0.001);血清miR-933水平与LVEF呈正相关,与LVEDD呈负相关(r=0.505、-0.410,P<0.001)。发生组血清miR-19b-3p、miR-933水平低于未发生组,差异有统计学意义(P<0.05)。血清miR-19b-3p、miR-933预测老年慢性心力衰竭患者预后的曲线下面积(AUC)为0.835(95%CI:0.785~0.885)、0.843(95%CI:0.790~0.890),二者联合预测的AUC为0.901(95%CI:0.851~0.951)。血清miR-19b-3p(HR=3.762,95%CI:1.854~7.634)、miR-933(HR=3.480,95%CI:1.903~6.364)及美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分(HR=3.047,95%CI:1.837~5.051)为老年慢性心力衰竭患者预后不良的影响因素(P<0.05)。结论 老年慢性心力衰竭患者的血清miR-19b-3p、miR-933水平均呈低表达。miR-19b-3p、miR-933水平变化与心功能及预后密切相关,其可作为预测老年慢性心力衰竭患者预后不良的有效指标。 展开更多
关键词 慢性心力衰竭 老年人 微小rna-19b-3p 微小rna-933 心功能 预后
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长链非编码RNA F-box富含亮氨酸的重复蛋白19反义RNA 1调节微小RNA-342-3p/自噬相关蛋白10轴对结直肠癌细胞增殖、迁移和奥沙利铂耐药性的影响实验研究
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作者 屠佳佳 王利云 +2 位作者 孙波 王凡荣 冯辉 《陕西医学杂志》 CAS 2024年第12期1604-1610,共7页
目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA) F-box富含亮氨酸的重复蛋白19反义RNA 1(FBXL19-AS1)调节微小RNA(miR)-342-3p/自噬相关蛋白10(ATG10)轴对结直肠癌(CRC)细胞增殖、迁移和奥沙利铂耐药性的影响。方法:实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检... 目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA) F-box富含亮氨酸的重复蛋白19反义RNA 1(FBXL19-AS1)调节微小RNA(miR)-342-3p/自噬相关蛋白10(ATG10)轴对结直肠癌(CRC)细胞增殖、迁移和奥沙利铂耐药性的影响。方法:实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测组织及正常肠上皮细胞(NCM460)、人CRC细胞系RKO、HCT-8细胞及HCT-8/L-OHP细胞中FBXL19-AS1、miR-342-3p、ATG10 mRNA表达水平。将HCT-8细胞分为shFBXL19-AS1组、shRNA组、shFBXL19-AS1+inhibitor NC组和shFBXL19-AS1+miR-342-3p inhibitor组,并以未转染的细胞为空白组。将HCT-8/L-OHP细胞分为L-OHP+shFBXL19-AS1组、L-OHP+shRNA组、L-OHP+shFBXL19-AS1+inhibitor NC组和L-OHP+shFBXL19-AS1+miR-342-3p inhibitor组,并以未转染的细胞为空白组。细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测HCT-8、HCT-8/L-OHP细胞增殖及其耐药性。划痕实验检测细胞迁移能力。免疫印迹法(Western blot)检测P-糖蛋白(P-gp)、增殖蛋白(Ki-67)、迁移侵袭增强子因子1(MIEN1)、ATG10蛋白表达水平。双荧光素酶报告基因实验分析miR-342-3p与FBXL19-AS1、ATG10靶向关系。结果:FBXL19-AS1、ATG10 mRNA表达在HCT-8/L-OHP细胞及CRC组织中增加,miR-342-3p表达则降低(均P<0.05)。shFBXL19-AS1组细胞增殖、细胞迁移、FBXL19-AS1和ATG10 mRNA表达以及Ki-67、MIEN1、ATG10蛋白表达较shRNA组和空白组降低,miR-342-3p表达则增加(均P<0.05)。shFBXL19-AS1+miR-342-3p inhibitor组细胞增殖、细胞迁移、ATG10 mRNA以及Ki-67、MIEN1、ATG10蛋白表达较shFBXL19-AS1+inhibitor NC组增加,miR-342-3p表达则降低(均P<0.05)。L-OHP+shFBXL19-AS1组细胞增殖、细胞迁移、细胞耐药性及P-gp、Ki-67、MIEN1、ATG10蛋白表达较L-OHP+shRNA组和空白组降低(均P<0.05)。L-OHP+shFBXL19-AS1+miR-342-3p inhibitor组细胞增殖、细胞迁移、细胞耐药性及P-gp、Ki-67、MIEN1、ATG10蛋白表达较L-OHP+shFBXL19-AS1+inhibitor NC组增加(均P<0.05)。结论:干扰lncRNA FBXL19-AS1通过上调miR-342-3p/ATG10轴抑制CRC细胞的增殖、迁移,改善奥沙利铂耐药性。 展开更多
关键词 结直肠癌 长链非编码RNA F-box富含亮氨酸的重复蛋白19反义RNA 1 微小rna-342-3p 自噬相关蛋白10 细胞增殖 细胞迁移 奥沙利铂
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糖尿病肾病患者血清microRNA-21含量及其与氧化应激指标的相关性 被引量:20
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作者 冯罡 李军 +3 位作者 王晓丽 周婷 常向云 孙侃 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2017年第1期60-63,共4页
目的分析糖尿病肾病(DN)患者血清micro RNA-21(mi R-21)含量及其与氧化应激指标的相关性。方法选择在该院接受治疗的DN患者82例作为观察组,根据病情严重程度分为轻度DN组(47例)、中重度DN组(35例),另取同期体检健康人60例作为对照组。... 目的分析糖尿病肾病(DN)患者血清micro RNA-21(mi R-21)含量及其与氧化应激指标的相关性。方法选择在该院接受治疗的DN患者82例作为观察组,根据病情严重程度分为轻度DN组(47例)、中重度DN组(35例),另取同期体检健康人60例作为对照组。检测各组患者的血清mi R-21含量,超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、晚期蛋白氧化产物(AOPP)等氧化应激指标水平,进一步分析两者之间的相关性。结果 1早期DN组、中晚期DN组患者血清mi R-21含量低于对照组,中晚期DN组患者血清mi R-21含量低于早期DN组;2早期DN组、中晚期DN组患者血清SOD、MDA、AOPP水平高于对照组,中晚期DN组患者血清SOD、MDA、AOPP水平高于早期DN组;3血清mi R-21含量与SOD、MDA、AOPP等氧化应激指标水平呈负相关。结论 DN患者的血清mi R-21含量降低,且与患者的氧化应激指标水平相关,有望成为诊断及指导疾病治疗的有效指标之一。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 micro rna-21 氧化应激
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红景天苷通过micro RNA-370改善2型糖尿病小鼠糖代谢的作用机制 被引量:9
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作者 张新茹 于玲 +1 位作者 王冬雪 谢莉娜 《医药导报》 CAS 北大核心 2018年第3期279-284,共6页
目的观察红景天苷改善2型糖尿病小鼠血糖作用,探讨红景天苷改善2型糖尿病小鼠糖代谢紊乱的分子机制。方法采用高脂饮食联合腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立2型糖尿病小鼠模型,检测血糖相关指标、血清和肝脏micro RNA-370表达,以及肝组织糖... 目的观察红景天苷改善2型糖尿病小鼠血糖作用,探讨红景天苷改善2型糖尿病小鼠糖代谢紊乱的分子机制。方法采用高脂饮食联合腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立2型糖尿病小鼠模型,检测血糖相关指标、血清和肝脏micro RNA-370表达,以及肝组织糖异生关键酶(PEPCK/G6Pase)蛋白表达水平,观察红景天苷对2型糖尿病小鼠糖代谢紊乱的改善作用。分离培养小鼠原代肝细胞,采用瞬时转染技术将micro RNA-370沉默或过表达,观察micro RNA-370对糖代谢的影响及红景天苷调节糖代谢的分子机制。结果与模型对照组比较,红景天苷各剂量组小鼠血糖相关指标均明显改善(P<0.05);血清和肝组织micro RNA-370表达水平以及肝组织PEPCK/G6Pase蛋白相对表达水平均不同程度降低,且呈剂量依赖性,中、大剂量组降低较明显(P<0.05),小剂量组有降低趋势,但差异无统计学意义。细胞实验中,与空白对照组比较,红景天苷组和micro RNA抑制剂组PEPCK/G6Pase表达均被抑制(P<0.05),micro RNA-370激动剂组PEPCK/G6Pase表达明显促进(P<0.05),红景天苷与micro RNA-370激动剂联用能逆转micro RNA-370激动剂所致PEPCK/G6Pase蛋白表达增高(P<0.05)。结论红景天苷能明显改善2型糖尿病小鼠糖代谢紊乱,且该作用至少部分通过抑制micro RNA-370实现。 展开更多
关键词 红景天苷 micro rna-370 2型糖尿病 糖代谢紊乱
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MicroRNA-126和血管内皮生长因子在胚胎停育绒毛组织中的表达及相关性研究 被引量:7
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作者 彭燕 莫吉祥 王新 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2016年第15期76-80,共5页
目的通过分析孕早期胚胎停育与正常胚胎绒毛组织中microRNA-126(miR-126)、血管内皮生长因子(VEGF)的表达差异,探讨其在早期胚胎停育中的相关性。方法收集孕早期胚胎停育和正常胚胎绒毛组织各28例作为胚胎停育组和对照组,采用逆转录-聚... 目的通过分析孕早期胚胎停育与正常胚胎绒毛组织中microRNA-126(miR-126)、血管内皮生长因子(VEGF)的表达差异,探讨其在早期胚胎停育中的相关性。方法收集孕早期胚胎停育和正常胚胎绒毛组织各28例作为胚胎停育组和对照组,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测两组miR-126和VEGF mRNA表达水平的变化。结果 1两组绒毛组织中均有miR-126表达,胚胎停育组绒毛组织中miR-126的表达高于对照组,但差异无统计学意义。2胚胎停育组绒毛组织中VEGF的表达低于对照组,差异有统计学意义。3胚胎停育组绒毛组织中miR-126与VEGF的表达呈负相关;对照组绒毛组织中miR-126与VEGF的表达呈正相关。结论 1胚胎停育绒毛组织中VEGF的表达低于正常胚胎。2VEGF的表达变化与胚胎停育的发生有一定的相关性。 展开更多
关键词 胚胎停育 绒毛组织 micro rna-126 血管内皮生长因子
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microRNA-133a拮抗苯肾上腺素诱导的小鼠心肌肥大 被引量:2
7
作者 李崎 杨祥胜 +6 位作者 周晓华 肖露 林曦 张风波 李玲丽 余艳红 马燕琳 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期1283-1286,共4页
目的利用心肌细胞肥大体外模型研究mi R-133a抗心肌肥大的作用机制。方法构建mi R-133a腺病毒表达载体,导入293细胞并收获高表达mi R-133a的病毒;取12只出生1~3 d内的小鼠心脏,采用酶消化及梯度离心法获得心肌细胞,分为对照组和模型组,... 目的利用心肌细胞肥大体外模型研究mi R-133a抗心肌肥大的作用机制。方法构建mi R-133a腺病毒表达载体,导入293细胞并收获高表达mi R-133a的病毒;取12只出生1~3 d内的小鼠心脏,采用酶消化及梯度离心法获得心肌细胞,分为对照组和模型组,模型组加入苯肾上腺素(PE)诱导;将高表达mi R-133a的腺病毒感染模型组的心肌细胞,观察细胞面积的变化,RTPCR检测Acta1、Actc1、Actb、Myh6、Myh7、BNP基因的表达。结果模型组心肌细胞加入PE培养后,较对照组面积增大3倍以上,Acta1等基因表达显著增高;肥大后模型组的心肌细胞采用mi R-133a病毒感染后较未加入mi R-133a病毒的模型组的心肌细胞的面积缩小,Acta1等基因表达显著降低。结论 mi R-133a是心肌肥大的重要调节因子,有拮抗心肌肥大的作用。 展开更多
关键词 micro rna-133a 心肌肥大 苯肾上腺素
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microRNA-155在类风湿关节炎外周血中的表达及临床意义 被引量:7
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作者 施春花 王友莲 +3 位作者 付强 杨明峰 尚可 皮慧 《江西医药》 CAS 2014年第11期1131-1134,共4页
目的通过研究micro RNA-155(mi R-155)在类风湿关节炎(RA)患者外周血的表达水平,分析mi R-155与疾病临床特征的相关性,探讨其在RA发病及疾病进展中的意义。方法抽取50例初发RA患者及36例健康对照组外周血分离PBMC(外周血单个核细胞),提... 目的通过研究micro RNA-155(mi R-155)在类风湿关节炎(RA)患者外周血的表达水平,分析mi R-155与疾病临床特征的相关性,探讨其在RA发病及疾病进展中的意义。方法抽取50例初发RA患者及36例健康对照组外周血分离PBMC(外周血单个核细胞),提取和纯化mi RNA,实时定量PCR检测mi R-155的表达,以小分子RNA U6作为内对照,对mi R-155的表达量进行相对定量分析。同时收集RA患者有关的临床参数,统计分析mi R-155的表达水平与RA合并临床参数的相关性。对RA活动组中,随机分为甲氨蝶呤(MTX)单药治疗组,肿瘤坏死因子(TNF)-α抑制剂单药治疗组,两组随访观察12周,收集患者治疗前后外周血。实时荧光定量PCR法检测RA患者治疗前后外周血mi R-155的表达水平变化。结果RA患者中PBMC中mi R-155的表达水平较健康对照组明显升高,(P<0.01);同时RA患者mi R-155的表达与患者活动度有关,与肺间质病变等无明显相关,RA患者TNF-α抑制剂单药治疗组中,mi R-155的表达较治疗前下降,而在甲氨蝶呤治疗组中无明显下降。结论 mi R-155在RA的PBMC中异常高表达,且与RA的活动度相关,提示mi R-155可能可作为RA诊断及RA活动的一个预测指标。mi R-155在RA的发病机制中可能参与了TNF-α的致炎过程。 展开更多
关键词 micro rna-155 类风湿关节炎
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血清microRNA-375在非小细胞肺癌中的表达水平及其临床意义 被引量:4
9
作者 万梦智 曾清华 +3 位作者 许飞 万训 杨建 涂友梅 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2015年第10期1597-1600,共4页
目的:探讨micro RNA-375(mi R-375)在非小细胞肺癌(non small-cell lung cancer,NSCLC)患者血清中的表达水平及临床意义。方法:采用实时荧光定量PCR方法检测82例非小细胞肺癌患者和对照组100例健康人血清的mi R-375的表达水平,分... 目的:探讨micro RNA-375(mi R-375)在非小细胞肺癌(non small-cell lung cancer,NSCLC)患者血清中的表达水平及临床意义。方法:采用实时荧光定量PCR方法检测82例非小细胞肺癌患者和对照组100例健康人血清的mi R-375的表达水平,分析其与临床病理参数之间的关系。结果:NSCLC组血清mi R-375表达水平显著低于对照组,并且其表达与临床分期和淋巴结转移有关(P〈0.05)。血清mi R-375在ROC曲线下面积(area under the ROC curve,AUC)为0.905(95%CI:0.860~0.950)。当血清mi R-375临界值取0.995时,对NSCLC诊断的灵敏度为92.0%,特异度为78.0%。结论:血清mi R-375可能作为一种新型NSCLC诊断的分子标志物和潜在的基因靶向治疗靶点。 展开更多
关键词 非小细胞肺 micro rna-375 实时荧光定量PCR
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microRNA-21通过促进成纤维细胞的增殖和分化调节心肌梗死后的心脏重塑 被引量:10
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作者 郭东 张闽红 +1 位作者 肖清萍 刘建文 《天津医药》 CAS 北大核心 2014年第5期447-450,共4页
目的探讨小鼠心肌梗死模型中microRNA-21(miR-21)对心脏成纤维细胞增殖和分化的影响。方法利用左前降支结扎法构建小鼠心肌梗死模型(心肌梗死组),以心电图及病理改变作为建模成功的观察指标。采用荧光定量PCR检测各组心肌组织miR-21的... 目的探讨小鼠心肌梗死模型中microRNA-21(miR-21)对心脏成纤维细胞增殖和分化的影响。方法利用左前降支结扎法构建小鼠心肌梗死模型(心肌梗死组),以心电图及病理改变作为建模成功的观察指标。采用荧光定量PCR检测各组心肌组织miR-21的表达。利用miR-21的模拟物(miR-21 mimic)转染小鼠成纤维细胞(miR-21 mimic组),使其在细胞中呈过表达状态,然后标记5-乙炔基-2′脱氧尿嘧啶核苷(EdU),通过荧光显微镜观察成纤维细胞的增殖情况,蛋白质印迹法检测成纤维细胞α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和小鼠Smad同源物7(Smad7)的表达,并与随机对照组及空白对照组比较。结果与假手术组比较,心肌梗死组梗死交界区的miR-21的表达量明显上调[(6.043±0.231)×10-4vs(1.620±0.451)×10-4,P<0.01],miR-21 mimic组成纤维细胞miR-21基因表达较随机对照组和空白对照组显著上调[(4.839±0.705)×10-4vs(1.143±0.064)×10-4vs(1.017±0.201)×10-4,P<0.01],miR-21mimic组成纤维细胞EdU染色阳性率较随机对照组和空白对照组显著增加[(27.892±1.645)%vs(12.553±1.227)%vs(13.946±1.550)%,P<0.01];同时,miR-21 mimic组成纤维细胞Smad7蛋白的表达明显下调,而α-SMA的表达显著上调。结论心肌梗死后,上调的miR-21可以通过调节转化生长因子(TGF)-β信号通路中Smad7的表达促进成纤维细胞的增殖和分化,进而调节心梗后的心脏重塑。 展开更多
关键词 心肌梗死 成纤维细胞 细胞增殖 细胞分化 Smad7蛋白质 Α平滑肌肌动蛋白 心脏重塑 micro rna-21 microrna-21
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MicroRNA-146a与风湿性疾病 被引量:3
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作者 荀春华 韩峰 胡志坚 《检验医学与临床》 CAS 2013年第19期2613-2615,共3页
MicroRNAs(miRNAs)是一类短小(20~24nt)的非编码RNA,通过对基因表达的转录后调节参与很多生物学过程。越来越多的研究证明,miRNAs尤其miRNA-146a在免疫和自身免疫中发挥着重要作用。本文将miRNA-146a在风湿性疾病中的生物学功能及... MicroRNAs(miRNAs)是一类短小(20~24nt)的非编码RNA,通过对基因表达的转录后调节参与很多生物学过程。越来越多的研究证明,miRNAs尤其miRNA-146a在免疫和自身免疫中发挥着重要作用。本文将miRNA-146a在风湿性疾病中的生物学功能及研究进展作一综述。 展开更多
关键词 非编码RNA micro rna-146a 风湿性疾病
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用双萤光素酶报告基因技术验证小鼠lncRNA-H19与miR-199a-5p的靶向关系 被引量:5
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作者 侯婧瑛 周长青 +7 位作者 郑韶欣 郭天柱 龙会宝 伍权华 钟婷婷 吴浩 汪蕾 王彤 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期2256-2260,共5页
目的:构建长链非编码RNA-H19(lncRNA-H19)萤光素酶报告质粒,利用双萤光素酶报告基因技术验证小鼠lncRNA-H19与微小RNA-199a-5p(miR-199a-5p)的靶向关系。方法:通过生物信息学网站RegRNA2.0预测获取小鼠lncRNA-H19与miR-199a-5p潜在的互... 目的:构建长链非编码RNA-H19(lncRNA-H19)萤光素酶报告质粒,利用双萤光素酶报告基因技术验证小鼠lncRNA-H19与微小RNA-199a-5p(miR-199a-5p)的靶向关系。方法:通过生物信息学网站RegRNA2.0预测获取小鼠lncRNA-H19与miR-199a-5p潜在的互补结合位点。将H19及其突变体克隆到萤光素酶载体psi CHECK-2中,构建H19野生型和突变型质粒,并采用酶切和测序方法鉴定psi CHECK-2-H19载体是否构建成功。将H19野生型和突变型质粒分别与miR-199a-5p模拟物、miR-199a-5p抑制剂、miR-199a-5p模拟物阴性对照或miR-199a-5p抑制剂阴性对照在293T细胞中共转染。收集细胞后通过双萤光素酶报告系统检测不同组别的萤光素酶活性,从而对lncRNA-H19与miR-199a-5p的靶向调节关系进行验证。结果:构建的重组萤光素酶报告质粒经酶切及测序鉴定正确,双萤光素酶报告基因检测显示,与miR-199a-5p模拟物阴性对照组相比,miR-199a-5p模拟物组H19野生型报告基因的萤光素酶活性显著降低,下降约49%左右(P<0.01),而miR-199a-5p抑制剂组H19野生型报告基因的萤光素酶活性较miR-199a-5p模拟物组明显增高(P<0.01)。miR-199a-5p模拟物、miR-199a-5p抑制剂、miR-199a-5p模拟物阴性对照以及miR-199a-5p抑制剂阴性对照对H19突变型的萤光素酶活性均无明显影响。结论:lncRNA-H19能够靶向结合miR-199a-5p,并在转录后水平对其有直接抑制作用。 展开更多
关键词 长链非编码rna-H19 微小rna-199a-5p 双萤光素酶报告基因
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抑制microRNA-21表达降低HCT-116细胞侵袭转移能力的实验研究 被引量:3
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作者 王金淼 姜涛 +2 位作者 戚峰 刘彤 王鹏志 《天津医科大学学报》 2016年第1期13-16,共4页
目的:探讨抑制人结肠癌细胞HCT-116 micro RNA-21表达降低结肠癌细胞侵袭转移能力作用机制。方法:应用表达反义micro RNA-21的质粒mi RZip21转染HCT-116细胞,检测micro RNA-21的变化,Target Scan和Pic Tar等工具筛选与侵袭转移相关的靶... 目的:探讨抑制人结肠癌细胞HCT-116 micro RNA-21表达降低结肠癌细胞侵袭转移能力作用机制。方法:应用表达反义micro RNA-21的质粒mi RZip21转染HCT-116细胞,检测micro RNA-21的变化,Target Scan和Pic Tar等工具筛选与侵袭转移相关的靶基因,实时定量PCR方法检测转染前后靶基因m RNA的变化,Western blot检测靶基因蛋白表达变化,平皿划痕和Transwell实验观察抑制micro RNA-21与否HCT-116细胞转移和侵袭能力。结果:筛选出4种与侵袭转移相关的micro RNA-21靶基因:TIMP-3,RECK,BMPRⅡ和PCDH17;mi RZip21质粒转染HCT-116后,micro-RNA 21表达水平下降约40%,靶基因TIMP-3和RECK的m RNA及靶蛋白表达上升明显,有统计学意义(P<0.05);平皿划痕和Transwell实验结果表明抑制micro RNA-21后,HCT-116细胞转移侵袭能力明显减弱,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:抑制micro RNA-21的表达能够减弱HCT-116细胞的侵袭和转移能力。 展开更多
关键词 结肠癌 侵袭 转移 micro rna-21 质粒
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胃癌组织中microRNA-224阳性表达与患者预后相关性分析 被引量:4
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作者 邵长明 邵钦树 《中外医学研究》 2016年第27期1-3,共3页
目的:探讨micro RNA-224于胃癌组织中的阳性表达与患者临床病理特征及预后的相关性。方法:应用原位杂交技术检测micro RNA-224在50例石蜡固定癌旁非肿瘤胃黏膜组织及112例石蜡胃肿瘤组织切片中的表达情况,分析其与肿瘤患者各病理参数及... 目的:探讨micro RNA-224于胃癌组织中的阳性表达与患者临床病理特征及预后的相关性。方法:应用原位杂交技术检测micro RNA-224在50例石蜡固定癌旁非肿瘤胃黏膜组织及112例石蜡胃肿瘤组织切片中的表达情况,分析其与肿瘤患者各病理参数及预后的相关性。原位杂交按照原位杂交试剂盒的说明书进行。结果:micro RNA-224在胃癌组织中阳性表达率49.1%(55/112),癌旁非肿瘤胃黏膜组织中阴性表达。其阳性表达与TNM分期、淋巴结转移、远处转移及浸润深度存在相关性(P<0.05),而与性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤的部位、分化程度、Lauren分型无关(P>0.05)。micro RNA-224阴性表达比阳性表达者5年生存率高,差异有统计学意义(P<0.001)。经COX多因素分析显示:micro RNA-224的表达是影响胃癌患者预后的独立因素之一(P<0.05)。结论:micro RNA-224在肿瘤组织中阳性表达与TNM分期、淋巴结转移、远处转移及浸润深度密切相关,是影响胃癌患者预后的独立因素之一。 展开更多
关键词 micro rna-224 原位杂交 胃癌 预后
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慢性心力衰竭患者血浆循环微小RNA-19b的表达情况分析 被引量:4
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作者 张婧 张恩翔 +2 位作者 王洪江 王喆 池洪杰 《中国医刊》 CAS 2022年第6期621-625,共5页
目的探讨慢性心力衰竭(简称心衰)患者血浆循环微小RNA(mirco RNA,miR)-19b与N末端B型利钠肽前体(N-terminal pro-B type natriuretic peptide,NT-proBNP)及心功能的相关性,评价循环miR-19b对慢性心衰的诊断及评估价值。方法选择首都医... 目的探讨慢性心力衰竭(简称心衰)患者血浆循环微小RNA(mirco RNA,miR)-19b与N末端B型利钠肽前体(N-terminal pro-B type natriuretic peptide,NT-proBNP)及心功能的相关性,评价循环miR-19b对慢性心衰的诊断及评估价值。方法选择首都医科大学附属北京朝阳医院2016年10月至2018年11月收住院的心衰患者208例作为心衰组,根据左心室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF)及舒张早期快速充盈波和舒张晚期心房收缩波充盈速度比(E/A)将心衰组患者分为收缩性心衰组(LVEF<45%)及舒张性心衰组(LVEF≥45%),根据年龄将心衰组分为≥60岁组与<60岁组。选取同期住院的年龄及性别匹配的非心衰冠心病及高血压患者80例作为对照组。记录所有患者的年龄、性别、病史、实验室检查及用药情况等临床资料。所有患者于入院次日晨起空腹取血,使用反转录聚合酶链反应检测血浆中循环mi R-19b的表达水平并进行组间比较,采用多因素logistic回归分析心衰患者血浆循环mi R-19b水平与NT-pro BNP及心功能的相关性。结果心衰组的循环mi R-19b表达水平为1.039±0.348,明显低于对照组(1.341±0.381),差异有显著性(P<0.05);收缩性心衰组循环mi R-19b表达水平(1.005±0.377)与舒张性心衰组(1.055±0.340)比较差异无显著性(P=0.335)。多因素logistic回归分析显示,纠正心衰发生其他相关因素后,mi R-19b仍与心衰呈负相关。受试者工作特征曲线分析显示,循环mi R-19b诊断心衰的曲线下面积(area under curve,AUC)为0.739±0.035(P<0.05),NT-pro BNP诊断心衰的AUC为0.896±0.024(P<0.05),NT-pro BNP与mi RNA-19b比值诊断心衰的AUC为0.902±0.023(P<0.05)。结论心衰患者血浆循环mi R-19b的表达水平降低,且不受心脏收缩功能、舒张功能及年龄的影响,对心衰具有辅助诊断价值。 展开更多
关键词 微小rna-19b 心力衰竭 N末端B型利钠肽前体 心功能
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微小RNA-19b协同5-氮胞苷对骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化的影响 被引量:1
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作者 周琦 明强 +1 位作者 刘敏 骆春艳 《岭南心血管病杂志》 CAS 2021年第5期587-592,共6页
目的探讨微小RNA(micro RNA,miR)-19b对骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem sells,BMSCs)分化的影响,并研究其协同5-氮胞苷(5-azacytidine,5-aza)对BMSCs分化成心肌样细胞的作用。方法分离培养SD大鼠BMSCs,细胞鉴定后使用mi... 目的探讨微小RNA(micro RNA,miR)-19b对骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem sells,BMSCs)分化的影响,并研究其协同5-氮胞苷(5-azacytidine,5-aza)对BMSCs分化成心肌样细胞的作用。方法分离培养SD大鼠BMSCs,细胞鉴定后使用miR-19b mimics/inhibitor转染BMSCs,实时荧光定量聚合酶链反应(real time quantitative polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测转染效率。采用10μmol/L 5-aza干预转染后的BMSCs,观察细胞形态学变化。采用Western blot检测诱导后BMSCs中心房钠尿肽(atrial natriuretic peptide,ANP)、心肌肌钙蛋白I(cardiac troponin I,cTnI)、和心肌肌钙蛋白T(cardiac troponin T,cTnT)表达。结果与5-aza诱导的BMSCs相比,miR-19b mimics转染后的BMSCs无明显形态学变化,5-aza诱导的miR-19b mimics组细胞形态变化最大,细胞体积变大,细胞聚集呈涡旋样,而5-aza诱导的miR-19b inhibitor组细胞形态变化不明显。与对照组比较,miR-19b mimics组ANP、cTnI及cTnT蛋白表达水平明显升高,而miR-19b inhibitor组ANP、cTnI及cTnT蛋白表达水平明显降低。结论miR-19b无诱导BMSCs分化的能力,但协同5-aza诱导BMSCs可提高其向心肌样细胞分化的能力。 展开更多
关键词 微小rna-19b 骨髓间充质干细胞 5-氮胞苷 心肌样细胞
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血清微RNA-191、细胞角蛋白19片段抗原21-1、糖类抗原72-4水平对卵巢良、恶性肿瘤的鉴别诊断价值 被引量:3
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作者 吕娜 《中国医学前沿杂志(电子版)》 2020年第12期121-125,共5页
目的探究血清微RNA-191(microRNA-191,miR-191)、细胞角蛋白19片段抗原21-1(cytokeratin 19 fragments antigen 21-1,CYFRA21-1)、糖类抗原72-4(carbohydrate antigen 72-4,CA72-4)水平对卵巢良、恶性肿瘤的鉴别诊断价值。方法将2017年... 目的探究血清微RNA-191(microRNA-191,miR-191)、细胞角蛋白19片段抗原21-1(cytokeratin 19 fragments antigen 21-1,CYFRA21-1)、糖类抗原72-4(carbohydrate antigen 72-4,CA72-4)水平对卵巢良、恶性肿瘤的鉴别诊断价值。方法将2017年6月至2019年6月首都医科大学附属北京妇产医院收治的156例卵巢恶性肿瘤患者和121例卵巢良性肿瘤患者分别纳入恶性组和良性组,另选取该院同期体检健康者纳入健康组。采用定量反转录聚合酶链反应技术检测受试者血清miR-191水平,采用电化学发光免疫法检测受试者血清CYFRA21-1、CA72-4水平。采用接受者操作特征曲线分析血清miR-191、CYFRA21-1、CA72-4水平对卵巢恶性肿瘤的诊断价值。结果良性组与恶性组患者血清miR-191、CYFRA21-1、CA72-4水平均显著高于健康组(均P<0.05)。恶性组患者血清miR-191、CYFRA21-1、CA72-4水平均显著高于良性组(均P<0.05)。临床分期Ⅲ~Ⅳ期、淋巴结转移患者血清miR-191、CYFRA21-1、CA72-4水平均显著高于Ⅰ~Ⅱ期、无淋巴结转移患者(均P<0.05)。高、中、低分化患者血清miR-191、CYFRA21-1、CA72-4水平依次显著升高(均P<0.05)。血清miR-191、CYFRA21-1、CA72-4预测卵巢恶性肿瘤的曲线下面积(area under the curve,AUC)分别为0.765、0.807、0.770,均明显低于三者联合检测的AUC(0.854)(Z=2.790、2.743、2.256,均P<0.05),且三者联合检测的灵敏度最高。结论卵巢恶性肿瘤患者血清miR-191、CYFRA21-1、CA72-4表达水平上调,均与临床分期、肿瘤分化程度和淋巴结转移有关,三者联合检测对卵巢良、恶性肿瘤的鉴别价值较高,有助于提高临床对卵巢恶性肿瘤的诊断准确性。 展开更多
关键词 卵巢肿瘤 rna-191 细胞角蛋白19片段抗原21-1 糖类抗原72-4 鉴别诊断
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MicroRNA-599对静脉曲张中血管平滑肌细胞去分化的影响及其机制研究
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作者 赵松峰 胡灵 杜丽苹 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2016年第15期91-97,共7页
目的研究micro RNA-599(miR-599)在曲张静脉中的表达,探讨miR-599是否通过下调血小板源性生长因子B(PDGF-BB),抑制曲张静脉中血管平滑肌细胞(VSMCs)去分化。方法收集大隐静脉移植术患者中曲张静脉和正常静脉标本,通过实时荧光定量聚合... 目的研究micro RNA-599(miR-599)在曲张静脉中的表达,探讨miR-599是否通过下调血小板源性生长因子B(PDGF-BB),抑制曲张静脉中血管平滑肌细胞(VSMCs)去分化。方法收集大隐静脉移植术患者中曲张静脉和正常静脉标本,通过实时荧光定量聚合酶链反应(q RT-PCR)检测42例曲张静脉组织及39例正常静脉组织中miR-599、miR-200、miR-145、miR-146b、miR-155的表达;Western blot检测两组标本中SMactin、SM-22、SM-MCH、OPN的表达;在细胞实验中,转染miR-599mimic和miR-NC至离体培养的VSMCs中,Western blot检测VSMCs中SM-actin、SM-22、SM-MCH、OPN、PDGF-BB的表达,噻唑蓝法测细胞增殖、划痕实验观察细胞迁移,利用荧光素酶试验验证PDGF是miR-599的靶基因。结果相比于正常静脉组织,miR-599在曲张静脉中的表达降低(F=73.012,P=0.001)。两组miR-146b、miR-200、miR-30、miR-155的表达量比较,差异无统计学意义。相比于正常静脉组织,曲张静脉组织中SM-actin、SM-22、SM-MCH的表达降低(P<0.05),OPN的表达升高(F=56.414,P=0.009);在细胞实验中,相比于对照组,miR-599组VSMCs中SM-actin、SM-22、SM-MCH的表达升高(P<0.05),OPN的表达降低(F=27.353,P=0.022),细胞增殖减少(F=37.824,P=0.016),迁移减少(F=69.365,P=0.001),PDGF表达量减少(F=55.345,P=0.004)。荧光素酶试验结果显示,miR-599能够降低PDGF-3'-UTR质粒的荧光素活性(F=21.429,P=0.036)。结论在曲张静脉组织中,miR-599低表达。在VSMCs中,miR-599可以通过下调PDGF-BB而抑制VSMCs去分化。 展开更多
关键词 下肢静脉曲张 micro rna-599 血管平滑肌细胞 细胞分化
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miRNA-19、miRNA-146、miRNA-155在支气管哮喘患者中的表达及与气道重塑的相关性
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作者 苏爱峰 王怀俊 李云 《实验与检验医学》 CAS 2023年第2期234-237,共4页
目的探讨微小RNA-19(miRNA-19)、微小RNA-146(miRNA-146)、微小RNA-155(miRNA-155)在支气管哮喘患者中的表达及与气道重塑的相关性。方法选取2019年2月至2021年2月92例支气管哮喘患者作为研究组,根据病情严重程度分为重度组(n=17)、中度... 目的探讨微小RNA-19(miRNA-19)、微小RNA-146(miRNA-146)、微小RNA-155(miRNA-155)在支气管哮喘患者中的表达及与气道重塑的相关性。方法选取2019年2月至2021年2月92例支气管哮喘患者作为研究组,根据病情严重程度分为重度组(n=17)、中度组(n=30)及轻度组(n=45),根据胸部高分辨率CT诊断结果将研究组分为气道重塑组(n=34)及非重塑组(n=58),另取同期60例健康体检者作为对照组,检测并比较各组血清miRNA-19、miRNA-146、miRNA-155,采用Perason相关性系数分析血清miRNA-19、miRNA-146、miRNA-155与病情严重程度、气道重塑的相关性。结果研究组血清miRNA-19、miRNA-146水平高于对照组,miRNA-155水平低于对照组(P<0.05);重度组血清miRNA-19、miRNA-146水平均高于中度组、轻度组,中度组血清miRNA-19、miRNA-146水平均高于轻度组(P<0.05);重度组血清miRNA-155水平低于中度组、轻度组,中度组血清miRNA-155水平低于轻度组(P<0.05);重塑组血清miRNA-19、miRNA-146水平均高于非重塑组,miRNA-155水平低于非重塑组(P<0.05);Perason相关性分析显示,血清miRNA-19、miRNA-146与病情严重程度、气道重塑呈正相关,血清miRNA-155与病情严重程度、气道重塑呈负相关(P<0.05)。结论支气管哮喘患者血清miRNA-19、miRNA-146呈高表达、miRNA-155呈低表达,三者均与病情严重程度及气道重塑情况存在相关性。 展开更多
关键词 支气管哮喘 微小rna-19 微小rna-146 微小rna-155 病情严重程度
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微小RNA-19a对肝细胞LO2脂肪分解代谢的影响
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作者 田晓玲 林凤平 +1 位作者 李伟民 刘秀芬 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期481-484,共4页
目的:观察微小RNA-19a(microRNA-19a,miR-19a)对肝细胞LO2脂肪分解代谢的影响,并初步探索可能机制。方法:在肝细胞LO2中转染miR-19a模拟物(mimics)或miR-19a抑制物(inhibitor),用实时荧光定量PCR检测miR-19a的水平变化,利用生物信息学... 目的:观察微小RNA-19a(microRNA-19a,miR-19a)对肝细胞LO2脂肪分解代谢的影响,并初步探索可能机制。方法:在肝细胞LO2中转染miR-19a模拟物(mimics)或miR-19a抑制物(inhibitor),用实时荧光定量PCR检测miR-19a的水平变化,利用生物信息学网站查找miR-19a的靶点,进而用双萤光素酶报告基因实验验证miR-19a对过氧化物酶体增殖物激活受体α(peroxisome proliferator-activated receptorα,PPARα)3’UTR活性的影响,通过Western blotting法检测PPARα及其下游脂肪分解代谢关键限速酶酰基辅酶A脱氢酶(acyl-coenzyme a dehydrogenase,ACADM)和肉毒碱棕榈酰基转移酶1A(carnitine palmitoyltransferase 1A,CPT1A)蛋白水平的变化,通过β-羟丁酸(beta-hydroxybutyric acid,β-OHB)试剂盒检测肝细胞LO2内酮体的生成能力。结果:转染miR-19a mimics可显著升高LO2细胞中的miR-19a水平(P<0.05),而转染miR-19a inhibitor可明显抑制LO2细胞中的miR-19a水平(P<0.05);生物信息学分析提示PPARα可能为miR-19a的潜在靶点,双萤光素酶报告基因实验证实了miR-19a mimics可使PPARα的3’UTR活性明显降低,miR-19a inhibitor可使PPARα的3’UTR活性显著升高,同时伴随PPARα及其下游基因ACADM和CPT1A的蛋白水平变化。此外,miR-19a mimics明显降低肝细胞LO2中β-OHB的含量(P<0.05),miR-19a inhibitor可明显上调肝细胞LO2中β-OHB的含量(P<0.05)。结论:miR-19a可通过调控PPARα及其下游关键限速酶的表达,调节肝细胞的脂肪分解代谢能力。 展开更多
关键词 微小rna-19a 过氧化物酶体增殖物激活受体Α 脂肪分解代谢
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