胃癌根治性切除患者术前血清外泌体miR-193a和miR-208b水平表达及其对预后预测价值研究

目的探究胃癌(gastric cancer,GC)患者在根治性手术前血清外泌体微小核糖核酸(micro RNA,miR)-193a和微小核糖核酸(microRNA,miR)-208b水平表达及其预后预测价值。方法以新疆医科大学第一附属医院2018年3月~2020年3月收治的132例GC根治性切除术前患者为GC组,同期132例体检健康者为对照组。收集对比患者临床病理资料。血清外泌体miR-193a和miR-208b相对表达水平的检测采用实时荧光定量PCR(quantitative realtime polymerase chain reaction,qRT-PCR)法,Pearson法分析miR-193a和miR-208b的相关性。GC患者术前血清外泌体miR-193a,miR-208b表达与术后患者预后相关性采用Kaplan-Meier法分析;单因素及多因素COX回归分析患者预后的影响因素。结果GC组外泌体miR-208b表达水平较对照组明显升高(1.77±0.14 vs 1.02±0.01),miR-193a表达水平明显降低(0.52±0.06 vs 1.01±0.01),差异具有统计学意义(t=92.551,61.392,均P<0.05)。GC患者术前miR-193a与miR-208b的表达水平呈负相关(r=-0.409,P<0.05)。患者中TNM分期为I+II期、无淋巴结转移、无远处转移的miR-193a低表达比例和miR-208b高表达比例明显低于TNM分期为III+IV、有淋巴结转移、有远处转移患者,差异具有统计学意义(χ^(2)=5.008,4.397;7.142,4.688;4.407,5.189,均P<0.05)。miR-193a低表达患者三年累积生存率(30.43%)显著低于高表达(60.32%)患者(χ^(2)=17.861,P<0.001),miR-208b高表达患者三年累积生存率(27.14%)低于低表达(64.52%)患者(χ^(2)=16.340,P<0.001)。血清外泌体miR-193a(HR=0.493,95%CI:0.323~0.753)和miR-208b水平(HR=2.697,95%CI:1.382~5.262)是患者预后的独立影响因素(P<0.05)。结论术前血清外泌体miR-193a水平降低,miR-208b水平升高,两者表达水平与GC根治性切除术患者的预后有关。

microRNA-208在急性心肌梗死病人血清中的变化

目的探讨血清中microRNA-208(miRNA-208)成为急性心肌梗死(AMI)心肌损伤标志物的可能性和意义。方法收集因急性胸痛发作入院的AMI患者60例和非AMI患者60例,分别在入院即刻和入院后2、4、8、12、24h,2、3、5和7天10个时间点采集血液,利用实时荧光定量PCR法和酶联荧光分析法等方法对血清中miRNA-208、肌红蛋白(Mb)和肌钙蛋白I(cTnI)进行测定,对结果进行统计分析;并对miRNA-208、Mb和cTnI在不同时点的敏感度和特异性进行比较。结果 AMI患者入院即刻血清中miRNA-208表达显著高于对照组(P<0.05),入院后miRNA-208逐渐升高,在入院后12h左右达到高峰;和Mb和cTnI相比,miRNA-208既具有Mb的高度敏感度,又具有cTnI的高度特异性。结论 miRNA-208表达升高可以反映AMI心肌损伤,可能是AMI早期诊断和治疗评估的一种新的检测标志物。

下调miR-208a通过靶向SFRP1介导Wnt信号通路对结直肠癌细胞5-FU耐药的改善作用

目的:探讨下调微小RNA-208a(miR-208a)对结直肠癌细胞5-氟尿嘧啶(5-FU)耐药的影响,阐明其相关分子机制。方法:采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测结直肠癌5-FU耐药细胞株HT-29/5-FU及其亲本HT-29细胞中miR-208a和分泌型卷曲相关蛋白1(SFRP1)mRNA表达水平。以HT-29/5-FU细胞为研究对象,将miR-208a抑制物(miR-208a inhibitor)质粒及其阴性对照质粒(inbibitor-NC)和SFRP1小干扰质粒(si-SFRP1)及其阴性对照质粒(si-NC)分别或同时转染至HT-29/5-FU细胞中,联合5-FU处理,将细胞分为空白组、inhibitor-NC组、miR-208a inhibitor组、miR-208a inhibitor+si-NC组和miR-208a inhibitor+si-SFRP1组。MTT法检测各组细胞增殖活性并计算耐药指数,AnnexinⅤ-FITC/PI双染法结合流式细胞术检测不同浓度5-FU作用后各组细胞凋亡率,Western blotting法检测各组细胞中SFRP1、β-连环蛋白(β-catenin)、P-糖蛋白(P-gp)和ATP结合盒B亚家族成员1转运蛋白(ABCB1)蛋白表达水平。双荧光素酶报告基因实验验证miR-208a与SFRP1的靶向关系。结果:与HT-29细胞比较,HT-29/5-FU细胞中miR-208a表达水平升高(P<0.05),SFRP1 mRNA表达水平降低(P<0.05)。与inhibitor-NC组比较,miR-208a inhibitor组细胞增殖活性降低(P<0.05),耐药指数降低,细胞凋亡率升高(P<0.05),细胞中β-catenin、P-gp和ABCB1蛋白表达水平降低(P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验提示SFRP1是miR-208a靶基因,且miR-208a可负向调控SFRP1的表达。与miR-208a inhibitor+si-NC组比较,miR-208a inhibitor+si-SFRP1组细胞增殖活性升高(P<0.05),耐药指数升高,细胞凋亡率降低(P<0.05),细胞中β-catenin、P-gp和ABCB1蛋白表达水平升高(P<0.05)。结论:下调miR-208a可通过靶向上调SFRP1表达抑制Wnt信号通路的转导,进而改善HT-29/5-FU细胞对5-FU的耐药。

miRNA-208a在急性ST段抬高型心肌梗死缺血-再灌注前后动态变化的意义

目的探讨miRNA-208a在急性ST段抬高型心肌梗死(STEMI)患者行急诊经皮冠状动脉介入术(PCI)后缺血/再灌注前后的动态变化意义。方法选择2018年1月-2020年7月本院收治STEMI行PCI患者96例为观察组,并于同期体检中心招募的健康志愿者96名为对照组,根据观察组患者术后90 min后心电图ST段是否回落程度分为完全回落组(ST段回落≥70%,53例),和不完全回落组(ST段回落<70%,43例)。重复测量方差分析检测入院时(T1)、术后90 min(T2)、术后4 h(T3)、术后8 h(T4)血清miRNA-208a与CK-MB、cTnT、hs-CRP、NT-proBNP水平及ST段回落幅度、LVEF%、心肌梗死面积变化;Person相关性分析T2时血清miRNA-208a水平与CK-MB、cTnT、hs-CRP、NT-proBNP水平及ST段回落幅度、LVEF%、心肌梗死面积大小相关性。结果观察组血清中miRNA-208a相对表达量高于对照组(P<0.05);完全回落组及部完全回落组患者血清miRNA-208a、hs-CRP及NT-pro BNP水平T1-T2时升高,T3-T4时回落,在T1-T4时CK-MB、cTnT水平、ST段回落幅度及LVEF%升高(P<0.05),心肌梗死面积降低(P<0.05);与不完全回落组比较,在T2-T4时间点,完全回落组血清miRNA-208a、CK-MB、cTnT、hs-CRP、NT-proBNP水平及心肌梗死面积降低,ST段回落幅度及LVEF%升高。Pearson相关性分析结果显示,观察组T2时血清miRNA-208a与CK-MB、cTnT、hs-CRP、NT-pro BNP水平、心肌梗死面积均呈正相关(P<0.05),与ST段回落幅度及LVEF呈负相关(P<0.05)。结论miRNA-208a在STEMI患者血清中呈高表达,在行PCI冠状动脉缺血-再灌后峰值出现较早,且对于ST段回落具有一定的临床参考价值。

N,N'-二(氟偕二硝基乙基)-3,4-二氨基呋咱(LLM-208)的晶体结构及热性质

以无水甲醇为溶剂,在10~15℃下采用溶剂挥发法培养并首次获得了LLM-208的单晶,运用Hirshfeld表面理论方法研究了晶体内分子间的相互作用,利用Kissinger法、Flynn-Wall-Ozawa法和Starink法计算LLM-208的热分解动力学参数。结果表明:LLM-208在130 K的晶体密度为1.895 g·cm^(-3),298 K下其晶体密度为1.848 g·cm^(-3),属于单斜晶系,C2空间群,晶胞参数为a=19.225(5),b=5.5779(15),c=6.4176(17),β=108.551(5)°,V=909.4(6)~3,Z=2,μ=0.192 mm^(-1),F(000)=376。Hirshfeld表面分析LLM-208晶体内占主导的近相互作用分别为O…H、H…O作用(35.0%),O…O作用(22.3%),以及F…O、C…F、F…F作用(12.5%)。LLM-208在Kissinger法、Flynn-Wall-Ozawa法和Starink法下的活化能分别为112.28,114.49,112.49 k J·mol^(-1),Kissinger法计算得指前因子为10^(21.30)s^(-1)。

血清miR-208a、miR-17-5p表达与急性心肌梗死患者左心室重构和预后的关系

目的 分析血清微小RNA-208a(miR-208a)、miR-17-5p表达与急性心肌梗死(AMI)患者左心室重构(LVR)和预后的关系。方法 选取2021年1—8月首都医科大学附属北京安贞医院心脏内科冠心病中心收治AMI患者133例,根据随访6个月时左心室收缩末期容积(LVESV)分为LVR组51例和非LVR组82例,并根据6个月时是否发生主要不良心血管事件分为预后不良组44例和预后良好组89例。采用qPCR检测患者血清miR-208a、miR-17-5p的表达水平,超声心动图检查左心室舒张末期内径(LVEDD)、舒张末期室间隔厚度(IVST)、左心室后壁厚度(LVPWT)、左心室质量指数(LVMI)、LVESV。Spearman相关性分析LVR组患者血清miR-208a、miR-17-5p表达与确诊时LVESV的相关性,多因素Logistic回归分析AMI患者预后不良的影响因素,受试者工作特征曲线(ROC)分析血清miR-208a、miR-17-5p表达对AMI患者预后不良的预测价值。结果 LVR组血清miR-208a、miR-17-5p表达水平高于非LVR组(t/Z=7.432、10.964,P均<0.001);LVR组LVEDD、IVST、LVPWT、LVMI、LVESV高于非LVR组(t/Z=11.774、8.611、6.416、9.676、5.336,P均<0.001)。预后不良组血清miR-208a、miR-17-5p表达高于预后良好组(t/Z=5.270、5.376,P均<0.001)。Spearman相关性分析显示,LVR组血清miR-208a、miR-17-5p表达与确诊时LVESV呈正相关(r_(s)=0.868、0.735,P均<0.001)。多因素Logistic回归分析显示,年龄大、Killip分级≥Ⅲ级和血清miR-208a、miR-17-5p升高为AMI患者预后不良的独立危险因素[OR(95%CI)=1.058(1.005~1.114)、4.984(1.564~15.880)、1.051(1.007~1.097)、1.098(1.027~1.175)],LVEF升高为其独立保护因素[OR(95%CI)=0.932(0.892~0.975)]。ROC曲线分析显示,血清miR-208a、miR-17-5p及二者联合预测AMI患者预后不良的曲线下面积分别为0.781、0.795、0.866,二者联合预测的价值高于单项指标(Z/P=2.102/0.025、2.511/0.014)。结论 AMI患者血清miR-208a、miR-17-5p表达升高与LVR和预后不良相关,可作为AMI患者预后不良的辅助预测指标。

AMI患者血浆miR-221-3p、miR-208b-3p表达水平与心肌损伤标志物及左心功能的关系

目的研究急性心肌梗死(AMI)患者血浆微小MicroRNA(miR)-221-3p、miR-208b-3p表达与心肌损伤标志物及左心功能的关系。方法132例AMI患者为AMI组,另选取48例健康查体人群作为对照组。采用全球急性冠状动脉事件注册(GRACE)评分对AMI患者进行危险分层,采用实时荧光定量PCR法检测各组血浆miR-221-3p、miR-208b-3p表达水平,比较不同危险分层的AMI患者血浆miR-221-3p、miR-208b-3p表达水平,分析二者与心肌损伤标志物肌钙蛋白I(cTnI)、磷酸激酶同工酶(CK-MB)、内皮素1(ET-1)及左心功能参数左心室射血分数(LVEF)、左心室舒张末期容积(LVEDV)及左心室收缩末期容积(LVESV)的关系。结果与对照组比较,AMI组患者的血浆miR-208b-3p、miR-221-3p表达明显较高(P<0.05)。不同GRACE危险分层的AMI患者血浆miR-221-3p、miR-208b-3p表达水平差异有统计学意义(P<0.05)。高危组患者血浆miR-208b-3p、miR-221-3p明显高于中危及低危组(P<0.05)。AMI组患者血浆miR-221-3p、miR-208b-3p与cTnI呈正相关(r值分别为0.480、0.518,P<0.05),与LVEF呈负相关(r值分别为-0.535、-0.503,P<0.05),而与CK-MB、ET-1、LVEDV、LVESV无相关性(P>0.05)。结论AMI患者血浆miR-221-3p、miR-208b-3p表达水平升高,并且与心肌损伤严重程度及左心功能的有关,有可能成为新的AMI标志物。

TM208-羟丙基-β-环糊精包合物的制备及其在大鼠体内的药动学研究

目的:4-甲基哌嗪-1-二硫代甲酸-(3-氰基-3,3-二苯基)丙酯盐酸盐(TM208)是我院合成的新抗肿瘤化合物,极难溶于水。本实验的研究目的是研制TM208-羟丙基-β-环糊精(HP-β-CD)包合物,并研究其在大鼠体内的药动学。方法:以共沉淀法制备TM208-HP-β-CD包合物,比较原药与包合物的紫外吸收光谱,X-射线衍射图谱,差示扫描量热图谱的变化;两组SD大鼠分别单剂量口服TM208混悬剂和TM208-HP-β-CD包合物,用HPLC法测定血药浓度;应用3P87药动学程序计算药动学参数。结果:TM208与TM208 HP-β-CD包合物紫外光谱一致; TM208经包合后晶体衍射峰消失;差示扫描量热法测定结果显示形成包合物后一种新物相峰出现;TM208在形成包合物后溶解度增大了700倍;大鼠单剂量给予TM208混悬剂和TM208-HP-β-CD包合物后,TM208的主要药动学参数C_(max)分别为(1．31±0．22)和(2．84±1．23)μg·mL^(-1),T_(max)分别为(10．2±4．18)和(3．31±0．541)h。AUC_(0～4(?)h)分别为(42．5±11．5)和(67．7±20．I)μg·mL^(-1)·h。统计分析结果显示,包合后TM208达峰时间显著缩短,峰浓度显著提高,相对生物利用度为159．3％。结论:TM208制备成HP-β-CD包合物后,在水中溶解度极显著增加,体内吸收速度与程度显著提高。

AMI患者血清miR-208、VEGF-B与左室重构及炎症反应的关系

目的探讨急性心肌梗死(AMI)患者血清微小RNA-208(miR-208)、血管内皮生长因子-B(VEGF-B)的变化与患者左室重构及炎症反应的关系。方法选取遂宁市中心医院2017年1月至2018年8月收治的90例AMI患者(AMI组)、健康对象90例作为对照组,检测对比两组的血清miR-208、VEGF-B、白细胞介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、可溶性细胞间黏附分子(sICAM-1)水平,采用超声心动图检测左室舒张末期容积(LVEDV)、左室舒张末期内经(LVEDD)、左室射血分数(LVEF)。结果 AMI组患者的血清miR-208水平显著的高于对照组,差异具有统计学意义(t=16.445,P <0.05),AMI组患者的血清VEGF-B水平显著的低于对照组,差异具有统计学意义(t=-11.625,P <0.05);AMI组患者的血清IL-10、TNF-α、sICAM-1水平显著的高于对照组,差异具有统计学意义(t=19.236、17.910、36.624,P <0.05);治疗12个月后,AMI组患者的LVEDV、LVEDD均显著的高于入院时(t=-7.697、-9.602,P <0.05),治疗12个月后的LVEF与入院时比较差异无统计学意义(t=1.911,P> 0.05);AMI患者的血清miR-208水平与LVEDV、LVEDD均呈显著的正相关关系(r=0.594、0.621,P <0.05),AMI患者的血清VEGF-B水平与LVEDV、LVEDD均呈显著的负相关关系(r=-0.552、-0.497,P <0.05);AMI患者的血清miR-208水平与血清IL-10、TNF-α、sICAM-1水平均呈显著的正相关关系(r=0.591、0.642、0.618,P <0.05),AMI患者的血清VEGF-B水平与血清IL-10、TNF-α、sICAM-1水平无明显的相关关系(r=-0.095、-0.117、0.153,P> 0.05)。结论 AMI患者早期出现血清miR-208表达升高、VEGF-B水平降低,可能与AMI患者炎症反应程度、远期心室重构形成有关。

微小核糖核酸-208与心血管疾病关系研究进展

微小核糖核酸是一类长21~25个核苷酸的高保守性的非编码小分子RNA,主要通过与靶基因真核mRNA的3’非翻译区结合而调控基因的表达。近年来研究发现循环血微小核糖核酸在心血管疾病中的含量会发生变化,现就心肌特异性的微小核糖核酸-208在心血管疾病的研究进展做一综述。

急性心肌梗死患者miR-208a、hs-cTnⅠ和MCP-1表达及临床意义

目的探讨微小核糖核酸RNA-208a(miR-208a)、超敏肌钙蛋白Ⅰ(hs-cTnⅠ)和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)在急性心肌梗死(AMI)患者中的表达及临床意义。方法选取2017年3月~2019年2月在台州市第一人民医院住院的96例AMI患者为AMI组,另选取同期来院体检的健康者45例为对照组,检测其外周血中的miR-208a、hs-cTnI和MCP-1,miR-208a、hs-cTnⅠ和MCP-1对AMI的诊断效能采用受试者工作特征(ROC)曲线进行评价。结果 AMI组miR-208a、hs-cTnⅠ和MCP-1表达水平显著高于对照组(P<0.05);AMI患者经有效治疗后,miR-208a、hs-cTnⅠ和MCP-1表达水平显著降低(P<0.05);miR-208a的表达水平与高血压、高血脂有关,hs-cTnI的表达水平与糖尿病、高血压有关,MCP-1的表达水平与糖尿病有关(P<0.05);miR-208a、hs-cTnⅠ和MCP-1对AMI的曲线下面积(AUC)分别为0.912、0.904和0.831。结论 miR-208a、hs-cTnI和MCP-1在AMI组患者显著升高,其动态变化对AMI的诊断有重要的临床意义。

长链非编码RNA COL11A1-208对口腔鳞癌细胞增殖及侵袭的影响

目的观察长链非编码RNA(lncRNA)COL11A1-208在口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞中的表达和定位,及其对OSCC细胞增殖和侵袭的影响。方法采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测COL11A1-208在CAL27、HN4、HN6等OSCC细胞系中的表达情况;通过RNA核质分离和荧光原位杂交(FISH)实验检测COL11A1-208在OSCC细胞中的定位。采用CAL27、HN4细胞建立COL11A1-208敲减组(SS-COL11A1-208组)和敲减对照组(SS-NC组);采用HN4、HN6细胞建立COL11A1-208过表达组(LV-COL11A1-208组)和过表达对照组(LV-NC组)。采用CCK-8实验、平板克隆形成实验以及Transwell实验检测COL11A1-208表达改变对各组细胞增殖活性、克隆形成能力、迁移和侵袭能力的影响。qPCR和Western blotting检测COL11A1-208表达改变对COL11A1基因及上皮-间充质转化相关蛋白(上皮钙黏素、波形蛋白)表达的影响。采用裸鼠皮下移植瘤模型观察COL11A1-208表达对OSCC细胞体内增殖能力的影响。结果qPCR结果显示,COL11A1-208在7个OSCC细胞系的相对表达量均明显高于正常对照细胞(P<0.05)。核质分离结果显示,CAL27、HN4、HN6细胞内COL11A1-208的胞核占比明显高于胞质占比(P<0.01);FISH实验结果显示,COL11A1-208主要定位于细胞核。与SS-NC组比较,SS-COL11A1-208组COL11A1-208相对表达量明显降低(CAL27:0.225±0.030 vs.1.000±0.000;HN4:0.393±0.028 vs.1.000±0.000;P<0.01);细胞增殖活性减弱(P<0.05),细胞克隆形成能力降低(P<0.0001),细胞穿膜数减少(P<0.05)。与LV-NC组比较,LV-COL11A1-208组COL11A1-208相对表达量明显升高(HN6:6524.216±3395.926 vs.1.000±0.000;HN4:3486.230±743.908 vs.1.000±0.000;P<0.05),细胞增殖活性增强(P<0.05),细胞克隆形成能力增高(P<0.01),细胞穿膜数增多(P<0.0001)。SS-COL11A1-208组COL11A1蛋白相对表达量明显低于SS-NC组(P<0.05),而LV-COL11A1-208组则明显高于LV-NC组(P<0.01)。另外,与相应对照组比较,SS-COL11A1-208组上皮钙黏素表达增高(P<0.05),波形蛋白表达降低(P<0.05);LV-COL11A1-208组上皮钙黏素表达降低(P<0.05),波形蛋白表达增高(P<0.01)。裸鼠皮下移植瘤模型实验显示,与相应对照组比较,ASO-COL11A1-208组皮下移植瘤重量和体积均减小(P<0.05),LV-COL11A1-208组皮下移植瘤重量和体积均增大(P<0.05)。结论COL11A1-208可促进OSCC细胞的增殖和侵袭能力,在OSCC发生与进展中发挥重要作用。

长链非编码RNA COL11A1-208在口腔鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的·研究长链非编码RNA(long noncoding RNA,lncRNA)COL11A1-208在口腔鳞状细胞癌(简称口腔鳞癌)中的表达水平,并评价其在患者预后预测和诊断中的潜在价值。方法·采用lncRNA基因表达谱芯片检测6对口腔鳞癌组织及对应癌旁正常组织中差异表达的lncRNA;采用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)检测74对口腔鳞癌组织及癌旁正常组织中COL11A1-208的表达,并比较不同临床特征患者COL11A1-208表达水平的差异。采用受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线评价癌组织COL11A1-208水平在口腔鳞癌诊断中的潜能。Kaplan-Meier生存分析评估COL11A1-208表达水平对口腔鳞癌患者3年总体生存率的影响。结果·qPCR检测结果显示,COL11A1-208在74例口腔鳞癌组织中的表达显著高于癌旁正常组织(P=0.000),与lncRNA基因芯片的结果一致。结合患者临床特征分析发现,TNM分期较晚(Ⅲ~Ⅳ)的口腔鳞癌组织的COL11A1-208表达水平显著高于分期较早(Ⅰ~Ⅱ)的癌组织(P=0.001);组织COL11A1-208水平用于诊断口腔鳞癌的ROC曲线下面积为0.702(95%CI 0.617~0.788,P=0.000),灵敏度和特异度分别为87.8%和54.1%;高表达COL11A1-208患者3年生存率显著低于低表达者(P=0.002)。结论·COL11A1-208在口腔鳞癌组织内高表达,在TNM分期较晚的癌组织表达水平更高;COL11A1-208可能在口腔鳞癌预后预测及诊断中有潜在应用价值。

冠心病患者血清同型半胱氨酸、miR-1、miR-126和miR-208的相关性分析

目的结合冠状动脉狭窄程度,探讨冠心病患者血清同型半胱氨酸(Hcy)与微小RNA(miR-1、miR-126及miR-208)之间的相互关系。方法选取行冠脉造影术的患者共102名,根据造影结果分为对照组和观察组,检测Hcy、miR-1、miR-126及miR-208水平,同时对冠脉造影结果进行评价并计算Gensini积分,应用相关及线性回归分析Hcy、miRNA(miR-1、miR-126、miR-208)以及Gensini积分的相互关系。结果观察组血清Hcy、miRNA(miR-1、miR-126、miR-208)水平均高于对照组,血清Hcy、miR-1和miR-126水平分别与Gensini积分呈正相关[相关系数(r)分别为0.575、0.649、0.499,P均<0.01],偏相关分析校正后它们之间仍然呈正相关(r’分别为0.693、0.621、0.532,P均<0.05);而血清Hcy与miR-1、miR-126水平亦呈正相关(r分别为0.513、0.56,P均<0.01),偏相关分析校正后排除年龄,体重指数,高血压和高脂血症病史的影响,其间仍然呈正相关(r’分别为0.599、0.614,P均<0.05),而与miR-208无显著相关性。结论血清Hcy、miRNA(miR-1、miR-126、miR-208)均是评价冠心病的独立危险因素,其水平均随着冠脉病变严重程度的加重而增加。

车古208-斜1井四开小井眼钻井液技术

车古208-斜1井位于济阳坳陷埕南断裂带车古20潜山车古208区块,设计井深4 818.58 m,实钻井深4 888.00 m.四开井眼尺寸小,容易井漏.斜井段容易形成岩屑床,井眼净化难度大,容易造成砂桥卡钻.施工中钻具紧贴井壁运行,井壁稳定及润滑防卡难度大.通过使用低固相钻井液体系,施工中井壁稳定,井下安全.车古208-斜1井四开小井眼的钻探成功表明低固相钻井液体系适应本区块地层特点,有助于本区块的进一步勘探开发.

老年急性心肌梗死患者血清微小核糖核酸-133a、微小核糖核酸-208a表达水平与冠状动脉病变程度相关性研究

目的探讨老年急性心肌梗死(AMI)患者血清微小核糖核酸(miR)-133a、miR-208a表达水平,分析其对冠状动脉病变程度的影响。方法选取自2017年2月至2019年2月收治的120例AMI患者为AMI组,患者均存在不同程度的冠状动脉病变;选取同期收治的80例稳定型心绞痛(SAP)患者为SAP组;选取同期体检的72例健康者为健康组。采用实时荧光定量法检测3组血清miR-133a、miR-208a表达水平,并进行比较。对AMI患者行冠状动脉造影,根据Gensini评分明确AMI患者冠状动脉病变程度,并分为轻度、中度、重度,比较不同冠状动脉病变程度的AMI患者血清miR-133a、miR-208a表达水平,采用Pearson线性相关分析对AMI患者血清miR-133a、miR-208a表达水平与冠状动脉病变程度的相关性进行分析。绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-133a、miR-208a对冠状动脉病变加重的评估价值。采用Logistic回归分析对AMI患者冠脉病变加重的危险因素进行分析。结果AMI组、SAP组的血清miR-133a、miR-208a相对表达量高于健康组,且AMI组高于SAP组,差异均有统计学意义(P<0.05)。重度、中度病变患者血清miR-133a、miR-208a相对表达量均高于轻度病变患者,且重度病变患者高于中度病变患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。经Pearson线性相关分析显示,血清miR-133a、miR-208a与AMI冠状动脉病变程度呈正相关(r=0.729、r=0.680,P<0.05)。以中度、重度患者为冠状动脉病变加重,ROC曲线显示,血清miR-133a、miR-208a及二者联合评估冠脉病变加重的ROC曲线下面积分别为0.751、0.774、0.854。Logistic回归分析结果显示,糖尿病、高血压以及血清miR-133a、miR-208a表达水平增高是AMI冠脉病变加重的危险因素(P<0.05)。结论血清miR-133a、miR-208a在AMI患者中表达明显增高,且与冠状动脉病变密切相关,二者联合检测对冠状动脉病变程度具有一定预测价值。

急性ST段抬高型心肌梗死患者血浆微小核糖核酸-208a水平对并发急性心力衰竭的预测价值

目的:探讨血清微小核糖核酸-208a(miR-208a)表达水平对急性ST段抬高型心肌梗死(STEMI)患者并发急性心力衰竭的预测关系。方法:连续性收集2018年1月至2019年6月,就诊于我科的152例急性STEMI患者纳入病例组,并随机选择同期在我院行健康体检的志愿者60例为对照组。根据发病48 h内是否发生急性心力衰竭(AHF)将病例组分为AHF亚组和非AHF亚组。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测血浆miR-208a的相对表达水平。结果:病例组血浆miR-208a相对表达水平显著高于对照组(Z=10.919,P=0.000)。AHF亚组血浆miR-208a相对表达水平显著高于非AHF亚组(Z=9.573,P=0.000)。Pearson相关性分析结果显示,病例组患者血浆miR-208a相对表达水平与BNP、hsCRP和cTnI均呈正相关关系(r=0.612,P=0.000;r=0.447,P=0.000;r=0.378,P=0.000)。二分类Logistic回归分析结果显示血浆miR-208a相对表达水平是急性STEMI患者并发AHF的危险因素(OR=2.118,95%CI 1.127~3.982,P=0.007)。血浆miR-208a预测AHF的AUC为0.896(0.844,0.948),cut-off值为32.00,对应的敏感性和特异性分别为88.4%和83.3%。结论:急性STEMI患者血浆miR-208a表达水平显著升高,且可能是并发AHF的危险因素。

miR-208a在大鼠心肌缺血再灌注损伤及缺血后处理中的表达及其作用

目的:探讨mi R-208a及α-肌球蛋白重链(α-myosin heavy chain,a-MHC)、β-肌球蛋白重链(β-myosin heavy chain,β-MHC)在大鼠心肌缺血再灌注损伤(ischemia reperfusion injury,IR)及缺血后处理(ischemic postconditioning,IPO)中的表达变化及其作用。方法:取SD大鼠,使用改良垫扎球囊法建立IR模型,随机分为3组(每组6只),Sham组、IR组、IPO组。检测各组血流动力学指标;real-time PCR检测mi R-208a、α-MHC、β-MHC基因表达;Western blot检测α-MHC、β-MHC蛋白含量。结果:与IR组相比,IPO能明显降低左室舒张末期容积(left ventricular end diastolic volume,LVEDV)和左室收缩末期容积(left ventricular end systolic volume,LVESV),增加左室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF)和左室短轴缩短率(left ventricular fraction shorting,LVFS),改善心功能。mi R-208a表达水平在IR组明显增加,IPO组明显降低。β-MHC表达在IR组明显上调,IPO组明显下调,且基因和蛋白表达水平一致。α-MHC基因和蛋白表达水平在3组无明显差异。结论:mi R-208a和β-MHC在缺血再灌注组明显增加,缺血后处理能使mi R-208a和β-MHC表达下降,并在一定程度上改善心功能。

心肌梗死患者血清miR-208b、miR-302b表达水平及预后研究

目的探讨心肌梗死患者血清微小核糖核酸(miR)-208b、miR-302b表达水平,分析其与患者预后的相关性。方法选取自2017年11月至2019年11月收治的132例心肌梗死患者为研究对象。比较不同Killip分级、梗死部位患者血清miR-208b、miR-302b表达水平,分析血清miR-208b、miR-302b表达水平与心肌梗死患者临床特征的相关性。根据患者30 d预后情况将患者分为预后良好组(n=75)与预后不良组(n=57)。比较不同预后患者血清miR-208b、miR-302b表达水平。绘制受试者工作特征曲线,分析血清miR-208b、miR-302b表达水平预测心肌梗死患者30 d预后价值。以血清miR-208b、miR-302b表达量均数将患者划分为高表达者与低表达者,通过Kaplan-Meier曲线进行高低危生存分析。结果不同Killip分级患者血清miR-208b、miR-302b表达水平比较,差异有统计学意义(P<0.05)。不同梗死部位患者血清miR-208b、miR-302b表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。Spearman相关性分析显示,血清miR-208b、miR-302b表达水平与心肌梗死患者Killip分级呈明显正相关(r=0.498,r=0.512,P<0.05)。预后不良组患者血清miR-208b、miR-302b表达水平高于预后良好组,差异有统计学意义(P<0.05)。血清miR-208b预测心肌梗死患者30 d预后的受试者工作特征曲线下面积为0.759(95%可信区间0.677~0.829),当截断值>2.10时,敏感度为59.65%,特异度为88.00%。血清miR-302b预测心肌梗死患者30 d预后的受试者工作特征曲线下面积为0.793(95%可信区间0.714~0.859),当截断值>3.21时,敏感度为45.61%,特异度为97.33%。血清miR-208b、miR-302b联合预测心肌梗死患者30 d预后的受试者工作特征曲线下面积为0.864(95%可信区间0.793~0.917),敏感度为78.95%,特异度为80.00%。miR-208b、miR-302b高表达患者与低表达患者生存曲线比较,差异有统计学意义(χ^2=2.203,χ^2=3.405,P<0.01)。结论不同预后患者血清miR-208b、miR-302b水平存在明显差异,二者联合应用在预测心肌梗死患者30 d预后中具有一定价值。

LncRNA COL11A1-208在胃癌中的表达及对细胞增殖、侵袭和迁移的影响

目的探究长链非编码RNA(LncRNA)COL11A1-208在胃癌(GC)中的表达及对细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法收集49例GC患者的癌组织及癌旁组织标本,体外培养人正常胃黏膜上皮细胞(GES-1)及人GC细胞(AGS、MGC-803、MKN-45、BGC-823、SGC-7901),qRT-PCR检测癌旁组织、癌组织及各GC细胞中COL11A1-208表达情况。对SGC-7901细胞进行转染并将其分为Ctrl组(未进行转染)、pcDNA3.1组(转染pcDNA3.1载体)、pcDNA3.1-COL11A1-208组(转染pcDNA3.1-COL11A1-208)、si-NC组(转染si-NC)、si-COL11A1-208组(转染si-COL11A1-208),qRT-PCR验证转染效果;CCK-8实验、克隆形成实验检测各组SGC-7901细胞增殖;Transwell实验检测各组SGC-7901细胞侵袭;划痕愈合实验检测各组SGC-7901细胞迁移;Western Blot检测各组SGC-7901细胞增殖、侵袭和迁移相关蛋白[Ki67、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、基质金属蛋白酶9(MMP9)、神经型钙黏附蛋白(N-cadherin)]表达。结果与癌旁组织比较,GC癌组织中COL11A1-208表达增加(P<0.05);与GES-1细胞比较,AGS细胞、MGC-803细胞、MKN-45细胞、BGC-823细胞、SGC-7901细胞中COL11A1-208表达均增加(P<0.05),且SGC-7901细胞增加更多;与Ctrl组、pcDNA3.1组、si-NC组比较,pcDNA3.1-COL11A1-208组SGC-7901细胞中COL11A1-208表达增加(P<0.05),SGC-7901细胞增殖率、克隆数、侵袭数、划痕面积愈合率及Ki67、Cyclin D1、MMP9、N-cadherin表达均增加(P<0.05),si-COL11A1-208组SGC-7901细胞中COL11A1-208表达减少(P<0.05),SGC-7901细胞增殖率、克隆数、侵袭数、划痕面积愈合率及Ki67、Cyclin D1、MMP9、N-cadherin表达均减少(P<0.05)。结论COL11A1-208在GC中高表达,其可促进SGC-7901细胞增殖、侵袭和迁移,COL11A1-208可能为GC一个潜在的生物标志物。