LncRNA MEG3调控microRNA-181b-5p/TIMP3对前列腺癌细胞侵袭、迁移的影响

目的探究长链非编码RNA母系表达基因3(lncRNA MEG3)调控微小RNA-181b-5p(microRNA-1816-5P,简称miR-181b-5p)/组织金属蛋白酶抑制因子3(TIMP3)对前列腺癌细胞侵袭、迁移的影响。方法收集2019年12月—2021年12月本院所收治的20例前列腺癌患者前列腺癌组织及其对应癌旁组织;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测组织MEG3、miR-181b-5p表达;将前列腺癌细胞(PC3细胞)随机分为对照组(未处理)、pcDNA3.1-NC组(转染pcDNA3.1-NC)、pcDNA3.1-MEG3组(转染pcDNA3.1-MEG)、pcDNA3.1-MEG3+miR-NC组(pcDNA3.1-MEG3与miR-NC共转染)、pcDNA3.1-MEG3+miR-181b-5p mimic组(pcDNA3.1-MEG3与miR-181b-5p mimic共转染);qRT-PCR检测细胞MEG3、miR-181b-5p表达;MTT实验、Transwell实验、划痕实验分别检测PC3细胞活力、侵袭及迁移能力;Western blot检测PC3细胞TIMP3、基质金属蛋白酶(MMP)9、MMP2蛋白表达;双荧光素酶实验检测MEG3、miR-181b-5p、TIMP3的靶向关系。结果与癌旁组织的表达相比,MEG3在前列腺癌组织(0.37±0.05 vs.1.00±0.04)及细胞(0.31±0.06 vs.1.00±0.01)中表达显著降低(P<0.05);与对照组相比,pcDNA3.1-MEG3组miR-181b-5p表达(0.26±0.04 vs.1.00±0.02)、细胞存活率(53.60±5.22 vs.100.00±0.00)、侵袭细胞数(62.33±9.85 vs.162.34±21.30)、细胞迁移率(32.85±3.80 vs.75.22±5.96)、MMP9(0.61±0.08 vs.1.62±0.23)、MMP2(0.73±0.10 vs.1.20±0.16)表达显著降低,MEG3(2.31±0.36 vs.1.00±0.01)、TIMP3蛋白(1.32±0.24 vs.0.53±0.08)表达显著增加(P<0.05);miR-181b-5p过表达可逆转上述指标变化(P<0.05);miR-181b-5p与MEG3、TIMP3间均存在靶向关系。结论lncRNA MEG3过表达可通过抑制miR-181b-5p来促进TIMP3表达,从而抑制PC3细胞侵袭、迁移。

MicroRNA-181b及Toll样受体4在新生大鼠神经元缺氧缺血损伤中的作用机制研究

目的观察Micro RNA-181b(mi RNA-181b)及Toll样受体4(TLR4)对新生大鼠缺氧缺血脑损伤(HIBD)的影响并探讨其潜在机制。方法选取3只1~2日龄新生大鼠脑皮质神经元细胞原代培养7 d,分为对照组和HIBD组。CKK-8法测定原代培养的脑皮质神经元细胞活性,流式细胞术检测细胞凋亡情况,瞬时转染调节细胞内mi RNA-181b及TLR4表达。双荧光素酶实验检测mi RNA-181b对TLR4基因的靶向调控,SYBR Green实时荧光定量PCR观察mi RNA-181b及TLR4 m RNA表达变化。Western blot观察TLR4蛋白在不同组别神经元细胞中的表达。结果与对照组比较,mi RNA-181b在新生大鼠缺氧缺血损伤神经元细胞中表达降低(P<0.05),mi RNA-181b mimic转染后过表达mi RNA-181b能抑制缺血缺氧对新生大鼠神经元细胞的损伤(P<0.05)。双荧光素酶实验证实mi RNA-181b可与TLR4 m RNA 3'-UTR直接结合,发挥对TLR4转录后翻译的抑制作用。进一步机制研究发现,si-TLR4转染后抑制TLR4表达能增加细胞活性,而mi RNA-181b抑制剂anti-mi RNA-181b转染后降低细胞活性,anti-mi RNA-181b与si-TLR4共转染能部分逆转神经元细胞缺血缺氧下的损伤(P<0.05)。结论新生大鼠HIBD神经元细胞中mi RNA-181b能够负性调控TLR4表达发挥一定的神经保护作用。

骨肉瘤患者血浆中microRNA-181b水平的检测

目的检测骨肉瘤患者血浆中micro RNA-181b(mi R-181b)的水平变化,初步探讨其临床意义.方法选择25例骨肉瘤患者和30例健康对照,采用茎-环定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测血浆中mi R-181b的水平,并分析mi R-181b与骨肉瘤临床病理指标之间的关系.结果骨肉瘤患者血浆中mi R-181b水平(0.62±0.25)与正常对照组(0.41±0.18)相比明显升高,差异具有统计学意义(P<0.01);骨肉瘤患者血浆中mi R-181b的水平与患者性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤部位、病理类型及Enneking分期均无明显相关性(P>0.05).结论骨肉瘤患者血浆中mi R-181b水平增高,mi R-181b可能参与了骨肉瘤的发病过程.

microRNA-181b调控精神分裂症易感基因EGR3的分子机制

目的用分子生物学的方法来检测microRNA-181b对EGR3基因的靶向调控作用,为后续microRNA-181b在精神分裂症(schizophrenia)中的分子功能研究指明方向。方法运用生物信息学软件预测到精神分裂症易感基因EGR3是microRNA-181b的潜在靶基因,随后采用PCR方法扩增EGR3基因3'UTR包含与microRNA-181b种子序列相结合的片段,再将该片段连接入pmirGLO质粒载体,用双酶切和测序的方法进行鉴定,与UCSC网站上EGR3序列相同的阳性重组质粒载体记为pmirGLO-EGR3。最后将该重组体与microRNA-181b阴性对照(NC)和模拟物(mimics)分为五组转染HEK293T细胞系,进行双荧光素酶报告基因活性测定。结果双酶切和测序结果表明EGR3 3'UTR成功构建入pmirGLO载体中。荧光显微镜下观察发现细胞转染实验成功,在大约90%的细胞中可检测到荧光信号。双荧光素酶报告基因活性检测结果表明,microRNA-181bmimics与NC相比,显著性降低了报告基因的活性。结论在细胞水平证明了精神分裂症易感基因EGR3是microRNA-181b的靶基因,对后续microRNA-181b的功能研究,以及其在精神分裂症中的分子作用机制研究提供了新的线索。

microRNA-181b在胰腺癌患者血浆中的表达及意义

目的检测胰腺癌患者血浆中microRNA-181b(mi R-181b)的水平,并初步探讨其临床意义。方法收集35例胰腺癌患者和35例正常健康志愿者的血浆,采用茎-环逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测血浆中miR-181b的表达水平,并分析mi R-181b与胰腺癌病理参数之间的关系。结果胰腺癌患者血浆中miR-181b水平(0.63±0.24)与正常健康志愿组(0.32±0.12)相比明显升高,差异具有统计学意义(P<0.01);胰腺癌患者血浆中miR-181b水平在不同年龄、不同性别、有无吸烟史、不同CA199浓度之间差异均无统计学意义(P>0.05),但不同肿瘤分期、局部淋巴结转移及远处转移之间差异有统计学意义(P<0.05)。结论胰腺癌患者血浆中miR-181b水平增高,miR-181b可能参与了胰腺癌的病理过程。

MicroRNA-181b对2型糖尿病胰岛素分泌调节的作用及其机制研究

目的探讨microRNA-181b(miR-181b)能否通过靶向调控NDRG2参与2型糖尿病胰岛素分泌的调节。方法选用小鼠胰岛β细胞进行体外传代培养,构建NDRG2野生型(NDRG2^(WT)-1uc)与突变型(NDRG2^(MUT)-1uc)荧光素酶报告基因质粒并进行转染,转染结束后进行双荧光素酶报告分析。构建NDRG2过表达和敲低质粒并转染小鼠胰岛β细胞,检测NDRG2 mRNA和蛋白表达、胰岛素分泌量。未转染的小鼠胰岛β细胞培养48 h后采用实时荧光定量聚合酶链反应检测miR-181b和NDRG2 mRNA的表达。采用葡萄糖刺激的胰岛素释放试验检测5 mmol/L和20 mmol/L葡萄糖条件下的小鼠胰岛β细胞分泌的胰岛素。结果(1)荧光素酶报告基因实验检测发现,各组相对荧光强度比较,差异有统计学意义(P<0.05)。miR-181b模拟物可以明显抑制NDRG2^(WT)-luc的3’端非翻译区的表达,但对NDRG2-MUT组和Control组无明显影响;miR-181b inhibitor可以加强NDRG2^(WT)-luc的3’-端非翻译区的表达,但对NDRG2-MUT组和Control组无明显影响。(2)过表达组NDRG2 mRNA和蛋白相对表达量高于过表达对照组(P<0.05);在5 mmol/L葡萄糖条件下,过表达组与过表达对照组胰岛素分泌量比较,差异无统计学意义(P>0.05);在20 mmol/L葡萄糖条件下,过表达对照组胰岛素分泌量高于过表达组(P<0.05)。敲低组NDRG2 mRNA和蛋白相对表达量低于敲低对照组(P<0.05);在5 mmol/L葡萄糖条件下,敲低组与敲低对照组胰岛素分泌量比较,差异无统计学意义(P>0.05);在20 mmol/L葡萄糖条件下,敲低组胰岛素分泌量高于敲低对照组(P<0.05)。(3)5 mmol/L葡萄糖组与对照组的miR-181b和NDRG2 mRNA相对表达量比较,差异无统计学意义(P>0.05);20 mmol/L葡萄糖组miR-181b相对表达量高于对照组和5 mmol/L葡萄糖组(P<0.05),NDRG2 mRNA相对表达量低于对照组和5 mmol/L葡萄糖组(P<0.05)。(4)5 mmol/L葡萄糖条件下,Control组、miR-181b mimics组、miR-181b inhibitor组胰岛素分泌量比较,差异无统计学意义(P>0.05)。在20 mmol/L葡萄糖条件下,miR-181b mimics组胰岛素分泌量高于Control组(P<0.05),miR-1b1 inhibitor组胰岛素分泌量低于Control组和miR-181b mimics组(P<0.05)。结论miR-181b可以通过靶向抑制NDRG2的表达来提高胰岛素的分泌。

急慢性注射地卓西平马来酸盐对小鼠额叶microRNA-181b表达的影响

目的研究急慢性注射地卓西平马来酸盐(MK-801)对小鼠额叶中与精神分裂症相关的微小RNA(microRNA,miRNA)-181b表达的影响,探讨其参与精神分裂症病理学的可能机制。方法急性注射实验中40只小鼠随机分成四组,分别腹腔注射不同剂量(0.125 mg/kg,0.25 mg/kg,0.50 mg/kg)的MK-801和生理盐水(简称急性对照组),15 min后用实时荧光定量PCR(real-time PCR)技术检测额叶miRNA-181b的相对表达量;慢性注射实验中22只小鼠随机分成两组,分别腹腔注射0.25 mg.kg-1.d-1的MK-801和生理盐水(简称慢性对照组),连续14 d,然后检测miRNA-181b的相对表达量。结果急性注射0.125 mg/kg、0.25 mg/kg、0.50 mg/kgMK-801的各组小鼠额叶miRNA-181b的相对表达水平分别为0.65±0.05、0.61±0.05和0.91±0.08。前两个剂量组miRNA-181b的表达明显低于对照组(1.00±0.13),P<0.05,而0.5 mg/kg的MK-801则对miRNA-181b表达无影响(P>0.05)。慢性MK-801注射组miRNA-181b的相对表达量为1.86±0.19,显著高于慢性对照组(1.00±0.10),P<0.05。结论急性和慢性MK-801对额叶中miRNA-181b表达的影响不同,结合miR-181b的分子功能,提示miRNA-181b在急性和慢性模型鼠的构建中起到不同的作用。

microRNA-181b对心血管疾病的调控作用及机制的研究进展

心血管疾病是当前发病率和病死率最高的疾病之一。microRNA-181b(miR-181b)在心血管疾病的发生和发展过程中发挥了重要的作用。大量研究表明,miR-181b可通过调控心血管组织中的相关靶基因进而调节细胞因子、蛋白酶以及受体的表达,从而参与调控心血管系统的生理及病理状态。在高血压、动脉粥样硬化、动脉瓣膜钙化、心肌纤维化、心肌肥厚以及心肌炎等心血管疾病中发挥着重要的调控作用。本文拟就相关的研究进展对miR-181b在心血管疾病中的作用及机制进行综述。

MicroRNA-181b相对表达量与冠状动脉狭窄程度的相关性研究

目的探讨冠心病患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)中的MicroRNA-181b相对表达量与冠状动脉病变程度的关系,研究MicroRNA-181b对冠脉病变的预测意义。方法选取因急慢性胸痛在心内科住院且已行冠状动脉造影的患者117例,其中非冠心病组42例,冠心病组75例,根据症状、心电图、肌酸激酶同工酶、肌钙蛋白、冠状动脉造影结果将冠心病组分为稳定型心绞痛30例,不稳定型心绞痛22例和急性心肌梗死23例。采集各组患者一般临床资料,抽血检测相关生化指标,计算冠脉Gensini积分,采用荧光实时定量PCR方法检测MicroRNA-181b的相对表达量,研究MicroRNA-181b相对表达量与Gensini积分有无关系,探讨其在冠心病中的意义。结果冠心病组Gensini积分与MicroRNA-181b表达水平呈负相关。冠心病组MicroRNA-181b相对表达量均低于非冠心病组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论冠心病患者MicroRNA-181b表达水平降低,表达水平越低其冠脉病变程度(Gensini积分)越重,呈负相关,MicroRNA-181b高表达对冠状动脉粥样硬化的进展有抑制作用。

下调microRNA-181b在小鼠缺血性脑损伤中的神经保护作用

目的:探讨microRNA-181b(miR-181b)在缺血性小鼠脑损伤病理过程中的神经保护作用。方法:应用N2A细胞氧-糖剥夺(OGD)模型模拟神经细胞缺血损伤;应用小鼠大脑中动脉阻塞(MCAO)模型模拟缺血性脑损伤(成功率约60%),原位细胞凋亡检测试剂盒检测N2A细胞损伤程度,蛋白印迹检测miR-181b靶蛋白自噬蛋白5(Atg5)及caspase-9的变化情况,萤光素酶报告基因技术检测miR-181b对Atg5 mRNA的直接调控作用。结果:在OGD致N2A细胞缺血损伤过程中,通过上调或抑制miR-181b的表达水平可以显著影响N2A细胞的凋亡(P<0.05);miR-181b表达水平的改变可显著影响Atg5蛋白表达水平(P<0.05);共转染miR-181b前体或miR-181b抑制剂可显著抑制或增高含有Atg5 mRNA 3’-UTR的萤光素酶报告基因的活性(P<0.05);MCAO后活化caspase-9的表达显著升高,而miR-181b拮抗剂可使MCAO后剪切的caspase-9表达明显减少(P<0.05)。结论:下调miR-181b可能通过调节Atg5的蛋白表达在缺血性小鼠脑损伤中发挥神经保护作用。

MicroRNA-181b和microRNA-130a在冠状动脉粥样硬化性心脏病患者血浆中的表达及临床意义

目的探讨micro RNA-181b(mi R-181b)和micro RNA-130a(mi R-130a)在冠状动脉粥样硬化性心脏病(简称冠心病)患者血浆中的表达及临床意义。方法选取106例冠心病患者和40例健康者作为对照组,收集临床资料,行冠状动脉造影检查及Gensini评分,利用实时荧光定量聚合酶链反应(q RT-PCR)检测冠心病患者和对照组血浆中mi R-181b和mi R-130a的表达,利用受试者工作特征曲线(ROC曲线)对血浆中mi R-181b和mi R-130a的相对表达量在评估冠心病患者病程进展中的价值进行分析。结果冠心病患者血浆中mi R-181b和mi R-130a相对表达量与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05),冠心病患者血浆中mi R-181b相对表达量低于对照组,而mi R-130a相对表达量则高于对照组,冠心病患者中,中重度组患者血浆mi R-181b相对表达量低于轻度组,而mi R-130a相对表达量则高于轻度组;Pearson相关分析显示,冠心病患者血浆中mi R-181b相对表达量均与Gensini积分、脂蛋白a(Lp-a)、高敏C反应蛋白(hs-CRP)呈负相关(r=-0.504、-0.382和-0.415,P<0.05),血浆中mi R-130a相对表达量均与Gensini积分、Lpa和hs-CRP呈正相关(r=0.586、0.335和0.394,P<0.05);ROC曲线分析显示,冠心病患者血浆中mi R-181b相对表达量在评估患者病程进展时,曲线下面积0.871(95%CI:0.807,0.936),敏感性75.0%,特异性82.3%,血浆中mi R-130a相对表达量在评估患者病程进展时,曲线下面积0.931(95%CI:0.887,0.976),敏感性93.2%,特异性81.2%。结论冠心病患者血浆中mi R-181b表达水平降低,而mi R-130a表达水平升高,且均与患者病情严重程度有关,可作为评估患者病情进展的指标。

MicroRNA-181b提高U87细胞对VM-26的敏感性研究

背景与目的:MicroRNA(miRNA)参与肿瘤发生发展的诸多过程,并参与调节多种抗肿瘤药物的敏感性。本研究探讨恶性胶质瘤中miR-181b对VM-26(teniposide)化疗敏感性的影响。方法:以荧光定量PCR法检测miR-181b在高级别胶质瘤中的表达,并利用CCK-8细胞毒性实验检测高级别胶质瘤患者细胞对VM-26的化疗敏感性;并通过慢病毒感染构建稳定高表达miR-181b的U87/181b细胞及其对照组U87/nc,在荧光显微镜下观察其转染率及荧光定量PCR法检测其中miR-181b的表达;进而利用CCK-8细胞毒性实验检测U87/181b和U87/nc细胞对VM-26的敏感性,利用流式细胞仪检测VM-26作用72小时后U87/181b和U87/nc的凋亡情况。结果:在高级别胶质瘤中,miR-181b的表达与VM-26的敏感性呈正相关(r=-0.691,P﹤0.01),也就是miR-181b高表达肿瘤对VM-26的敏感性高。qPCR检测miR-181b在U87/181b(0.699±0.023)的表达显著高于U87/nc(0.019±0.001)(P﹤0.05)。CCK-8检测结果显示U87/181b[IC50:(1.25±0.12)μg/mL]对VM-26的敏感性显著高于U87/nc[IC50:(6.24±0.88)μg/mL](P﹤0.05)。经VM-26处理后U87/181b凋亡率(69.41±0.77)明显高于U87/nc(37.93±2.90)(P﹤0.05)。结论:在高级别胶质瘤高表达miR-181b的肿瘤对VM-26的敏感性高;在胶质瘤细胞U87中增加miR-181b表达可以提高对VM-26的敏感性。

MicroRNA-196b、IGFBP-3在非小细胞肺癌组织中的表达及与预后关系

目的 探究microRNA-196b(miR-196b)、胰岛素样生长因子结合蛋白-3(IGFBP-3)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及与预后的关系。方法 选取2020年4月—2022年4月在无锡市第二人民医院手术治疗的NSCLC患者78例。收集患者的病历资料,采用实时荧光定量聚合酶链反应检测癌组织、癌旁组织中miR-196b、IGFBP-3的表达。所有患者随访12个月,根据预后结局分为进展组、稳定组。筛查NSCLC患者预后的影响因素,评估组织中miR-196b、IGFBP-3表达对NSCLC患者预后的预测效能。分析癌组织中miR-196b、IGFBP-3不同表达患者生存曲线的差异。结果 进展组临床分期Ⅲ期占比、术前淋巴结转移率均高于稳定组(P <0.05)。进展组癌组织miR-196b相对表达量高于稳定组(P <0.05),IGFBP-3阳性表达率低于稳定组(P <0.05)。癌组织miR-196b相对表达量高于癌旁组织(P <0.05),IGFBP-3阳性表达率低于癌旁组织(P <0.05)。多因素逐步Logistic回归分析结果显示:临床分期[O^R=3.684(95%CI:1.259,10.778)]、术前淋巴结转移[O^R=3.557(95%CI:1.216,10.408)]、癌组织miR-196b表达[O^R=3.979(95%CI:1.359,11.641)]是NSCLC患者预后的危险因素(P <0.05),癌组织IGFBP-3表达阳性[O^R=0.220(95%CI:0.075,0.642)]是NSCLC患者预后的保护因素(P <0.05)。癌组织miR-196b、IGFBP-3及联合预测NSCLC患者预后的敏感性分别为66.25%(95%CI:0.512,0.797)、60.00%(95%CI:0.496,0.781)、87.50%(95%CI:0.725,0.963),特异性分别为69.74%(95%CI:0.534,0.825)、76.32%(95%CI:0.603,0.892)、72.37%(95%CI:0.576,0.861),曲线下面积分别为0.703、0.680、0.805。miR-196b低表达组生存情况优于高表达组(P <0.05)。IGFBP-3阳性表达组生存情况优于阴性表达组(P <0.05)。结论 NSCLC患者癌组织miR-196b、IGFBP-3表达与预后相关,且联合预测NSCLC患者预后效能良好。

天麻素调控miR-181b对创伤性颅脑损伤大鼠行为及脑水肿的作用机制探究

目的探究天麻素(GAS)调控miR-181b对创伤性颅脑损伤(TBI)大鼠行为及脑水肿的作用机制。方法将120只SPF级SD雄性大鼠随机分为假手术组(Sham组)、TBI模型组(Model组)、低剂量GAS组(GAS-L组,50 mg/kg GAS)、高剂量GAS组(GAS-H组,100 mg/kg GAS)、高剂量GAS+miR-181b antagomir NC组(GAS-H+miR-181b antagomir NC组,100 mg/kg GAS+200 nmol miR-181b antagomir NC)和高剂量GAS+miR-181b antagomir组(GAS-H+miR-181b antagomir组,100 mg/kg GAS+200 nmol miR-181b antagomir),每组20只大鼠。采用改良神经功能缺损严重程度评分量表(mNSS)对各组大鼠神经功能进行评估。采用转棒测试、旷场实验评价大鼠行为学变化。干湿重法测定大鼠脑组织含水量。HE染色观察大鼠脑组织病理学变化。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法测定各组大鼠脑组织miR-181b水平。Western blot法测定大鼠脑组织中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、水通道蛋白-4(AQP-4)的表达水平。结果与Sham组相比,Model组大鼠mNSS评分、脑组织含水量、脑组织MMP-9、AQP4蛋白表达显著升高(P<0.05),转棒测试跌落时间、旷场实验区域中心停留时间、脑组织miR-181b水平显著降低(P<0.05),大鼠脑皮质神经元萎缩,结构紊乱,细胞轮廓不清晰,出现严重的脑损伤。与Model组相比,GAS-H组大鼠相关指标变化趋势与上述相反(P<0.05)。miR-181b antagomir减弱了GAS对TBI导致的大鼠行为学障碍和脑水肿的减轻作用。结论GAS可能通过提高miR-181b的表达来改善TBI导致的大鼠行为学障碍和脑水肿。

早发型子痫前期患者血清microRNA-26b表达及其与胎盘早剥发生的关系

目的分析早发型子痫前期患者血清microRNA-26b(miR-26b)表达及其与胎盘早剥发生的关系。方法选取2019年8月至2022年8月荆州市中心医院收治的102例早发型子痫前期患者作为研究对象。检测所有患者miR-26b相对表达量,随访至患者分娩,根据胎盘早剥发生情况分成胎盘早剥组与非胎盘早剥组,分析早发型子痫前期患者血清miR-26b表达及其与胎盘早剥发生的关系。结果随访至产妇分娩,102例早发型子痫前期患者胎盘早剥发生率为17.65%(18/102)。胎盘早剥组血清miR-26b相对表达量高于非胎盘早剥组(P<0.05)。根据确诊疾病时血清miR-26b四分位数将患者分为Q1组(n=25)、Q2组(n=27)、Q3组(n=24)及Q4组(n=26),Q4组胎盘早剥发生率高于Q1组、Q2组及Q3组(P<0.05)。经点二列相关性分析检验,血清miR-26b与早发型子痫前期患者胎盘早剥发生率呈正相关(r=0.458,P<0.05)。绘制受试者工作特征(ROC)曲线,血清miR-26b对早发型子痫前期患者胎盘早剥具有中等预测价值,且当血清miR-26b相对表达量为2.465时,可获得最佳预测价值。结论早发型子痫前期患者血清miR-26b与胎盘早剥发生有关,检测血清miR-26b相对表达量能为预测胎盘早剥发生提供重要价值。

重复经颅磁刺激对阿尔茨海默病患者临床症状及血浆微小核糖核酸-125b、血浆磷酸化Tau-181蛋白的影响

目的:观察重复经颅磁刺激(repetitive transcranial magnetic stimulation,rTMS)对阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)患者认知功能、神经精神行为症状及血浆微小核糖核酸-125b(microRNA-125b,miR-125b)、血浆磷酸化Tau-181蛋白(phosphorylated Tau181 protein,P-tau181)表达的影响。方法:筛选轻中度AD患者34例,随机分为对照组(n=16)和试验组(n=18)。对照组采取认知训练及重复经颅磁伪刺激,试验组采取认知训练结合重复经颅磁真刺激。磁刺激强度为100%的静息运动阈值,频率为10Hz,每日治疗1次,每周治疗5天,持续4周,刺激脑区为左侧前额叶背外侧区和左侧颞叶区。在治疗前、后进行Addenbrooke-Ⅲ认知检查(the AddenbrookeⅢcognitive examination,ACE-Ⅲ)、简易精神状态量表(mini-mental state scale,MMSE)及神经精神症状问卷(neuropsychiatric inventory,NPI)评估,并采用实时荧光定量聚合酶链式反应(realtime fluorescence quantitative polymerase chain reaction,qRT-PCR)技术检测微小miR-125b表达量,酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)技术检测P-tau181的浓度。结果:治疗结束后,试验组ACE-Ⅲ、MMSE和NPI评分以及miR-125b、P-tau181均较组内治疗前显著改善,差异具有显著性意义(P<0.05),且上述指标与对照组治疗后相比,差异具有显著性意义(P<0.05);而对照组各项指标改善不具有显著性意义(P>0.05)。结论:rTMS能改善轻中度AD患者的认知功能及神经精神行为症状,这可能与rTMS促进血浆miR-125b的表达和抑制P-tau181蛋白产生相关。

MicroRNA-26b下调MALAT-1抑制乳腺癌MCF-7细胞恶性生物学行为的机制研究

目的 探索microRNA-26b(miR-26b)通过MALAT-1抑制乳腺癌MCF-7细胞恶性生物学行为的分子机制。方法 以乳腺癌细胞系MCF-7作为研究对象,采用慢病毒LV-miR-26b-ctrl和LV-miR-26b转染肿瘤细胞,逆转录聚合酶链反应检测MALAT-1、miR-26a和miR-26b的mRNA表达,平板克隆形成实验、CCK-8细胞增殖实验、软琼脂成瘤实验、细胞划痕实验、Transwell细胞侵袭实验分别检测肿瘤细胞的增殖、体外成瘤、迁移和侵袭能力。结果 E2组与Mock组MCF-7细胞24、48、72和96 h时吸光度值比较,经重复测量设计的方差分析,结果:(1)不同时间点吸光度值比较,差异有统计学意义(P <0.05);(2)两组吸光度值比较,差异有统计学意义(P <0.05),与Mock组比较,E2组72和96 h时细胞增殖能力较Mock组提高(P <0.05);(3)两组吸光度值变化趋势比较,差异有统计学意义(P <0.05)。与Mock组相比,E2组MALAT-1相对表达量升高(P <0.05),miR-26a、miR-26b mRNA相对表达量下降(P <0.05)。高表达miR-26b的乳腺癌患者的生存情况优于低表达miR-26b组,死亡风险更低(P <0.05),低表达miR-26a组患者的生存情况优于高表达miR-26a组(P <0.05),用Cox比例风险回归模型,将miR-26a作为一个独立的预后因素来比较,两组患者的死亡风险比较无差异(P>0.05)。与LV-miR-26b-ctrl组比较,LV-miR-26b-ctrl/E2组乳腺癌细胞的MALAT-1相对表达量升高(P <0.05),与LV-miR-26b-ctrl/E2组比较,LV-miR-26b/E2组乳腺癌细胞的MALAT-1相对表达量降低(P <0.05)。LV-miR-26b-ctrl组、LV-miR-26b-ctrl/E2组、LV-miR-26b/E2组细胞在24、48、72和96 h时吸光度值比较,经重复测量设计的方差分析,结果:(1)不同时间点吸光度值比较,差异有统计学意义(P <0.05);(2)各组吸光度值比较,差异有统计学意义(P <0.05),LV-miR-26b-ctrl/E2组72和96 h时细胞增殖能力明显较LV-miR-26b-ctrl组增强(P <0.05),LV-miR-26b/E2组72和96 h时细胞增殖能力较LV-miR-26b-ctrl/E2组降低(P <0.05);(3)各组吸光度值变化趋势比较,差异有统计学意义(P <0.05)。E2处理后的LV-miR-26b-ctrl肿瘤细胞增殖和体外成瘤能力增强。与LV-miR-26bctrl/E2组比较,LV-miR-26b/E2组肿瘤细胞的增殖和体外成瘤能力降低。在24 h时,LV-miR-26b-ctrl/E2组细胞划痕间隙较LV-miR-26b-ctrl组变窄,LV-miR-26b/E2组24 h时细胞的划痕间隙较LV-miR-26bctrl/E2组明显增宽。LV-miR-26b-ctrl/E2组Transwell小室下方的乳腺癌细胞数量较LV-miR-26b-ctrl组增多,LV-miR-26b/E2组的肿瘤细胞数量较LV-miR-26b-ctrl/E2组减少。结论 下调MALAT-1可能是miR-26b抑制乳腺癌恶性生物学行为的分子机制之一,miR-26b有望成为乳腺癌治疗的调控靶点。

血清微RNA-181b、促甲状腺激素在甲状腺结节患者体内表达状态及意义

目的:探究血清微RNA-181b(miRNA-181b)和促甲状腺激素(TSH)在甲状腺结节(TNS)患者体内表达水平及意义。方法:依据细针穿刺细胞活检结果将40例TNS患者分为良性组和恶性组,测定比较两组患者血清TSH和miRNA-181b,分析血清TSH和miRNA-181b在TNS良恶性鉴别中的价值,比较不同TNS恶性肿瘤患者血清TSH和miRNA-181b表达水平。结果:TNS恶性组中甲状腺超声报告和数据系统(TI-RADS)分类4c/5类占比明显大于良性组(均P<0.05),血清甲状腺球蛋白抗体(TG-Ab)、TSH、miRNA-181b水平明显高于良性组(均P<0.05)。Logistic回归分析显示,TI-RADS分类、TG-Ab、TSH、miRNA-181b是影响TNS恶性肿瘤发生的危险因素(均P<0.05)。受试者工作特征(ROC)曲线分析显示,血清TSH、miRNA-181b均可用于TNS良恶性鉴别诊断(AUC=0.759、0.719),灵敏度和特异度分别为56.3%、68.8%和83.3%、91.7%,两者联合检测对诊断TNS良恶性具有更高灵敏度(87.5%,AUC=0.891)。病灶最大径线≥14.5 mm和TI-RADS分类4c/5类者血清TSH和miRNA-181b明显高于病灶最大径线<14.5 mm和TI-RADS分类4a/4b类(均P<0.05)。结论:血清TSH和miRNA-181b在恶性TNS患者体内上调表达,是甲状腺癌变发生的危险因素;联合检测血清TSH和miRNA-181b在TNS良恶性鉴别诊断方面具有良好应用价值。

miR-181b miR-210 miR-126在妊娠期高血压疾病中的表达及与炎症反应的相关性

目的:探究微小RNA-181b(miR-181b)、miR-210、miR-126在妊娠期高血压疾病(HDP)中的表达及与炎症反应的相关性。方法:选取2018年1月至2019年12月承德市妇幼保健院收治的213例HDP单胎孕妇作为观察组,以病情严重程度为依据将其设为妊娠期高血压(GH组,62例)、轻度子痫前期(MP组,90例)及重度子痫前期(SP组,61例)3个亚组;另选取同期同医院收治的78名健康孕妇作为对照组。检测各组miR-181b、miR-210、miR-126相对表达量及血清白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)、白介素-10(IL-10)、白介素-17(IL-17)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)及血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)水平,并分析HDP患者各指标间的相关性。结果:观察组miR-181b、miR-210相对表达量及IL-1β、IL-6、IL-17、TNF-α、MCP-1、VCAM-1均比对照组高(P<0.05);观察组miR-126相对表达量及IL-10均比对照组低(P<0.05)。GH组miR-181b、miR-210相对表达量及IL-1β、IL-6、IL-17、TNF-α、MCP-1、VCAM-1均比MP组及SP组低,且MP组比SP组低(P<0.05);GH组miR-126相对表达量及IL-10均比MP组及SP组高,且MP组比SP组高(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,HDP患者miR-181b、miR-210相对表达量与IL-1β、IL-6、IL-17、TNF-α、MCP-1、VCAM-1均呈正相关,与IL-10呈负相关(P<0.05);HDP患者miR-126相对表达量与IL-1β、IL-6、IL-17、TNF-α、MCP-1、VCAM-1均呈负相关,与IL-10呈正相关(P<0.05)。结论:miR-181b、miR-210在HDP中呈高表达,miR-126在HDP中呈低表达,且三者与HDP炎症反应密切相关。

脑动脉硬化患者血清miR-181b miR-126与内皮功能和炎症水平的相关性

目的探讨脑动脉硬化患者血清miR-181b、miR-126与内皮功能和炎症水平的相关性。方法选取78例脑动脉硬化患者设为病例组,78名健康志愿者设为对照组。比较两组受试者血清miR-181b、miR-126表达,比较两组受试者血清一氧化氮、血管内皮素、促血管生成素-2、超敏C反应蛋白、白介素-6、白细胞计数水平。分析脑动脉硬化患者miR-181b、miR-126表达与内皮功能及炎症水平的相关性。结果病例组患者血清miR-181b、miR-126相对表达量均低于对照组(P<0.01)。病例组患者血清一氧化氮水平低于对照组,血清血管内皮素、促血管生成素-2、超敏C反应蛋白、白介素-6及白细胞水平均高于对照组(P<0.01)。脑动脉硬化患者miR-181b、miR-126均与血清一氧化氮水平呈正相关(P<0.01),与血清血管内皮素、促血管生成素-2、超敏C反应蛋白、白介素-6及白细胞水平呈负相关(P<0.01)。结论脑动脉硬化患者miR-181b、miR-126存在异常表达,且其与患者炎症水平及内皮功能具有显著相关性,可能通过调控炎症水平及内皮功能参与脑动脉硬化的发生发展。