MicroRNA-195/497对香烟烟雾提取物诱导的人支气管上皮细胞中TGF-β表达的影响

目的探讨microRNA-195/497(miR-195/497)在香烟烟雾提取物(CSE)诱导的人支气管上皮细胞中影响转化生长因子-β(TGF-β)表达的作用机制。方法用3%CSE诱导BEAS-2B细胞模拟慢性阻塞性肺疾病(COPD)的发病机制,实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-195、miR-497、SMAD7及TGF-β基因表达。双荧光素酶报告实验验证miR-195、miR-497与SMAD7的靶向关系,将miR-195mimic和miR-497 mimic转染至3%CSE处理的细胞中,qRT-PCR检测SMAD7的表达。将miR-195 mimic、miR-497 mimic和si-SMAD7转染至3%CSE处理的细胞中,qRT-PCR检测miR-195、miR-497、SMAD7、TGF-β的基因表达,Western blotting检测SMAD7、TGF-β的蛋白表达。结果3%CSE组miR-195、miR-497 mRNA相对表达量低于正常细胞组(P<0.05),SMAD7、TGF-βmRNA相对表达量高于正常细胞组(P<0.05)。miR-195 mimic组Wt-SMAD7 mRNA相对表达量低于mimic NC组(P<0.05)。miR-195 mimic组与mimic NC组Wt-SMAD7 mRNA相对表达量比较,差异无统计学意义(P>0.05)。miR-497 mimic组WtSMAD7 mRNA相对表达量低于mimic NC组(P<0.05)。miR-497 mimic组与mimic NC组Mut-SMAD7mRNA相对表达量比较,差异无统计学意义(P>0.05)。miR-195 mimic组SMAD7 mRNA相对表达量低于mimic NC组(P<0.05)。miR-497 mimic组SMAD7 mRNA相对表达量低于mimic NC组(P<0.05)。3%CSE组细胞miR-195和miR-497相对表达量较Control组下降(P<0.05),SMAD7及TGF-β蛋白相对表达量升高(P<0.05);miR-195 mimic+3%CSE组细胞miR-195相对表达量较3%CSE组升高(P<0.05),SMAD7、TGF-β下降(P<0.05),而miR-497相对表达量无明显差异(P>0.05);miR-497 mimic+3%CSE组细胞miR-497相对表达量较3%CSE组升高(P<0.05),SMAD7、TGF-β下降(P<0.05),而miR-195相对表达量无明显差异(P>0.05);si-SMAD7+3%CSE组SMAD7、TGF-β蛋白相对表达量较3%CSE组下降(P<0.05),而miR-195、miR-497无明显差异(P>0.05)。3%CSE组SMAD7、TGF-β蛋白相对表达量较Control组升高(P<0.05),miR-195 mimic+3%CSE组、miR-497 mimic+3%CSE组、si-SMAD7+3%CSE组较3%CSE组下降(P<0.05)。结论miR-195/497可通过调控SMAD7的表达影响CSE诱导的人支气管上皮细胞中TGF-β表达。

抑郁症患者治疗前血浆microRNA-16、microRNA-195表达水平研究

目前我国抑郁症患病率为1.6%,终身患病率为3.3%～。世界卫生组织曾报道,在全球范围内,共有超过3.5亿人患有抑郁症,遍布各个年龄组。它以情绪低落、思维迟缓、意志活动减退和躯体症状为主要表现。抑郁症发病机制仍不明确,与遗传因素、生物学因素和心理社会因素相关。

过表达MicroRNA-195抑制子宫内膜癌细胞系Ishikawa的增殖、迁移与侵袭能力

目的:观察MicroRNA-195对子宫内膜癌细胞增殖、迁移与侵袭能力的影响。方法:取对数生长期人子宫内膜癌细胞系Ishikawa,分别转染MicroRNA-195模拟物(MicroRNA-195过表达组)、MicroRNA-195抑制物(MicroRNA-195低表达组)及阴性对照质粒MicroRNA-NC(空白质粒组)。转染48h后,qRT-PCR法检测细胞中MicroRNA-195表达,CCK-8法检测细胞增殖,Transwell小室实验检测细胞迁移与侵袭能力,Western blot法检测Akt、p-Akt蛋白表达。将转染MicroRNA-195模拟物、MicroRNA-195抑制物及阴性对照质粒MicroRNA-NC的人子宫内膜癌细胞系Ishikawa分别注射至裸鼠皮下,每天检测肿瘤体积,实验周期为3周。结果:MicroRNA-195过表达可抑制人子宫内膜癌细胞系Ishikawa的增殖、迁移与侵袭能力(P<0.05),提高p-Akt蛋白表达(P<0.05);MicroRNA-195低表达可促进人子宫内膜癌细胞Ishikawa的增殖、迁移与侵袭能力(P<0.05),降低p-Akt蛋白表达(P<0.05)。MicroRNA-195过表达可抑制裸鼠体内人子宫内膜癌细胞Ishikawa的增殖(P<0.05),MicroRNA-195低表达可促进裸鼠体内人子宫内膜癌细胞Ishikawa的增殖(P<0.05)。结论:MicroRNA-195可抑制子宫内膜癌细胞Ishikawa的增殖、迁移与侵袭能力,其作用机制可能与激活PI3K/Akt信号通路有关。

MicroRNA-195与Bcl-2/Bax在钙化大鼠主动脉中的表达及其相互作用

目的观察Bcl-2/Bax和microRNA(miRNA)-195在大鼠血管钙化中表达的变化和相互关系。方法将16只实验大鼠随机分对照组和钙化组,每组8只。钙化组肌肉注射维生素D3(30万U/kg,1次)和尼古丁灌胃(25mg/kg溶于花生油中,早、晚各1次)诱导大鼠血管钙化模型,对照组大鼠予灌服等量生理盐水。建模6周后,股动脉放血处死大鼠,将主动脉用Von Kossa梁色后,观察其形态特征。用免疫组化染色法和免疫印迹法检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达,应用实时荧光定量多聚酶链式反应(qRT-PCR)法检测miRNA-195的表达。结果钙化组的主动脉有大量黑色颗粒沉淀。钙化组主动脉组织中Bax的表达与对照组无明显差别,而Bcl-2的表达升高(P<0.05)。钙化组miRNA-195的表达量高于对照组(P<0.01)。Pearson直线相关分析显示,钙化的主动脉中miRNA-195表达的水平与Bcl-2表达的水平呈显著正相关(r=0.791,P<0.05)。结论钙化的主动脉组织中miRNA-195的表达升高,并伴有Bcl-2蛋白的表达上调。miRNA-195与Bcl-2可能参与主动脉钙化。

microRNA-195在弥漫大B细胞淋巴瘤患者中的表达及临床意义

目的:探讨微小RNA 195(miR-195)在弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)患者中的表达及其临床意义。方法:选取本院近4年诊治的60例DLBCL患者,并选取同时期同年龄段于本院行健康体检的健康人群30例作为对照,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCT)分别测定两组患者miR-195的表达量,分析其表达与患者临床病理特征及患者生存时间的关系。结果:miR-195在DLBCL患者中的表达量较对照组显著降低(P<0.001);miR-195的表达水平与DLBCL患者肿瘤直径、IPI指数评分及Ann Arbor分期密切相关;高表达miR-195的DLBCL患者总体生存时间显著高于低表达患者(P<0.001)。结论:miR-195表达在DLBCL患者中的表达降低,miR-195与DLBCL患者肿瘤特征密切相关,高表达miR-195的DLBCL患者可获得更长的总体生存时间。

MicroRNA-195在宫颈癌及子宫上皮瘤变患者外周血中的表达及临床意义

目的:研究宫颈癌和子宫上皮瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)患者外周血中微小RNA-195(microRNA-195,miR-195)的表达水平及其临床意义。方法:收集30例健康对照者、51例CIN患者和51例宫颈癌患者,应用实时定量PCR方法检测其外周血中miR-195表达水平,应用受试者工作特征(ROC)曲线分析miR-195表达对诊断CIN、宫颈癌的意义。通过Kaplan-Meier生存分析评价miR-195对宫颈癌患者预后的影响。结果:宫颈癌患者、CIN患者和健康对照者3组间外周血miR-195表达水平差异有统计学意义(P<0.01),其中宫颈癌患者明显低于其他两组(P<0.01或P<0.05)。ROC曲线分析表明外周血miR-195能够很好地区分宫颈癌患者、CIN患者与健康对照者;miR-195低表达患者总体生存时间明显短于miR-195高表达患者(P=0.016)。结论:宫颈癌和CIN患者外周血中miR-195表达降低,可作为辅助诊断宫颈癌和CIN的分子标志。

MicroRNA-195与TGF-β1/Smads信号通路在自发性高血压大鼠心脏重构中的作用

目的探讨微小核糖核酸195(microRNA-195,miR-195)、转化生长因子β1/Smads(TGF-β1/Smads)信号转导通路及血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)在自发性高血压大鼠(SHR)心脏重构中的作用,血管紧张素转化酶抑制剂(ACEI)类药物干预对SHR心脏形态结构及表达上述因子的影响。方法以8周龄雄性SHR大鼠16只及Wistar大鼠8只为研究对象,将SHR大鼠随机分为SHR贝那普利干预组(SHR干预组,n=8)、SHR对照组(n=8),Wistar大鼠作为正常对照组;SHR干预组大鼠予灌服贝那普利10 mg/(kg·d),SHR对照组大鼠和正常对照组大鼠予蒸馏水灌胃,干预8周;干预前后测鼠尾动脉血压,干预8周后股动脉放血处死大鼠,HE染色观察大鼠心脏形态学改变,实时荧光定量多聚酶链式反应(qRT-PCR)法检测大鼠心脏中miRNA-195的表达,Western blot检测转化生长因子β1(transforming growth factor beta1,TGF-β1)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、Smad蛋白3(small mother against decapentaplegic protein three,Smad3)、I型胶原(Col-Ⅰ)和Ⅲ型胶原(Col-Ⅲ)蛋白表达水平。结果 SHR大鼠心脏miRNA-195、AngⅡ、TGF-β1、Smad3、Col-Ⅰ及Col-Ⅲ的表达量均高于Wistar大鼠(P<0.01或P<0.05),SHR干预组大鼠心肌细胞较SHR对照组明显变小,细胞排列较其紧密有序,miRNA-195、AngⅡ、TGF-β1、Smad3、Col-Ⅰ及Col-Ⅲ表达量均明显降低(P<0.01或P<0.05)。结论 MiRNA-195可能通过上调AngⅡ及TGF-β1/Smads信号转导通路促进SHR心脏重构;贝那普利干预可抑制miRNA-195表达,可能通过下调AngⅡ及TGF-β1/Smads信号转导通路抑制SHR心脏重构。

MicroRNA-195-5p调节Bmpr1α表达对骨髓间充质干细胞成脂分化的影响

目的探讨miR-195-5p在补肾方含药血清干预大鼠原代骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cell,BM SC)中的表达及其对成脂分化的影响。方法体外贴壁法原代培养的大鼠BM SC细胞经流式细胞术、CD44和CD34免疫荧光染色鉴定后,与椎间盘软骨细胞和成骨细胞一起采用荧光定量RT-PCR方法检测细胞中rno-miR-195-5p的表达情况;采用荧光素酶报告基因实验验证骨形态发生蛋白受体-1α(Bmpr1α)是否为rno-miR-195-5p的靶基因,采用Western印迹法和油红O染色检测rno-miR-195-5p对Bmpr1α表达和BMSC成脂分化的影响。结果流式细胞术与免疫荧光分析显示所培养细胞具备BMSC特征。rno-miR-195-5p在补肾方含药血清干预的原代BM SC中表达明显升高(P<0.01),且在分化完成的软骨细胞和成骨细胞中高表达。双荧光素酶报告实验与Western印迹法证实Bmpr1α是rno-miR-195-5p的靶基因。转染rno-miR-195-5p mimics上调BM SC中rno-miR-195-5p可抑制Bmpr1α的表达(P<0.05),降低成脂分化能力;而转染rno-miR-195-5p inhibitor可显著增加BM SC中Bmpr1α的表达(P<0.01),增强成脂分化能力。结论补肾方含药血清干预BMSC上调rno-miR-195-5p,通过降低其靶基因Bmpr1α的表达而降低BMSC的成脂分化,改善骨质疏松症状。

MicroRNA-195参与切应力对血管内皮细胞炎症调控作用的研究

目的研究micro RNA-195(miR-195)是否参与切应力对血管内皮细胞(ECs)炎症的调控作用。方法 (1)验证生理切应力调节ECs miRNAs的表达:15 dyne/cm2的生理切应力处理人脐静脉内皮细胞(HUVEC),24 h后利用实时荧光定量聚合酶链反应(q RT-PCR)检测内皮细胞相关miRNAs(miR-27b、miR-143/145及miR-195等)的表达变化;(2)miR-195与内皮细胞炎症反应的关系:体外转染miR-195mimics及inhibitors至HUVEC,通过Western blot、免疫荧光检测ECs中炎症相关因子表达及miR-195对内皮细胞的炎症控制水平。结果 15 dyne/cm^2的生理切应力处理HUVEC,24 h后miR-27b、miR-143/145及miR-195等表达上调;过表达miR-195对ECs内皮型一氧化氮合酶(e NOS)的表达没有影响,但抑制了p65的磷酸化(P-p65)表达;采用miRNA inhibitors抑制内源性的miR-195后,ECs e NOS的表达下调,抑制了κB抑制蛋白(IκBα)的表达水平。免疫荧光结果显示,在ECs中过表达miR-195抑制了NF-κB的核转运,而抑制miR-195可能促进了NF-κB的核转运,促进炎症。结论生理切应力诱导miR-195表达上调,miR-195可能参与切应力对ECs炎症的调控作用。

microRNA-195在食管鳞状上皮细胞癌中的表达及临床意义

目的检测microRNA-195(miR-195)在食管鳞状上皮细胞癌组织中的表达水平,探讨其临床病理生理学意义。方法应用实时荧光聚合酶链反应法检测94例食管鳞状上皮细胞癌组织和配对癌旁正常组织中miR-195的表达水平,并分析miR-195表达水平与食管鳞状上皮细胞癌患者临床病理学特征及预后之间的关系。结果食管鳞状上皮细胞癌组织中miR-195不同程度低表达45例(47.9%),正常表达39例(41.5%),高表达10例(10.6%)。miR-195低表达者比例在有无淋巴结转移、不同TNM分期者中的差异有统计学意义(P<0 05);miR-195表达水平与患者无瘤生存期显著相关,是食管鳞状上皮细胞癌患者预后的独立危险因素。结论miR-195下调影响食管鳞状上皮细胞癌进展和患者预后,可能起着抑癌基因功能。

子宫内膜癌患者血清及癌组织中microRNA-195的表达水平及意义

目的观察microRNA-195在子宫内膜癌患者血清及组织中的表达情况,并分析其诊断价值及与病理学指标的关系。方法子宫内膜癌癌组织及对应肿瘤边缘2~5 cm处的癌旁组织来源于2018年1—4月石家庄心脑血管病医院接受子宫内膜癌分期手术治疗的60例患者(病例组),并抽取其术前外周静脉血;同时抽取同期入院行妇科体检的30例健康志愿者作为对照(健康组)。采用实时荧光定量PCR检测血清及组织中microRNA-195的相对表达量,并分析其与病理学指标的关系。结果与健康组相比,病例组血清microRNA-195表达水平明显低,差异有统计学意义(P<0.05)。血清microRNA-195对诊断子宫内膜癌的受试者工作特征曲线下面积为0.778(95%CI:0.692~0.864),确定最佳阈值后诊断子宫内膜癌的灵敏度、特异度分别为76.67%、73.33%。与癌旁组织相比,子宫内膜癌癌组织中microRNA-195相对表达量明显低,差异有统计学意义(P<0.05)。不同的年龄、病理类型、病理分级、ER、PR表达强度的子宫内膜癌癌组织microRNA-195表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);而microRNA-195表达水平Ⅰ期癌组织>Ⅱ期癌组织>Ⅲ期癌组织,浸润深度≥1/2肌层的癌组织microRNA-195表达水平明显高于浸润深度<1/2肌层的癌组织,Her-2阴性的癌组织癌组织microRNA-195表达水平明显高于Her-2阳性的癌组织,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论microRNA-195在子宫内膜癌患者血清及癌组织中呈低表达,对子宫内膜癌的诊断有一定价值,且可能对子宫内膜癌的发生发展有一定促进作用。

HSF1基因缺失通过上调microRNA-195a-3p加速压力超负荷下心脏重构

目的:探讨热休克转录因子1(HSF1)调控微小RNA-195a-3p (miR-195a-3p)对心肌微血管内皮细胞血管新生功能的影响,旨在阐明HSF1基因缺失加重压力超负荷下心脏重构的病理分子机制。方法:压力超负荷动物模型采用小鼠主动脉弓缩窄(TAC),辅以心脏超声功能评价。在体实验分组为HSF1基因敲除(HSF1^(-/-))小鼠假手术组、C57BL/6野生型(WT)小鼠假手术组、HSF1^(-/-)小鼠TAC模型组和C57BL/6 WT小鼠TAC组;细胞实验分组为对照组、miR-195a-3p模拟物干预组和阴性对照microRNA(miR-NC)干预组。TAC术后4周,通过病理组织切片检测各组小鼠心肌肥厚(HE染色)和血管新生(CD31染色),小鼠心超检查心脏主要功能指标变化;通过生物信息软件TargetScan 6.2结合萤光素酶(luciferase)报告基因检测,以及Western blot验证,测定miR-195a-3p调控血管新生的下游分子靶点;并用miR-195a-3p诱导微血管内皮细胞,观察其对细胞成管能力的影响。结果:HSF1缺失会导致TAC诱导的小鼠左心室重构加重。芯片筛查结果表明HSF1缺失可促进心脏12种microRNAs表达上调,5种microRNAs在心肌微血管内皮细胞中表达显著升高,其中miR-195a-3p的增高具有统计学显著性。miR-195a-3p过表达可以有效抑制微血管内皮细胞CD31和血管内皮生长因子(VEGF)的表达,阻滞细胞形成管腔样结构。TargetScan 6.2预测miR-195a-3p的靶点为AMP活化蛋白激酶α2(AMPKα2),在微血管内皮细胞用miR-195a-3p模拟物干预可以有效抑制AMPKα2的表达,同时miR-195a-3p模拟物也抑制了CD31和VEGF的表达。结论:HSF1基因缺失导致的miR-195a-3p表达上调是加速压力超负荷下心脏重构的重要诱因,其机制可能是通过抑制AMPKα2介导的血管新生信号通路的激活。

MicroRNA-195与Smad7靶向关系的研究

目的:构建含有Smad7基因3'-UTR区的荧光素酶报告基因载体,利用双荧光素酶报告基因验证MicroRNA195与其潜在靶基因Smad7的靶向关系。方法:PCR扩增出Smad7基因3'-UTR区片段,以此构建含3'-UTR的荧光素酶报告基因载体(wild type,WT);将miRNA-195与荧光素酶报告重组子共转染至293T细胞中,双荧光素酶报告基因系统检测荧光素酶活性;构建含Smad7基因3'-UTR突变体(mutant,Mut)的荧光素酶报告基因质粒,检测荧光素酶活性变化。结果:测序结果表明,含有Smad7基因3'-UTR区的荧光素酶报告基因载体构建正确;荧光素酶活性实验表明,与对照组相比,miRNA-195可使含Smad7基因3'-UTR区的荧光素酶报告重组子的荧光素酶活性降低40%左右;而定点突变Smad7基因3'-UTR的荧光素酶报告重组子荧光活性未有明显变化。结论:成功构建了Smad7基因3'-UTR区的荧光素酶报告基因载体,而miRNA-195可以直接作用于Smad7基因3'-UTR区,抑制其荧光素酶活性。

microRNA-195在脑膜瘤中的表达及其功能研究

目的探究非编码microRNA-195在脑膜瘤中的表达及其功能。方法采用原位杂交检测miR-195在脑膜瘤组织中的表达水平及其与临床分级的相关性;在脑膜瘤细胞株IOMM-Lee中过表达miR-195,通过CCK8、流式细胞术等检测miR-195对脑膜瘤细胞生物学功能的影响。结果 miR-195在脑膜瘤中表达,其表达水平与肿瘤级别呈负相关。在脑膜瘤细胞中过表达miR-195可显著抑制肿瘤细胞的细胞活力,将细胞周期阻滞于G1期;荧光素梅报告基因结果显示miR-195可以直接抑制c-myb的转录水平,在脑膜瘤细胞中过表达miR-195能够显著抑制c-myb mRNA水平和蛋白水平的表达。结论 miR-195在脑膜瘤中异常表达,与肿瘤临床分级相关,能够通过靶向调节c-myb的表达抑制脑膜瘤细胞的细胞周期,抑制肿瘤细胞的生长。

脑源性神经生长因子/microRNA-195在创伤性脑损伤中的作用研究

目的探讨脑源性神经生长因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)/microRNA-195(miR-195)在创伤性脑损伤(traumatic brain injury,TBI)中的作用。方法 TBI患者入院及建立TBI大鼠模型后,分别采用ELISA和RT-PCR法检测TBI患者及大鼠模型中BDNF和miR-195的含量,并分析BDNF和miR-195之间的关系,进一步确定其对神经细胞N2A和SY5Y凋亡水平的影响;采用CCK-8实验检测BDNF和miR-195对N2A和SY5Y增殖能力的影响;应用NSS评分对BDNF/miR-195治疗TBI大鼠的疗效进行评价。结果 TBI患者入院时血清BDNF水平显著低于健康组(P<0.05);TBI大鼠脑组织中BDNF水平先升高后降低,且低于正常水平[对照组:0.5 h时,(177.0±20.4)μg;48 h时,(181.2±19.4)μg。重度组:0.5 h时,(300.5±31.2)μg;48 h时,(103.6±21.0)μg](P<0.05或P<0.01);而TBI患者和大鼠模型中miR-195水平均显著升高,并高于正常水平(P<0.01);BDNF可促进神经细胞生长增殖,抑制其凋亡,但miR-195同BDNF作用相反,其可抑制神经细胞生长增殖并促进其凋亡;BDNF可通过抑制miR-195的表达进而达到促进细胞生长增殖、抑制细胞凋亡,并起到改善神经功能的疗效。结论 BDNF/miR-195具有促进神经细胞生长,抑制凋亡,改善神经功能,可为临床上TBI的治疗提供新的靶点。

MicroRNA-195在长期脑低灌注诱发认知功能障碍中的作用及其分子机制

长期脑低灌注(chronic brain hypoperfusion,CBH)是血管性痴呆(vascular dementia,VD)患者共有的临床特征。探讨CBH对认知功能的影响对深入理解VD的发病机制,探索临床干预策略具有重要意义。课题组通过使用双侧颈总动脉结扎(bilateral common carotid artery occlusion,BCCAO,或two-vessel occlusion,2VO)手术法构建CBH动物模型,并从miRNAs的角度系统研究了CBH对大鼠学习和记忆的影响及其分子机制。发现microRNA-195(miR-195)可以以多靶点调控的方式参与到老年痴呆的三个病理特征(β淀粉样蛋白(amyloidβpeptide,Aβ)沉积、tau蛋白过度磷酸化、神经元突触退化和神经元的死亡)的发生和发展过程中。值得关注的是,2VO引起的miR-195下调不仅可以通过上调淀粉样前体蛋白(amyloid precursor protein,APP)和β-分泌酶(β-site APP cleaving enzyme 1,BACE1)的表达从源头启动Aβ级联反应过程,并且在这个级联反应过程的每一个关键节点处为维持反应过程提供底物。该系列研究也从另外一个角度证明miRNAs可以在一个功能模块中以多靶点调控的方式参与到疾病的发生和发展过程中。

MicroRNA-196b、IGFBP-3在非小细胞肺癌组织中的表达及与预后关系

目的 探究microRNA-196b(miR-196b)、胰岛素样生长因子结合蛋白-3(IGFBP-3)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及与预后的关系。方法 选取2020年4月—2022年4月在无锡市第二人民医院手术治疗的NSCLC患者78例。收集患者的病历资料,采用实时荧光定量聚合酶链反应检测癌组织、癌旁组织中miR-196b、IGFBP-3的表达。所有患者随访12个月,根据预后结局分为进展组、稳定组。筛查NSCLC患者预后的影响因素,评估组织中miR-196b、IGFBP-3表达对NSCLC患者预后的预测效能。分析癌组织中miR-196b、IGFBP-3不同表达患者生存曲线的差异。结果 进展组临床分期Ⅲ期占比、术前淋巴结转移率均高于稳定组(P <0.05)。进展组癌组织miR-196b相对表达量高于稳定组(P <0.05),IGFBP-3阳性表达率低于稳定组(P <0.05)。癌组织miR-196b相对表达量高于癌旁组织(P <0.05),IGFBP-3阳性表达率低于癌旁组织(P <0.05)。多因素逐步Logistic回归分析结果显示:临床分期[O^R=3.684(95%CI:1.259,10.778)]、术前淋巴结转移[O^R=3.557(95%CI:1.216,10.408)]、癌组织miR-196b表达[O^R=3.979(95%CI:1.359,11.641)]是NSCLC患者预后的危险因素(P <0.05),癌组织IGFBP-3表达阳性[O^R=0.220(95%CI:0.075,0.642)]是NSCLC患者预后的保护因素(P <0.05)。癌组织miR-196b、IGFBP-3及联合预测NSCLC患者预后的敏感性分别为66.25%(95%CI:0.512,0.797)、60.00%(95%CI:0.496,0.781)、87.50%(95%CI:0.725,0.963),特异性分别为69.74%(95%CI:0.534,0.825)、76.32%(95%CI:0.603,0.892)、72.37%(95%CI:0.576,0.861),曲线下面积分别为0.703、0.680、0.805。miR-196b低表达组生存情况优于高表达组(P <0.05)。IGFBP-3阳性表达组生存情况优于阴性表达组(P <0.05)。结论 NSCLC患者癌组织miR-196b、IGFBP-3表达与预后相关,且联合预测NSCLC患者预后效能良好。

血清microRNA-155、microRNA-21、趋化素、瘦素与糖尿病肥胖患者胰岛素抵抗的相关性

目的 探讨糖尿病肥胖患者血清microRNA-155(miR-155)、microRNA-21(miR-21)、趋化素、瘦素水平与胰岛素抵抗(IR)的相关性。方法 选取2022年1月—2023年4月山东中医药大学第二附属医院收治的138例2型糖尿病(T2DM)患者为研究对象,其中肥胖患者73例(肥胖组),非肥胖患者65例(非肥胖组)。肥胖组中有IR 45例(IR组),无IR 28例(非IR组)。收集患者一般资料,包括性别、体质量指数(BMI)、年龄、颈围(NC)、腰围(WC)、空腹血糖(FPG)、甘油三酯(TG)、空腹胰岛素(FINS)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、miR-155、miR-21、趋化素、瘦素、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)水平;通过多因素逐步Logistic回归模型分析T2DM肥胖患者发生IR的危险因素;绘制受试者工作特征(ROC)曲线,分析miR-155、miR-21、趋化素、瘦素诊断T2DM肥胖患者IR的效能;Pearson法分析miR-155、miR-21、趋化素、瘦素与HOMA-IR的相关性。结果 肥胖组miR-155相对表达量低于非肥胖组(P <0.05),miR-21、趋化素、瘦素、HOMA-IR高于非肥胖组(P <0.05)。IR组miR-155相对表达量低于非IR组(P <0.05),NC、WC、miR-21、趋化素、瘦素水平高于非IR组(P<0.05)。多因素逐步Logistic回归分析结果显示:NC [O^R=1.416(95%CI:1.038,1.932)]、WC [O^R=1.227(95%CI:1.049,1.435)]、miR-155 [O^R=1.763(95%CI:1.205,2.579)]、miR-21[O^R=1.932(95%CI:1.356,2.753)]、趋化素[O^R=2.074(95%CI:1.492,2.883)]、瘦素[O^R=1.628(95%CI:1.246,2.127)]是T2DM肥胖患者发生IR的危险因素(P <0.05)。ROC曲线分析结果显示,miR-155、miR-21、趋化素、瘦素诊断T2DM肥胖患者IR的曲线下面积分别为0.865、0.909、0.874和0.871;敏感性为77.8%(95%CI:0.614,0.825)、86.7%(95%CI:0.792,0.917)、95.6%(95%CI:0.713,0.965)和80.0%(95%CI:0.692,0.917);特异性为85.7%(95%CI:0.647,0.903)、82.1%(95%CI:0.732,0.914)、75.0%(95%CI:0.675,0.928)和89.3%(95%CI:0.656,0.944)。miR-155与HOMA-IR呈负相关(r=-0.573,P=0.000),miR-21、趋化素、瘦素与HOMA-IR均呈正相关(r=0.531、0.558和0.568,均P=0.000)。结论 T2DM肥胖患者中IR较多,且miR-155、miR-21、趋化素、瘦素是T2DM肥胖患者发生IR的危险因素。

糖尿病合并甲状腺功能亢进患者血清miR-122、miR-195表达及意义

目的分析糖尿病合并甲状腺功能亢进(甲亢)患者血清微小RNA-122(miR-122)和微小RNA-195(miR-195)的表达水平,并探讨其临床诊断价值。方法选取我院2020年3月至2023年3月98例糖尿病合并甲亢患者为糖尿病合并甲亢组,选取同期收治的98例甲状腺功能正常的糖尿病患者为糖尿病组,另选本院同期98例体检健康志愿者为健康对照组。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测血清miR-122和miR-195表达水平。Pearson相关性分析糖尿病合并甲亢患者血清miR-122、miR-195水平与游离三碘甲状腺原氨酸(FT_(3))、游离四碘甲状腺原氨酸(FT_(4))、促甲状腺激素(TSH)、空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)及胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)的相关性;血清miR-122、miR-195水平对糖尿病合并甲亢的临床诊断价值分析采用ROC曲线进行判断。结果健康对照组、糖尿病组、糖尿病合并甲亢组患者血清miR-122、miR-195表达水平逐渐增加(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,糖化血红蛋白、FT_(3)、FT_(4)、TSH、HOMA-IR及miR-122、miR-195表达是糖尿病合并甲亢的影响因素(P<0.05)。Pearson分析显示,糖尿病合并甲亢患者血清miR-122、miR-195水平与FT_(3)、FT_(4)、FBG、FINS及HOMA-IR呈正相关(P<0.05),与TSH呈负相关(P<0.05)。ROC曲线分析显示,miR-122和miR-195联合诊断糖尿病合并甲亢的AUC显著大于miR-122单独诊断的AUC(Z=2.245,P=0.025)及miR-195单独诊断的AUC(Z=2.182,P=0.029)。结论糖尿病合并甲亢患者血清miR-122、miR-195表达水平明显升高,二者联合检测对糖尿病合并甲亢具有较高的诊断价值。

血清microRNA-21、microRNA-193a-3p表达与结直肠癌患者手术预后的关系

目的探究血清microRNA-21(miR-21)、microRNA-193a-3p(miR-193a-3p)水平与结直肠癌患者手术预后的关系。方法回顾性分析2020年1月—2022年1月苏州大学附属第一医院收治112例结直肠癌患者的病历资料。患者均接受结直肠癌根治术,术后随访16个月,记录患者的预后生存结局,多因素逐步Logistic回归分析结直肠癌患者手术预后的影响因素,评估血清miR-21、miR-193a-3p对结直肠癌患者预后的预测效能。结果112例结直肠癌患者死亡22例,病死率为19.64%;生存90例,生存率为80.36%。死亡组术前血清miR-21 mRNA相对表达量、临床分期Ⅲ期占比、淋巴结转移率均高于生存组(P<0.05),血清miR-193a-3p m RNA相对表达量低于生存组(P<0.05)。多因素逐步Logistic回归分析结果显示,临床分期Ⅲ期[OR=3.777(95%CI:1.399,10.194)]、淋巴结转移[OR=5.099(95%CI:1.715,15.156)]、miR-21表达升高[OR=4.889(95%CI:1.645,14.533)]、miR-193a-3p表达降低[OR=4.402(95%CI:1.481,13.084)]均是直肠癌患者预后的影响因素(P<0.05)。受试者工作特性曲线分析结果显示,血清miR-21、miR-193a-3p单一及联合预测结直肠癌预后的敏感性分别为69.04%(95%CI:0.487,0.813)、72.73%(95%CI:0.495,0.884)、86.36%(95%CI:0.640,0.964),特异性分别为62.22%(95%CI:0.513,0.720)、68.89%(95%CI:0.581,0.780)、90.00%(95%CI:0.814,0.950),曲线下面积分别为0.782、0.731和0.901。结论结直肠癌患者术前miR-21、miR-193a-3p表达与术后预后密切相关,且在结直肠癌患者的预后结局中表现出良好的预测效能。