MicroRNA-205通过甲基化修饰调节帕金森病多巴胺神经元LRRK2表达

目的探讨MicroRNA-205(miR-205)如何调节LRRK2表达从而在帕金森病中发挥作用。方法诱导人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)成为PD细胞模型,检测PD细胞模型中miR-205以及LRRK2的表达量;转染前体miR-205,使miR-205过表达,随后q-PCR方法检测miR-205过表达PD模型细胞中LRRK2转录水平变化;转染miR-205抑制剂,随后q-PCR方法检测miR-205抑制PD模型细胞中LRRK2转录水平变化。结果相较于正常细胞(1.02±0.14),PD模型细胞中miR-205的表达水平明显降低(0.59±0.03),差异有统计学意义(P=0.017);而相较于正常细胞(1.00±0.11),PD模型细胞中LRRK2水平上调(1.50±0.10),差异有统计学意义(P=0.033);相较于正常细胞(1.02±0.11)以及PD模型细胞(1.47±0.12),使用前体miR-205处理SH-SY5Y细胞可持续抑制LRRK2蛋白表达约50%(0.87±0.11),差异有统计学意义(P=0.020);相较于正常细胞(1.02±0.11)以及PD模型细胞(1.47±0.12),转染miR-205抑制剂后可诱导神经元培养物中LRRK2蛋白表达的剂量依赖性上调(1.87±0.11),差异有统计学意义(P=0.036)。结论miR-205可抑制LRRK2的转录水平。过表达miR-205可能成为LRRK2-PD的治疗手段。

基底样乳腺癌中microRNA-205靶向调控KLF12及对细胞侵袭能力的影响

目的探讨基底样乳腺癌(basal-like breast carcinoma,BLBC)特异性miRNAs和靶基因及生物学功能。方法提取细胞总RNA和蛋白,荧光素酶实验验证靶基因;采用qRT-PCR、Western blot和免疫组化En Vision法分析miRNA和靶基因表达;CCK8和Transwell实验检测细胞增殖和侵袭能力。结果荧光素酶实验示miR-205靶向调控KLF12(P=0.001 6)。qRT-PCR检测结果示MAD-MB-468细胞中miR-205表达下调(P=0.007),KLF12表达升高(P=0.039);转染miR-205 mimics过表达miR-205,miR-205表达显著升高(P=0.000),KLF12表达减少(P=0.038)。Western blot检测结果示miR-205过表达,MDAMB-468细胞KLF12表达显著升高(P=0.007 9)。CCK8实验示miR-205未参与细胞增殖。Transwell实验示过表达miR-205显著抑制细胞侵袭能力(P=0.001)。结论 miR-205是BLBC特异性的miRNA,通过负性靶向调控原癌基因KLF12和抑制侵袭具有抑癌基因的功能。miR-205和KLF12为BLBC的诊断和治疗提供潜在的分子标志物和新思路。

MicroRNA-205抑制黑素瘤细胞迁移和侵袭的作用及其机制

目的探讨microRNA-205(miR-205)表达对人类黑素瘤细胞株(A375和A2058)迁移和侵袭的作用及其分子机制。方法转染miR-205过表达慢病毒(Lenti-miR-205)构建miR-205过表达的黑素瘤细胞A375和A2058细胞系(miR-205组),转染空白对照慢病毒作为对照细胞系(NC组)。通过划痕实验和Transwell实验分别检测两组细胞迁移和侵袭能力,激光共聚焦扫描显微镜观察细胞形态和表达钙黏蛋白E(E-cadherin)的细胞数量与荧光强度,蛋白质印迹法检测E-cadherin、Twist、整合素(intergrin)、波形蛋白(vimentin)、Zeb1、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9蛋白表达。结果培养8 h和24 h时miR-205组A375与A2058细胞的迁移能力均大于NC组(P<0.01);miR-205组两种细胞的侵袭能力均低于NC组(P<0.01)。MiR-205过表达后A375和A2058细胞均由梭形、基质型向圆形、表皮型转化。与NC组相比,miR-205组细胞E-cadherin蛋白表达增加(P<0.01),且表达E-cadherin的细胞数量和荧光强度均增加;Twist、intergrin、vimentin、Zeb1、MMP-2和MMP-9蛋白表达水平降低(P<0.01)。结论 MiR-205通过诱导E-cadherin的表达逆转上皮间质转化,从而抑制黑素瘤细胞的迁移和侵袭。

原位杂交检测microRNA-205在乳腺癌中的表达

目的探讨microRNA-205表达与乳腺恶性病变的关系。方法乳腺疾病及癌组织芯片原位杂交分析microRNA-205的表达;实时定量RT-PCR方法检测正常乳腺细胞株、恶性程度不同的乳腺癌细胞株中microRNA-205的表达。结果原位杂交分析显示,36例正常与良性乳腺病变中,33例(91.67%)表达阳性;36例乳腺癌中,23例(63.89%)表达阳性。microRNA-205的表达在乳腺正常与良性病变中的表达较恶性病变中高且有统计学差异(P=0.011),但与乳腺癌TNM分期、临床分期无关(P>0.05)。实时定量RT-PCR结果显示,四个高度恶性乳腺癌细胞株(MDA-MB-231、HS578T、BT549和SUM159PT)中microRNA-205的表达较永生化正常乳腺上皮细胞株MCF10A和四个低度恶性细胞株(MDA-MB-468、T-47D、ZR-75-1和SKBR3)中为低(P<0.05)。结论原位杂交适用于microRNA-205的表达分析;组织芯片标本原位杂交与乳腺细胞株实时定量RT-PCR分析结果提示,microRNA-205可能参与了乳腺癌的发生、发展,并随着乳腺癌的演进呈下调趋势。

上调microRNA-205表达对HeLa细胞生物学特性的影响

【目的】探讨上调microRNA-205(miR-205)表达对HeLa细胞生物学特性的影响。【方法】实验分4组:miR-205上调组,阴性对照组,空白转染组和空白对照组。每种检测重复3次。利用脂质体siPORT NeoFX Transfection Agent,向miR-205上调组细胞转染Pre-miR-hsa-miR-205 miRNA Precursor,阴性对照组细胞转染Cy3 dye labeled PremiR Negative Control。荧光显微镜下评估转染情况,实时定量PCR方法检测miR-205表达,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法和平板克隆形成实验分别检测细胞生长和增殖能力,流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞周期分布,Transwell小室法检测细胞迁移能力。【结果】实时定量PCR结果显示,miR-205上调组miR-205的表达增加3061.5倍。与空白对照组相比,72hmiR-205上调组与阴性对照组活细胞数分别为(126±41)%,(126±39)%;两组克隆形成率分别为(79±11)%,(63±10)%;凋亡率分别为(4.6±2.1)%,(4.1±2.4)%;S期细胞比例分别为(19.2±3.6)%,(23.4±3.0)%;200倍镜视野下迁移细胞数分别为63±17和68±16。与对照组比,miR-205上调组细胞增殖能力增强但生长曲线不受影响,S期细胞比例降低,而凋亡率不变,细胞迁移能力无明显改变。【结论】上调miR-205表达后,HeLa细胞增殖能力及细胞周期改变,但生长曲线、凋亡率和迁移能力无变化。

不同分期及分级膀胱癌组织中microRNA-21、microRNA-205表达变化

目的检测microRNA-21(miR-21)与microRNA-205(miR-205)在不同分期、分级膀胱癌组织中的表达情况,探讨其在各期、各级膀胱癌组织中的表达差异性及意义。方法采用基于2-ΔΔCT的实时荧光定量PCR法检测78例膀胱癌组织中miR-21及miR-205表达,其中T1期45例、T2期15例、T3期10例、T4期8例,低级别膀胱癌61例、高级别膀胱癌17例。结果不同分期、分级膀胱癌组织之间,miR-21及miR-205表达差异有统计学意义(P均<0.05)。与低级别膀胱癌相比,高级膀胱癌组织miR-21高表达、miR-205低表达(P均<0.01);随着肿瘤分期恶性程度的增加,miR-21表达逐渐升高,而miR-205表达逐渐下降(P均<0.01)。结论 miR-21高表达、miR-205低表达可能参与膀胱癌的发生、发展,并与肿瘤的恶性程度相关。

microRNA-205在人非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的检测人非小细胞肺癌（non small cell lung cancer,NSCLC）组织中microRNA-205表达的变化及分析肺腺癌有淋巴结转移患者组织中microRNA-205与EMT相关标志基因表达的相关性。方法收集2011年12月～2013年10月笔者医院收治的NSCLC患者75例,每例患者另取癌旁组织作为对照,荧光定量PCR法检测肿瘤组织microRNA-205的表达及有淋巴结转移患者肺癌组织中EMT相关基因Slug、Snail、vimentin mRNA的表达情况。结果NSCLC癌组织microRNA-205的表达在〈3cm肿瘤患者（19.56±10.81 vs 29.36±10.37）、有淋巴结转移（15.46±7.03 vs 37.98±10.35）或临床分期为Ⅰ～Ⅱ（19.09±9.23 vs 30.21±8.96）患者组织中相对低表达,在肿瘤大小、淋巴结转移或临床分期之间差异具有统计学意义（P〈0.05）,且29例淋巴结转移肺腺癌患者癌组织microRNA-205与EMT重要转录因子Slug和Snail的表达呈显著负相关（Pearson r=-0.417, P=0.024;Pearson r=-0.388, P=0.038）。结论NSCLC癌组织microRNA-205的表达与淋巴结转移密切相关,可能通过调控Slug和Snail分子参与肺腺癌的侵袭转移过程,将为寻找治疗肺癌转移的策略提供新靶点。

microRNA-205在恶性肿瘤中的研究进展

microRNA-205(miR-205)是进化保守的内源性非编码小分子RNA。研究表明miR-205与多种恶性肿瘤相关,在不同肿瘤中或高表达或低表达,通过不同途径参与不同恶性肿瘤的发生发展过程。本文就miR-205在恶性肿瘤中的表达及调控机制作一综述,以期为恶性肿瘤的诊疗、预后判断提供新的思路。

下调microRNA-205表达对人子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖和侵袭的作用

目的:探讨下调microRNA-205(miR-205)表达对人子宫内膜样腺癌细胞系Ishika-wa增殖和侵袭的作用及可能的机制。方法:将miR-205抑制剂(miR-205 inhibitor)瞬时转染Ishikawa细胞,下调miR-205的表达;应用实时荧光定量PCR方法(qRT-PCR)检测miR-205的表达;噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖能力;Transwell小室法检测细胞侵袭能力。qRT-PCR和Western blot分别检测miR-205的预测靶基因ESRRG mRNA和蛋白表达水平。应用双荧光素酶分析方法鉴定miR-205和ESRRG 3'UTR的表达调节关系。结果:miR-205在Ishikawa细胞中呈高表达;转染miR-205 inhibitor的Ishikawa细胞中,miR-205表达降低了86.9%,细胞增殖和侵袭能力下降,同时细胞ESRRG mRNA和蛋白表达升高;miR-205通过直接与ESRRG mR-NA 3'UTR结合负调节其表达。结论:下调miR-205表达可抑制Ishikawa细胞增殖、侵袭能力;miR-205的生物效应可能与调节潜在抑癌基因ESRRG有关。

敲减microRNA-205靶向PTEN抑制食管癌细胞TE1的增殖并促进细胞凋亡

目的:探讨miRNA-205对食管癌细胞株TE1增殖和凋亡能力的影响及其作用机制。方法:实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)和Western印迹检测正常食管黏膜细胞Het-1A和不同食管癌细胞株(KYSE70,TE12,TE1)中miRNA-205的mRNA及蛋白表达水平。转染miRNA-205抑制剂下调TE1细胞中miRNA-205的表达,采用CCK-8法和流式细胞术检测细胞增殖能力、细胞周期和细胞凋亡情况;Western印迹检测细胞增殖和细胞凋亡相关CDK2,cyclin D1,P21,Bcl-2,cleavedcaspase-3,caspase-3,p-Rb,Rb,p-Akt和Akt的蛋白表达水平。双荧光素酶报告基因分析法预测及验证其可能的靶基因。结果:MiRNA-205在各型食管癌细胞中高表达。沉默miRNA-205后,TE1细胞的增殖能力降低并表现为细胞周期阻滞,而细胞凋亡率显著升高(P<0.05)。同时细胞中cyclinD1,CDK2,bcl-2,p-Rb及p-Akt的蛋白表达水平均显著降低,p21及cleaved-caspase-3的蛋白表达水平显著升高。双荧光素酶报告基因分析显示PTEN是miRNA-205的可能作用靶点,TE1中共转染miRNA-205抑制剂和PTENsiRNA可部分逆转miRNA-205介导细胞增殖抑制及凋亡诱导作用。结论:沉默miRNA-205可靶向PTEN抑制食管癌细胞株TE1的增殖,并促进其凋亡,提示miRNA-205可作为食管癌诊疗的一个潜在作用靶点。

microRNA-205基因在子宫内膜癌中的研究进展

微小RNA-205(microRNA-205,miR-205)属于高度保守的miRNAs家族,可通过调控靶基因的表达及致癌信号通路等来影响肿瘤的细胞生长、增殖、迁移、侵袭和转移等多个环节,促进或抑制癌症的发生发展。近年研究结果证明,miR-205可激活或增加子宫内膜癌(EC)细胞的增殖、生长、入侵及转移,影响其预后及临床病理特性,成为EC患者潜在诊断、治疗及预后的分子靶点。

microRNA-205靶向抑制PHLPP2促进子宫内膜癌细胞增殖侵袭

目的:研究miR-205在人子宫内膜癌细胞中的生物学功能及可能作用机制,探讨miR-205作为子宫内膜癌靶向治疗的潜在靶点的可能性。方法:荧光定量PCR测定人子宫内膜癌细胞株AN3CA、HEC-1-A和Ishikawa以及人正常子宫内膜细胞(CP-H058)中miR-205表达。通过转染miR-205 mimics或miR-205 inhibitor上调或下调子宫内膜癌细胞中miR-205表达,CCK-8和平板克隆形成实验测定细胞增殖活力,Transwell侵袭实验测定细胞侵袭。TargetScan7.1数据库预测发现PHLPP2(pleckstrin homology domain leucine-rich repeat protein phosphatase 2,含有PH结构域亮氨酸丰富的磷酸酶2)mRNA的3'非翻译区存在miR-205的结合序列。采用双荧光素酶报告基因实验进一步验证。Western blot检测上调或下调miR-205后靶蛋白表达。结果:人子宫内膜癌细胞株AN3CA、HEC-1-A和Ishikawa中miR-205相对表达均显著高于正常人子宫内膜上皮细胞(P<0.01)。与阴性对照相比,上调Ishikawa细胞中miR-205表达,能促进Ishikawa细胞的增殖及侵袭;下调AN3CA细胞中miR-205表达,能抑制AN3CA细胞的增殖活性及侵袭能力(P均<0.05)。双荧光素酶报告基因实验结果发现,与转染阴性对照相比,转染miR-205 mimics至Ishikawa细胞,或转染miR-205 inhibitor至AN3CA,作用于PHLPP2的3'-非翻译区(野生型,含miR-205正常结合位点序列),能减少或升高相对荧光素酶活性(P均<0.01);但在Ishikawa中转染miR-205 mimics,或在AN3CA中转染miR-205 inhibitor,与PHLPP2的3'-非翻译区(突变型,构建miR-205结合序列突变位点)作用,都未能改变荧光素酶活性。Western blot分析显示,在Ishikawa细胞中上调miR-205能降低PHLPP2蛋白表达;而在AN3CA中下调miR-205升高了PHLPP2蛋白表达。结论:miR-205靶向抑制PHLPP2在子宫内膜癌细胞中发挥促癌作用。miR-205与PHLPP2可能成为子宫内膜癌靶向治疗的靶标。

血清microRNA-155、microRNA-21、趋化素、瘦素与糖尿病肥胖患者胰岛素抵抗的相关性

目的 探讨糖尿病肥胖患者血清microRNA-155(miR-155)、microRNA-21(miR-21)、趋化素、瘦素水平与胰岛素抵抗(IR)的相关性。方法 选取2022年1月—2023年4月山东中医药大学第二附属医院收治的138例2型糖尿病(T2DM)患者为研究对象,其中肥胖患者73例(肥胖组),非肥胖患者65例(非肥胖组)。肥胖组中有IR 45例(IR组),无IR 28例(非IR组)。收集患者一般资料,包括性别、体质量指数(BMI)、年龄、颈围(NC)、腰围(WC)、空腹血糖(FPG)、甘油三酯(TG)、空腹胰岛素(FINS)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、miR-155、miR-21、趋化素、瘦素、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)水平;通过多因素逐步Logistic回归模型分析T2DM肥胖患者发生IR的危险因素;绘制受试者工作特征(ROC)曲线,分析miR-155、miR-21、趋化素、瘦素诊断T2DM肥胖患者IR的效能;Pearson法分析miR-155、miR-21、趋化素、瘦素与HOMA-IR的相关性。结果 肥胖组miR-155相对表达量低于非肥胖组(P <0.05),miR-21、趋化素、瘦素、HOMA-IR高于非肥胖组(P <0.05)。IR组miR-155相对表达量低于非IR组(P <0.05),NC、WC、miR-21、趋化素、瘦素水平高于非IR组(P<0.05)。多因素逐步Logistic回归分析结果显示:NC [O^R=1.416(95%CI:1.038,1.932)]、WC [O^R=1.227(95%CI:1.049,1.435)]、miR-155 [O^R=1.763(95%CI:1.205,2.579)]、miR-21[O^R=1.932(95%CI:1.356,2.753)]、趋化素[O^R=2.074(95%CI:1.492,2.883)]、瘦素[O^R=1.628(95%CI:1.246,2.127)]是T2DM肥胖患者发生IR的危险因素(P <0.05)。ROC曲线分析结果显示,miR-155、miR-21、趋化素、瘦素诊断T2DM肥胖患者IR的曲线下面积分别为0.865、0.909、0.874和0.871;敏感性为77.8%(95%CI:0.614,0.825)、86.7%(95%CI:0.792,0.917)、95.6%(95%CI:0.713,0.965)和80.0%(95%CI:0.692,0.917);特异性为85.7%(95%CI:0.647,0.903)、82.1%(95%CI:0.732,0.914)、75.0%(95%CI:0.675,0.928)和89.3%(95%CI:0.656,0.944)。miR-155与HOMA-IR呈负相关(r=-0.573,P=0.000),miR-21、趋化素、瘦素与HOMA-IR均呈正相关(r=0.531、0.558和0.568,均P=0.000)。结论 T2DM肥胖患者中IR较多,且miR-155、miR-21、趋化素、瘦素是T2DM肥胖患者发生IR的危险因素。

血清microRNA-21、microRNA-193a-3p表达与结直肠癌患者手术预后的关系

目的探究血清microRNA-21(miR-21)、microRNA-193a-3p(miR-193a-3p)水平与结直肠癌患者手术预后的关系。方法回顾性分析2020年1月—2022年1月苏州大学附属第一医院收治112例结直肠癌患者的病历资料。患者均接受结直肠癌根治术,术后随访16个月,记录患者的预后生存结局,多因素逐步Logistic回归分析结直肠癌患者手术预后的影响因素,评估血清miR-21、miR-193a-3p对结直肠癌患者预后的预测效能。结果112例结直肠癌患者死亡22例,病死率为19.64%;生存90例,生存率为80.36%。死亡组术前血清miR-21 mRNA相对表达量、临床分期Ⅲ期占比、淋巴结转移率均高于生存组(P<0.05),血清miR-193a-3p m RNA相对表达量低于生存组(P<0.05)。多因素逐步Logistic回归分析结果显示,临床分期Ⅲ期[OR=3.777(95%CI:1.399,10.194)]、淋巴结转移[OR=5.099(95%CI:1.715,15.156)]、miR-21表达升高[OR=4.889(95%CI:1.645,14.533)]、miR-193a-3p表达降低[OR=4.402(95%CI:1.481,13.084)]均是直肠癌患者预后的影响因素(P<0.05)。受试者工作特性曲线分析结果显示,血清miR-21、miR-193a-3p单一及联合预测结直肠癌预后的敏感性分别为69.04%(95%CI:0.487,0.813)、72.73%(95%CI:0.495,0.884)、86.36%(95%CI:0.640,0.964),特异性分别为62.22%(95%CI:0.513,0.720)、68.89%(95%CI:0.581,0.780)、90.00%(95%CI:0.814,0.950),曲线下面积分别为0.782、0.731和0.901。结论结直肠癌患者术前miR-21、miR-193a-3p表达与术后预后密切相关,且在结直肠癌患者的预后结局中表现出良好的预测效能。

血管内超声参数联合microRNA-206评估非ST段抬高型急性心肌梗死患者病变严重程度及预后的价值

目的探讨血管内超声(IVUS)参数联合microRNA-206(miR-206)评估非ST段抬高型急性心肌梗死(NSTEAMI)患者病变严重程度及预后的价值。方法选取2019年3月-2021年4月河北北方学院附属第一医院收治的105例NSTEAMI患者,所有患者行经皮冠状动脉介入术(PCI),根据病变严重程度将患者分为单支病变组(55例)、双支病变组(32例)、多支病变组(18例)。对比不同病变程度患者IVUS参数、血清miR-206,分析IVUS参数、血清miR-206与NSTEAMI患者病变严重程度的相关性。随访2年,根据是否发生MACE分为发生组与非发生组。对比发生组与非发生组的临床资料,采用多因素逐步Logistic回归模型分析NSTEAMI患者发生主要不良心脏事件(MACE)的影响因素。绘制受试者工作特征(ROC)曲线,评估IVUS参数、血清miR-206预测NSTEAMI患者发生MACE的效能。结果多支病变组斑块负荷、斑块面积、重构指数、偏心指数、血清miR-206相对表达量均高于单支、双支组(P<0.05),且双支病变组均高于单支病变组(P<0.05)。Pearson相关性分析结果显示,血管外弹力膜面积与NSTEAMI患者病变严重程度无相关性(r=0.271,P=0.325);斑块负荷、斑块面积、重构指数、偏心指数、血清miR-206与NSTEAMI患者病变严重程度呈正相关(r=0.416、0.382、0.423、0.507和0.394,均P=0.000)。随访2年,失访2例,剩余103例患者中32例(31.07%)发生MACE,71例(68.93%)未发生MACE。发生组多支病变、血运未重建占比、斑块负荷、斑块面积、重构指数、偏心指数、血清miR-206相对表达量均高于非发生组(P<0.05),淋巴细胞计数、血红蛋白水平均低于非发生组(P<0.05)。多因素逐步Logistic回归分析结果显示:多支病变[OR=3.466(95%CI:1.523,7.884)]、血运未重建[OR=2.776(95%CI:1.220,6.315)]、斑块负荷[OR=3.155(95%CI:1.387,7.177)]、重构指数[OR=3.842(95%CI:1.689,8.740)]、偏心指数[OR=4.166(95%CI:1.831,9.477)]、血清miR-206[OR=4.500(95%CI:1.978,10.236)]为NSTEAMI患者发生MACE的危险因素(P<0.05)。ROC曲线结果显示,斑块负荷、重构指数、偏心指数、血清miR-206四者联合预测NSTEAMI患者发生MACE的敏感性为88.52%(95%CI:0.674,0.957),特异性为92.86%(95%CI:0.713,0.968),曲线下面积为0.900(95%CI:0.812,0.953)。结论IVUS参数(斑块负荷、重构指数、偏心指数)、血清miR-206在评估NSTEAMI患者病变严重程度与预后中具有重要价值,且四者联合具有更高的预测价值。

激光功率对205B铝合金激光-CMT复合增材组织及性能的影响

目的针对传统增材技术造成的205B铝合金组织均匀性差、气孔率高、强度低等问题,选用激光-电弧(CMT)复合增材技术为研究方法,探究激光功率对其组织均匀性和性能的影响规律。方法采用激光-电弧(CMT)复合增材技术实现了205B铝合金增材成形件的良好成形,并利用现代分析技术对材料的宏微观组织形貌、第二相分布、气孔、物相组成、显微硬度及拉伸强度进行表征。结果成形件中部区域呈现“凹弧形”层状结构特征且存在一定程度的组织不均匀性和各类气孔。激光功率对材料层间和层内宏微观组织及第二相分布有显著影响,当激光功率增加至1800W及以上时,层间“细晶带”特征明显且柱状晶组织逐渐消失。当激光功率为1600 W时,材料获得了最低的气孔率(0.85%),平均气孔直径为25.58μm,平均气孔数量为32。材料具有典型的拉伸强度各向异性,当激光功率为1600 W时,材料的横向拉伸强度和纵向拉伸强度均获得最大值,分别为265.65MP和235.75MPa。结论通过调节激光功率能够在一定程度上解决材料组织不均匀的问题并减小气孔率,从而提高了成形件的力学性能。

慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者血浆miR-205、miR-21表达水平及临床意义

目的 探讨血浆miR-205、miR-21在慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)患者中的表达水平及临床意义。方法 选取2022年1—12月收治的COPD 140例,另选取同期体检的健康人群70例作为健康组。根据COPD是否进入急性加重期将患者分为急性加重组63例与稳定组77例。采用荧光定量PCR法检测3组血浆miR-205、miR-21水平,采用受试者工作特征曲线评估血浆miR-205、miR-21对AECOPD发生的预测价值,采用多因素Logistic逐步回归分析探讨AECOPD预后的影响因素。结果 稳定组和急性加重组COPD患者血浆miR-205、miR-21水平均高于健康组,且急性加重组高于稳定组(P<0.05)。血浆miR-205、miR-21联合预测AECOPD发生的曲线下面积大于二者单独预测。死亡组AECOPD患者血浆miR-205、miR-21水平高于生存组(P<0.05)。血浆miR-205、miR-21高表达及急性生理与慢性健康状况Ⅱ系统评分≥2分是AECOPD患者入院后28 d死亡的危险因素(P<0.01)。结论 AECOPD患者血浆miR-205、miR-21表达水平明显升高,可作为早期诊断和预后的生物学指标,且二者联合预测AECOPD患者发生的效能更高。

LINC00894通过miR-205-5p/ZEB1轴对胃癌细胞增殖和转移的影响

目的 探究长链非编码RNA 00894(LINC00894)基因对人胃癌细胞增殖、转移的影响,验证LINC00894、miR-205-5p、ZEB1在胃癌中的调控关系。方法 采用RT-qPCR检测LINC00894在胃癌细胞系、正常胃细胞系、临床胃癌及正常胃组织样本中的表达水平;通过随访,探究LINC00894的表达水平与胃癌患者预后的关系;构建LINC00894敲减细胞系和过表达细胞系,并采用RT-qPCR检测敲减及过表达效率;通过CCK-8、克隆形成和Transwell实验检测细胞增殖与转移能力;采用双荧光素酶报告实验、RT-qPCR实验和Western blot实验检测LINC00894、miR-205-5p和ZEB1的靶向调控关系。结果 LINC00894基因在胃癌组织或细胞中的表达量明显高于胃正常组织或细胞,且LINC00894基因高表达的胃癌患者预后更差;LINC00894基因的敲减抑制了胃癌细胞的活力、克隆形成能力、迁移能力和侵袭能力,相反,LINC00894基因的过表达得到相反地结果;LINC00894通过靶向miR-205-5p并下调其表达,从而促进ZEB1的表达。结论 LINC00894在胃癌中扮演癌基因的角色,可能通过miR-205-5p/ZEB1轴促进胃癌细胞增殖和转移。

miR-205-5p靶向ERBB3调控PI3K/AKT/mTOR通路抑制血管生成在痔疮中的分子机制

目的 探讨miR-205-5p靶向ERBB3调控PI3K/AKT/mTOR通路抑制血管生成在痔疮中的分子机制。方法 收集2021年07月至2022年06月临床12例患者的痔核和正常肛周组织,通过qRT-PCR检测临床病理样本中miR-205-5p和ERBB3的表达情况,双荧光素酶报告基因实验验证miR-205-5p与ERBB3的靶向关系。将miR-205-5p mimic、pcDNA-ERBB3、miR-205-5p inhibitor、sh-ERBB3、oe-ERBB3及阴性对照质粒分别或共同转染至痔疮模型大鼠和HUVEC细胞。HE、TUNEL染色观察组织病理和细胞凋亡情况,免疫组化检测ERBB3、VEGFR2蛋白定位及表达水平,Western blot检测ERBB3、VEGFR2、Cyclin D1、Cleaved-caspase 3、Bax、Bcl-2和PI3K/AKT/mTOR通路相关蛋白的表达水平。MTT、划痕愈合、Transwell实验、流式细胞术、血管形成实验检测各组HUVEC细胞增殖、迁移、侵袭能力、凋亡率和血管生成量。结果 痔疮临床样本中miR-205-5p呈低表达,ERBB3呈高表达(P <0.001),miR-205-5p与ERBB3(WT)的3'UTR靶向结合(P <0.001)。miR-205-5p mimic组痔疮大鼠和HUVEC细胞中ERBB3表达量显著降低(P <0.01,P <0.001),VEGFR2(P <0.001)、Cyclin D1(P <0.01)、Bcl-2(P <0.001)、p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT和p-mTOR/mTOR(P <0.001)水平显著下调,Cleaved-caspase 3和Bax水平显著上调(P <0.01),大鼠肛周组织病理状况改善,HUVEC细胞增殖、迁移和侵袭力均降低(P <0.001),凋亡率升高(P <0.001),血管生成数量及分支减少(P <0.001),pcDNAERBB3逆转了这一效应(P <0.001)。结论 miR-205-5p能通过靶向抑制ERBB3表达,下调PI3K/AKT/mTOR通路活性,抑制细胞增殖、迁移和侵袭,促进细胞凋亡,减少血管生成,从而缓解痔疮进展。

miR-205、血清淀粉样蛋白A联合检测在自发性早产早期评估中的价值

目的探讨miR-205、血清淀粉样蛋白A(SAA)联合评估早期自发性早产的价值。方法选取2019年1月至2021年12月于我院建档并随访至分娩的自发性早产孕妇137例(早产组)和正常分娩孕妇165例(对照组)为研究对象,实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)测定血清中miR-205水平,GenruiPA300全自动特定蛋白分析仪检测SAA浓度,分析二者评估早期自发性早产的价值。结果早产组miR-205、SAA分别为(1.51±0.43)RQ,65.19(33.66,126.62)mg/L,显著高于对照组[(0.73±0.21)RQ,8.66(5.34,11.95)mg/L],差异有统计学意义(t=19.404,Z=-10.179,均P<0.05)。miR-205、SAA评估早期自发性早产的曲线下面积分别为0.954、0.885,miR-205曲线下面积较大,二者联合诊断价值最高,曲线下面积为0.971。结论miR-205评估早期自发性早产价值较高,临床可联合检测miR-205、SAA以提高评估效能。