microRNA-497在肾小球系膜细胞焦亡中的作用及机制

目的:探讨microRNA-497(miR-497)对高糖和胰岛素诱导的肾小球系膜细胞焦亡的调控作用。方法:高糖和胰岛素处理人肾小球系膜细胞(HRMC),在不同时间运用流式细胞仪检测细胞焦亡,实时定量PCR检测HRMC细胞中miR-497表达水平;转染不同浓度miR-497 mimic,检测细胞焦亡通路关键基因mRNA表达水平,运用Western印记检测NLRP1蛋白的表达水平;运用生物信息学和萤光素酶报告基因技术预测并验证miR-497对炎性小体NLRP1基因的靶向结合作用;miR-497 mimic和pc DNA-NLRP1分别单独转染或共转染后检测细胞增殖。结果:高糖和胰岛素处理48 h以上HRMC细胞焦亡水平显著增加(P<0.05),miR-497表达水平显著降低(P<0.05);miR-497 mimic转染显著抑制HRMC细胞焦亡,和焦亡通路关键基因IL-1β、TNFα和caspase-1表达水平下降(P<0.05);miR-497可直接靶向作用于NLRP1基因并抑制NLRP1蛋白的表达;NLRP1过表达可消除miR-497对细胞焦亡的抑制作用。结论:miR-497 mimic抑制高糖和胰岛素诱导的肾小球系膜细胞焦亡。

血清microRNA-497定量检测与结直肠癌血管生成的关系及其临床意义

目的定量检测结直肠癌(colorectal cancer,CRC)患者血清microRNA-497(miR-497)表达量,探讨其与结直肠癌血管生成的关系及其临床意义。方法采用实时荧光定量RT-PCR检测93例CRC患者术前、30例健康者血清miR-497表达量;以ELSIA法检测血清VEGF、血管生成素-2(Angiopoietin-2,Ang-2)含量;以免疫组化法检测93例CRC癌组织及30例正常结直肠黏膜组织中CD34表达,计算肿瘤微血管密度(microvessel density,MVD);术后随访3年;分析术前血清miR-497表达量与CRC血管生成、病理特征及预后的关系。结果CRC组血清miR-497表达量显著低于正常对照组(P<0.01),血清VEGF、Ang-2含量及癌组织中MVD显著高于正常对照组(P<0.01);miR-497低表达组血清VEGF、Ang-2含量及MVD均显著高于miR-497高表达组(P<0.01);CRC组血清miR-497表达量与血清VEGF、Ang-2含量及MVD均呈负相关(r=-0.437、-0.461、-0.383,P<0.01);术前血清miR-497表达量与CRC分化程度、TNM分期、是否淋巴结转移及是否远处转移呈负相关(P<0.01),与术后复发转移呈负相关(P<0.01)、与生存期长短呈正相关(P<0.01)。Cox多因素分析显示术前血清miR-497表达量是影响CRC患者术后预后的独立高危因素。结论血清miR-497表达量降低可促进CRC新生血管生成及侵袭转移,与CRC患者不良预后相关;术前血清miR-497表达量可成为CRC患者预后评价指标。

microRNA-194及microRNA-497在结直肠癌患者血清中的表达和临床意义

目的探讨microRNA-194(miR-194)、microRNA-497(miR-497)在结直肠癌(CRC)患者血清中的表达及临床意义。方法收集52例CRC患者(CRC组)和22例健康体检者(对照组)血清标本,采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测miR-194、miR-497的表达量。结果 CRC组血清中miR-194表达为1.90(0.86~3.35),明显高于对照组[0.76(0.69~0.93)],CRC组血清中miR-497表达为1.57(0.62~2.38),高于对照组[0.79(0.36~1.15)],差异均有统计学意义(P<0.05)。不同年龄、肿块大小、肿瘤分化程度、淋巴结转移情况及TNM分期的CRC患者miR-194、miR-497水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 miR-194和miR-497在CRC患者血清中表达上升,其异常表达可能与CRC的发生有关。

MicroRNA-497对人膀胱癌EJ细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨microRNA-497(miR-497)对人膀胱癌EJ细胞增殖和凋亡的影响。方法将人膀胱癌细胞株EJ分为4组:miR-497 mimics、mimics NC、miR-497 inhibitor、inhibitor NC;通过脂质体Lipfectami-neTM2000介导将miR-497 mimics、mimics NC、miR-497 inhibitor、inhibitor NC瞬时转染至上述4组细胞中,转染6 h后,在荧光显微镜下观察转染效率;转染48h后,采用qRT-PCR技术检测各组细胞中miR-497的表达;平板克隆实验和噻唑蓝(MTT)实验检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡情况,Western blot法检测凋亡相关蛋白Bcl-2和Caspase-3的表达变化。结果荧光显微镜下观察结果显示:各组细胞转染效率均>90%;qRT-PCR结果显示:与各自阴性对照组相比,转染miR-497 mimics组,EJ细胞中miR-497表达明显增加(P<0.01),而转染miR-497 inhibitor后表达明显下调(P<0.01)。过表达miR-497后,EJ细胞的增殖能力较阴性对照组明显减弱(P<0.01),凋亡率明显上升(P<0.01);而抑制miR-497表达后,EJ细胞的增殖能力较阴性对照组明显增强(P<0.05),凋亡率明显降低(P<0.01)。Western blot结果示:与阴性对照组相比,过表达miR-497可使EJ细胞的Bcl-2表达降低(P<0.01),Caspase-3表达增加(P<0.01)。结论miR-497可抑制膀胱癌EJ细胞增殖,促进其凋亡,可能与影响Bcl-2和Caspase-3蛋白表达有关。

原发性肝癌组织MicroRNA-497表达及与患者临床特征和生存率的关系

目的:回顾性分析microRNA-497(miRNA-497)在原发性肝癌(HCC)患者癌组织中的表达及与患者临床特征和生存率的关系。方法:收集2010-01—2010-10接受手术治疗的61例HCC患者,采用荧光定量PCR检测其癌组织及癌旁组织miRNA-497的相对表达量。以癌组织miRNA-497相对表达水平的中位数为界限,将61例患者分为miRNA-497高表达组(n=21)和miRNA-497低表达组(n=40)。比较癌组织与癌旁组织miRNA-497水平差异;同时分析miRNA-497高表达组与miRNA-497低表达组临床特征和预后危险因素;比较两组平均生存率和累计生存率的差异。结果:miRNA-497在癌组织中的表达明显低于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05)。HCC患者癌组织miRNA-497低表达组血清AFP水平、肿瘤大小、TNM分期、血管侵犯与高表达组分布差异有统计学意义(P<0.05)。多因素回归分析显示血管侵犯、TNM分期、miRNA-497表达量是影响HCC患者预后的独立危险因素。Kaplan-Meier分析表明,miRNA-497低表达组平均生存期明显低于高表达组(19.0个月vs 33.3个月),1年、3年、5年累计生存率也较miRNA-497高表达组明显降低(55.0%vs 71.4%、20.0%vs 42.9%、15.0%vs 37.5%,P<0.05)。结论:miRNA-497在HCC组织中的低表达提示预后不良。

血浆microRNA-497表达水平与急性心肌梗死的相关性

目的探讨血浆microRNA-497表达水平与急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)的相关性。方法选取2015年1月-2016年9月于河北省涿州市医院就诊的疑似AMI患者,根据AMI诊断标准将患者分为AMI组与非AMI组;以同期健康体检者作为对照组。荧光定量反转录-聚合酶链反应(reverse transcriptase-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测血浆microRNA-497含量,电化学发光法检测心肌肌钙蛋白Ⅰ(cardiac troponinⅠ,cTnⅠ)及肌酸激酶同工酶(creatine kinase isoenzyme,CK-MB)水平。应用受试者工作特征曲线分析血浆microRNA-497、cTnⅠ及CK-MB对AMI的诊断价值,多元Logistic回归模型分析血浆microRNA-497与AMI的关系。Spearman秩相关分析AMI患者血浆microRNA-497水平与cTnⅠ、CK-MB的相关性。结果 AMI组血浆microRNA-497、CTnⅠ及CK-MB水平[3.41±0.94;2.94(0.57,10.25);37.48(18.75,101.28)]较非AMI组[1.35±0.63;0.06(0.01,0.21);16.73(13.46,19.57)]和对照组[0.64±0.12;0.00(0.00,0.00);9.25(8.36,9.92)]明显升高(P均<0.05)。血浆microRNA-497、cTnⅠ及CK-MB诊断AMI的曲线下面积及95%CI分别为0.895(0.831~0.960)、0.902(0.839~0.968)、0.784(0.726~0.843),当microRNA-497取值为1.58时,其诊断AMI的敏感度和特异度最好,分别为85.0%和94.2%。Logistic回归分析显示,血浆microRNA-497及cTnⅠ为AMI的独立危险因素(OR=2.637,95%CI:1.574~5.327;OR=2.152,95%CI:1.126~4.975;P均<0.05)。AMI患者血浆microRNA-497与cTnⅠ、CK-MB均呈正相关(r=0.673、0.328,P均<0.01)。结论血浆microRNA-497可作为早期诊断AMI的生物学指标,其诊断效能与cTnⅠ相当,二者联合应用有望提高AMI早期诊断的准确性。

结直肠癌患者血清microRNA-335、microRNA-497表达与临床病理特征及预后的关系

目的探究结直肠癌患者血清microRNA-335(miR-335)、microRNA-497(miR-497)表达与临床病理特征及预后的关系。方法选取2013年2月—2014年9月于邯郸市中心医院诊治的99例结直肠癌患者作为结直肠癌组,选择同期在该院体检的99例健康者作为健康组。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测两组的血清miR-335、miR-497表达水平,比较不同临床病理特征患者血清miR-335、miR-497的表达水平,采用Kaplan-Meier法估计不同血清miR-335、miR-497表达水平患者的生存率。结果结直肠癌组患者血清miR-335、miR-497表达水平低于健康组(P <0.05);浸润深度T1、T2,TNM分期Ⅰ、Ⅱ,及无淋巴结转移患者血清miR-497表达水平高于浸润深度T3、T4,TNM分期Ⅲ,及有淋巴结转移患者(P <0.05);TNM分期Ⅰ、Ⅱ和中高分化患者血清miR-355表达水平高于TNM分期Ⅲ和低分化患者(P <0.05);血清miR-335和miR-497高表达的结直肠癌患者5年生存率分别高于血清miR-497和miR-335低表达患者(P <0.05)。结论结直肠癌患者血清miR-335、miR-497表达水平下降与结直肠癌的发生、发展,病情恶化及预后不良有关。

microRNA-497在麝香保心丸调控急性心肌梗死心室重构中作用机制的实验研究

目的探讨microRNA-497(miRNA-497)在麝香保心丸调控急性心肌梗死心室重构中的作用机制。方法将75只SD大鼠随机分为A组、B组、C组、D组、E组,每组15只。A组为空白对照组,B组、C组、D组、E组采用结扎左冠状动脉前降支法建立急性心肌梗死模型。C组给予miRNA-497激动剂和麝香保心丸干预,D组给予miRNA-497抑制剂和麝香保心丸干预,E组给予麝香保心丸干预,B组给予等量生理盐水。6周后,比较各组大鼠一般情况、心功能指标[左室收缩末压(LVESP)、左室内压最大上升速率(LV+dp/dtmax)、左室舒张末压(LVEDP)、左室内压最大下降速率(LV-dp/dtmax)]、急性心肌梗死面积、心肌细胞凋亡率、心肌组织形态学变化、miRNA-497表达量。结果与B组比较,C组大鼠一般情况及心肌组织病理学改变无明显改善,D组、E组大鼠一般情况及心肌组织病理学改变有改善,且D组较E组改善更明显。D组、E组大鼠LVEDP、急性心肌梗死面积、心肌细胞凋亡率明显低于B组、C组(P<0.05),且D组大鼠LVEDP、急性心肌梗死面积、心肌细胞凋亡率明显低于E组(P<0.05);D组、E组大鼠LV+dp/dtmax、LVESP、LV-dp/dtmax明显高于B组、C组(P<0.05),且D组大鼠LV+dp/dtmax、LVESP、LV-dp/dtmax明显高于E组(P<0.05);C组大鼠LVEDP、LV+dp/dtmax、LVESP、LV-dp/dtmax、急性心肌梗死面积、心肌细胞凋亡率与B组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。B组、C组、D组、E组大鼠心肌组织中miRNA-497表达量明显高于A组(P<0.05);C组大鼠心肌组织中miRNA-497表达量明显高于B组(P<0.05);D组、E组大鼠心肌组织中miRNA-497表达量明显低于B组、C组(P<0.05),D组大鼠心肌组织中miRNA-497表达量低于E组(P<0.05)。结论miRNA-497是麝香保心丸改善急性心肌梗死后心室重构中的关键分子,这为急性心肌梗死后心室重构提供了新的研究方向。

microRNA-497在胰腺癌患者血清中定量检测及其临床意义

[目的]定量检测胰腺癌(pancreatic cancer,PC)患者血清microRNA-497(miR-497)表达量,探讨其临床意义。[方法]检测70例PC患者(PC组)治疗前、30位健康者(正常对照组)血清miR-497表达量以及血清CA199、CEA含量;随访PC患者治疗后预后2年;分析血清miR-497表达量的临床价值。[结果]PC组治疗前血清miR-497表达量显著低于正常对照组(P<0.01);血清miR-497对PC的诊断敏感度显著高于血清CA199(91.0%∶76.6%,χ2=7.637,P<0.01);两者诊断准确度比较无明显差异(P>0.05),三者联合检测可提高诊断敏感性和特异性。治疗前血清miR-497表达量与PC浸润深度、淋巴结转移及是否远处转移呈负相关(均P<0.01)。治疗前血清miR-497低表达组其治疗后1年、2年生存率显著低于高表达组(P<0.05)。Cox多因素分析显示治疗前血清miR-497表达量是影响PC预后的独立高危因素。[结论]血清miR-497低表达与PC侵袭转移、不良预后密切相关,对其诊断有一定价值,可成为PC临床辅助诊断、预后评价的指标。

MicroRNA-195/497对香烟烟雾提取物诱导的人支气管上皮细胞中TGF-β表达的影响

目的探讨microRNA-195/497(miR-195/497)在香烟烟雾提取物(CSE)诱导的人支气管上皮细胞中影响转化生长因子-β(TGF-β)表达的作用机制。方法用3%CSE诱导BEAS-2B细胞模拟慢性阻塞性肺疾病(COPD)的发病机制,实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-195、miR-497、SMAD7及TGF-β基因表达。双荧光素酶报告实验验证miR-195、miR-497与SMAD7的靶向关系,将miR-195mimic和miR-497 mimic转染至3%CSE处理的细胞中,qRT-PCR检测SMAD7的表达。将miR-195 mimic、miR-497 mimic和si-SMAD7转染至3%CSE处理的细胞中,qRT-PCR检测miR-195、miR-497、SMAD7、TGF-β的基因表达,Western blotting检测SMAD7、TGF-β的蛋白表达。结果3%CSE组miR-195、miR-497 mRNA相对表达量低于正常细胞组(P<0.05),SMAD7、TGF-βmRNA相对表达量高于正常细胞组(P<0.05)。miR-195 mimic组Wt-SMAD7 mRNA相对表达量低于mimic NC组(P<0.05)。miR-195 mimic组与mimic NC组Wt-SMAD7 mRNA相对表达量比较,差异无统计学意义(P>0.05)。miR-497 mimic组WtSMAD7 mRNA相对表达量低于mimic NC组(P<0.05)。miR-497 mimic组与mimic NC组Mut-SMAD7mRNA相对表达量比较,差异无统计学意义(P>0.05)。miR-195 mimic组SMAD7 mRNA相对表达量低于mimic NC组(P<0.05)。miR-497 mimic组SMAD7 mRNA相对表达量低于mimic NC组(P<0.05)。3%CSE组细胞miR-195和miR-497相对表达量较Control组下降(P<0.05),SMAD7及TGF-β蛋白相对表达量升高(P<0.05);miR-195 mimic+3%CSE组细胞miR-195相对表达量较3%CSE组升高(P<0.05),SMAD7、TGF-β下降(P<0.05),而miR-497相对表达量无明显差异(P>0.05);miR-497 mimic+3%CSE组细胞miR-497相对表达量较3%CSE组升高(P<0.05),SMAD7、TGF-β下降(P<0.05),而miR-195相对表达量无明显差异(P>0.05);si-SMAD7+3%CSE组SMAD7、TGF-β蛋白相对表达量较3%CSE组下降(P<0.05),而miR-195、miR-497无明显差异(P>0.05)。3%CSE组SMAD7、TGF-β蛋白相对表达量较Control组升高(P<0.05),miR-195 mimic+3%CSE组、miR-497 mimic+3%CSE组、si-SMAD7+3%CSE组较3%CSE组下降(P<0.05)。结论miR-195/497可通过调控SMAD7的表达影响CSE诱导的人支气管上皮细胞中TGF-β表达。

胶质瘤组织lncRNA SNHG25、miR-497-5p表达与临床特征及预后的关系研究

目的探讨胶质瘤组织长链非编码RNA(lncRNA)小核仁RNA宿主基因(SNHG)25、微小RNA(miR)-497-5p表达与临床特征及预后的关系。方法选择2019年1月至2020年1月该院收治的157例胶质瘤患者为胶质瘤组,同期该院100例因颅脑损伤接受手术治疗的患者为对照组。分别取术中切除的胶质瘤组织和正常脑组织检测lncRNA SNHG25、miR-497-5p表达水平,术后随访3年。分析lncRNA SNHG25表达水平与miR-497-5p的相关性,lncRNA SNHG25、miR-497-5p表达水平与患者临床特征和预后的关系。结果与对照组比较,胶质瘤组lncRNA SNHG25表达水平升高(P<0.05),miR-497-5p表达水平降低(P<0.05)。与肿瘤最大径<4 cm、世界卫生组织(WHO)中枢神经系统肿瘤分级Ⅰ~Ⅱ级比较,肿瘤最大径≥4 cm、WHO中枢神经系统肿瘤分级Ⅲ~Ⅳ级的胶质瘤组织中lncRNA SNHG25表达水平升高,miR-497-5p表达水平降低(P<0.05)。胶质瘤患者的lncRNA SNHG25表达水平与miR-497-5p呈负相关(r=-0.370,P<0.05)。lncRNA SNHG25高表达组累积生存率低于lncRNA SNHG25低表达组(P<0.05),miR-497-5p低表达组累积生存率低于miR-497-5p高表达组(P<0.05)。WHO中枢神经系统肿瘤分级Ⅲ~Ⅳ级、lncRNA SNHG25高表达是胶质瘤患者预后不良的危险因素(P<0.05),miR-497-5p高表达则是保护因素(P<0.05)。结论胶质瘤组织中lncRNA SNHG25表达水平升高,miR-497-5p表达水平降低,且与肿瘤最大径增大、WHO中枢神经系统肿瘤分级高有关,可导致胶质瘤患者不良预后。

MicroRNA-196b、IGFBP-3在非小细胞肺癌组织中的表达及与预后关系

目的 探究microRNA-196b(miR-196b)、胰岛素样生长因子结合蛋白-3(IGFBP-3)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及与预后的关系。方法 选取2020年4月—2022年4月在无锡市第二人民医院手术治疗的NSCLC患者78例。收集患者的病历资料,采用实时荧光定量聚合酶链反应检测癌组织、癌旁组织中miR-196b、IGFBP-3的表达。所有患者随访12个月,根据预后结局分为进展组、稳定组。筛查NSCLC患者预后的影响因素,评估组织中miR-196b、IGFBP-3表达对NSCLC患者预后的预测效能。分析癌组织中miR-196b、IGFBP-3不同表达患者生存曲线的差异。结果 进展组临床分期Ⅲ期占比、术前淋巴结转移率均高于稳定组(P <0.05)。进展组癌组织miR-196b相对表达量高于稳定组(P <0.05),IGFBP-3阳性表达率低于稳定组(P <0.05)。癌组织miR-196b相对表达量高于癌旁组织(P <0.05),IGFBP-3阳性表达率低于癌旁组织(P <0.05)。多因素逐步Logistic回归分析结果显示:临床分期[O^R=3.684(95%CI:1.259,10.778)]、术前淋巴结转移[O^R=3.557(95%CI:1.216,10.408)]、癌组织miR-196b表达[O^R=3.979(95%CI:1.359,11.641)]是NSCLC患者预后的危险因素(P <0.05),癌组织IGFBP-3表达阳性[O^R=0.220(95%CI:0.075,0.642)]是NSCLC患者预后的保护因素(P <0.05)。癌组织miR-196b、IGFBP-3及联合预测NSCLC患者预后的敏感性分别为66.25%(95%CI:0.512,0.797)、60.00%(95%CI:0.496,0.781)、87.50%(95%CI:0.725,0.963),特异性分别为69.74%(95%CI:0.534,0.825)、76.32%(95%CI:0.603,0.892)、72.37%(95%CI:0.576,0.861),曲线下面积分别为0.703、0.680、0.805。miR-196b低表达组生存情况优于高表达组(P <0.05)。IGFBP-3阳性表达组生存情况优于阴性表达组(P <0.05)。结论 NSCLC患者癌组织miR-196b、IGFBP-3表达与预后相关,且联合预测NSCLC患者预后效能良好。

补骨脂异黄酮通过miR-497-5p调控对瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖和迁移的机制研究

目的:探讨补骨脂异黄酮通过调控miR-497-5p抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖和迁移的机制研究。方法:体外培养瘢痕疙瘩成纤维细胞,使用浓度为0、9、18、36μg/ml补骨脂异黄酮处理细胞,记为Con组、低剂量组、中剂量组、高剂量组;按照脂质体法miR-NC、miR-497-5p转染细胞,记为miR-NC组、miR-497-5p组;按照脂质体法anti-miR-NC、anti-miR-497-5p转染细胞后,使用36μg/ml补骨脂异黄酮处理细胞,记为高剂量组+anti-miR-NC组、高剂量组+anti-miR-497-5p组。CCK8、克隆实验检测细胞增殖;伤口愈合实验检测细胞迁移;Western blot实验检测Cyclin D1、MMP2、MMP9蛋白表达水平;qRT-PCR实验检测miR-497-5p表达水平。结果:补骨脂异黄酮呈剂量关系降低瘢痕疙瘩成纤维细胞活性、迁移率(P<0.05),减少克隆细胞数(P<0.05),降低Cyclin D1、MMP2、MMP9蛋白表达水平(P<0.05),增加miR-497-5p表达水平。与miR-NC组相比,miR-497-5p组细胞活性、迁移率降低(P<0.05),克隆细胞数减少(P<0.05),Cyclin D1、MMP2、MMP9蛋白表达水平降低(P<0.05)。抑制miR-497-5p可以逆转补骨脂异黄酮对瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖、迁移的影响。结论:补骨脂异黄酮可能通过上调miR-497-5p抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖和迁移。

血清microRNA-155、microRNA-21、趋化素、瘦素与糖尿病肥胖患者胰岛素抵抗的相关性

目的 探讨糖尿病肥胖患者血清microRNA-155(miR-155)、microRNA-21(miR-21)、趋化素、瘦素水平与胰岛素抵抗(IR)的相关性。方法 选取2022年1月—2023年4月山东中医药大学第二附属医院收治的138例2型糖尿病(T2DM)患者为研究对象,其中肥胖患者73例(肥胖组),非肥胖患者65例(非肥胖组)。肥胖组中有IR 45例(IR组),无IR 28例(非IR组)。收集患者一般资料,包括性别、体质量指数(BMI)、年龄、颈围(NC)、腰围(WC)、空腹血糖(FPG)、甘油三酯(TG)、空腹胰岛素(FINS)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、miR-155、miR-21、趋化素、瘦素、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)水平;通过多因素逐步Logistic回归模型分析T2DM肥胖患者发生IR的危险因素;绘制受试者工作特征(ROC)曲线,分析miR-155、miR-21、趋化素、瘦素诊断T2DM肥胖患者IR的效能;Pearson法分析miR-155、miR-21、趋化素、瘦素与HOMA-IR的相关性。结果 肥胖组miR-155相对表达量低于非肥胖组(P <0.05),miR-21、趋化素、瘦素、HOMA-IR高于非肥胖组(P <0.05)。IR组miR-155相对表达量低于非IR组(P <0.05),NC、WC、miR-21、趋化素、瘦素水平高于非IR组(P<0.05)。多因素逐步Logistic回归分析结果显示:NC [O^R=1.416(95%CI:1.038,1.932)]、WC [O^R=1.227(95%CI:1.049,1.435)]、miR-155 [O^R=1.763(95%CI:1.205,2.579)]、miR-21[O^R=1.932(95%CI:1.356,2.753)]、趋化素[O^R=2.074(95%CI:1.492,2.883)]、瘦素[O^R=1.628(95%CI:1.246,2.127)]是T2DM肥胖患者发生IR的危险因素(P <0.05)。ROC曲线分析结果显示,miR-155、miR-21、趋化素、瘦素诊断T2DM肥胖患者IR的曲线下面积分别为0.865、0.909、0.874和0.871;敏感性为77.8%(95%CI:0.614,0.825)、86.7%(95%CI:0.792,0.917)、95.6%(95%CI:0.713,0.965)和80.0%(95%CI:0.692,0.917);特异性为85.7%(95%CI:0.647,0.903)、82.1%(95%CI:0.732,0.914)、75.0%(95%CI:0.675,0.928)和89.3%(95%CI:0.656,0.944)。miR-155与HOMA-IR呈负相关(r=-0.573,P=0.000),miR-21、趋化素、瘦素与HOMA-IR均呈正相关(r=0.531、0.558和0.568,均P=0.000)。结论 T2DM肥胖患者中IR较多,且miR-155、miR-21、趋化素、瘦素是T2DM肥胖患者发生IR的危险因素。

血清microRNA-21、microRNA-193a-3p表达与结直肠癌患者手术预后的关系

目的探究血清microRNA-21(miR-21)、microRNA-193a-3p(miR-193a-3p)水平与结直肠癌患者手术预后的关系。方法回顾性分析2020年1月—2022年1月苏州大学附属第一医院收治112例结直肠癌患者的病历资料。患者均接受结直肠癌根治术,术后随访16个月,记录患者的预后生存结局,多因素逐步Logistic回归分析结直肠癌患者手术预后的影响因素,评估血清miR-21、miR-193a-3p对结直肠癌患者预后的预测效能。结果112例结直肠癌患者死亡22例,病死率为19.64%;生存90例,生存率为80.36%。死亡组术前血清miR-21 mRNA相对表达量、临床分期Ⅲ期占比、淋巴结转移率均高于生存组(P<0.05),血清miR-193a-3p m RNA相对表达量低于生存组(P<0.05)。多因素逐步Logistic回归分析结果显示,临床分期Ⅲ期[OR=3.777(95%CI:1.399,10.194)]、淋巴结转移[OR=5.099(95%CI:1.715,15.156)]、miR-21表达升高[OR=4.889(95%CI:1.645,14.533)]、miR-193a-3p表达降低[OR=4.402(95%CI:1.481,13.084)]均是直肠癌患者预后的影响因素(P<0.05)。受试者工作特性曲线分析结果显示,血清miR-21、miR-193a-3p单一及联合预测结直肠癌预后的敏感性分别为69.04%(95%CI:0.487,0.813)、72.73%(95%CI:0.495,0.884)、86.36%(95%CI:0.640,0.964),特异性分别为62.22%(95%CI:0.513,0.720)、68.89%(95%CI:0.581,0.780)、90.00%(95%CI:0.814,0.950),曲线下面积分别为0.782、0.731和0.901。结论结直肠癌患者术前miR-21、miR-193a-3p表达与术后预后密切相关,且在结直肠癌患者的预后结局中表现出良好的预测效能。

MiR-497通过下调XIAP诱导肝细胞癌LM3的凋亡

目的MiR-497在细胞行为中扮演着重要的角色,MiR-497可以与X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)3’-UTR相结合,共同在肝癌细胞的增殖和凋亡中起重要的作用。本研究探讨并验证MiR-497和XIAP在影响肝癌细胞增殖和细胞凋亡中的作用。方法选取2017年12月至2023年3月内蒙古医科大学附属医院75例原发性肝癌的患者作为研究对象。通过检测肝脏肿瘤组织和癌旁组织标本中MiR-497和XIAP的表达,将正常肝组织L02细胞与肝细胞癌组织LM3细胞中的MiR-497和XIAP水平进行比较。Ki-67蛋白表达及细胞凋亡通过流式细胞仪进行检测。MiR-497和XIAP之间的目标关系通过双荧光素酶报告基因检测进行验证分析。肝细胞癌组织中的LM3细胞可以被分为mimic NC,miR-97 mimic,si-NC,si-XIAP和miR-497 mimic+si-XIAP group。恶性细胞生长能力通过集落形成进行了评价。结果在肝细胞癌组织与癌旁组织对比中发现,MiR-497明显下调而XIAP的表达却明显增强。在肝癌组织中LM3细胞与正常肝组织中L02细胞相比中发现MiR-497下降而XIAP是升高的。肝癌组织中LM3细胞表现出细胞增殖增强和细胞凋亡减少的特性,并且在肝癌组织LM3细胞中MiR-497可以靶向调控XIAP基因。MiR-497显著的上调和/或XIAP显著降低都弱化了肝癌组织中LM3细胞的增殖和恶性生长,促使Caspase-3和Caspase-7酶活性升高,并促进细胞凋亡。结论在肝细胞癌组织与癌旁组织相比较中,MiR-497异常下调,而XIAP却是增强的。MiR-497也许可以通过靶向抑制XIAP的表达拮抗在Caspase酶活性中XIAP的抑制作用,从而促进肝癌细胞凋亡。

清肾颗粒对非透析慢性肾脏病湿热证患者血清microRNA-21、Wnt4及β-catenin的影响

目的观察清肾颗粒对非透析慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)湿热证患者血microRNA-21、Wnt4及β-catenin的影响,探讨其保护肾功能、改善临床症状的作用机制。方法选取66例符合纳入标准的CKD湿热证患者,最终完成64例,对照组和观察组各32例。对照组采用CKD常规基础治疗,观察组在对照组治疗基础上加用清肾颗粒口服,疗程均为12周。观察和比较两组患者治疗前后中医症状积分及证候疗效,肾功能指标[血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、肾小球滤过率(estimated glomerular filtration rate,eGFR)、血清肌酐(serum creatinine,SCr)],微炎症、营养指标[超敏C反应蛋白(hypersensitive C-reactive protein,hs-CRP)、白蛋白(albumin,Alb)、前白蛋白(prealbumin,PAB)],血清microRNA-21、Wnt4及β-catenin水平。结果两组患者治疗后中医症状积分较治疗前均显著降低(P<0.05),且观察组降低程度显著大于对照组(P<0.05);两组患者临床疗效比较,差异无统计学意义(P>0.05)。观察组BUN、SCr水平,eGFR较治疗前显著改善(P<0.05),且改善程度显著优于对照组(P<0.05);与治疗前比较,两组患者治疗后血清hs-CRP水平均显著降低(P<0.05),Alb、PAB水平均显著升高(P<0.05),且观察组血清hs-CRP、Alb、PAB水平改善程度优于对照组(P<0.05);治疗前两组患者血清microRNA-21、Wnt4、β-catenin水平均显著高于正常组(P<0.05),观察组患者治疗后血清microRNA-21、Wnt4、β-catenin水平均显著降低(P<0.05),且降低程度显著大于对照组(P<0.05)。结论清肾颗粒能够改善CKD湿热证患者肾功能及微炎症、营养不良状态,减轻临床症状,其机制可能与降低microRNA-21表达水平,靶向抑制Wnt/β-catenin信号通路有关。

血管内超声参数联合microRNA-206评估非ST段抬高型急性心肌梗死患者病变严重程度及预后的价值

目的探讨血管内超声(IVUS)参数联合microRNA-206(miR-206)评估非ST段抬高型急性心肌梗死(NSTEAMI)患者病变严重程度及预后的价值。方法选取2019年3月-2021年4月河北北方学院附属第一医院收治的105例NSTEAMI患者,所有患者行经皮冠状动脉介入术(PCI),根据病变严重程度将患者分为单支病变组(55例)、双支病变组(32例)、多支病变组(18例)。对比不同病变程度患者IVUS参数、血清miR-206,分析IVUS参数、血清miR-206与NSTEAMI患者病变严重程度的相关性。随访2年,根据是否发生MACE分为发生组与非发生组。对比发生组与非发生组的临床资料,采用多因素逐步Logistic回归模型分析NSTEAMI患者发生主要不良心脏事件(MACE)的影响因素。绘制受试者工作特征(ROC)曲线,评估IVUS参数、血清miR-206预测NSTEAMI患者发生MACE的效能。结果多支病变组斑块负荷、斑块面积、重构指数、偏心指数、血清miR-206相对表达量均高于单支、双支组(P<0.05),且双支病变组均高于单支病变组(P<0.05)。Pearson相关性分析结果显示,血管外弹力膜面积与NSTEAMI患者病变严重程度无相关性(r=0.271,P=0.325);斑块负荷、斑块面积、重构指数、偏心指数、血清miR-206与NSTEAMI患者病变严重程度呈正相关(r=0.416、0.382、0.423、0.507和0.394,均P=0.000)。随访2年,失访2例,剩余103例患者中32例(31.07%)发生MACE,71例(68.93%)未发生MACE。发生组多支病变、血运未重建占比、斑块负荷、斑块面积、重构指数、偏心指数、血清miR-206相对表达量均高于非发生组(P<0.05),淋巴细胞计数、血红蛋白水平均低于非发生组(P<0.05)。多因素逐步Logistic回归分析结果显示:多支病变[OR=3.466(95%CI:1.523,7.884)]、血运未重建[OR=2.776(95%CI:1.220,6.315)]、斑块负荷[OR=3.155(95%CI:1.387,7.177)]、重构指数[OR=3.842(95%CI:1.689,8.740)]、偏心指数[OR=4.166(95%CI:1.831,9.477)]、血清miR-206[OR=4.500(95%CI:1.978,10.236)]为NSTEAMI患者发生MACE的危险因素(P<0.05)。ROC曲线结果显示,斑块负荷、重构指数、偏心指数、血清miR-206四者联合预测NSTEAMI患者发生MACE的敏感性为88.52%(95%CI:0.674,0.957),特异性为92.86%(95%CI:0.713,0.968),曲线下面积为0.900(95%CI:0.812,0.953)。结论IVUS参数(斑块负荷、重构指数、偏心指数)、血清miR-206在评估NSTEAMI患者病变严重程度与预后中具有重要价值,且四者联合具有更高的预测价值。

早发型子痫前期患者血清microRNA-26b表达及其与胎盘早剥发生的关系

目的分析早发型子痫前期患者血清microRNA-26b(miR-26b)表达及其与胎盘早剥发生的关系。方法选取2019年8月至2022年8月荆州市中心医院收治的102例早发型子痫前期患者作为研究对象。检测所有患者miR-26b相对表达量,随访至患者分娩,根据胎盘早剥发生情况分成胎盘早剥组与非胎盘早剥组,分析早发型子痫前期患者血清miR-26b表达及其与胎盘早剥发生的关系。结果随访至产妇分娩,102例早发型子痫前期患者胎盘早剥发生率为17.65%(18/102)。胎盘早剥组血清miR-26b相对表达量高于非胎盘早剥组(P<0.05)。根据确诊疾病时血清miR-26b四分位数将患者分为Q1组(n=25)、Q2组(n=27)、Q3组(n=24)及Q4组(n=26),Q4组胎盘早剥发生率高于Q1组、Q2组及Q3组(P<0.05)。经点二列相关性分析检验,血清miR-26b与早发型子痫前期患者胎盘早剥发生率呈正相关(r=0.458,P<0.05)。绘制受试者工作特征(ROC)曲线,血清miR-26b对早发型子痫前期患者胎盘早剥具有中等预测价值,且当血清miR-26b相对表达量为2.465时,可获得最佳预测价值。结论早发型子痫前期患者血清miR-26b与胎盘早剥发生有关,检测血清miR-26b相对表达量能为预测胎盘早剥发生提供重要价值。

化瘀杀胚汤联合甲氨蝶呤治疗异位妊娠的疗效及对TGF-β/Smad2/3蛋白水平和microRNA-30d-5p表达量的影响

【目的】探讨化瘀杀胚汤(由丹参、赤芍、桃仁、蜈蚣、紫草、天花粉、三七等中药组成)联合甲氨蝶呤治疗异位妊娠疗效及对患者TGF-β/Smad2/3蛋白水平和microRNA-30d-5p表达量的影响。【方法】将104例异位妊娠患者随机分为观察组和对照组,每组各52例。对照组给予甲氨蝶呤联合米非司酮治疗,观察组在对照组的基础上加用化瘀杀胚汤治疗,连续用药3 d并随访观察1个月。比较2组患者保守治疗成功率、血β人绒毛膜促性腺激素(β-HCG)水平恢复正常时间以及异位妊娠包块吸收时间、治疗后输卵管完全通畅率与不通畅率,观察2组保守治疗成功患者治疗前后血清TGF-β/Smad2/3蛋白水平和microRNA-30d-5p相对表达量的变化情况。【结果】(1)观察组的保守治疗成功率为94.23%(49/52),明显高于对照组的71.15%(37/52),差异有统计学意义(P<0.05)。(2)与对照组比较,观察组的血β-HCG恢复正常时间及包块吸收时间均明显缩短,差异均有统计学意义(P<0.01)。(3)观察组治疗后的输卵管完全通畅率为55.77%(29/52),明显高于对照组的21.15%(11/52);不通畅率为19.23%(10/52),明显低于对照组的59.62%(31/52),差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。(4)与治疗前比较,2组保守治疗成功患者治疗结束1个月后的TGF-β/Smad2/3蛋白水平和microRNA-30d-5p相对表达量均明显降低(P<0.05或P<0.01);与对照组比较,观察组治疗结束1个月后的TGF-β/Smad2/3蛋白水平和microRNA-30d-5p相对表达量均明显降低,差异均有统计学意义(P<0.01)。(5)2组患者的不良反应均以胃肠道不适为主,观察组的不良反应发生率为25.00%(13/52),明显低于对照组的46.15%(24/52),组间比较,差异有统计学意义(P<0.05)。【结论】化瘀杀胚汤联合甲氨蝶呤治疗异位妊娠,可有效提高药物保守治疗的成功率,有助于包块的吸收以及输卵管通畅,能有效降低患者的TGF-β/Smad2/3蛋白水平及microRNA-30d-5p的相对表达量,且药物安全性较高。