一株红霉素降解菌Penicillium sp.ERY-1的筛选、降解特性及其应用研究

在渔业养殖过程中,使用绿色环保、高效低廉的微生物菌剂解决渔业废水中的抗生素残留,对保障水产品质量安全和生态环境有重要意义。为获得可应用于渔业养殖废水的红霉素降解菌剂,采用梯度富集驯化的方法从养殖污染底泥样品中分离筛选红霉素降解菌株,通过形态学特征和ITS(InternalTranscribedSpaces)序列分析进行微生物分类鉴定;采用单因素试验确定最适降解温度和pH;利用超高效液相色谱串联高分辨率电喷雾电离质谱仪鉴定降解产物,并据此推测降解途径,通过斑马鱼攻毒试验初步评估菌株的生物安全性;优化菌株固态发酵参数,制备红霉素降解菌剂,并初探降解菌剂对红霉素污染的养殖废水的修复效果。结果显示,获得一株红霉素降解菌株ERY-1并鉴定其为青霉菌属(Penicilliumsp.);菌株ERY-1在温度20-35℃、pH 5-7的环境中具有较好的降解率,在该条件下,菌株对质量浓度为1.0 mg·L^(-1)的红霉素的降解率在97%以上;鉴定了5种降解中间产物,并据此推测菌株ERY-1通过脱水、脱红霉支糖和开环逐渐使红霉素失去抗菌活性;斑马鱼攻毒试验初步表明菌株ERY-1对水生生物具有较高的安全性;以稻壳:麦麸:玉米粉质量比(m꞉m꞉m)为1꞉1꞉1作为固态培养基配方,初始料水比为1g:1L,接种量为0.75%,在温度为25℃,发酵13d后获得产孢量约9.14×10^(9)cfu·g^(-1)的降解菌剂。将制备的降解菌剂投撒到有红霉素残留的养殖废水中,3d后水中的红霉素未达到方法的检出质量浓度(0.2ng·L^(-1))。结果表明,菌株ERY-1可有效的解决渔业养殖废水中的红霉素残留,由其制备的降解菌剂具有良好的应用和推广价值。

拟除虫菊酯类农药残留降解菌的筛选及其生理特性研究

从活性污泥的富集培养物中分离得到可降解几种拟除虫菊酯农药的菌株qw5,初步鉴定qw5为地衣芽孢杆菌 (Bacilliuslicheniformis)。菌株qw5在通气、pH7～ 8、温度 3 0℃左右的环境条件下生长较好。培养 5天 ,菌株qw5对氰戊菊酯、氯氰菊酯、溴氰菊酯的降解率分别为 5 3 .8%、41 .2 %和 61 .7%。经质谱分析 ,菌株qw5降解氰戊菊酯产生中间代谢产物 3 -苯氧基苯甲醛。qw5对小白鼠无致病力 ,对几种常用的抗生素敏感。盆钵和小区试验表明 ,菌株qw5对青菜中残留的拟除虫菊酯有明显去除效果。

七叶树皂苷-Ia的人肠内细菌生物转化产物及其抗肿瘤活性研究

目的 :探讨人肠内细菌和短乳杆菌粗酶转化七叶树皂苷 Ia ,阐明转化产物结构 ,研究其抗肿瘤活性。方法 :采用人肠内细菌和短乳杆菌粗酶分别与七叶树皂苷 Ia共温孵方法 ,通过色谱技术分离、纯化转化产物 ,应用波谱技术确定转化产物结构。结果 :七叶树皂苷 Ia可由人肠内细菌和短乳杆菌粗酶转化产生异七叶树皂苷Ia、去酰基七叶树皂苷I、2 1 β O 巴豆酰基原七叶树皂苷元和原七叶树皂苷元。去酰基七叶树皂苷I对小鼠肉瘤S 1 80、肝癌和肺癌细胞的生长具有抑制作用。结论 :七叶树皂苷 Ia是“前药” ,人肠内细菌和短乳杆菌粗酶能够转化七叶树皂苷 Ia;转化产物去酰基七叶树皂苷I有抗肿瘤活性 。

激光针灸配腺内注射双黄连治疗慢性细菌性前列腺炎的临床研究

本文采用激光针灸配腺内注射双黄连（治疗组３５例）与激光针灸配腺内注射先锋Ⅴ号（对照组３３例）治疗慢性细菌性前列腺炎６８例。治疗组治愈率８５．７％，对照组５１．５％，两组比较差鼻非常显著（Ｐ＜０．０１）。治疗后主要症候的改善，治疗组优于对照组（Ｐ＜０．００１），并对患者前列腺体Ｂ超检查、ＥＰＳ的ｐＨ值、血清免疫球蛋白ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＭ、补体Ｃ４等技术指标进行了观察，证明本方法对改善前列腺体的肿胀、形态、ＥｐＳ的ｐＨ值，提高患者自身的免疫机能都有较好的作用。

乙型肝炎病毒相关性肾炎肾组织中HBVDNA的原位检测

目的 :检测HBVDNA在乙型肝炎病毒相关性肾炎肾组织中的分布 ,探讨乙型肝炎病毒相关肾炎的发病机制。方法 :应用针对HBV全基因组的DNA探针进行原位杂交及原位PCR研究 ,对 45例肾炎病人肾组织中的HBVDNA进行检测。结果 :肾组织HBV抗原阳性的 38例标本中 ,肾组织HBVDNA的检出率为 71% (2 7/38) ;其中 ,HBV相关肾炎HBVDNA的阳性率为 73% (19/2 6 ) ,IgA肾病及狼疮肾炎伴HBV抗原沉积病例HBVDNA的阳性率为 6 7% (8/12 )。原位杂交显示HBVDNA以肾小管上皮细胞胞浆分布为主 ;原位PCR方法可使阳性信号增强 ,并可见HBVDNA在部分肾小管细胞胞核、肾小球上皮细胞及系膜细胞的胞核和胞浆以及肾小球基底膜内均有分布。结论 :HBV在肾组织内存在感染及复制 ,其在乙型肝炎病毒相关性肾炎的发病机制中具有重要作用。

微生物脱硫工艺条件的研究

通过对比酸性水溶液、含Fe3 +的酸性水溶液及细菌菌液脱除SO2 的效果 ,研究了Fe3 +浓度、pH值和通气时间变化对脱硫率的影响 .实验表明 :酸性水溶液中SO2 的吸收仅为物理吸收 ;Fe3 +能催化氧化SO2 ,这种催化氧化效果随着Fe3 +浓度的升高、pH值的增大而变得明显 (pH值 2 0、Fe3 +1 5 g/L时 ,通气时间近 1 70min ,脱硫率仍高达 90 % ) ;细菌菌液脱硫的效果同样受Fe3 +浓度、pH值的影响 ;氧化亚铁硫杆菌不仅具有氧化Fe2 +的能力 ,还具有氧化S(Ⅳ )的能力 ,在Fe3 +浓度 1 5g/L ,pH值 1 5时效果最为明显 .

玉米秸青贮与黄贮及苜蓿干草的体外动态消化研究

采用产气量法测定了玉米秸青贮、玉米秸黄贮和苜蓿干草的瘤胃微生物体外动态消化参数。将 3种饲料样品及其分离出的相应的中性洗涤纤维 (NDF)同时进行 72h体外发酵 ,并测定不同时间点的产气量。中性洗涤可溶物 (NDS)的产气量可由饲料样品与其相应的NDF的产气量之间的差值计算得到。结果表明 ,3种饲料的 72h累积产气量没有显著性差异 ,但 3种饲料相应的NDF和NDS部分对产气量的贡献不同 (P <0 .0 5 )。其产气量曲线变化趋势受饲料中NDS和NDF的含量及消化率的影响。 3种饲料经 72h发酵后对瘤胃液的pH值没有显著影响 ,但对发酵终产物挥发性脂肪酸 (VFA)的摩尔百分比有影响 (P <0 .0 5 )。

酵母相马尔尼菲青霉菌体外抗真菌药敏试验研究

目的 用 Ｅ-test法测定马尔尼菲青霉菌（penicillium marneffei,PM)酵母相的药物敏感性，指导临床合理用药。方法 采用Ｍ２７－ｐ方案中的Ｅ-test法测定６株ＰＭ的酵母相（ｙeast）对伊曲康唑、酮康唑、氟康唑、５－氟胞嘧啶、二性霉素Ｂ的ＭＩＣ值。结果 伊曲康唑ＭＩＣ值范围０．００２～０．016μg/ml，无耐药株；酮康唑ＭＩＣ值范围０．０１６～０．１６０μg/ml，耐药株１株；５－氟胞嘧啶ＭＩＣ值范围０．０３２～０．３８０ μｇ／ml，耐药株１株；氟康唑ＭＩＣ值范围１．５００～６．０００μｇ／ml，无耐药株；二性霉素 Ｂ ＭＩＣ值范围 ０．０４７～１．５００μｇ/ml，耐药株２株。结论 伊曲康唑敏感性最强，其次是酮康唑和 ５－氟胞嘧啶，二性霉素Ｂ敏感性相对较弱，酵母型ＰＭ对５种抗真菌药物敏感性存在差异。

复合微生态制剂对中国对虾养殖池塘水质和生长性能的影响

本试验运用复合微生态制剂PondPlus于中国对虾的池塘养殖中,旨在探明该复合微生态制剂对水质和中国对虾后期生长性能的影响。结果表明,该微生态制剂可以使水体中的氨氮含量维持在一个相对稳定的状态。试验组的亚硝酸盐含量(0.03±0.01)mg/L极显著低于对照组(0.06±0.01)mg/L(P<0.01),试验组硫化氢的含量为(0.14±0.05)mg/L,而对照组为(0.21±0.07)mg/L,二者差异显著(P<0.05)。说明该制剂对降低水中的硫化氢起到显著作用。生长性能显示,平均生长速度试验组为0.15g/d,对照组为0.12g/d,t检验结果显示,二者差异极显著(P<0.01),说明PondPlus微生态制剂对中国对虾生长具有明显的促进作用。

幽门螺杆菌与胃炎活动性关系的病理观察

目的:探讨胃癌高危人群幽门螺杆菌(Helicobacterpylori,Hp)与胃炎活动性的关系。方法:对胃癌高发区成年人群(533人)做内镜、快速尿素酶试验及胃粘膜活检组织学检查,Hp以组织学WS染色检查为标准,数据结果均做χ2检验。结果:(1)人群Hp的检出率为64.54%,活动性胃炎的检出率为69.42%。(2)活动性胃炎中Hp的检出率为92.43%。(3)Hp阳性组活动性胃炎的检出率为99.42%,明显高于Hp阴性组。(4)胃窦部及体小弯活动性胃炎的检出率高于胃底部;胃窦部高于体小弯。(5)Hp阳性者各活检部位的活动性胃炎组织中Hp的检出率均高。(6)Hp根除后活动性胃炎的检出率明显下降(5.77%),前后比较差异有极显著性。结论:(1)Hp与胃炎活动性密切相关。(2)Hp的检出提示胃内有活动性炎症的存在。

HBeAg阳性母亲流产胎儿肝及肝外脏器HBV标志的检测

应用免疫金银染色法和原位核酸杂交技术同步检测9例HBsAg和HBeAg均阳性母亲流产胎儿的肝、胸腺、脾、胰中的HBsAg、HBcAg和HBV-DNA.结果,在肝(5例)、胸腺(1例)、脾(3例)、胰(2例)中测出HBsAg及HBV-DNA.其中2例胎肝细胞并呈HBcAg阳性,但在胸腺、脾、胰中未检出HBcAg.HBsAg分布主要为胞浆型,也见有膜型;HBV-DNA及HBcAg主要分布于胞浆内,偶见于核内.此种分布特点,提示HBV处于复制相.在肝脏中,HBsAg、HBcAg及HBV-DNA除见于胞浆外,还见于造血灶中造血细胞内.上述结果表明,HBV已感染胎儿肝脏、胸腺、脾脏、胰腺以及肝内造血细胞.

1629株医院感染致病菌的构成及对药物敏感性分析

目的探讨1629株医院感染致病菌的构成及对药物敏感性分析,为治疗感染性疾病提供参考依据。方法回顾性分析1629株临床标本病原菌构成及对的敏感性,采用WalkAway-40全自动细菌鉴定及药敏测试仪以及NC31鉴定板进行了分析。结果共检出细菌1629株,革兰阴性杆菌占59.9%,革兰阳性球菌占40.1%,常见病原菌为铜绿假单胞菌(169株)、大肠埃希菌(165株)、表皮葡萄球菌(161株)、肺炎克雷伯菌(151株)、金黄色葡萄球菌(135株)、阴沟肠杆菌(79株)、鲍曼/溶血不动杆菌(76株)、溶血葡萄球菌(86株)和嗜麦芽窄食单胞菌(57株)。细菌对抗生素均呈不同程度耐药,敏感株所占比例极少,但尚未检出耐万古霉素葡萄球菌和肠球菌,革兰阴性杆菌(除嗜麦芽单胞菌外)中对亚胺培南耐药率最低。结论细菌构成与国内其他地区相近,常见细菌对多种抗生素的敏感性均较低,建议临床根据药敏结果选用抗生素,以期减少耐药菌株产生。

幽门螺杆菌致病因子与胃相关疾病的关系

目的:探讨幽门螺杆菌(Helicobacterpylori,Hp)的空泡形成毒素(vacuolatingcytotoxinA,VacA)、细胞毒素相关蛋白(cytotoxinassociatedproteinA,CagA)及尿素酶A(ureaseA,UreA)以及另外3种Hp特异蛋白(相对分子质量分别为19.5×103,26.5×103和35×103)与消化性溃疡(pepticulcer,PU)及慢性浅表性胃炎(chronicsuperficialgastritis,CSG)的关系,了解这6种蛋白在溃疡的存在及发生中的意义。方法:以山东牟平胃癌高发区人群为调查样本,以WesternBlot的方法,检测病人血清中上述6种Hp特异蛋白的抗体,并以LEICAQ550IW软件系统对抗体表达进行定量测定。同时对胃镜下活检组织标本进行HE染色,以分析组织的病理学特征。全部标本的Hp诊断以WS染色及快速尿素酶试验(RUT)均阳性为金标准。结果:(1)PU组与CSG组中各蛋白抗体的检出率无显著差异(P>0.05)。而定量研究发现,①CSG组26.5×103蛋白的含量高于PU组[(0.057±0.043)vs(十二指肠球部溃疡:0.040±0.032),(胃溃疡:0.023±0.017),P<0.01];②17例CSG病人在一年后发展为十二指肠球部溃疡,他们1996年血清中35×103蛋白抗体的含量高于同期与之配对的17例未发生十二指肠球部溃疡的CSG病人[(0.107±0.026)vs(0.085±0.036),P<0.01]。但胃溃疡组无此差别。(2)26.

毒死蜱降解菌枝孢霉菌的紫外诱变和筛选

通过紫外诱变毒死蜱降解菌枝孢霉菌Cladosporium cladosporioidesHu-01,利用高效液相色谱(HPLC)检测,筛选获得12株突变菌株,其中突变株Hu-01-4和Hu-01-6的降解效果明显高于初始菌株Hu-01.突变株Hu-01-4和Hu-01-6经过加药斜面传种10代,Hu-01-6的降解率比初始菌株提高11.74%,并且保持良好的稳定性.突变菌株Hu-01-6在28℃、pH6.5培养条件下的生长量最大,降解率最高,且均明显高于初始菌株Hu-01.

新生儿柯萨奇B＿3病毒性心肌炎及其病原学检测

１９９２年北京市某医院发生一次新生儿柯萨奇Ｂ３病毒感染流行，发病３５例，合并病毒性心肌炎８例，２例死亡，尸解病理诊断为急性弥漫性非化脓性心肌炎。为明确病原学诊断，用ＥＬＩＳＡ测患儿血中柯萨奇Ｂ病毒抗体ＩｇＭ；用ＰＣＲ测患儿血及心肌组织中的肠道病毒（包括柯萨奇病毒）ＲＮＡ；用大便及咽拭子分泌物进行病毒分离，证实此次流行的病原为柯萨奇病毒Ｂ３。认为ＥＬＩＳＡ、ＰＣＲ方法快速、敏感、特异强，可推广应用。

结石性胆囊胆汁厌氧菌的检测

目的 探讨不同种类厌氧菌在结石性胆囊胆汁中的分布及其临床价值。方法 对 6 7例结石性胆囊胆汁进行厌氧菌培养和自动检测分析。结果 各型厌氧菌的总检出率为 5 5 2 % (37/ 6 7) ,厌氧菌株主要以脆弱类杆菌为主 ,4例为专性厌氧。结论 胆囊结石的形成可能与厌氧菌感染存在联系 ;专性厌氧菌感染具有病史长 ,抗菌治疗效果差的特点。

姜黄素联合木黄酮对人胃癌细胞株SGC-7901的作用

目的 :体外观察姜黄素及木黄酮对人胃癌细胞株 (SGC - 790 1)的联合作用。方法 :采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测药物效应 ,利用中效原理判定两药合用的效果。结果 :两药单独应用时随着药物剂量增加 ,其效应也增加 ,呈剂量 -效应关系 ;两药合用时合用指数CI<1。结论 :姜黄素联合木黄酮对人胃癌细胞株SGC - 790 1的作用是协同作用。

三种不同DNA提取法对血链球菌随意引物PCR鉴定影响的研究

目的 :研究不同 DNA提取法对随意引物聚合酶链反应 (AP- PCR)鉴定血链球菌的影响。方法 :采用 3种DNA提取法 ,利用 2 5碱基引物 5′AAG AGA GGA GCT AGC TCT TCT TGG A3′对不同菌种的血链球菌 DNA进行 AP- PCR。结果 :不同菌种的血链球菌 DNA经 AP- PCR扩增后产生不同的 DNA片段 ;用不同方法提取同种血链球菌 DNA可以得到相同的 DNA片段。结论 :不同

肺结核患者外周血中结核杆菌DNA检测的意义

用ＰＣＲ技术对肺结核患者外周血１０８例和痰９６例中结核杆菌ＤＮＡ进行检测，结果患者外周血和痰中结核杆菌ＤＮＡ阳性率分别为７７．７８％和５７．２９％；其中５２例患者外周血和痰标本配对同时检测总阳性率达９２．３％，提示外周血结核杆菌ＤＮＡ检测可提高肺结核诊断敏感性和阳性检出率，可作为肺结核诊断有用的指标。

慢性胃炎幽门螺杆菌感染与中医舌象证型关系探讨

控制幽门螺杆菌是治疗慢性胃炎的重要环节，本文从中医舌象、证型两个方面探讨了慢性胃炎幽门螺杆菌感染的表现，舌淡白、淡紫，苔厚腻浊滑及脾气虚证、湿热证与幽门螺杆菌感染的关系密切，提示正气亏虚、湿浊痰饮内停、湿热内蕴是幽门螺杆菌感染和生存的条件，为用健脾益气、燥湿化痰、清热利湿治疗慢性胃炎幽门螺杆菌感染提供了依据。