不同细胞来源外泌体miRNAs在胃癌进展及诊断和预后中的作用

背景:肿瘤微环境可通过多种途径参与胃癌的发生发展并促进胃癌化疗耐药,其中外泌体miRNAs介导的肿瘤微环境串话可诱导基质重编程,参与肿瘤异质性,并形成有利于肿瘤增殖、迁移、侵袭、免疫逃逸和化疗耐药的微环境。目的:对近年来外泌体miRNAs在胃癌微环境中的作用机制及其在胃癌诊断及预后评估中的应用进展作一综述。方法:以“Exosomal miRNAs,gastric cancer,angiogenesis,apoptosis,proliferation,migration,autophagy,invasion,immune response,chemotherapy resistance,biomarker”为英文检索词和“外泌体miRNAs,胃癌”为中文检索词分别检索PubMed及中国知网数据库。检索时限为2017-2024年。通过阅读文题及摘要进行初步筛选,排除研究内容相关性差及内容重复的文献,最终纳入77篇文献进行归纳探讨。结果与结论:①外泌体作为细胞间信息交流的重要载体,可携带miRNA等多种信息物质,通过激活靶细胞上的细胞表面受体、与受体细胞质膜融合及内吞作用3种途径实现细胞间信号传递。②外泌体miRNAs通过调节胃癌细胞增殖、凋亡、自噬、血管形成、侵袭转移、免疫应答以及耐药性的形成等多种途径,进而在胃癌进展中发挥着重要作用。③miRNA与靶mRNA相互作用及其调控网络广泛存在于肿瘤发生和人类癌症发展中,不同类型外泌体miRNAs对调控胃癌细胞凋亡具有不同的作用,鉴别不同外泌体miRNAs对胃癌细胞凋亡相关蛋白及通路的影响,合理运用其诱导剂或抑制剂可对胃癌细胞凋亡水平进行调控。④不同细胞来源的外泌体miRNAs通过将M1极化型巨噬细胞诱导为M2型,在肿瘤微环境的建立、血管生成、免疫应答及化疗耐药中扮演重要角色。⑤外泌体miRNAs广泛稳定存在于血液及其他体液中,其在胃癌患者中的差异性表达可作为胃癌患者诊断、预后及治疗依据。目前作为生物标志物研究较多的外泌体miRNAs包括miR-379-5p,miR-590-5p,miR-29s和miR-21等,其中miR-590-5p灵敏度与特异性分别为63.7%和86%,其表达水平与胃癌患者总体生存率、浸润深度密切相关。⑥设计外泌体miRNAs模拟物或抑制物,并利用纳米递送载体(如外泌体、脂质体)将其靶向递送至肿瘤部位以恢复miRNAs正常水平,可能是治疗胃癌的一种新策略。⑦虽然外泌体miRNAs在胃癌患者诊疗中具有很大的应用前景,但仍存在一些问题亟待解决,例如外泌体miRNAs的潜在靶点及作用机制尚未完全探讨,其有效性及安全性有待进一步确认;而且外泌体的提取及纯化缺乏标准化规模化制备流程等。

桑树miRNAs的研究进展

小RNA(microRNA,miRNA)在桑树的整个生长发育周期中扮演着至关重要的角色。本文从miRNA调控桑树的生长发育、对生物胁迫和非生物胁迫的应答,以及在蚕、桑互作中的作用等方面进行了综述,通过深入分析miRNA在这些方面的调控机制,揭示其在桑树生物学功能调节中的重要性。展望未来,对miRNA在桑树生长发育过程中的调控研究提出了新的思路,旨在为桑树遗传改良提供指导意见,为拓展桑树的应用领域以及促进蚕桑产业的可持续发展提供参考。

失巢凋亡相关miRNAs预测肝细胞癌预后的分析

目的:利用癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库筛选肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织中与失巢凋亡相关的miRNAs(anoikis-related miRNAs,armiRNAs),基于筛选出来的miRNAs构建HCC预后列线图模型,探讨armiRNAs与HCC预后的相关性,为HCC的治疗提供新的靶点。方法:从TCGA数据库下载RNA转录数据,筛选在HCC和癌旁组织中差异表达的armiRNAs,采用单因素Cox回归和LASSO回归分析鉴定具有预后意义的armiRNAs,通过受试者工作特征曲线(ROC曲线)评价其可靠性,并构建预后列线图模型。利用该模型,使用京都基因和基因组百科全书(KEGG)进行基因富集分析及药物敏感性研究。通过RT-qPCR对人正常肝细胞系LO2和三种人肝癌细胞系中差异表达的armiRNAs进行验证。结果:本研究经过筛选得到7个armiRNAs,根据风险评分将肝癌样本分为高、低风险组,Kaplan-Meier生存曲线显示两组之间存在显著差异,死亡人数随着风险评分的增加而增加。预测1年、2年、3年生存率的ROC曲线的AUC值分别为0.794、0.789、0.781,表明该模型具有较高的区分度。针对不同风险组对抗肿瘤药物敏感性的研究结果表明,高危组对多种抗肿瘤药物敏感性较高。实验验证显示,与LO2细胞相比,三种人肝癌细胞系中hsa-miR-4661、hsa-miR-1180表达水平显著增高,hsa-miR-139、hsa-miR-101-2、hsa-miR-326、hsa-miR-29c表达水平显著下降,而hsa-miR-509-3-5p在HepG2细胞中表达显著降低,在SMMC-7721、MHCC97细胞中表达显著升高。结论:本研究共筛选出7个armiRNAs,基于这些基因构建的模型能够较好的预测HCC患者的生存率及患者对药物的敏感性,这些结果可为探索肝癌预后标志物和临床个体化治疗提供重要参考。

7种miRNAs联合检测用于原发性肝癌的诊断价值

目的:分析7种微小核糖核酸(miRNAs)联合检测用于原发性肝癌诊断的临床应用价值。方法:采用荧光PCR技术检测原发性肝癌组、转移性肝癌组、肝硬化组共131例患者的7种miRNAs的表达水平,比较7种miRNAs在3组患者中的阳性率;分析7种miRNAs在不同病理类型肝癌中的诊断价值;比较7种miRNAs在甲胎蛋白(AFP)阴性以及AFP和异常凝血酶原(PIVKA-Ⅱ)均阴性的肝细胞癌(HCC)患者中的阳性率;分析AFP、7种miRNA以及AFP+7种miRNAs用于HCC诊断的敏感度、特异度,并运用ROC曲线评价三者的诊断效能。结果:原发性肝癌组患者7种miRNAs阳性率显著高于转移性肝癌组(χ2=13.388,P<0.01)和肝硬化组(χ2=30.827,P<0.01);在不同细胞类型的肝癌中,HCC组患者7种miRNAs的阳性率显著高于胆管细胞癌(ICC)组(χ2=6.805,P<0.01);AFP、PIVKA-Ⅱ以及7种miRNAs在HCC组患者中阳性率分别为60.71%、64.28%和75.00%;AFP阴性以及AFP和PIVKA-Ⅱ均阴性的HCC患者中,7种miRNAs联合检测阳性率分别为81.8%和80.0%;AFP、7种miRNAs以及AFP+7种miRNAs联合检测对于HCC患者诊断灵敏度分别为60.71%、75.00%和89.29%,特异度分别为81.33%、85.33%和78.67%;AFP、7种miRNAs以及AFP+7种miRNAs联合用于HCC诊断的AUC(ROC曲线下面积)分别为0.708、0.839和0.864。结论:7种miRNAs在HCC患者中具有较高的阳性率,在AFP阴性的肝癌中也具有较高的阳性率;AFP+7种miRNAs联合检测可以显著提高HCC诊断的阳性率。

miRNAs介导寄生虫和宿主互作机制的研究进展

寄生虫病流行范围广泛,严重威胁人类健康并影响畜牧业发展。miRNAs是一类长度约19~24 nt的高度保守的内源性非编码单链小分子RNAs,寄生虫会表达大量的miRNAs介导其感染宿主,同时宿主miRNAs的表达谱也会发生改变,这些miRNAs将影响宿主的抗性或易感性,miRNAs已成为研究寄生虫和宿主互作机制的热点方向之一。本文综述了不同种类寄生虫表达的miRNAs在其感染宿主中的作用及宿主miRNAs对寄生虫的调控,旨在为研发基于miRNAs的抗寄生虫感染的治疗措施提供参考。

犬新孢子虫miRNAs的鉴定与分析

为鉴定犬新孢子虫(Neospora caninum)特异表达的miRNAs,并研究其在宿主细胞中的表达情况,本研究收集N.caninum速殖子感染的山羊子宫内膜上皮细胞(caprine endometrial epithelial cells,EECs)24和48 h的样本,用Illumina高通量测序平台和生物信息学分析犬新孢子虫特异表达的miRNAs及其体外表达情况,并研究了一个上调的miRNA novel3_mature对犬新孢子虫在山羊EECs增殖的影响。结果发现,共鉴定出3404个犬新孢子虫特异表达的miRNAs(155个新预测miRNAs),其中77个(47个上调和30个下调)miRNAs显著差异表达;随机选取7个显著差异表达的miRNAs进行实时荧光定量PCR分析,结果与高通量测序结果一致;预测分析发现61个miRNAs的3978个靶基因,功能富集分析发现这些靶基因可能主要参与MAPK信号通路、突触导向、黏着斑、cMAP信号通路、钙信号通路等;转染novel3_mature的模拟物显著促进犬新孢子虫在山羊EECs中的增殖。犬新孢子虫存在多个特异表达的miRNAs,其在虫体增殖中发挥重要作用,研究成果为深入理解犬新孢子虫胞内生存提供了新的思路。

miRNAs对食管癌发生发展的影响及中医药的干预作用

食管癌是常见的上消化道恶性肿瘤,在我国食管癌的总患病数和死亡数占全球的一半,极大地加重了我国癌症防治及医疗保障体系的负担。食管癌早期发病隐匿、不易察觉,导致多数患者在确诊时已处于中晚期,不利于治疗和预后。微小RNA(miRNAs)作为新型生物标志物,在肿瘤的诊断、病情监测和预后评估中发挥着重要作用。近年研究表明,miRNAs在食管癌微环境的形成,放化疗抵抗,肿瘤细胞增殖、凋亡、侵袭、自噬等过程中扮演着抑癌基因和抗癌基因的双重角色,是食管癌潜在的干预靶点,具有较高的研究价值和意义。但miRNAs在食管癌进展中的作用机制尚不明确,限制其作为肿瘤标志物应用于食管癌的临床诊断、治疗和预后。基于此,文章就miRNAs在食管癌发生发展中的双重调控机制及中医药干预研究进行系统综述,旨在明确miRNAs如何影响食管癌的发生与发展及潜在治疗策略,以期为食管癌的临床防治提供新思路。

水稻AP2/ERF转录因子家族及其相应miRNAs在叶片衰老中的表达

【目的】探究水稻AP2/ERF转录因子在叶片衰老中的功能及其受miRNA和组蛋白修饰调控的转录机制。【方法】在全基因组水平对水稻(Oryza sativa)AP2/ERF家族成员及其上游靶向的miRNAs进行鉴定和生物信息学分析。对miRNA及其靶基因在水稻叶片衰老过程中的表达谱进行分析。通过RT⁃qPCR检测该家族成员及miRNAs在水稻叶片衰老过程中的互作关系。【结果】在水稻中共有155个AP2/ERF基因,所有成员启动子都含有光响应元件,大多数基因都具有茉莉酸(jasmonic acid,JA)、脱落酸(abscisic acid,ABA)和厌氧诱导顺式作用元件。预测到45个miRNAs靶向调控水稻AP2/ERF家族的58个成员。鉴定出一系列在水稻叶片衰老过程中呈显著负相关的miRNA-靶基因对,暗示这些miRNAs可能通过抑制AP2/ERF基因的表达,参与水稻叶片衰老过程的调控。同时,发现4个AP2/ERF基因的表达量及其组蛋白H3K9ac富集水平随水稻叶片的衰老持续上升,说明这些基因表达同时受到H3K9ac修饰调控。【结论】在水稻叶片衰老过程中AP2/ERF基因的转录受其相应靶向的miRNAs和组蛋白H3K9ac修饰的影响。

基于血清mirnas差异性表达分析糖尿病高危足的风险因素分析

目的评估糖尿病(T2D)患者和T2D高危足患者以及非糖尿病患者的血清样本中的miRNAs表达模式。方法收集2021年6月至2022年6月期间在河北省沧州中西医结合医院内分泌科住院的92例T2D患者。其中46例被诊断为高危足但没有足部溃疡,为T2D高危足组;其余患者为T2D组。选择在本院接受体检的46例糖耐量正常的健康人作为对照组。从所有参与者收集血液样本,采用了基于RT-qPCR的TLDA芯片血清样品的miRNA谱,并通过RT-qPCR对其中差异表达的miRNA进行验证。结果TLDA分析结果显示,在评估的754个miRNAs中,与对照组相比,两组T2D患者中有25个上调,118个下调。RT-qPCR验证显示,与对照组相比,包括miR-23、miR-195-5p、miR-205-5p、miR-203在内的4个miRNA的水平在T2D组和T2D高危足组患者中均显著增加(P<0.05)。此外,T2D高危足组患者的上述4个血清miRNA的水平高于T2D组患者(P<0.05)。在多变量分析中,以对照组为参考类别时,仅miR-195-5p(OR=6.9,95%CI:2.0~24.2,P=0.003)和miR-205-5p(OR=7.2,95%CI:1.6~32.0,P=0.009)与单纯T2D独立相关,和miR-195-5p(OR=6.9,95%CI:2.0~24.2,P<0.001)、miR-205-5p(OR=11.0,95%CI:2.8~43.2,P=0.001)与T2D高危足独立相关。当T2D组被作为参考类别时,仅miR-195-5p(OR=3.0,95%CI:1.6~5.7,P=0.001)和miR-205-5p(OR=2.3,95%CI:1.2~4.2,P=0.012)与T2D高危足独立相关。miR-195-5p和miR-205-5p在区分T2D组和对照组时的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.74和0.70,在区分T2D高危足组和对照组时的AUC为0.87和0.84,在区分T2D组和T2D高危足组时的AUC为0.65和0.62。结论miR-195-5p、miR-205-5p可能成为T2D及高危足的新型风险指标,并可能在T2D及高危足的发病机制和进展中发挥重要作用。

鸡胚胎期肌纤维形成相关miRNAs的筛选与分析

研究旨在挖掘鸡胚胎期肌纤维形成相关miRNAs,为进一步探究miRNA在肌肉发育过程中的调控机制提供理论基础。研究采集玫瑰冠鸡、科宝鸡胚胎期第8天(E8)和第14天(E14)腿肌组织进行HE染色和small RNA测序,通过生物信息学分析差异表达miRNAs,随机选择14个差异表达的miRNAs进行荧光定量PCR(qRT-PCR)验证结果的准确性。结果显示,玫瑰冠鸡、科宝鸡E8的肌纤维直径和横截面积极显著小于E14(P<0.01),E8的肌纤维密度极显著高于E14(P<0.01)。通过生物信息学分析,在12个测序文库中共鉴定出2455个已知miRNAs和329个新的miRNAs,其中在E8和E14(C8TvsC14T_R8TvsR14T)中筛选出499个差异表达miR-NAs。GO富集结果显示,差异miRNA靶基因在细胞迁移、代谢过程、细胞增殖、细胞发育和小分子结合等GO条目中显著富集。KEGG富集分析发现,大量的靶基因富集到与细胞周转和代谢相关的信号通路中,同时富集到TGF-β、Notch、Hedgehog、Wnt、FoxO等与肌肉发育相关的信号通路。miRNA-mRNA联合分析结果表明,miR-3594-3p-APOBEC2、miR-1635-FHL3/MEF2D、miR-193-3p-HDAC3、miR-1724-PRKAG3、miR-1698-PRKAG3等互作对可能是调控鸡胚胎期肌纤维形成和肌肉发育的重要因子。研究表明,鸡胚胎期肌纤维形成受到多种miRNAs和信号通路的调控,筛选出miR-3594-3p、miR-1635、miR-193-3p、miR-1724、miR-1698等miRNAs可能在肌纤维形成过程中发挥重要作用。

呼吸窘迫综合征新生患儿血浆中miRNAs的差异性表达及临床意义

目的 探讨呼吸窘迫综合征(Respiratory distress syndrome, RDS)新生患儿血浆miRNAs的差异表达及意义。方法 选取68例RDS新生患儿、15例健康新生儿为研究对象,随机各选取6例进行血浆测序,用反转录聚合酶链反应(Reverse transcription-polymerase chain reaction, RT-PCR)检测血浆miRNAs表达。鉴定出差异表达最显著的两个miRNAs进行后续研究,用RT-PCR检测RDS发作期、出院时、出院后1个月时的miRNAs水平。用受试者工作特征曲线(Receiver operating characteristic curve,ROC)分析发作期时血浆miRNAs表达水平诊断RDS严重程度的价值。分析发作期时miRNAs表达水平与动脉血氧分压(Partial pressure of oxygen, PaO_(2))、二氧化碳分压(Partial pressure of carbon dioxide, PaCO_(2))、吸氧分数(Fraction of oxygen uptake, FiO_(2))、氧合指数(PaO_(2)/FiO_(2))、肌酸激酶同工酶(Creatine kinase isoenzyme, CK-MB)、乳酸脱氢酶(Lactic dehydrogenase, LDH)、超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase, SOD)、丙二醛(Malondialdehyde, MDA)水平的相关性。结果 测序结果显示,RDS新生患儿与健康新生儿血浆中共1 230种差异表达miRNAs,其中693种表达上调,537种表达下调。miRNA-200b及miRNA-449差异表达倍数>20,是差异性表达最显著的miRNAs。出院后1个月时RDS新生患儿血浆miRNA-200b及miRNA-449的表达水平均低于发作期和出院时(P<0.05),且出院时水平低于发作期(P<0.05)。血浆miRNA-200b、miRNA-449诊断RDS的曲线下面积(Area under curve,AUC)分别为0.702、0.763,灵敏度分别为73.6%、76.9%,特异度分别为69.8%、72.8%。血浆miRNA-200b与miRNA-449相对表达水平分别与PaO_(2)、PaO_(2)/FiO_(2)呈负相关(P<0.05),与PaCO_(2)、FiO_(2)呈正相关(P<0.05)。miRNA-200b、miRNA-449分别与CK-MB、LDH、MDA呈正相关(P<0.05),与SOD呈负相关(P<0.05)。结论 RDS新生患儿血浆miRNAs有明显异常表达,其中miRNA-200b、miRNA-449差异较为显著,二者在RDS新生患儿血浆中表达水平升高,且与呼吸功能损伤、心肌损伤和氧化应激损伤相关。

胃癌发生过程中风险miRNAs筛选及其诊断效能评价的多中心研究

目的探索胃癌发生过程的风险miRNAs,为上消化道机会性筛查中早期胃癌识别提供依据。方法纳入2021年6月至2023年8月在广西医科大学附属肿瘤医院、右江民族医学院附属医院、桂林市人民医院3个中心进行上消化道癌机会性筛查的人群。选取健康体检者107例、早期胃癌患者71例、进展期胃癌患者97例。首先采用转录组测序筛选差异表达miRNAs,然后在3组前瞻性人群的血浆样本中通过RT‐qPCR验证差异表达的miRNAs,最后采用受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线评估miRNAs的诊断效能。结果转录组测序的差异基因分析共筛选出胃癌发生过程中的6个差异表达miRNAs,包括miR‐3176、miR‐885‐5p、miR‐203a‐3p、miR‐452‐5p、miR‐223‐3p、miR‐219a‐2‐3p。RT‐qPCR结果显示,miR‐452‐5p在早期胃癌及进展期胃癌患者中表达上调(均P<0.001)。ROC曲线显示,miR‐452‐5p诊断早期胃癌和进展期胃癌的曲线下面积(area under the curve,AUC)分别为0.900、0.975。区分早期胃癌与进展期胃癌的AUC为0.843。结论miR‐452‐5p在早期胃癌中具有良好的诊断效能,可能作为液体活检诊断早期胃癌的潜在生物标志物。

类风湿关节炎活动期患者血浆外泌体miRNAs差异表达筛选与生物信息学分析及验证

目的筛选类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)活动期患者和健康体检者血浆外泌体(exosomes)中差异表达的微小核糖核酸(microRNAs,miRNAs),并进行生物信息学分析,以探讨血浆外泌体miRNAs在RA致病中的作用及其潜在临床应用价值。方法选取2023年01~04月就诊于苏州大学附属第二医院风湿免疫科的39例RA患者作为研究对象,同时选取39例健康体检者作为正常对照。利用Illumina高通量测序技术检测血浆外泌体中miRNAs的表达水平,以log2(Fold Change)绝对值>1和P值<0.05为条件获得差异表达的miRNAs。按照P值从小到大的顺序挑选6条miRNAs进行生物信息学分析,并利用实时荧光定量PCR(quantitative real-time fluorescence PCR,qRT-PCR)验证。结果与对照组相比,RA患者血浆外泌体中存在22条异常表达的miRNAs,4条上调,18条下调。其中,miR-30b-5p,miR-144-3p,miR-20a-5p,miR-223-5p,miR-425-3p和miR-589-5p的水平变化显著。GO和KEGG富集分析结果显示,差异表达的miRNAs可能通过调节转化生长因子-β(TGF-β)和PI3K/AKT信号通路参与疾病进展,涉及Th17细胞分化、细胞间相互作用和蛋白磷酸化等生物学过程。qRT-PCR验证结果显示,与对照组相比,RA患者血浆外泌体miR-144-3p和miR-425-3p的表达水平明显降低,差异具有统计学意义(t=3.617,3.595,均P<0.001),而miR-30b-5p,miR-223-5p,miR-589-5p和miR-20a-5p的表达差异均无统计学意义(t=1.956,1.331,1.662,1.861,均P>0.05)。结论RA患者血浆外泌体的miRNAs表达谱发生改变,可能通过TGF-β等信号通路参与疾病进展,外泌体miR-144-3p和miR-425-3p是RA疾病诊断的潜在血清学标志物。

miRNAs在特应性皮炎发病机制中的作用研究进展

特应性皮炎(Atopic dermatitis, AD)是一种以反复瘙痒及湿疹样皮肤损伤为典型临床特征的慢性炎症性皮肤病,近年来已成为疾病负担较重的非致命性皮肤病,严重影响人们的生活质量^([1]).AD的发病机制尚不明确,表皮屏障缺陷、免疫失调及遗传易感性为当前的机制研究方向^([2]).微小RNA(MicroRNAs,miRNAs)是短的单链RNA分子,其在转录后水平上控制基因表达。

基于自编码器的疾病相关miRNAs的预测方法

MicroRNAs(miRNAs)是一类由内源基因编码的长度约为22个核苷酸的非编码单链RNA分子,它们在动植物中参与转录后基因表达调控。大量研究表明,miRNAs在包括肿瘤在内的多种复杂疾病发生、发展过程中扮演着重要的角色。因此,识别疾病相关的miRNAs对研究疾病的机理及治疗具有重要意义。鉴于湿实验验证方法存在耗时长、成本高的缺点,当前许多研究工作聚焦于开发高效计算模型,识别新的miRNA-disease关联关系。该研究提出一种基于自编码器数据驱动的模型,预测miRNA-disease关联关系。结果表明,作者预测的疾病相关miRNAs在HMDD数据库中对应的疾病相关miRNAs列表上显著富集。此外,通过对排名靠前的miRNAs分析,发现这些miRNAs具有重要的生物学功能,同时对于疾病的分类表现出较高的精度。总之,文章提出的模型,对于疾病相关miRNAs的发现具有重要的辅助作用。

慢性心力衰竭患者中西医结合治疗前后彩超及miRNAs检测的临床意义

目的分析慢性心力衰竭(CHF)患者中西医结合治疗前后彩超参数及微小RNAs(miRNAs)检测的临床意义。方法选取2020年1月至2023年4月收治的162例CHF为研究对象,根据纽约心脏协会心功能分级分为心功能Ⅱ级组(n=47),心功能Ⅲ级组(n=75),心功能Ⅳ级组(n=40)。比较不同心功能分级CHF治疗前后彩超参数[左心室射血分数(LVEF)、左心房内径(LAD)、左心室舒张末内径(LVEDd)]及miRNAs(miRNA-208、miRNA-130a)表达水平。分析彩超参数、miRNAs与心功能分级的相关性,比较不同预后CHF患者彩超参数、miRNAs表达水平,并分析其对中西医结合治疗预后的评估价值。结果治疗前后,心功能Ⅱ级组LVEF>心功能Ⅲ级组>心功能Ⅳ级组,心功能Ⅱ级组LAD、LVEDd及miRNA-208、miRNA-130a表达水平<心功能Ⅲ级组<心功能Ⅳ级组(P<0.05)。不同心功能分级CHF患者中西医结合治疗后LVEF水平均较治疗前升高,LAD、LVEDd及miRNA-208、miRNA-130a表达水平均较治疗前降低(P<0.05)。治疗前后,LVEF与CHF患者心功能分级呈负相关,而LAD、LVEDd及miRNA-208、miRNA-130a表达与心功能分级呈正相关(P<0.01)。治疗前后,预后不良组LVEF均低于预后良好组,LAD、LVEDd及miRNA-208、miRNA-130a表达水平均高于预后良好组(P<0.05)。不同预后CHF患者治疗后LVEF均较治疗前升高,LAD、LVEDd及miRNA-208、miRNA-130a表达水平均较治疗前降低(P<0.05)。治疗前后彩超参数及miRNAs检测联合评估CHF患者预后的曲线下面积最大,分别为0.915(95%CI:0.861,0.953)、0.943(95%CI:0.896,0.974)。结论CHF患者中西医结合治疗前后彩超参数及miRNA-208、miRNA-130a表达与心功能分级关系密切,联合检测彩超参数、miRNAs对CHF预后有较高评估价值。

Hcy促血管平滑肌细胞增殖迁移相关的miRNAs筛选研究

目的明确同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)对人源血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)增殖迁移的影响以及分析Hcy干预下VSMC增殖迁移相关差异miRNAs,为探讨Hcy促VSMC增殖迁移的分子机制提供依据。方法体外培养VSMC,分为Control组和100μmol·L^(-1) Hcy组。采用CCK-8法测量VSMC的增殖活性;采用划痕实验分析VSMC在0 h和48 h的迁移情况。高通量测序分析各组VSMC中差异化表达的miRNAs,采用miRanda和TargetScan软件进行靶基因预测,使用BLAST软件将预测靶基因序列与GO和KEGG数据库比对,分析靶基因的功能,获得与VSMC增殖和迁移相关的靶基因信息。通过RT-qPCR对其中表达上调的miRNAs进行验证。结果Hcy干预能增加VSMC的增殖活力(P<0.01),且VSMC的划痕面积减少(P<0.01)。两组细胞共检测到576个miRNAs,其中已知miRNAs 404个,新预测miRNAs 172个。与Control组相比,Hcy组存在88个差异表达的miRNAs,其中表达上调的20个,表达下调的68个。与VSMC增殖和迁移相关的miRNAs有20个,表达上调的包括miRNA39、miRNA206和miRNA212-5p,表达下调的包括miRNA35等17个。RT-qPCR结果显示,Hcy组miRNA212-5p的表达上调(P<0.05)。结论Hcy致VSMC增殖迁移过程中存在差异表达的miRNAs,miRNA212-5p可能参与了Hcy对VSMC的作用。

表面增强拉曼散射光谱在miRNAs检测中的研究进展

表面增强拉曼散射(SERS)因其灵敏度高、非侵入性、多路检测等特点,已广泛应用于生物医学检测。研究发现微小核糖核酸(miRNAs)的异常表达与多种疾病有关,miRNAs已成为一种新型的生物标志物。开发简单、灵敏、可靠的miRNAs检测方法,对miRNAs的生物学功能研究、医学诊断、疾病治疗和靶向药物研究具有重要意义。目前,与核酸信号放大策略相结合的纳米SERS探针,用于miRNAs检测表现出较高的灵敏度。然而实际样本中成分复杂,易产生背景信号,干扰检测结果;分离纯化过程繁琐,增加了检测时间。近年来,研究者们通过结合其他技术来优化检测,提高样本检测通量、简化操作、减少分析时间、提高分辨率。该论文主要介绍了基于SERS技术的miRNAs检测方法的最新进展,讨论了技术融合的优势与必要性,并总结了基于SERS技术的miRNAs检测用于临床检测还存在的问题,旨在为设计新型快速灵敏可靠的miRNAs SERS检测平台提供参考。

lncRNA UCA1和miRNAs在中枢神经系统疾病中的作用机制研究进展

中枢神经系统疾病的发生率和病死率呈逐年增长趋势,从分子水平层面深入研究中枢神经系统疾病的发病机制显得尤为重要。近年来研究发现,尿路上皮癌胚抗原1(urothelial carcinoma antigen 1,UCA1)在癫痫、神经胶质瘤等中枢神经系统疾病组织或细胞中均有不同程度的表达,参与疾病的潜在机制,包括与微小RNA(microRNAs, miRNAs)之间相互调控,影响相关信号通路,不仅促进中枢神经系统疾病的发生、发展,还增强了常规治疗药物的耐药性。本文回顾近年来UCA1与miRNAs在中枢神经系统疾病(癫痫、神经胶质瘤、帕金森病)的作用机制研究进展,提示UCA1有望成为癫痫治疗靶点和临床检测标志物,以期为与此相关的研究提供参考。

miRNAs及其单核苷酸多态性在缺血性脑卒中的研究进展

缺血性脑卒中(ischemic stroke,IS)是由环境因素和遗传因素共同作用所致的一种多因素疾病,其遗传易感性及缺血性脑损伤机制仍是近年来研究的热点。微小RNA(microRNA,miRNA)表达谱异常在IS的病因、病理生理、神经保护和卒中后脑水肿等多个过程均有参与。单核苷酸多态性(single nueleotide polymorphism,SNP)指在有遗传效应的DNA片段上由单个核苷酸发生颠换、转换、插入、缺失等所引起的DNA序列多态性。当miRNA存在SNP时可能直接或间接影响其靶基因的表达,从而作用于IS的发生发展,故miRNA的SNP可成为研究miRNA与IS之间相互作用的新的切入点。本文拟对部分miRNAs及其SNP与IS之间的关系进行综述,以期为IS的诊断、治疗及预后评估提供科学依据。