菜豆细胞膜系统上Mg^(2+)-ATP酶热稳定性的细胞化学研究

本实验选用耐性菜豆85CT-49762为实验材料,运用膜 Mg^(2+)-ATP 酶电镜细胞化学方法,研究了细胞热锻炼前后膜系统热损伤的特点。结果表明:①细胞质的热凝固可能是膜热破坏的原因之一;②液泡膜比质膜对热更加敏感;③细胞膜系统上 ATP 酶失活不是导致膜热破损的主要原因。

动脉硬化性血栓性脑梗塞患者红细胞膜钙泵活性与血流动力学研究

本文对３２例动脉硬化性血栓性脑梗塞（ＡＴＣＩ）患者进行了红细胞膜Ｃａ２＋Ｍｇ２＋－ＡＴＰ酶、全血粘度（ＷＶ）与局部脑血流（ｒＣＢＦ）量的检测，并与３０例健康对照组进行了比较。结果患者组的Ｃａ２＋Ｍｇ２＋－ＡＴＰ酶、ｒＣＢＦ均明显低于对照组（Ｐ＜０．０１～０．００１），ＷＶ明显高于对照组（Ｐ＜０．０１）。患者组的Ｃａ２＋Ｍｇ２＋－ＡＴＰ酶活性与ｒＣＢＦ相关分析呈显著正相关，与ＷＶ比较两者呈明显负相关。提示钙泵活性与血流动力学的检测对ＡＴＣＩ患者的治疗和预后均有重要意义。

利福平增加异烟肼肝毒性的机制探讨

目的 探讨利福平增加异烟肼肝毒性的机制。方法 分别测定异烟肼组、利福平组和联合用药组小鼠的血清谷丙转氨酶（ＧＰＴ）、肝指数、肝匀浆丙二醛（ＭＤＡ）含量、肝微粒体Ｐ４５０和线粒体Ｃａ~２＋ＡＴＰ活性，及肝病理检查，结果与对照组或实验组之间进行比较。结果 异烟肼和利福平联合用药组的ＭＤＡ、ＧＰＴ明显增高，线粒体Ｃａ~２＋ ＡＴＰ酶活性明显降低（Ｐ＜０．０５），且肝细胞坏死较为明显。结论 异烟肼和利福平联合用药后肝毒性增加与膜脂质过氧化、线粒体Ｃａ~２＋ ＡＴＰ酶受损及利福平诱导肝药酶有关。

氧氟沙星联用抗结核药肝毒性的实验研究

目的 :研究氧氟沙星联用抗结核药的肝毒性并探讨其机制。方法 :分别测定异烟肼组、利福平组、异烟肼利福平联合用药 (IR)组及其联用氧氟沙星 (IRO)组小鼠的血清谷氨酸氨基转移酶 (ALT)、肝指数、肝匀浆丙二醛(MDA)含量、肝微粒体细胞色素p45 0和线粒线Ca2 + ATP酶活性 ,及肝病理检查 ,结果与对照组以及实验组之间进行比较。结果 :与正常对照组及单用异烟肼、利福平组比较 ,IR组及IRO组的血清ALT、肝细胞匀浆MDA明显增高 (P <0 0 5 ) ;同时发现IR组和IRO组的肝微粒体细胞色素p45 0含量较高和线粒体Ca2 + ATP酶活性较低 ;病理检查IRO和IRC组肝细胞坏死程度稍轻但与IR组比较无明显差异。结论 :异烟肼和利福平联用氧氟沙星肝毒性增加 ,但并不比异烟肼和利福平联合时强。

肉碱棕榈酰基转移酶Ⅱ缺陷症的生化学研究

目的:分析肉碱棕榈酰基转移酶Ⅱ(CPTⅡ)缺陷症患者细胞生化学特性,为研究CPTⅡ缺陷导致能量代谢障碍分子机制提供基本数据。方法:通过基因组序列分析,确定CPTⅡ基因突变类型;通过检测CPTⅡ残基酶活性和酶促动力学特征,分析正常和缺陷CPTⅡ残基酶两者活性与CPTⅡ基因突变类型间关系;测定两者线粒体脂肪酸β-氧化和ATP生成水平;分析两者细胞膜电位。结果:生化学特性分析结果显示CPTⅡ缺陷症患者细胞的CPTⅡ残基酶活性明显降低,且呈热不稳定性;细胞线粒体脂肪酸β-氧化和ATP生成水平显著不足;细胞膜电位显著较低。结论:CPTⅡ是一个热不稳定蛋白酶,CPTⅡ缺陷导致CPTⅡ残基酶活性明显降低,脂肪酸β-氧化和ATP生成水平显著不足。

环丙沙星与氧氟沙星联用抗结核药物肝毒性比较

目的 研究环丙沙星或氧氟沙星联用抗结核药的肝毒性并探讨其机制。方法 分别测定异烟肼和利福平联合用药 (IR)组及其分别联用氧氟沙星 (IRO)或环丙沙星 (IRC)组小鼠的血清谷氨酸氨基转移酶 (ALT)、肝指数、肝匀浆丙二醛 (MDA)含量、肝微粒体细胞色素P45 0和线粒体Ca2 + ATP酶活性 ,及肝病理检查 ,结果与对照组以及实验组之间进行比较。结果 与正常对照组比较 ,IR组及IRO组的血清ALT、肝细胞匀浆MDA明显增高 (P <0 .0 5 ) ,而IRC组变化不大 (P >0 .0 5 ) ;同时发现IR组和IRO组的肝微粒体细胞色素P45 0含量较高和线粒体Ca2 +ATP酶活性较低 ,而IRC组则相反 ;病理检查IRO和IRC组肝细胞坏死程度稍轻但与IR组比较无明显差异。结论 氧氟沙星、环丙沙星不增加异烟肼和利福平联用肝毒性 ,且环丙沙星有一定的拮抗作用。

三(2-氯乙基)磷酸酯诱导肝细胞线粒体毒性的研究

[目的]研究三(2-氯乙基)磷酸酯[tris(2-chloroethyl)phosphate,TCEP]对肝细胞线粒体功能的影响。[方法]用0.00(溶剂对照组)、3.12、12.50、50.00和200.00 mg/L TCEP分别处理人正常肝细胞(L02细胞)和人肝癌细胞(Hep G2细胞)24 h和48 h。测定细胞活力、线粒体内活性氧水平、线粒体DNA拷贝数、线粒体膜电位和胞内游离钙(Ca2+)水平以及胞内ATP的浓度。[结果]与相应溶剂对照组相比,在24 h,200.00 mg/L TCEP处理组L02细胞活力降低(P<0.05),≥12.50 mg/L TCEP处理组Hep G2细胞活力降低(P<0.05);在48 h,50.00 mg/L和200.00 mg/L TCEP处理组两种细胞活力降低(P<0.05)。所有TCEP处理组两种细胞的线粒体DNA拷贝数均减少(P<0.05或P<0.01)。在24 h,所有TCEP处理组两种细胞的线粒体膜电位均下降(P<0.05或P<0.01)。在24 h,200.00 mg/L TCEP处理组两种细胞胞内游离Ca2+水平均升高(P<0.01);在48 h,50.00 mg/L和200.00 mg/L TCEP处理组两种细胞胞内游离Ca2+均升高(P<0.01)。在24 h和48 h,200.00 mg/L TCEP处理组L02胞内ATP水平降低(P<0.05);在24 h,50.00 mg/L和200.00 mg/L TCEP处理组Hep G2胞内ATP浓度下降(P<0.05或P<0.01)。[结论]一定浓度的TCEP可致肝细胞线粒体损伤和线粒体功能指标异常,提示TCEP有肝细胞线粒体毒性。