细胞学核评分结合BRAF V600E检测对BethesdaⅢ类甲状腺结节的诊断价值

目的:探讨细针穿刺细胞学(fine needle aspiration cytology,FNAC)意义未明确的非典型细胞(BethesdaⅢ)量化诊断标准,评估核评分结合BRAF V600E检测对BethesdaⅢ类甲状腺结节的诊断价值。方法:对124例原细胞学诊断为BethesdaⅢ类样本,重新经7个形态学指标核评分判读,并用免疫组化或荧光聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)法检测BRAF V600E突变。以核评分≥5分或BRAF V600E阳性判读为恶性,以组织学诊断或随访结果为诊断金标准。结果:42(42/124)例BethesdaⅢ类核评分≥5分,30(30/99)例BRAF V600E检测阳性,两种检测方法结合对124例甲状腺结节恶性的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、恶性检出率分别为93.2%、95.0%、91.1%、96.2%、33.1%。结论:BethesdaⅢ类甲状腺结节有较高恶性风险率;核评分≥5分可作为区分甲状腺结节良性或乳头状癌的形态学量化域值,量化核评分可以大幅度减少BethesdaⅢ类的报告比率;核评分≥5分结合BRAF V600E检测,对甲状腺结节良恶性诊断有较高敏感度、特异度,并可提高其恶性检出率。

经DCAG方案化疗后AML患者血清HOXA9、PCⅢ、SE-CAD水平的变化及其与预后的关系

目的:探讨急性髓系白血病(AML)患者采用DCAG方案化疗后血清同源盒基因A9(HOXA9)、可溶性E钙黏蛋白(SE-CAD)及Ⅲ型前胶原蛋白(PCⅢ)水平的变化及其与预后的关系。方法:回顾性分析2018年3月至2021年12月经本院确诊并收治的80例复发难治性AML患者的资料,按照治疗方案不同将其分为DCAG组(n=40)与CAG组(n=40),对比治疗前后各组的临床疗效及HOXA9、SE-CAD、PCⅢ水平的变化;另按照临床疗效将所有患者分为缓解组(n=58)与未缓解组(n=22),通过单因素和多因素分析影响AML患者预后的危险因素;采用ROC曲线分析HOXA9、SE-CAD、PCⅢ三项单一指标及三者联合对预后的预测效能。结果:相比于治疗前,DCAG组与CAG组患者在治疗后的HOXA9、SE-CAD、PCⅢ水平均有所下降,但DCAG组患者各指标的改善效果明显优于CAG组,且DCAG组患者在治疗后的临床疗效显著优于CAG组(均P<0.05);多因素分析结果显示,骨髓原始细胞比率、HOXA9 m RNA、SE-CAD及PCⅢ水平升高是影响AML患者化疗疗效的独立危险因素(均P<0.05);ROC曲线分析显示,HOXA9 m RNA、SE-CAD及PCⅢ联合能够有效预测AML预后情况,其敏感度为84.80%、特异度为88.20%。结论:应用DCAG的化疗方案能够显著改善AML患者的HOXA9 m RNA、SE-CAD及PCⅢ水平;且这三项指标作为影响AML患者预后的危险因素,通过联合检测能够对AML患者的预后情况进行有效预测。

HPLC法测定罗汉果中罗汉果苷ⅡE、苷Ⅲ的含量

采用ZORBAX SB-C18(4.6 mm×150 mm,5 μm)色谱柱,以乙腈-水(25:75)为流动相,流速1 mL/min,柱温25℃,二极管阵列检测器,检测波长为203 nm,以外标法测定了罗汉果中罗汉果苷ⅡE、苷Ⅲ的含量.罗汉果苷ⅡE在1.934～25.142μg,苷Ⅲ在2.070～26.910μg范围内呈线性关系,平均加样回收率为96.6%与97.9%.

大鼠皮肤创伤后EⅢA-FN mRNA表达与损伤时间推断研究

目的研究皮肤创伤后不同时间纤连蛋白剪接方式变化及EⅢA剪接异型体的表达。方法提取伤区组织总RNA,RT-PCR方法扩增目的条带。结果大鼠皮肤损伤后表达出正常组织中没有的EⅢA+(526bp)片段,其中伤后1h该条带肉眼可辨认,在伤后24h内,随损伤时间延长其条带亮度相应升高。结论EⅢA-FN剪接异型体表达变化可为法医学损伤时间推断较理想指标。

HPLC法测定不同生长期罗汉果甙ⅡE,Ⅲ,Ⅴ的含量

采用HPLC法测定同一产地不同生长期罗汉果中罗汉果甙ⅡE、Ⅲ、Ⅴ的含量。结果表明,在生长初期罗汉果中主要含具有苦味的甙Ⅱ及无味的甙Ⅲ,随着生长期的增加,苦味甙ⅡE、无味甙III含量逐渐减少,甜甙Ⅴ在50d时开始出现,并随生长期增加,到80d后含量达到最高。

建筑用抗震钢HRB400EⅢ级钢筋焊接接头的低周疲劳性能

采用轴向应变控制方法,在MTS809拉扭复合疲劳试验机上开展了HRB400EⅢ级钢筋母材及焊接接头的低周疲劳试验,获得了母材及焊接接头的低周疲劳性能,如循环应力响应特征、循环应力-应变关系以及寿命预测公式等。通过断口电镜扫描发现,HRB400EⅢ级钢筋焊接接头的裂纹萌生于试件表面,且存在多处裂纹源。研究结果表明,焊接接头与母材的低周疲劳寿命及微观断裂机理方面均存在明显差异,并从力学性能变化的角度对引起差异的原因进行了解释。

西尼罗病毒E蛋白结构域Ⅲ在昆虫S2细胞中的表达与鉴定

根据GenBank中发表的西尼罗病毒(WNV)E domainⅢ基因序列设计1对引物,用PCR方法扩增domainⅢ基因片段,回收目的基因片段定向克隆入果蝇表达载体pMT/B/V5,构建重组表达载体pMT-DⅢ。测序验证正确后,用脂质体转染法与辅助质粒pCoBlast共转染果蝇S2细胞,通过Blasticidin进行加压筛选,获得了抗性细胞S2-DⅢ。提取S2-DⅢ细胞的基因组DNA,用PCR方法检测目的基因在果蝇S2细胞中的整合与表达。用硫酸铜溶液诱导表达,收集无血清的细胞表达上清,样品浓缩后进行SDS-PAGE及Western blotting鉴定。结果表明,研究成功构建了重组表达载体pMT-DⅢ,转染细胞经12mg/L的Blasticidin筛选及鉴定后获得了稳定表达WNV E do-mainⅢ蛋白的果蝇S2细胞株。

重组黄热病毒E蛋白结构域Ⅲ作为亚单位疫苗的抗原性和免疫原性

目的:表达纯化黄热病毒(YFV)囊膜蛋白(E蛋白)结构域Ⅲ,研究其作为亚单位疫苗预防YFV、日本脑炎病毒(JEV)感染的可能。方法:扩增YFVE蛋白结构域Ⅲ(YFDⅢ)的cDNA片段333bp,将其连接到原核表达载体pET-32a(+)中,构建原核表达载体pET-YFDⅢ,转化感受态大肠杆菌Rosetta(DE3),IPTG诱导表达重组YFDⅢ;用纯化的YFDⅢ免疫新西兰兔和BALB/c鼠,检测相关抗体滴度。结果:在大肠杆菌中可溶性表达了YFDⅢ融合蛋白,表达量约占菌体蛋白的50%;Western印迹及ELISA分析表明,纯化的YFDⅢ具有良好的抗原性和免疫原性;利用纯化的YFDⅢ免疫新西兰兔,获得了高达1∶4×105滴度的抗YFV抗体和1∶2×104滴度的抗JEV抗体;利用纯化的YFDⅢ免疫BALB/c鼠,获得了1∶7×104滴度的抗YFV抗体和1∶2×103滴度的抗JEV抗体。结论:重组YFDⅢ有较好的免疫原性,具有开发成亚单位疫苗的潜能。

鹅坦布苏病毒E蛋白结构域Ⅲ的原核表达及抗原性分析

【目的】获得鹅坦布苏病毒(GTMUV)E蛋白结构域III的原核表达重组蛋白并明确其免疫原性,为进一步研究其生物学功能及研制亚单位疫苗奠定基础。【方法】根据Gen Bank中GTMUV JS804株E蛋白结构域III的同源基因序列设计1对引物,在其两端加入Flag标签序列和酶切位点,采用PCR扩增GTMUV的E蛋白结构域III基因(EIII),然后与p ET32a原核表达载体连接构建重组表达质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3)后用IPTG诱导融合蛋白表达,并以Western blotting鉴定其免疫原性。【结果】PCR扩增获得携带Flag标签序列的EIII基因片段约430 bp,将其插入p ET32a载体可成功构建重组质粒p ET32a-EIII。阳性重组菌经IPTG诱导表达5 h即可得到融合蛋白,分子质量约33.0 k Da,主要以包涵体形式存在。Western blotting鉴定结果显示,融合蛋白与抗Flag标签单克隆抗体、小鼠抗坦布苏病毒多克隆抗体均可发生特异性反应,检测到预期的目的条带。【结论】GTMUV E蛋白结构域Ⅲ能在大肠杆菌中成功诱导表达,且获得的融合蛋白具有良好的免疫原性,可用于研制GTMUV诊断抗原和亚单位疫苗。

蝎素组分Ⅲ对Jurkat E6-1细胞中LAT和SLP-76表达的影响

目的研究蝎素组分Ⅲ(SVC-Ⅲ)对Jurkat E6-1细胞LAT和SLP-76表达的影响,并探讨SVC-Ⅲ参与细胞免疫调控的可能机制。方法不同浓度SVC-Ⅲ(100 ng.mL-1、10 ng.mL-1、1 ng.mL-1、0.1 ng.mL-1)与植物凝集素(PHA)共同刺激培养Jurkat E6-1细胞。72 h后收获细胞,利用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测细胞内信号分子LAT和SLP-76 mRNA表达变化情况。结果高浓度SVC-Ⅲ(100 ng.mL-1)明显抑制Jurkat E6-1细胞LAT和SLP-76的mRNA的表达(P<0.05),低浓度SVC-Ⅲ(0.1 ng.mL-1、1 ng.mL-1、10 ng.mL-1)对Jurkat E6-1细胞LAT和SLP-76的mRNA的表达没有明显作用(P>0.05)。结论SVC-Ⅲ能够抑制Jurkat E6-1细胞LAT和SLP-76的表达,在一定程度上阻止T细胞信号进一步的传递,从而抑制Jurkat E6-1细胞的活化能力。并且SVC-Ⅲ可抑制PHA诱导的Jurkat E6-1细胞的活化,其作用机制可能与早期活化相关的LAT和SLP-76等的表达相关。

宁泌泰胶囊联合盐酸坦洛新缓释胶囊治疗ⅢB型前列腺炎的临床疗效及对患者前列腺液IL-10、TNF-α、PGE-2的影响

目的 探究宁泌泰胶囊联合盐酸坦洛新缓释胶囊治疗ⅢB型前列腺炎的临床疗效及对患者前列腺液白介素-10（IL-10）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、前列腺素E2（PGE-2）的影响。方法 选择2015年12月～2016年10月于丽水市中心医院接受治疗的ⅢB型前列腺炎患者104例,根据治疗方法分为观察组和对照组,每组各52例。观察组使用宁泌泰胶囊联合盐酸坦洛新缓释胶囊治疗,对照组采用盐酸坦洛新缓释胶囊治疗。比较2组临床疗效,治疗前后慢性前列腺炎症状积分指数,最大尿流率、平均尿流率;分析治疗前后列腺液中水平IL-10、TNF-α、PGE-2与白细胞计数变化。结果 经治疗,观察组总有效率为90.4%,明显高于对照组72.0%（P〈0.05）;治疗后,观察组前列腺液中IL-10、TNF-α、PGE-2、WBC水平均明显低于对照组（P〈0.05）;观察组慢性前列腺炎症状积分指数明显低于对照组,最大尿流率、平均尿流率明显高于对照组,差异均具有统计学意义（P〈0.05）。结论 采用宁泌泰胶囊联合盐酸坦洛新缓释胶囊治疗ⅢB型前列腺炎患者临床疗效显著,能够通过下调列腺液中IL-10、TNF-α、PGE-2水平,缓解临床症状。

生物反馈电刺激对ⅢB型前列腺炎EPS中IL-10、PGE_2水平的影响及临床意义

目的:分析ⅢB型前列腺炎患者生物反馈电刺激治疗前、后前列腺液(EPS)中白细胞介素-10(IL-10)、前列腺素E2(PGE2)水平的变化以及与慢性前列腺炎症状的关系,探讨生物反馈电刺激治疗ⅢB型前列腺炎的作用机制。方法:50例ⅢB型前列腺炎患者作为观察组,非前列腺炎患者、尿常规及EPS常规检查正常者23例作为对照组,观察组采用生物反馈治疗仪治疗12周,检测治疗前、后国际前列腺炎症状评分(CPSI)、IL-10、PGE2水平,并与对照组进行比较。结果:治疗前观察组CPSI和EPS中PGE2水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05～0.01),EPS中IL-10水平差异无统计学意义(P>0.05)。观察组治疗后3个月和治疗结束后1个月CPSI和EPS中PGE2水平明显低于治疗前,差异有统计学意义(P<0.05),EPS中IL-10水平与治疗前相比变化不大(P>0.05),3个指标与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。观察组EPS中的IL-10、PGE2与CPSI呈正相关(r值分别为0.563 5、0.432 9,P<0.01)。结论:ⅢB型前列腺炎患者EPS中IL-10和PGE2水平升高,其慢性盆痛症状严重程度与EPS中IL-10、PGE2水平呈正比。生物反馈电刺激治疗可能通过降低PGE2水平以改善ⅢB型前列腺炎患者的临床症状。

疏肝消脂Ⅲ方胶囊对非酒精性脂肪肝大鼠CYP2E1基因表达的影响

目的探讨疏肝消脂Ⅲ方胶囊对非酒精性脂肪肝(NAFLD)大鼠的防治作用及对肝组织细胞色素P4502E1mRNA表达的影响。方法用高脂乳剂灌胃建立NAFLD大鼠模型,于灌胃第6周末形成脂肪肝后,给予疏肝消脂Ⅲ方胶囊和水飞蓟宾胶囊4周,在光镜下观察各组肝脏病理变化,并通过荧光定量(qPCR)法测定大鼠肝组织CYP2E1的mRNA的表达情况。结果与模型组相比,各药物组肝脏病理变化改善;疏肝消脂Ⅲ方组CYP2E1的mRNA水平较模型组降低(P<0.05)。结论疏肝消脂Ⅲ方胶囊能明显改善高脂饮食大鼠脂肪肝病理学变化,抑制NAFLD氧化应激反应,保护肝脏,作用机制可能与CYP2E1表达有关。

西尼罗河病毒preM/EⅢ融合蛋白特异性单克隆抗体的制备以及应用分析

目的制备针对西尼罗河病毒preM/EⅢ融合蛋白特异性单克隆抗体,并分析其在临床检测中的应用价值。方法采用原核表达系统表达西尼罗河病毒preM/E融合蛋白,作为抗原,免疫BALB/c小鼠,按常规单克隆抗体技术将免疫后小鼠脾细胞与SP2/0细胞融合,采用有限稀释法筛选能稳定分泌抗preM/EⅢ单抗的杂交瘤细胞株。接种杂交瘤细胞于小鼠腹腔,抽取腹水纯化单克隆抗体。采用间接ELISA和Western blotting对抗体特异性和效价进行分析,并对临床样本进行检测。结果获得了1株能稳定分泌preM/EⅢ蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为ME1。纯化后抗体效价为10-6,其亚类为IgG1。ME1单抗能与西尼罗病毒preM/EⅢ蛋白以及西尼罗病毒发生特异性反应,而与日本脑炎病毒(JEV)、圣路易斯脑炎病毒(SLEV)、黄热病毒(YFV)和登革热病毒(DENV)无交叉反应。临床诊断准确率为97.78%。结论 ME1单克隆抗体具有较高的特异性,临床诊断准确性较高,具有临床应用价值。

猪乙型脑炎病毒E-Ⅲ抗原域蛋白间接ELISA的建立及应用

该研究利用纯化后的流行性乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)E-Ⅲ抗原域蛋白,将其作为包被抗原,建立了间接ELISA检测方法。试验的最佳反应条件为:最佳抗原包被浓度为17.5μg/mL,血清抗体稀释度为1∶4,酶标二抗稀释度为1∶5 000,封闭液和稀释液用含0.4%BSA的PBST。采用该方法对127份临床样品进行检测,结果显示,与商品试剂盒检测结果比较符合率达到90.00%。因此,该研究建立的流行性乙型脑炎间接ELISA检测方法具有良好的稳定性和可重复性,并具有较高的特异性和敏感性。

铒激光与E光联合重组人源Ⅲ型胶原蛋白治疗面部痤疮凹陷性瘢痕的疗效及对p38MAPK通路蛋白的影响

目的:探讨铒激光与E光联合重组人源Ⅲ型胶原蛋白治疗面部痤疮凹陷性瘢痕的疗效及对痤疮瘢痕权重评分(Echelle d'Evaluation Clinique des Cicatrices d'acne,ECCA)、p38丝裂原活化蛋白激酶(P38 mitogen activated protein kinase,p38MAPK)通路蛋白的影响。方法:选取笔者医院2018年1月-2019年12月面部痤疮凹陷性瘢痕患者195例,按照随机数字法分为3组,各65例。对照1组给予E光联合重组人源Ⅲ型胶原蛋白,对照2组给予铒激光联合重组人源Ⅲ型胶原蛋白,研究组给予铒激光与E光联合重组人源Ⅲ型胶原蛋白。比较三组治疗效果、治疗前后温哥华瘢痕量表(Vancouver scar scale,VSS)变化情况、ECCA评分、视觉模拟评分(Visual analogue scale,VAS)、血清p38MAPK通路蛋白(ERK1、ERK2、MEK1、MEK2)、炎性因子[肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)、C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)]及患者满意度。结果:研究组总有效率(95.38%)高于对照1组(81.54%)、对照2组(84.62%),差异有统计学意义(P<0.05)。治疗结束后三组瘢痕厚度、血管分布、色泽、柔软度评分、ECCA、VAS评分低于治疗前,研究组低于对照1组、对照2组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗结束后三组血清MEK1、MEK2、ERK1、ERK2、TNF-α、IL-6、CRP低于治疗前,研究组低于对照1组、对照2组,差异有统计学意义(P<0.05)。研究组患者满意度(93.85%)高于对照1组(80.00%)、对照2组(80.00%),差异有统计学意义(P<0.05)。结论:联合采取铒激光、E光、重组人源Ⅲ型胶原蛋白治疗面部痤疮凹陷性瘢痕效果显著,且患者满意度较高。

昆明地区汉族人群高脂血症患者载脂蛋白B，CⅢ，E基因多态性频率分布研究

目的探讨高脂血症患者载脂蛋白B，CⅢ，E中ApoB MspI，ApoB XbaI，ApoB EcorI，ApoCⅢ3175，ApoCⅢ3206，ApoE112／158等6个位点基因多态性的频率分布。方法采用病例一对照相关性研究策略，选择昆明地区汉族作为研究对象，用基因芯片检测技术，对91例高脂血症患者及76例健康对照者进行上述6个位点基因多态性检测，用直接计算法计算其基因型及等位基因频率。结果昆明地区汉族76例健康人群及91例高脂血症患者检测结果：①ApoBMspI位点的＋／＋，＋／一基因型频率分别是0．618，0．382及0．978，0．022，差异有统计学极显著性意义（z。=35．42，P=0．000），未检出-／-基因型；＋和-的等住基因频率分别是0．809，0．191及0．989，0．011，差异有统计学极显著性意义（妒=31．80，P=0．000）。②ApoBXbaI住点的＋／＋，＋／-，-／-基因型频率分别为0．013，0．145，0．842及0．000，0．077，0．923，差异无统计学显著性意义（x^2=3．259，P=0．195）；＋和-等住基因频率分别是0．086，0．914及0．038，0．962，差异无统计学显著性意义（x^2=3．70，P=0．071）。（9ApoBEcorI住点的＋／＋，＋／-基因型频率分别是0．961，0．039及0．857，0．143，差异有统计学显著性意义（x^2=5．109，P=0．024），未检出-／-基因型；＋和-等位基因频率分另4是0．980，0．020及0．929，0．071，差异有统计学显著性意义（x^2=4．852，P=0．028）。④ApoCⅢ3175位点的CC，CG，GG基因型频率分别是0．363，0．560，0．077及0．421，0．553，0．026，差异无统计学显著性意义（x^2=2．336，P=0．311）；C和G等位基因频率分别是0．643，0．375及0．697，0．303，差异无统计学显著性意义（x^2=1．109，P=0．292）。⑤ApoCⅢ3206位点的GG，GT，TT基因型频率分别是0．527，0．396，0．077及0．671，0．276，0．053，差异无统计学显著性意义（x^2=3．538，P=0．171）；G和T等位基因频率分别是0．7250．275及0．809，0．191，差异无统计学显著性意义（x^2=3．231，P=o．072）。⑥ApoE112／158位点的E3／E3，EZ／E3，E2／E4，E3／E4，E2／E2基因型频率分别是0．725，0．132，0．022，0．110，0．011，0．000及0．263，0．421，0．237，0．066，0．000，0．013，差异有统计学极显著性意义（x^2=49．21，P=o．ooo），其中E3／E4及EZ／E3基因频率差异有统计学极显著性意义（x^2=35．41，17．85，P=0．000，0．000）；E2，E3和E4等位基因频率分别是0．077，0．846，0．077及0．342，0．506，0．152，差异有统计学极显著性意义（x^2=47．42，P=0．000），未检出E4／E4基因型。结论①昆明地区汉族健康人群上述6个位点基因型多态性有地区特征。②昆明地区汉族高脂血症患者ApoE112／158位点基因型频率（E3／E3，E2／E3，E2／E4，E3／E4），AopBMpsI基因住点的基因型（＋／＋，＋／-）与ApoCⅢ3175位点（CC，CG）基因型，ApoCI3206位点的（GG，GT，TT）基因型与高脂血症易感性相关。

维生素E对肝纤维化大鼠金属蛋白酶组织抑制因子-2、Ⅲ型胶原及纤维连接蛋白表达的影响

目的 研究维生素E(VE)防治肝纤维化作用及可能存在的机制。方法 以四氯化碳制备大鼠肝纤维化模型 ,用VE乳剂 (10 0mg/kg ,2次 /周 )静脉注射 ,连续 10周。免疫组织化学检测肝组织Ⅲ型胶原、纤维连接蛋白 (FN)沉积 ;原位杂交检测肝内金属蛋白酶组织抑制因子 2 (TIMP 2 )及α1(Ⅲ )前胶原mRNA表达。结果 治疗组大鼠肝内Ⅲ型胶原蛋白及FN形成较对照组减少 ;α1(Ⅲ )前胶原及TIMP 2mRNA表达降低 ,经图像分析 ,与对照组差异有显著性 (P<0 .0 5 )。结论 VE治疗可下调肝纤维化大鼠TIMP 2基因表达 ,减少细胞外基质沉积 。

蝎素组分Ⅲ对Jurkat E6-1细胞中CD69表达的影响

[目的]本文研究蝎素组分Ⅲ(scorpion venom crudeⅢ,SVC-Ⅲ)对Jurkat E6-1细胞CD69表达的影响,并探讨SVC-Ⅲ参与细胞免疫调控的可能机制。[方法]不同浓度SVC-Ⅲ(100ng/ml、10ng/ml、1ng/ml、0.1ng/ml)与植物凝集素(PHA)共同刺激培养Jurkat E6-1细胞。36h后利用流式细胞技术检测Jurkat E6-1细胞表面活化信号分子CD69表达变化情况。[结果]与PHA对照组比较,经PHA刺激培养的Jurkat E6-1细胞中,加入不同浓度的SVC-Ⅲ时,CD69表达均明显抑制(P﹤0.05),但高浓度(100ng/ml)SVC-Ⅲ对Jurkat细胞CD69表达的抑制作用没有低浓度SVC-Ⅲ(1ng/ml、0.1ng/ml)强,差异有统计学意义(P﹤0.05)。[结论]SVC-Ⅲ可抑制PHA诱导的JurkatE6-1细胞的活化,其作用机制可能与早期活化相关的CD69等的表达相关。

前列腺素E_2受体EP3-Ⅲ对胆管上皮癌细胞生长的影响

目的:探讨前列腺素E_2受体EP3-Ⅲ对胆管上皮癌细胞生长的影响。方法:采用常规培养的人胆管上皮癌细胞株HuccT1,分别给予不同浓度的EP3受体激动剂sulprostone(0、1、5、10μmol/L)作用24 h,用WST-8法检测细胞的活性。用RT-PCR方法检测HuccT1细胞表面EP3-ⅢmRNA水平的表达。用细胞瞬时转染方法使HEK293细胞表达EP3-Ⅲ蛋白,并用WST-8法检测PGE_2对转染HEK293细胞生长的影响。结果:WST-8检测发现,随着sulprostone作用浓度的升高,HuccT1的细胞活性呈浓度梯度依赖性增加。RT-PCR检测发现,HuccT1细胞有EP3-ⅢmRNA表达。HEK293细胞瞬时转染EP3-Ⅲ后,WST-8检测发现转染细胞在PGE_2 10μmol/L作用下细胞活性明显增加。结论:人胆管上皮癌细胞株HuccT1表面有前列腺素E_2受体EP3-Ⅲ表达,EP3-Ⅲ对细胞生长有显著的促进作用。