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天蚕素多肽分子对大肠埃希菌的抑制作用
被引量:
3
1
作者
王炜
任伟宏
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第6期533-536,共4页
目的体外重组表达家蝇天蚕素成熟肽分子,观察其对临床分离的多重耐药大肠埃希菌(E.coli)体外抑制作用。方法 PCR克隆天蚕素成熟肽(Mature Cecropin,MC)基因,在MC基因前加入色氨酸密码子(TGG)连接于pET32a质粒的硫氧还蛋白基因后,构建重...
目的体外重组表达家蝇天蚕素成熟肽分子,观察其对临床分离的多重耐药大肠埃希菌(E.coli)体外抑制作用。方法 PCR克隆天蚕素成熟肽(Mature Cecropin,MC)基因,在MC基因前加入色氨酸密码子(TGG)连接于pET32a质粒的硫氧还蛋白基因后,构建重组质粒pET32a-MC。转化E.coli/BL21(DE3)中。IPTG诱导重组融合蛋白质Thioredoxin(硫氧还蛋白,Trx)-MC表达。融合蛋白质纯化后,经胃蛋白酶37℃水解。融合蛋白质中的天蚕素氨基酸序列具有抗胃蛋白酶能力不被水解,融合蛋白质其余部分被胃蛋白酶水解成小于2kD的碎片,使用透析袋分离、纯化、浓缩,获得天蚕素成熟肽分子。水解产物经Tricine-SDS-PAGE验证,获得一条与天蚕素分子大小相近的条带。采用液态生长抑制试验检验天蚕素分子对E.coli抑制作用,观察其对标准菌株ATCC 25922及临床分离多重耐药菌株的抑制活性。结果 MC成熟肽分子体外对E.coli标准菌株的抑制活性较强,标准菌株较多重耐药菌株受抑制得更快,但两者均能被天蚕素分子抑制。结论天蚕素多肽分子对E.coli多重耐药菌株具有抑制作用。
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关键词
天蚕素
伴侣分子
融合表达
抑菌试验
多重耐药菌
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职称材料
题名
天蚕素多肽分子对大肠埃希菌的抑制作用
被引量:
3
1
作者
王炜
任伟宏
机构
河南中医学院第一附属医院
出处
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第6期533-536,共4页
文摘
目的体外重组表达家蝇天蚕素成熟肽分子,观察其对临床分离的多重耐药大肠埃希菌(E.coli)体外抑制作用。方法 PCR克隆天蚕素成熟肽(Mature Cecropin,MC)基因,在MC基因前加入色氨酸密码子(TGG)连接于pET32a质粒的硫氧还蛋白基因后,构建重组质粒pET32a-MC。转化E.coli/BL21(DE3)中。IPTG诱导重组融合蛋白质Thioredoxin(硫氧还蛋白,Trx)-MC表达。融合蛋白质纯化后,经胃蛋白酶37℃水解。融合蛋白质中的天蚕素氨基酸序列具有抗胃蛋白酶能力不被水解,融合蛋白质其余部分被胃蛋白酶水解成小于2kD的碎片,使用透析袋分离、纯化、浓缩,获得天蚕素成熟肽分子。水解产物经Tricine-SDS-PAGE验证,获得一条与天蚕素分子大小相近的条带。采用液态生长抑制试验检验天蚕素分子对E.coli抑制作用,观察其对标准菌株ATCC 25922及临床分离多重耐药菌株的抑制活性。结果 MC成熟肽分子体外对E.coli标准菌株的抑制活性较强,标准菌株较多重耐药菌株受抑制得更快,但两者均能被天蚕素分子抑制。结论天蚕素多肽分子对E.coli多重耐药菌株具有抑制作用。
关键词
天蚕素
伴侣分子
融合表达
抑菌试验
多重耐药菌
Keywords
Musca domestica cecropin
molecular partner fusion expression multiple drug resistant
分类号
R378.2 [医药卫生—病原生物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
天蚕素多肽分子对大肠埃希菌的抑制作用
王炜
任伟宏
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013
3
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