苦瓜总皂苷对小鼠急性酒精性肝损伤的干预作用研究

为了探讨苦瓜总皂苷对小鼠急性酒精性肝损伤的干预作用。将60只健康昆明种小鼠随机分为6组,每组10只。依次为空白组、模型组、阳性对照组、苦瓜总皂苷高剂量组、苦瓜总皂苷中剂量组和苦瓜总皂苷低剂量组。除空白组外,其他各组连续10d上午9:00给予白酒,建立急性酒精性肝损伤模型,下午2:00除模型组和空白组给予生理盐水外,其他各组给予干预治疗。末次给药12h后,比较每组小鼠的酒精状态。称重肝脏,计算肝脏系数,取肝组织切片进行病理学分析,测量小鼠的血清和肝脏中生化指标。结果表明:苦瓜总皂苷可以显著提高肝指数;降低模型组小鼠血清中AST、ALT水平和肝脏中MDA含量,增加肝脏中GSH含量,增强肝脏SOD、CAT活力且肝细胞颗粒变性有不同程度的改善。苦瓜总皂苷可有效减轻白酒诱导的小鼠急性酒精性肝损伤,其作用机制可能与减轻自由基和脂质过氧化物对肝细胞损伤有关。

A new cucurbitane triterpenoid from Momordica charantia

One new cucurbitane-type triterpenoid saponin, 5β,19-epoxycucurbita-6,23-diene-3β,19,25-triol-3-O-β-D-allopyranoside （1）,named momordicoside P was isolated from the fresh fruits ofMomordica charantia. The structure of the saponin was elucidated by spectral methods, including 2D-NMR spectra.

苦瓜皂苷最佳提取工艺优化及其对α-葡萄糖苷酶的抑制活性

采用响应面法优化超声提取苦瓜皂苷的最佳工艺,并考察最佳提取工艺条件下提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制活性。试验结果表明,超声提取苦瓜皂苷的最佳工艺条件为固液比1∶15(g/mL)、乙醇浓度75%、超声时间95 min、提取温度50℃,在该条件下苦瓜皂苷的提取率可达2.21%,其对α-葡萄糖苷酶抑制的IC50值为5.48 mg/mL。

苦瓜皂苷对饲喂高糖饲料松浦镜鲤幼鱼生长、消化及肝脏健康的影响

为探讨苦瓜皂苷对饲喂高糖饲料松浦镜鲤(Cyprinus carpio Songpu)幼鱼的生长、消化及肝脏健康的影响,随机选取450尾体质量(6.43±0.02)g的松浦镜鲤幼鱼饲养在室内500 L控温循环水族箱中,分别投喂蛋白30%、脂肪6%而含糖不同的6种饲料:含糖10%的饲料(对照组LC)和含30%饲料(高糖组HC)及含30%糖的高糖中添加100 mg/kg(MCS1)、400 mg/kg(MCS2)、1600 mg/kg(MCS3)及6400 mg/kg(MCS4)]苦瓜皂苷的饲料,在水温28℃~32℃下饲养8周。结果表明,MCS3组松浦镜鲤的终末体质量、特定生长率、饲料效率及摄食率显著高于HC组(P<0.05),且MCS3组的终末体质量和摄食率显著高于LC组(P<0.05)。MCS3组松浦镜鲤的蛋白酶及淀粉酶活性最高,显著高于HC组和MCS4组(P<0.05),而其脂肪酶活性最低,显著低于HC组(P<0.05)。MCS3组肝脏的核因子E2相关因子2、铜锌超氧化物歧化酶、锰超氧化物歧化酶及过氧化氢酶的表达量,超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、过氧化物酶、谷胱甘肽、总抗氧化能力活性最高,显著高于HC组(P<0.05)。MCS3组Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1表达量和丙二醛含量最低,显著低于HC组(P<0.05);MCS3组中过氧化氢酶表达量显著高于LC组(P<0.05)。MCS3组改变了HC组的病理表现,肝细胞核更清晰,细胞界限明显且排列整齐,与LC组肝脏组织结构完整度相似,结构较清晰。综上所述,高糖饲料中苦瓜皂苷添加水平应在1600 mg/kg左右,当添加水平达到6400 mg/kg时,不利于松浦镜鲤幼鱼肠道消化及肝脏健康。

苦瓜皂苷调控circ_0008274/miR-377对结肠癌细胞增殖及凋亡的影响

目的:探讨苦瓜皂苷对结肠癌细胞增殖及凋亡的影响及其可能作用机制。方法:体外培养结肠癌细胞Caco-2,分为对照组、苦瓜皂苷L组、苦瓜皂苷M组、苦瓜皂苷H组、si-NC组、si-circ_0008274组、苦瓜皂苷H+pcDNA-circ_0008274组;MTT法、平板克隆实验、流式细胞术分别检测细胞增殖、克隆形成及凋亡;qRT-PCR法检测circ_0008274、miR-377的表达量;双荧光素酶报告实验检测circ_0008274与miR-377的靶向关系。结果:与对照组比较,苦瓜皂苷L组、苦瓜皂苷M组、苦瓜皂苷H组细胞增殖抑制率、miR-377的表达量、细胞凋亡率升高(P<0.05),克隆形成数减少(P<0.05),circ_0008274的表达量降低(P<0.05);与si-NC组比较,si-circ_0008274组细胞增殖抑制率、细胞凋亡率升高(P<0.05),克隆形成数减少(P<0.05);circ_0008274可靶向调控miR-377的表达;与苦瓜皂苷H组比较,苦瓜皂苷H+pcDNA-circ_0008274组miR-377的表达量、细胞增殖抑制率、细胞凋亡率降低(P<0.05),克隆形成数增多(P<0.05)。结论:苦瓜皂苷可通过抑制circ_0008274表达而促进miR-377表达来诱导结肠癌细胞凋亡、抑制细胞增殖。

罗汉果皂苷Ⅴ的镇咳、祛痰及解痉作用研究

目的筛选罗汉果镇咳祛痰的有效部位,并进一步研究罗汉果皂苷Ⅴ的镇咳、祛痰及解痉作用。方法通过观察罗汉果水提部位、体积分数95%醇提部位及体积分数50%醇提部位对浓氨水致小鼠咳嗽次数及咳嗽潜伏期的影响,筛选出罗汉果镇咳的有效部位为体积分数50%醇提部分。进一步观察了50%醇提部分中的罗汉果皂苷Ⅴ对小鼠酚红排泄量及组胺致豚鼠离体回肠及离体气管痉挛的影响。结果罗汉果水煎剂50g生药.kg-1,罗汉果体积分数50%醇提部位50g生药.kg-1及罗汉果皂苷Ⅴ300,150,75mg.kg-1能明显减少小鼠的咳嗽次数,罗汉果体积分数50%醇提部位50g生药.kg-1及罗汉果皂苷Ⅴ300mg.kg-1还能明显延长小鼠咳嗽潜伏期;罗汉果皂苷Ⅴ150mg.kg-1能明显增加小鼠气管酚红排泄量,提示有一定的祛痰作用;5g.L-1的罗汉果皂苷Ⅴ能明显拮抗组胺引起的回肠收缩;2.5及1.25g.L-1剂量对组胺引起的气管痉挛有明显的拮抗作用。结论罗汉果皂苷Ⅴ显示出一定的镇咳、祛痰、解痉活性,推测为罗汉果镇咳的主要活性成分。

苦瓜皂甙快速分离纯化方法研究

用乙醇浸提葫芦科植物苦瓜(MomordicacharantiaL.),通过改变浸提液浓度,浸提时间和洗脱液浓度等,确定一种提取苦瓜总皂甙的优化工艺。用人参皂甙Rg1为对照品,通过选择最大吸收波长,绘制标准曲线定量测定苦瓜皂甙总量。

苦瓜皂甙的抗氧化作用初探

目的 :利用现有条件提取苦瓜皂甙 ,并探讨其抗氧化作用。方法 :Wistar大鼠 ,体重(180± 10 )g ,随机分为正常对照组 (NC)、实验对照组 (EC)、实验 1组 (E1)和实验 2组 (E2 ) ,饲喂普通饲料 ,NC和EC饮用自来水 ,E1和E2饮水中分别添加 10 0mg·L-1、2 0 0mg·L-1的苦瓜皂甙。饲养 5周后 ,将 3个实验组游泳 1h后及NC组处死 ,取血清、骨骼肌和肝脏标本测MDA、SOD、GSH -Px。另外 ,在体外培养的胸腺细胞中分别加入苦瓜皂甙至终浓度为 2 5mg·L-1、5 0mg·L-1,检测细胞中SOD、GSH -Px、MDA。结果 :苦瓜皂甙能显著降低剧烈运动后各组织MDA升高幅度 :NC、EC、E1和E2各组 ,血清中MDA分别为 (34 .5 7± 3.5 2 )、(135 .2 0± 8.19)、(10 4 .96±9.67)、(79.4 9± 9.92 )nmol·ml-1;骨骼肌中的MDA分别为 (12 2 .4 3± 19.36)、(62 0 .0 4± 5 4 .67)、(5 14.0 0± 76.0 4 )和 (32 7.69± 5 0 .17)nmol·gpr-1;肝脏MDA分别为 (10 4 .5 5± 16.36)、(4 5 6.90±34 .4 5 )、(380 .64± 2 3.17)和 (310 .2 4± 19.91)nmol·gpr-1,且有剂量效应。能显著升高各组织SOD活力 :血清中的SOD活力分别为 (2 6.0 5± 4 .12 )、(2 3.69± 3.4 1)、(32 .93± 4 .4 7)和 (39.12± 4 .19)U·ml-1;骨骼肌的SOD活力分别为 (5 .2 1±

苦瓜皂甙对衰老动物内分泌功能的影响

目的 :探讨苦瓜皂甙对衰老动物内分泌功能的调节作用。方法 :15月龄雌性老年昆明小鼠 ,随机分为老年对照组、实验 1组和实验 2组三组 ,同时准备 4月龄雌性昆明小鼠作青年对照组 ,其中两对照组饮水为普通水 ,两个实验组饮水分别含有 10 0mg/L及 2 0 0mg/L苦瓜皂甙 ,饲养 5周后取血清标本待测。同时 ,取 12月龄大鼠胸腺细胞培养 ,检测不同浓度苦瓜皂甙对雌激素受体蛋白表达的影响。结果 :与青年对照组相比 ,衰老小鼠血清ACTH、雌二醇水平显著降低。与老年对照组相比 ,两实验组血清雌二醇水平均明显升高 ,ACTH水平有升高趋势 ,但只有高剂量组有显著性 ;两组之间所有指标均没有显著性差异。体外实验发现 ,苦瓜皂甙明显促进雌激素受体蛋白的表达 ,却不影响其mRNA水平。结论

不同苦瓜品种皂苷含量组成及其抗氧化活性和α-葡萄糖苷酶的抑制活性

【目的】比较不同品种苦瓜果肉中皂苷总含量、7种单体组成含量及抗氧化性和α-葡萄糖苷酶抑制活性差异,为明确苦瓜中主要皂苷单体组成含量,筛选高皂苷含量及高活性的苦瓜品种提供科学参考。【方法】采用香草醛-高氯酸法测定13个苦瓜品种皂苷总含量,高效液相法测定7种皂苷单体含量、总抗氧化能力指数(ORAC),并评价其抗氧化活性,采用4-硝基酚-2-D吡喃葡萄糖苷法测定α-葡萄糖苷酶抑制率,同时分析组成含量和活性之间的相关性。【结果】13个不同品种苦瓜果肉皂苷总含量呈显著性差异,含量变幅为(0.52—1.20)g/100g DW,平均值为0.79 g/100g DW,变异系数为21.65%。7种皂苷单体含量的平均值依次为:苦瓜苷A(Momorcharaside A)5.32μg·g-1 DW,苦瓜皂苷A(Momordicoside A)25.42μg·g-1 DW,Karaviloside XI 3.96μg·g-1 DW,苦瓜皂苷F2(Momordicoside F2)66.95μg·g-1 DW,苦瓜皂苷K(Momordicoside K)183.70μg·g-1 DW,(23E)-3β,7β,25-trihydroxycucubita-5,23-dien-19-al 40.13μg·g-1 DW,Kuguacin N 3.87μg·g-1 DW。不同品种苦瓜总皂苷ORAC指数变幅为2 747.76—15 584.07μmol Trolox·g-1,平均值为8 879.48μmol Trolox·g-1,变异系数为34.91%;α-葡萄糖苷酶IC50值变幅为1.55—4.96 mg·m L-1。【结论】不同品种苦瓜果肉皂苷总含量、单体组成含量、抗氧化活性和α-葡萄糖苷酶抑制率有显著差异。皂苷是苦瓜抑制α-葡萄糖苷酶活性的主要物质基础,但并非苦瓜抗氧化活性主要贡献物质。(23E)-3β,7β,25-trihydroxycucubita-5,23-dien-19-al是主要活性单体。

苦瓜总皂苷对2型糖尿病大鼠降血糖作用机制的研究

目的探讨苦瓜总皂苷对2型糖尿病大鼠的降血糖机制。方法取清洁级雄性SD大鼠60只,随机取8只作为正常对照组,其余的用高脂高糖饮食喂养8周后用小剂量链脲佐菌素(STZ)尾静脉注射建2型糖尿病大鼠模型。将合格的糖尿病模型大鼠40只分为模型组、二双胍组和3个剂量(100 mg/kg、200 mg/kg、400 mg/kg)苦瓜总皂苷组,每组8只。二甲双胍组每天给予二甲双胍50 mg/kg,苦瓜总皂苷100组、200组和400组:分别每天给予100、200和400 mg/kg苦瓜总皂苷,灌胃8周后分别测定大鼠空腹血糖、胰岛素,同时留取胰岛、肝脏和骨骼肌,分别用电镜、糖原染色和Western blot的方法观察胰岛β细胞结构、肝糖原和骨骼肌葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)表达量。结果给药8周后,与模型组比较,各苦瓜总皂苷组大鼠的空腹血糖和胰岛素值均显著降低,而骨骼肌GLUT4表达量显著增高,胰岛素分泌颗粒显著增加,肝脏糖原颗粒数量也明显增加。结论苦瓜总皂苷有降血糖作用,其机制主要包括促进肝糖原合成、抑制肝糖原分解以及通过外周组织GLUT4表达增强进而增加胰岛素敏感性等。

苦瓜多糖与皂苷对高血糖协同预防作用机制研究

研究苦瓜多糖及皂苷对高血糖的协同预防作用,为预防高血糖的苦瓜复方保健食品的开发提供依据。用苦瓜多糖及皂苷灌胃3周,腹腔注射链脲佐菌素(STZ)诱导小鼠高血糖,观察小鼠的体重,肝肾脏器系数,血糖,胰岛素,糖原代谢,糖酵解,抗氧化能力的变化。结果表明,STZ注射前,各组小鼠血糖无差异(P>0.05);STZ注射后,与对照组比较,协同组小鼠肝系数增高,血糖降低,胰岛素增高,肝超氧化物歧化酶(SOD)及乳酸脱氢酶(LDH)活性增强,丙二醛(MDA)含量降低,肌糖原增加(P<0.05);协同组胰岛素为(17.74±1.19)μIU/mL,SOD为(366.43±28.28)U/mg·prot,显著高于多糖组及皂苷组(P<0.05),血清LDH活性为(1039.77±98.44)U/L,显著低于多糖组及皂苷组。说明苦瓜多糖及皂苷能通过协同增加糖贮存、协同增强抗氧化能力及组织供养能力保护胰岛分泌功能等途径预防高血糖。

苦瓜皂甙降血糖作用及其机制初探

将雄性Wistar鼠 (体重 1 80± 1 0g)随机分为正常对照组 (NC)、实验对照组 (EC)和两个实验组 (E1、E2 ) ,其中NC、EC组饮用普通水 ,E1、E2组饮用水中分别含有苦瓜皂甙 1 0 0mg·L 1和 2 0 0mg·L 1。饲养五周后 ,后三组动物禁食 2 4h后取血待测 ;取血完毕即开始进食 ,2 4h后再次取血待测。一周后杀死动物取肌肉、肝脏标本检测糖原水平。结果显示苦瓜皂甙虽不影响禁食大鼠血浆胰岛素含量 ,却可明显升高血糖和皮质醇水平 ;显著降低进食后大鼠血糖和胆固醇水平 ,并维持适度的皮质醇水平。

电喷雾多级串联质谱快速鉴定木鳖子皂苷

利用电喷雾正负离子多级串联质谱相结合的方法 ,并结合皂苷部分醇解产物和皂苷元的质谱数据 ,鉴定了木鳖子皂苷的结构 。

HPLC-MS法表征苦瓜皂苷结构

建立苦瓜皂苷结构的HPLC-MS分析方法。粗提、纯化后的苦瓜皂苷,经固相萃取精制后,用高效液相色谱-电喷雾离子阱质谱法鉴定洗脱液中的皂苷种类。根据正离子和负离子模式下的分子离子峰获得化合物分子量信息,通过与文献数据对照,确定化合物的可能结构为苦瓜皂苷L(分子量634)、苦瓜皂苷F2或I(分子量618)、7-β,25-三羟基-葫芦烷-5,(23E)-双烯-19-醛或苦瓜皂苷Ⅰ。

罗汉果皂苷Ⅲ的人肠内细菌生物转化

目的:探讨人肠内细菌对中药罗汉果中罗汉果皂苷Ⅲ结构的生物转化,确定转化产物的结构,为原形化合物罗汉果皂苷Ⅲ在肠内吸收的评价提供科学依据。方法:采用人肠内细菌与罗汉果皂苷Ⅲ在厌氧条件、37℃共温孵培养的方法对其结构进行生物转化,通过硅胶柱色谱技术分离、纯化生物转化产物,应用红外光谱(infra-red spectrometry,IR)、核磁共振波谱(nuclear magneticresonance spectrometry,NMR)和质谱(mass spectroscopy,MS)等技术方法确定生物转化产物的结构。结果:罗汉果皂苷Ⅲ可由人肠内细菌依次脱去C-3葡萄糖基和C-24龙胆二糖基转化产生罗汉果皂苷ⅡA1和罗汉果醇。结论:罗汉果皂苷Ⅲ可被人肠内细菌进行生物转化,产生次级苷罗汉果皂苷ⅡA1及其苷元罗汉果醇。

罗汉果皂甙的含量测定

从罗汉果中提取强甜味剂罗汉果皂甙 ,并进行了初步分离 ,以香草醛 高氯酸比色法测定了大中小三种罗汉果中总皂甙的含量 ,经方差分析 ,大、中罗汉果总皂甙含量无显著差异 ,而小果皂甙含量大于大、中果 ,提取单位皂甙所需原材料价格以小果为低。若将其作为甜味剂开发使用 ,以小果最为经济。为开发利用商品性差、价格低的小果 ,提供了实验研究依据和开发利用途径。

苦瓜皂甙对老年荷瘤小鼠免疫功能的影响

目的 :探讨苦瓜皂甙对老年荷瘤小鼠免疫功能的调节作用。方法 :15月龄雌性昆明小鼠 ,随机分为老年对照组、实验对照组、实验 1组和实验 2组。均喂以普通饲料 ,其中两对照组饮用自来水 ,两个实验组饮用分别为 10 0mg·L- 1和 2 0 0mg·L- 1苦瓜皂甙水。饲养 5周后 ,对后三组动物腹腔均接种 0 .1ml浓度为 10 6 ·ml 1的S180肿瘤细胞 ,1周后处死动物取标本待测。结果 :两个使用苦瓜皂甙组小鼠胸腺和脾脏组织中CD8+T细胞数有增高趋势 ,胸腺中CD4 +CD8+双阳性T细胞数显著降低〔老年对照组 :(6 8.0 9± 5 .2 6 ) % ,实验对照组 :(5 8.82± 6 .5 2 ) % ,实验 1组 :(5 0 .5 8± 3.74 ) % ,实验 2组 :(45 .85± 5 .75 ) %〕 ;血清IL - 2水平回升明显 ,血清TNFα含量显著增高 ;老年对照组、实验对照组、实验 1组和实验 2组 ,血清IL - 2分别为 (2 8.5 7± 4 .90 )、(17.14± 3.2 7)、(2 2 .86± 3.2 7)、(2 7.76± 4 .2 0 )ng·L- 1,血清TNFα分别为 (185 .5 3± 35 .34)、(2 4 5 .83±2 7.39)、(2 92 .2 1± 2 4 .74 )、(2 89.12± 2 5 .18)ng·L- 1。但是两个使用苦瓜皂甙组之间 ,所有指标均没有统计学差异。结论 :苦瓜皂甙可改善老年荷瘤小鼠免疫功能 。

苦瓜皂甙对衰老小鼠免疫功能的影响

目的 : 探讨苦瓜皂甙对衰老小鼠免疫功能的影响。方法 : 1 5 mo雌性昆明小鼠 ,随机分为老年对照组 ( SC)、实验 组 ( E1 )、实验 2组 ( E2 ) ,SC饮用自来水、E1、E2两组分别饮含有1 0 0 mg/L和 2 0 0 mg/L的苦瓜皂甙水。饲养 5 w后 ,处死动物 ,取标本待测。同时制备衰老小鼠脾细胞、腹腔巨噬细胞、胸腺细胞 ,分别加入不同浓度的苦瓜皂甙 ( 2 5 mg/L和 5 0 mg/L) ,培养后待测。结果 : 苦瓜皂甙不影响脾脏指数 ,但胸腺指数有升高趋势 ,实验组吞噬指数、血清 IL- 2水平明显升高 ,且 E2高于 E1 ( P<0 .0 5 )。苦瓜皂甙能明显增加胸腺中 CD8+ - T细胞数 ,显著降低胸腺和脾脏中 CD+ CD8+ 双阳性 T细胞数。体外实验表明 ,苦瓜皂甙不但可促进脾脏分泌 IL - 2 ,还可显著增强腹腔巨噬细胞分泌 TNFα,但不影响胸腺细胞凋亡百分率。结论 : 苦瓜皂甙可通过改变 T细胞各亚群比例 ,促进 IL- 2分泌 ,增强吞噬指数 ,提高衰老小鼠免疫功能。

苦瓜皂苷和多糖的连续提取工艺及其对α-葡萄糖苷酶的抑制作用

【目的】建立超声-微波法连续提取苦瓜皂苷和多糖的优化工艺,并评价其对α-葡萄糖苷酶的抑制作用。【方法】采用二次回归正交旋转组合设计优化超声-微波法连续提取苦瓜中皂苷和多糖的工艺条件,采用4-硝基酚-2-D吡喃葡萄糖苷(PNPG)法测定皂苷和多糖提取物对α-葡萄糖苷酶抑制率。【结果】以含水质量分数13%的苦瓜干为原料,先提取皂苷后提取多糖的条件为,将其粉碎至200目后,以体积分数75%乙醇为溶剂,料液比1﹕18,超声-微波协同萃取(50 W,20 kHz)16 min,在该条件下,皂苷提取率达2.51%。提取皂苷后的残渣,继续以水为溶剂,料液比1﹕14,pH 8.0,时间23 min,温度84℃,超声-微波协同萃取(50 W,20 kHz)20 min,多糖提取率达12.86%。苦瓜皂苷和多糖提取物对α-葡萄糖苷酶均有不同程度的抑制作用,其IC50分别为1.03mg.mL-1和10.73 mg.mL-1,苦瓜皂苷的抑制效果显著强于多糖的(P<0.05)。【结论】采用超声-微波协同作用连续提取苦瓜皂苷和多糖工艺,可有效利用原料、提高产出和效率,所得苦瓜皂苷和多糖提取物对α-糖苷酶均表现抑制作用,显示一定的降糖潜力。