单克隆非特异性抑制因子-β(MNSFβ)在大肠杆菌中的表达、抗体的制备及在小鼠子宫内膜上的组织定位

为了获得足够量的单克隆非特异性抑制因子-β蛋白(monoclonal nonspecific supressor factor β,MNSFβ)及其抗体用于探讨MNSFβ在着床中的作用机理,本研究构建了表达质粒pBV220/MNSFβ-hCGβ,在大肠杆菌中表达了融合蛋白MNSFβ-hCGβ,用抗hCGβ抗体对表达产物进行鉴定,结果表明融合蛋白MNSFβ-hCGβ得到了正确表达,且分子量和理论值相近。表达产物MNSFβ-hCGβ经初步纯化后用于免疫Balb/C小鼠,制备抗体。同时,我们还构建了表达质粒pGEX-4T-2/MNSFβ,在大肠杆菌中表达了融合蛋白GST-MNSFβ。用融合蛋白GST-MNSFβ对融合前的免疫小鼠回忆刺激并进行检测,制备了抗MNSFβ多克隆抗体和单克隆抗体。应用所制备的多克隆抗体进行免疫组化研究,对MNSFβ在小鼠子宫内膜上进行了组织定位,结果显示,MNSFβ在着床日(受精后第4.5天)小鼠子宫非着床位点的表达和着床位点相比明显提高。

MNSF-β在子宫内膜异位症异位内膜中的研究

目的探讨小鼠单克隆非特异性抑制因子-β（MNSF-β）在子宫内膜异位症发病机制中的作用。方法选取24例经病理证实为子宫内膜异位症的异位内膜标本为实验组，以14例非子宫内膜异位症患者的子宫内膜标本为对照组。采用RT-PCR方法检测MNSF-βmRNA的相对表达。并对子宫内膜异位症患者异位内膜中MNSF-β表达水平与内异症严重程度及月经周期进行相关性分析。结果实验组异位内膜中MNSF-β表达相对水平明显低于对照组在位内膜（t=-11．581，P〈0．01）；实验组的异位内膜MNSF-9水平，中、重度组与轻度组的差别有显著性（t=-2．731，P〈0．05）；实验组异位内膜和对照组在位内膜在各自组中增殖期和分泌期比较，MNSF-β表达水平均无显著性差异（P〉0．05）；实验组异位内膜增殖期、分泌期与对照组在位内膜增殖期、分泌期在位内膜分别比较，均有统计学差异（t增殖期=-3．858，t分泌期=-3．187，均P〈0．05）。结论MNSF-β表达降低与子宫内膜异位症的发生发展有着密切关系。