甘蓝花蕾小孢子发育同步性影响因素初步探讨

为了提高甘蓝单花蕾小孢子发育同步性,完善游离小孢子培养技术体系,对小孢子供体植株通过整枝、NAA处理和增施微肥3种处理对其影响因素进行初步探究。结果表明,只留一级侧枝(CL2)能有效提高花蕾小孢子发育同步性;1 000mg/L(N2)质量浓度的NAA处理后也能显著提高花蕾小孢子发育同步性;增施质量分数0.1%的微肥后,单核靠边期最大比率可达76.0%,比对照(35.6%)有极显著的提高。

脐血单核细胞向破骨细胞诱导分化的实验研究

目的 脐血单核细胞向破骨细胞诱导分化的可行性研究。方法 分离脐血中单核细胞经1×10 -8mol/L 1,2 5 (OH) 2 D3 诱导培养,采用倒置相差显微镜观察细胞形态变化、组化染色和吸收陷窝观察技术分析细胞的抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate resistantacidphosphatase ,TRAP)表达和骨吸收活性。结果 脐血单核细胞在1,2 5 (OH) 2 D3 作用下分化加速,表现为长梭形和类圆形细胞的增多、增大,体外诱导培养13d ,有多核TRAP阳性细胞产生,但未表现出骨吸收功能。结论 脐血单核细胞经1,2 5 (OH) 2 D3 体外诱导培养后可表现骨细胞的早期特征。

新疆野生阿魏菇原生质体的再生与单核菌株交配型测定

【目的】利用原生质体单核化技术获得具有优良性状的阿魏菇(Pleurotus ferulae)新菌种,为新疆野生阿魏菇新品种的保育及产业化应用提供技术支撑。【方法】采用原生质体制备技术获得阿魏菇单核菌株并进行交配型测定。【结果】酶解3.5 h时,PL01、PL163与PL176等3株野生阿魏菇亲本菌株的原生质体释放量最大,浓度最高达20.6×10^(5)个/mL,通过优化的原生质体单核化技术最终获得50个单核菌株,亲本菌株PL163、PL01、PL176原生质体单核化率分别为25.68%、12.8%、10.8%,获得率较低。对其进行了交配型测定,每株亲本菌株得到2种交配型的单核菌株。其中,菌株PL01与PL163、2种交配型获得比例均为1∶3,而PL1762种交配型获得比例为1∶4。每个亲本菌株与获得的单核菌株在菌丝长速、菌落形态方面均具有差异。以不同交配型的单核菌株PL01-P16、PL01-P49、PL163-7、PL163-24、PL176-23、PL176-39作为杂交育种材料进行配对,获得12株性状优良的杂交菌株。拮抗反应表明,12株杂交菌株与亲本之间形成明显隆起的拮抗带,与亲本菌株显著不同。【结论】3株阿魏菇野生菌株在原生质体再生单核获得率、长速、形态等方面具有丰富的多样性,获得的杂交菌株为新疆阿魏菇新品种的保护奠定了基础,并为选育优良阿魏菇杂交品种提供了良好的种质材料。

系统性红斑狼疮外周血单个核细胞Fas FasL及bcl-2抗原的表达

目的探讨系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）免疫功能失调与细胞凋亡的关系。方法应用免疫细胞化学技术对ＳＬＥ患者外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）上某些凋亡调节分子的表达进行了检测。结果ＳＬＥ患者ＰＢＭＣ上Ｆａｓ及ＦａｓＬ抗原均高表达，ｂｃｌ２蛋白正常表达。结论ＳＬＥ患者体内存在较多活化的淋巴细胞，Ｆａｓ和ＦａｓＬ抗原表达异常促进了ＳＬＥ的ＰＢＭＣ凋亡。

D2胚胎核状态影响胚胎质量和着床潜能

目的：研究第2d（D2）胚胎核状态对D3胚胎质量和胚胎着床潜能的影响，以评估其在体外受精-胚胎移植（IVF-ET）中的临床应用价值。方法：回顾性分析本院生殖中心2006年7-10月的409例常规IVF-ET／ICSI移植周期的胚胎。评估D2胚胎卵裂球的核特征，将胚胎分为A级（胚胎的每个卵裂球内均可见单核）、B级（胚胎至少有1个卵裂球内未见核）和C级[胚胎至少有1个卵裂球内见多核（≥12个核）]，比较各级胚胎的D3停滞胚胎率和优质胚胎率。并比较移植胚胎来自同-D2核类型的周期的临床妊娠率和着床率。结果：A级胚胎的D3停滞胚胎率低于B级和C级，优质胚胎率高于B级和C级（P〈0．01）。B级胚胎的停滞胚胎率低于C级，优质胚胎率高于C级（P〈0．01）。移植胚胎的D2核类型相同的周期共234例，其中移植胚胎均为A级胚胎的周期（A组）51例，移植胚胎均为B级胚胎的周期（B组）183例。A、B组间临床妊娠率差异无统计学意义（P〉0．05），但A组的着床率高于B组（P〈0．05）。结论：对D2胚胎进行核评估可预测胚胎的继续发育能力和着床潜能，将其与D3形态评估相结合，将有助于识别有活力的胚胎，减少移植胚胎数。

儿童特发性血小板减少性紫癜Th亚群细胞因子的测定及意义

目的 研究外周血Th亚群细胞因子IFN-γ,IL-4和TGF-β1在急、慢性儿童特发性血小板减少性紫癜中的浓度及临床意义.方法 应用流式细胞术检测外周血IFN-γ和IL-4表达水平,采用酶联免疫（ELISE）法检测外周血单个核细胞生成的TGF-β1水平,并与24例正常对照组检测进行比较.结果 aITP患儿Th1细胞因子IFN-γ阳性百分比高于正常对照组（P＜0.05）,cITP患儿Th1细胞因子IFN-γ阳性百分比较对照组显著降低（P＜0.01）.aITP患儿Th2细胞因子IL-4与正常对照组比较差异无统计学意义（P＞0.05）,cITP患儿Th2细胞比对照组显著升高（P＜0.05）.aITP和cITPTh3细胞因子TGF-β1水平均较正常对照组明显降低,cITP较aITP显著降低,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 儿童急、慢性ITP中Th细胞因子对其发病机制研究及鉴别诊断有重要价值.

体外诱导脐血单核细胞分化为破骨样细胞的研究

目的建立人破骨样细胞体外培养的方法,探讨1α,25-(OH)2D3、巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)、前列腺素E2(PGE2)等骨吸收刺激因子对破骨细胞分化、增殖和功能的影响,为进一步研究正畸牙齿移动的生物力学机制奠定基础。方法将脐血单核细胞接种于预置盖玻片和骨片的24孔培养板中,实验组分别加入诱导因子1α,25-(OH)2D3、M-CSF、PGE2,对照组不加,每3 d换液一次,培养7 d。采用倒置相差显微镜、TRAP染色等方法观察破骨样细胞的形成情况。结果第3天实验组单核细胞出现融合趋势,第7天TRAP染色可见阳性的多核破骨样细胞,但尚未形成骨吸收陷窝,以1α,25-(OH)2D3组破骨样细胞形成数量最多。结论脐血单核细胞经1α,25-(OH)2D3、M-CSF、PGE2体外诱导培养后可分化为TRAP(+)多核的破骨样细胞,且10-8mol/L的1α,25-(OH)2D3具有最强的生物学效应。

防御素α1、α3 mRNA在活动性狼疮肾炎患者PBMC中的表达

为了探讨活动性狼疮肾炎 (LN )患者外周血单个核细胞 (PBMC )中防御素α1、α3mRNA的表达 ,从 33例女性活动性LN患者及 2 1例健康女性PBMC中提取总RNA ,采用半定量RT PCR的方法 ,以GAPDH为内参照 ,测定防御素α1、α3mRNA的相对表达。发现LN患者的防御素α1、α3mRNA表达均较健康人升高 (P <0 0 1)。防御素α1、α3mRNA在活动性LN患者PBMC中的高表达提示防御素α1。

低氧对CD34^+造血干/祖细胞增殖分化及其对细胞因子依赖性的影响

采用免疫磁珠法分离脐血CD34+造血干 /祖细胞 ,进行低氧和常氧条件下单个核细胞 (MNC)及CD34+细胞的半固体及液体培养 ,计细胞总数和集落产率 ,并通过流式细胞仪检测细胞表型和细胞周期 ,以探讨造血干/祖细胞在低氧环境下增殖分化性能的改变及其对细胞因子反应性的变化。结果显示 :CD34+细胞在低氧条件下生成的BFU E集落数 ( 32 4 8± 41 4/10 4 细胞 )明显增多 (对照为 191 2± 34 5 /10 4 细胞 ,P <0 0 1) ;在无细胞因子存在的液体培养体系中 ,低氧组的BFU E产率 ( 15 2 4± 2 2 6 /10 4 细胞 )明显高于常氧组 ( 74 2± 9 3/10 4 细胞 ,P <0 0 1) ;低氧培养细胞中CD34+细胞的比例高于对照 2 5± 1 2倍 (P <0 0 5 )。但MNC生成的BFU E在常氧和低氧条件下无显著差异。这些结果表明 :体外低氧环境能显著增加CD34+造血干 /祖细胞形成红系祖细胞的产率 ,且使其对细胞因子的依赖性降低 ,并对早期红系祖细胞的维持有增强作用 。

重症肌无力患者外周血产生白细胞介素2的能力

<正> 以往重症肌无力(MG)发病研究主要集中在体液免疫,细胞免疫尤其是免疫调节因子方面的工作研究较少。本文首次报道MG患者外周血淋巴细胞(PBL)体外经植物血凝素(PHA)刺激后产生白细胞介素_2(IL-2)能力的研究。10~6/ml的PBL经PHA刺激后培养48h,取上清液;用IL-2依赖的特异性T杀伤细胞株(CTLL)培养[~3H]-TdR参入法测定其中IL-2的生物活性。发现MG组(30例)IL-2的产生能力26.04±9.11U/ml,显著低于正常对照组(27例)42.52±13.43U/ml(P<0.01)。同时用酶联免疫吸附法(ELISA)测定了MG患者血清中烟碱型乙酰胆碱受体抗体(nAchRAb),对MG患者各部位肌无力严重程度累计积分。

三分群血细胞分析仪显微镜复检标准探讨

目的比较三分群血细胞分析仪和显微镜下白细胞分类结果,探讨三分群血细胞分析仪中间细胞群(mononnuclear,Mo)的显微镜复检标准,以保证血液常规的检验质量。方法应用KX-21三分群血细胞分析仪和普通光学显微镜分别对302例临床血液常规标本进行白细胞分类,并进行对比分析。结果Mo<8%时,仪器分类结果与显微镜分类结果无显著性差异,且有良好的相关性。Mo>8%时,仪器分类结果与显微镜分类结果有显著性差异,其中有8.6%的标本显微镜分类出现异常情况。结论三分群血细胞分析仪仅作为白细胞分类的初筛,尚不能完全替代人工显微镜分类方法。临床应用中引入显微镜复检标准,可为临床提供有价值的诊断信息。

“萍乡显性核不育水稻”细胞形态学研究初报

萍乡雄性核不育水稻，是一种自然变异株，由于在小孢子形成过程中出现各种异赏现象，进入单核期很快以各种形式败育致死，能进入双核期败育的是极少数，未见到三核期败育的花粉粒。该材料属于典败型显性雄性不育水稻。

血管内皮生长因子在脊柱关节病外周关节病变发病机制中的作用研究

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)在脊柱关节病(SpA)发病机制中的作用以及与疾病活动性的相关性。方法收集外周血单个核细胞(PBMC)和关节液中的单个核细胞(SFMC),经脂多糖(LPS)刺激后,采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测VEGFmRNA的表达,并与疾病活动性进行相关性比较,同时采用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法测定关节液和血清中的VEGF(SF-VEGF/s-VEGF),并与VEGFmRNA以及疾病活动性进行相关性比较。结果未经任何刺激的PBMC无VEGFmRNA表达,经LPS刺激的SFMC其VEGFmRNA的表达比未经刺激的SFMC显著增高,未经刺激的SFMCVEGFmRNA表达与临床常用的疾病活动性指标C反应蛋白(CRP)显著相关,经LPS刺激后的SFMCVEGFmRNA表达还与Bath强直性脊柱炎(AS)疾病活动性指数(BASDAI)、外周关节肿胀数、SF-VEGF、s-VEGF显著相关。SF-VEGF水平较s-VEGF明显增高,SF-VEGF水平与BASDAI、外周关节肿胀数以及外周血白细胞计数的相关有显著性;s-VEGF水平显示出与BASDAI、Bath强直性脊柱炎功能指数(BASFI)、外周关节肿胀数、疲倦程度以及外周血小板计数有相关性。结论SpA患者SFMC表达VEGFmRNA,LPS可上调其表达;SF-VEGF水平高于s-VEGF,与血沉(ESR)、CRP相比s-VEGF更能准确反应机体疾病活动性。

外周血单个核细胞在狼疮性肾炎病人体内高效表达IL-6的观察

为了确定狼疮性肾炎（ＬＮ）病人体内是否存在内源性ＩＬ－６表达增高及其来源，作者应用ＥＬＩＳＡ法检测５８例ＬＮ病人的血清及外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）内ＩＬ－６蛋白的含量，用原位杂交方法结合ＩＢＡＳ２．０图像分析系统，检测其中２０例ＬＮ病人ＰＢＭＣ在未受任何刺激时ＩＬ－６ｍＲＮＡ表达强度，并分析三者之间的关系。结果表明该三者水平在ＬＮ病人体内均异常增高，活动期尤其明显，三者之间互呈直线正相关。提示ＬＮ病人ＰＢＭＣ内源性过度表达和合成ＩＬ－６是其外周血ＩＬ－６水平增高的原因之一，异常增高的循环ＩＬ－６对狼疮性全身性病理损害，尤其对肾损害具有重要的作用。此外，血清ＩＬ－６过高还提示ＬＮ处于活动期，对临床指导治疗有一定意义。

D2形态特征对胚胎体外发育能力和体内着床潜能的影响

目的:探讨D2胚胎的各种形态特征对D3胚胎质量、D6囊胚发育和胚胎着床潜能的影响,以评估D2形态在体外受精-胚胎移植(IVF-ET)中的临床应用价值。方法:于常规IVF或ICSI授精后42～44 h观察D2胚胎形态特征,按D2细胞数、碎片比例、卵裂球大小均匀程度和卵裂球内的核特征进行分组,比较各组间的D3优质胚胎率、D6囊胚形成率和着床率。按卵裂球内的核特征分组,将胚胎分为A级(胚胎的每个卵裂球内均可见单核)、B级(胚胎至少有1个卵裂球内未见核)、C级(胚胎每个卵裂球均未见核)和D级〔胚胎至少有1个卵裂球内见多核(≥2个核)〕。结果:①4细胞胚胎的体外发育能力和体内着床潜能优于另外两组,>4细胞胚胎的D3优质胚胎率和着床率高于<4细胞胚胎。②碎片≤10%的D2胚胎的体外发育能力和体内着床潜能优于碎片>10%的胚胎。③与其他各组相比,A组具有最高的体外发育能力和着床潜能,在形态优质的D2胚胎中,也得到同样的结果。而D组胚胎中,D3优质胚胎率明显低于其他各组,而且在移植的27个D组胚胎中,没有胚胎着床。结论:碎片≤10%的4细胞胚胎具有较高的体外发育能力和体内着床潜能;同时,D2核评估可独立预测胚胎体内外发育能力,选择时应优先考虑每个卵裂球上均可见单核的胚胎;胚胎中多核的存在是发育潜能受损的表现。

2,2′:6′,2″-联三吡啶配体的合成

近年来,2,2′:6′,2″-联三吡啶作为典型的三齿有机杂环配体在超分子化学与材料化学领域得到广泛应用。通过取代基团对配体的结构修饰或改变金属离子的类型可以调控联三吡啶金属络合物的光物理和电化学性能,从而得到多种不同用途的功能化材料及超分子组装体。本文对单核联三吡啶配体近年来发展的典型合成方法加以阐述,并简单介绍联三吡啶配体在超分子化学中的应用。