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一株嗜水气单胞菌Aeromonas hydrophila的16S-23S rDNA间区序列分析及应用 被引量:4
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作者 邓先余 王智学 +1 位作者 叶巧真 何建国 《中山大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期74-78,共5页
根据细菌的16SrDNA3′端和23SrDNA5′端的高度保守区设计引物,扩增了一株中华鳖Trionyxsinensis"红板病"病原菌嗜水气单胞菌的16S-23SrDNA间区,克隆到pGEM_T载体上,测序。用BLAST和DNAstar软件对16S-23SrDNA间区序列以及其内... 根据细菌的16SrDNA3′端和23SrDNA5′端的高度保守区设计引物,扩增了一株中华鳖Trionyxsinensis"红板病"病原菌嗜水气单胞菌的16S-23SrDNA间区,克隆到pGEM_T载体上,测序。用BLAST和DNAstar软件对16S-23SrDNA间区序列以及其内tRNA基因与已发表的嗜水气单胞菌和近缘种的IGSG序列进行比较分析,设计出对嗜水气单胞菌特异的PCR引物,建立了检测嗜水气单胞菌的PCR方法,进行了特异性、灵敏性检测,并用此方法检测了不同的水样。 展开更多
关键词 嗜水气单胞菌 16S-23S RDNA间区 tRNA^Clu基因 特异性 灵敏性
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特发性弱精子症精子前向运动率与DNA碎片指数、高活性氧率及高线粒体膜电位率的相关性分析 被引量:1
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作者 王凯立 高凯 +2 位作者 杨涛 马旭辉 韦三华 《临床检验杂志》 CAS 2024年第6期421-424,共4页
目的探讨特发性弱精子症患者精子DNA碎片指数(DFI)、高活性氧(ROS)率、高线粒体膜电位(MMP)率与精子前向运动率之间的关系。方法选取2022年12月至2023年11月在空军军医大学唐都医院生殖医学中心男科门诊就诊的250例患者,根据精子前向运... 目的探讨特发性弱精子症患者精子DNA碎片指数(DFI)、高活性氧(ROS)率、高线粒体膜电位(MMP)率与精子前向运动率之间的关系。方法选取2022年12月至2023年11月在空军军医大学唐都医院生殖医学中心男科门诊就诊的250例患者,根据精子前向运动率将其分为轻度(20%≤精子前向运动率<32%,86例)、中度(10%≤精子前向运动率<20%,67例)、重度(精子前向运动率<10%,47例)弱精子症组和正常组(女方因素不孕,男方精液常规结果均在参考区间内,精子前向运动率≥32%,50例)。采用流式细胞术检测精子DFI、高ROS率、高MMP率水平,并分析其与精子前向运动率的相关性。结果与正常组相比,弱精子症组精子浓度、活动率、正常形态百分率、高MMP率水平显著降低(P<0.05),DFI、高ROS率水平显著升高(P<0.01)。重度弱精子症组精子DFI、高ROS率显著高于轻、中度组,高MMP率水平显著低于轻、中度组(P<0.01);轻、中度组间精子DFI、高ROS率、高MMP率水平差异无统计学意义(P>0.05)。随着弱精子症严重程度增加,精子DFI、高ROS率水平升高,高MMP率水平降低。相关性分析显示,精子前向运动率与高MMP率呈显著正相关(r=0.439,P<0.01),与高ROS率(r=-0.435,P<0.01)、DFI(r=-0.478,P<0.01)呈显著负相关。结论特发性弱精子症患者精子DFI、高ROS率水平升高,高MMP率水平降低,且与弱精子症严重程度相关。较高ROS水平可能通过损伤精子DNA和线粒体功能,导致精子前向运动能力下降。 展开更多
关键词 特发性弱精子症 DNA碎片指数 活性氧 线粒体膜电位 精子前向运动率
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北京和宁夏地区2家医院临床分离气单胞菌属的临床分布和耐药性分析
3
作者 陶佳 陈素明 +7 位作者 王文 李刚 王欢 王亮 马婷婷 曲芬 贾伟 王利茹 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期1107-1113,共7页
目的了解北京和宁夏地区2家医院(解放军总医院第五医学中心和宁夏医科大学总医院)临床分离气单胞菌属的分布特点及耐药性,为临床治疗和防控气单胞菌属感染提供参考。方法回顾性分析2013—2022年间2家医院临床分离气单胞菌属感染患者的... 目的了解北京和宁夏地区2家医院(解放军总医院第五医学中心和宁夏医科大学总医院)临床分离气单胞菌属的分布特点及耐药性,为临床治疗和防控气单胞菌属感染提供参考。方法回顾性分析2013—2022年间2家医院临床分离气单胞菌属感染患者的年龄、性别、菌种分布、标本类型分布和耐药率等,使用Whonet5.6软件和Graphpad Prism 8软件进行统计分析。结果10年间2家医院分离气单胞菌属细菌共541株,分别为198株和343株,感染患者均是男性多于女性,年龄多为50岁以上的中老年人。2家医院检出的气单胞菌属中均以嗜水气单胞菌为主,其次为豚鼠气单胞菌、维隆气单胞菌温和亚种,其他检出的菌种包括维隆气单胞菌维隆亚种、杀鲑气单胞菌和斑点气单胞菌。541株气单胞菌的标本来源主要为胆汁和血液,分别占31.98%和19.78%,其他标本类型包括痰液、引流液、分泌物等。2家医院气分离单胞菌属的标本类型有统计学差异,解放军总医院第五医学中心前五位的标本类型为血液、粪便、腹水、胆汁和引流液,宁夏医科大学总医院的标本类型主要为胆汁、痰液、分泌物、引流液、血液。气单胞菌属对碳青霉烯类、氨基糖苷类、喹诺酮类抗菌药物的耐药率均较低,3种气单胞菌均未检测到阿米卡星耐药的菌株。豚鼠气单胞菌对头孢类及单环类抗菌药物的耐药率在宁夏医科大学总医院明显高于解放军总医院第五医学中心。结论2家医院检出的气单胞菌属的菌种组成类似,但在临床分布及耐药性间均存在差异性,每个医院都需要监测本地区气单胞菌的流行情况及耐药性,为气单胞菌的诊疗提供参考。 展开更多
关键词 气单胞菌属 菌种分布 临床分布 耐药性
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Effect of vitamin E on human sperm motility and lipid peroxidation in vitro 被引量:3
4
作者 Anil Verma K.C.Kanwar 《Asian Journal of Andrology》 SCIE CAS CSCD 1999年第3期151-154,共4页
Aim: To assess the protective efficacy of vitamin E to counteract the reactive oxygen species (ROS) mediated damage onsperm motility, viability and lipid peroxidation. Methods: Human semen samples were obtained from t... Aim: To assess the protective efficacy of vitamin E to counteract the reactive oxygen species (ROS) mediated damage onsperm motility, viability and lipid peroxidation. Methods: Human semen samples were obtained from the local hospi-tal. The split seminal fractions freed of seminal plasma were reconstituted in Ringer-Tyrode and subjected to varied vita-min E concentrations (0.1 - 2 mmol/L). Results: Dose-dependent improvement in both motility and viability accom-panied by concomitant decrease in malondialdehyde (MDA--an end product of lipid peroxidation) following vitamin Esupplementation was noticed. Conclusion: Vitamin E protects against the ROS mediated damage on spermatozoa.Vitamin E supplementation could be of clinical importance for prolonged spermatozoal storage whenever needed. (AsianJ Androl 1999 Sep; 1: 151 - 154 ) 展开更多
关键词 reactive oxygen species vitamin E sperm motility lipid peroxidation
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Dot-ELISA快速检测鱼类运动性气单胞菌的研究 被引量:14
5
作者 马家好 李学勤 +2 位作者 王振英 杨振国 王文东 《大连水产学院学报》 CSCD 1997年第3期72-78,共7页
制备了引起常见鱼病的6株运动性气单胞菌的兔抗血清,建立了检测运动性气单胞菌的Dot-ELISA法。该法能检出含107菌细胞/mL的菌悬液及10个菌细胞/mL增菌20h的培养物,与运动性气单胞菌群内的菌株,均呈现明显的... 制备了引起常见鱼病的6株运动性气单胞菌的兔抗血清,建立了检测运动性气单胞菌的Dot-ELISA法。该法能检出含107菌细胞/mL的菌悬液及10个菌细胞/mL增菌20h的培养物,与运动性气单胞菌群内的菌株,均呈现明显的阳性反应,不与鲁克耶尔森氏菌、荧光假单胞菌、鳗弧菌等10株对照菌发生影响检测结果的交叉反应。应用Dot-ELISA与常规分离法分别对人工感染的40份样本进行检测,其阳性数分别为33和34,两法符合率为97%。经X2检验表明,两法检测结果间有显著意义的一致性(P<0.05),但前者可在24h内报告结果。应用Dot-ELISA又对8株鱼源菌检定,结果与细菌学检查相符。Dot-ELISA法具有快速、敏感、特异、实用的优点,可用于引起常见鱼病的运动性气单胞菌群的检测。 展开更多
关键词 运动性气单胞菌 DOT-ELISA 鱼病
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淡水鱼类主要细菌性传染病快速诊断的研究Ⅰ.SPA-CoA检测6株运动型气单胞菌 被引量:12
6
作者 李学勤 王振英 +2 位作者 马家好 杨振国 王文东 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第1期33-35,共3页
用富含A蛋白的金黄色葡萄球菌国际标准株(CowanⅠ),分别标记6株淡水鱼病原性运动型气单胞菌高免血清,制备SPA诊断液,建立了检测运动型气单胞菌的SPA-CoA。将待检病料经分离培养16~18h后进行检测,3min... 用富含A蛋白的金黄色葡萄球菌国际标准株(CowanⅠ),分别标记6株淡水鱼病原性运动型气单胞菌高免血清,制备SPA诊断液,建立了检测运动型气单胞菌的SPA-CoA。将待检病料经分离培养16~18h后进行检测,3min内可判定结果,比玻片凝集试验的敏感性高25~50倍;交叉和重复性试验表明,其特异性强,重复性好。SPA-CoA操作简便、快速,无需特殊仪器。 展开更多
关键词 淡水鱼类 协同凝集试验 细菌性传染病
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不同动物源性维氏气单胞菌生物学特性比较研究 被引量:7
7
作者 单晓枫 康元环 +6 位作者 夏京津 龙继兵 陈龙 王惠 曹亮 孟庆峰 钱爱东 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2015年第3期82-85,共4页
为深入了解维氏气单胞菌,本试验选取8株不同动物源性的维氏气单胞菌,并对其染色特性、理化特性、培养特性、耐药性、不同pH值、温度、渗透压对其生长的影响以及16S rRNA序列的相似性等生物学特性进行比较研究.结果显示,多数维氏气单胞... 为深入了解维氏气单胞菌,本试验选取8株不同动物源性的维氏气单胞菌,并对其染色特性、理化特性、培养特性、耐药性、不同pH值、温度、渗透压对其生长的影响以及16S rRNA序列的相似性等生物学特性进行比较研究.结果显示,多数维氏气单胞菌在体外培养的老龄培养物中呈现多形性;理化特性大致相同;可以在TSA培养基、RS培养基、S.S.培养基、BS培养基、HE培养基上生长良好;可以在4 c|C、25℃~40℃、pH值6~9、氯化钠含量0%~4%中生长;对青霉素G、克林霉素、万古霉素、多粘菌素B、氨苄西林、新生霉素等表现出耐药性;经比对,不同维氏气单胞菌菌株的16S rRNA基因序列具有较高的相似性,但存在一定的差异.研究结果将为维氏气单胞菌的检验检疫、疾病预防奠定基础,同时为该菌的深入研究提供数据支持. 展开更多
关键词 不同动物源性 维氏气单胞菌 生物学特性
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温室池水环境与罗非鱼运动性气单胞菌败血症爆发的关系 被引量:2
8
作者 彭开松 佘锐萍 +3 位作者 杨玉荣 周雪媚 胡艳欣 朱靖斌 《农业工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第10期189-192,共4页
为阐明温室池水环境对罗非鱼运动性气单胞菌败血症发生的影响,对5年监测所得的发病池的95个水样和无病池的78个水样的水环境因子值进行了统计分析.结果表明,虽然发病池和无病池的水温平均值和pH平均值差异均不显著(p>0.05),但在18~2... 为阐明温室池水环境对罗非鱼运动性气单胞菌败血症发生的影响,对5年监测所得的发病池的95个水样和无病池的78个水样的水环境因子值进行了统计分析.结果表明,虽然发病池和无病池的水温平均值和pH平均值差异均不显著(p>0.05),但在18~27℃范围内,发病池出现的百分率随水温升高而增加;发病池的溶解氧、总氨氮、分子氨氮、亚硝酸盐氮、有机物化学耗氧量的平均值分别为2.85±1.45、2.48±0.99、0.067±0.048、0.361±0.233、39.56±20.31 mg/L;无病池的溶解氧、总氨氮、分子氨氮、亚硝酸盐氮、有机物化学耗氧量的平均值分别为3.41±1.39、0.94±0.76、0.025±0.025、0.105±0.066、20.62±9.73 mg/L.发病池的溶解氧平均值显著低于无病池(p<0.05),发病池的总氨氮、分子氨氮、亚硝酸盐氮、有机物化学耗氧量的平均值分别极显著高于无病池(p<0.01).根据发病池和无病池出现的百分率随各环境因子变化的趋势可以得出结论:高水温、低溶解氧、高氨氮、高分子氨氮、高亚硝酸盐氮和高有机物化学耗氧量的池水更容易诱发凡隆气单胞菌温和生物型引起的罗非鱼运动性气单胞菌败血症. 展开更多
关键词 罗非鱼 运动性气单胞菌败血症 温室池水环境
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DNA甲基化转移酶hsdM基因对维氏气单胞菌运动性的影响
9
作者 陈婷 李宏 +4 位作者 王丹 唐燕琼 唐鸿倩 马香 刘柱 《生物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期28-32,共5页
为探究I型RM系统甲基转移酶基因hsdM对维氏气单胞菌运动性的影响,研究构建hsdM基因敲除的维氏气单胞菌突变株ΔhsdM,并探究该基因敲除对维氏气单胞菌生长、运动能力及鞭毛基因表达的影响。生长曲线测定结果表明:ΔhsdM菌株的生长速率在... 为探究I型RM系统甲基转移酶基因hsdM对维氏气单胞菌运动性的影响,研究构建hsdM基因敲除的维氏气单胞菌突变株ΔhsdM,并探究该基因敲除对维氏气单胞菌生长、运动能力及鞭毛基因表达的影响。生长曲线测定结果表明:ΔhsdM菌株的生长速率在对数期生长后期开始缓慢降低,但总体生长水平与野生型基本一致;平板运动实验结果显示,hsdM基因敲除后,维氏气单胞菌运动性极显著下降;RT-qPCR结果表明,ΔhsdM菌株部分鞭毛基因表达显著下调。探究hsdM基因敲除对细菌表观性状的调节作用,为进一步探究N6-甲基腺嘌呤(6mA)甲基化调节基因表达的机制奠定理论基础。 展开更多
关键词 DNA甲基化 甲基转移酶 维氏气单胞菌 细菌运动性
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弱精症精子SOD2和PRDX6的表达变化及其与精子运动能力的相关性分析 被引量:5
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作者 杨梓涵 郝小玲 +3 位作者 王虹 叶柳 黄润 孟江萍 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第20期2199-2207,共9页
目的探究活性氧(reactive oxygen species,ROS)对精子的损伤作用,分析抗氧化蛋白超氧化物歧化酶2(SOD2)和过氧化物酶6(PRDX6)在弱精症患者精子中的表达变化,并分析其与精子运动能力的相关性。方法选取2020年1-11月我中心收集的弱精症患... 目的探究活性氧(reactive oxygen species,ROS)对精子的损伤作用,分析抗氧化蛋白超氧化物歧化酶2(SOD2)和过氧化物酶6(PRDX6)在弱精症患者精子中的表达变化,并分析其与精子运动能力的相关性。方法选取2020年1-11月我中心收集的弱精症患者精液标本(PR<32%,PR+NP<40%,精子密度≥15×10^(6)/mL)84例,正常精液标本(PR≥32%,PR+NP≥40%,精子密度≥15×10^(6)/mL)55例。通过精液计算机辅助分析系统(computer-aided sperm analysis,CASA)检测精液常规参数及精子运动参数;不同浓度H_(2)O_(2)处理正常精子后通过CASA检测精子活力和运动参数变化,伊红染色检测精子存活率变化,Western blot检测精子SOD2和PRDX6表达变化;运用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western blot同时对弱精症组精子和正常组精子SOD2和PRDX6表达进行定量检测,进一步统计分析SOD2和PRDX6的表达变化及其与精液参数的相关性。结果CASA检测结果显示精子活力在0.10、0.35、1.00 mmol/L H_(2)O_(2)处理后显著降低;精子运动参数中曲线速率(VCL)、直线速率(VSL)、平均路径速率(VAP)和平均角位移(MAD)在0.05、0.10、0.35 mmol/L H_(2)O_(2)处理后剂量依赖式降低,侧摆幅度(ALH)、直线性(LIN)、摆动性(WOB)和前向性(STR)在0.10、0.35 mmol/L H_(2)O_(2)处理后降低;伊红染色结果显示精子存活率在0.35、1.00 mmol/L H_(2)O_(2)处理后降低,而Western blot检测结果显示精子SOD2和PRDX6表达呈H_(2)O_(2)(0.10、0.35和1.00 mmol/L)剂量依赖式增高。RT-qPCR检测结果显示弱精症组精子SOD2[(0.297±0.038)vs(0.895±0.140),P<0.01]与PRDX6[(0.743±0.107)vs(1.416±0.163),P<0.01]mRNA相对表达量低于正常组。Western blot结果显示弱精症组精子SOD2[(0.689±0.147)vs(1.466±0.212),P<0.01]与PRDX6[(0.726±0.084)vs(1.183±0.100),P<0.01]蛋白相对表达量低于正常组。相关性分析结果显示精子SOD2 mRNA相对表达量与前向运动精子百分率(r=0.267,P<0.01)和总活力(r=0.329,P<0.01)呈正相关;PRDX6 mRNA相对表达量与前向运动精子百分率(r=0.453,P<0.01)、总活力(r=0.476,P<0.01)、STR(r=0.270,P<0.01)、VCL(r=0.313,P<0.01)、VSL(r=0.349,P<0.01)、VAP(r=0.410,P<0.01)呈正相关。结论ROS可降低精子活力、运动能力和存活率并上调精子SOD2和PRDX6表达;弱精症患者精子SOD2和PRDX6表达下调且其表达与精子运动能力正相关。 展开更多
关键词 弱精症 精子运动能力 ROS SOD2 PRDX6
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运动性气单胞菌分离和鉴定方法的研究 被引量:2
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作者 张碧波 张立怀 +5 位作者 秦贞奎 侯艳酶 王润生 袁宝琴 董维 范华炜 《天津轻工业学院学报》 2000年第4期40-43,56,共5页
通过碱性蛋白胨水 (APW)的增菌效果与气单胞菌培养基 (RYAN)的选择性效果试验 ,建立了运动性气单胞菌细菌学分离和鉴定的实验室检测程序。应用该程序对 8个模拟阳性样品和 71个动物产品、养殖水样及动物病料进行检测 ,结果模拟感染菌全... 通过碱性蛋白胨水 (APW)的增菌效果与气单胞菌培养基 (RYAN)的选择性效果试验 ,建立了运动性气单胞菌细菌学分离和鉴定的实验室检测程序。应用该程序对 8个模拟阳性样品和 71个动物产品、养殖水样及动物病料进行检测 ,结果模拟感染菌全部被分离到 ,从 71个检测样品中分离到 2 0株运动性气单胞菌。实验表明 ,所建立的分离和鉴定方法简便、快速、敏感。 展开更多
关键词 运动性气单胞菌 分离鉴定 致病力 生化特性
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维氏气单胞菌新型sRNA N155的鉴定及功能研究
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作者 何金花 马香 +3 位作者 唐燕琼 王丹 李宏 刘柱 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第11期267-275,共9页
维氏气单胞菌(Aeromonas veronii,A.veronii)是一种新型病原体,既能感染鱼类,又可以感染包括人在内的哺乳动物,其致病机理尚不完全清楚。基于A.veronii C4野生型菌株转录组数据一个新的sRNA N155被鉴定,进一步利用同源重组等分子生物学... 维氏气单胞菌(Aeromonas veronii,A.veronii)是一种新型病原体,既能感染鱼类,又可以感染包括人在内的哺乳动物,其致病机理尚不完全清楚。基于A.veronii C4野生型菌株转录组数据一个新的sRNA N155被鉴定,进一步利用同源重组等分子生物学手段构建了sRNA N155的缺失菌株。转录组数据和RT-qPCR分析结果表明,sRNA N155独立转录。序列比对分析发现,sRNA N155具有物种特异性,仅存在于气单胞菌属中。生长曲线测定和运动性实验结果表明,sRNA N155的敲除不影响A.veronii生长,但会导致A.veronii运动能力下降。本研究成功构建的ΔsRNA N155敲除菌株,为进一步研究sRNA N155在A.veronii中的功能提供了可靠材料。 展开更多
关键词 维氏气单胞菌 转录组 SRNA 运动性
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Inverse correlation between reactive oxygen species in unwashed semen and sperm motion parameters as measured by a computer-assisted semen analyzer 被引量:2
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作者 Teppei Takeshima Yasushi Yumura +4 位作者 Kengo Yasuda Hiroyuki Sanjo Shinnosuke Kuroda Hiroyuki Yamanaka Akira Iwasaki 《Asian Journal of Andrology》 SCIE CAS CSCD 2017年第3期350-354,共5页
This study investigated the correlation between sperm motion parameters obtained by a computer-assisted semen analyzer and levels of reactive oxygen species in unwashed semen. In total, 847 patients, except for azoosp... This study investigated the correlation between sperm motion parameters obtained by a computer-assisted semen analyzer and levels of reactive oxygen species in unwashed semen. In total, 847 patients, except for azoospermic patients were investigated. At the time of each patient's first consultation, semen parameters were measured using SMASTM or CellSoft 3000TM, and production of reactive oxygen species was measured using a computer-driven LKB Wallac Luminometer 1251 Analyzer. The patients were divided into two groups: reactive oxygen species - positive and negative. The semen parameters within each group were measured using one of the two computer-assisted semen analyzer systems and then compared. Correlations between reactive oxygen species levels and sperm motion parameters in semen from the reactive oxygen species - positive group were also investigated. Reactive oxygen species were detected in semen samples of 282 cases (33.3%). Sperm concentration (P 〈 0.01; P 〈 0.01), motility (P 〈 0.01; P 〈 0.05), and progressive motility (P 〈 0.01; P 〈 0.01) were markedly lower in the reactive oxygen species - positive group than in the reactive oxygen species - negative group. Among the sperm motion parameters in the reactive oxygen species - positive group, sperm concentration (P 〈 0.01; P 〈 0.01), motility (P 〈 0.05; P 〈 0.01), mALH (P 〈 0.05; P 〈 0.01), and progressive motility (P 〈 0.05; P 〈 0.01) also showed inverse correlations with the logarithmic transformed reactive oxygen species levels. Therefore, this study demonstrated that excessive reactive oxygen species in semen damage sperm concentration, motility, and other sperm motion parameters. 展开更多
关键词 oxidative stress reactive oxygen species semen analysis sperm motility
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lsrB基因对维氏气单胞菌TH0426菌株运动性影响的研究
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作者 王红 赵泽林 +3 位作者 杨金金 魏俊峰 钱爱东 单晓枫 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2022年第11期77-83,89,139,共9页
为了研究lsrB基因对维氏气单胞菌(A.veronii)TH0426菌株运动性的影响,试验以A.veronii TH0426菌株基因组为模板,扩增lsrB基因的上下游同源臂片段L1与L2,利用重叠PCR连接L1与L2,以得到的连接片段构建重组自杀性质粒pRE-112-lsrB,然后转化... 为了研究lsrB基因对维氏气单胞菌(A.veronii)TH0426菌株运动性的影响,试验以A.veronii TH0426菌株基因组为模板,扩增lsrB基因的上下游同源臂片段L1与L2,利用重叠PCR连接L1与L2,以得到的连接片段构建重组自杀性质粒pRE-112-lsrB,然后转化至E.coli WM3064感受态细胞内,得到接合转移菌株,通过同源重组的方法构建A.veronii的lsrB基因缺失株ΔlsrB,随后比较A.veronii TH0426菌株与ΔlsrB菌株的生长性能,并利用含3%琼脂的LB固体培养基检测ΔlsrB菌株的运动能力,最后利用实时荧光定量PCR方法检测ΔlsrB菌株中15个鞭毛主要调控基因的表达情况。结果表明:经PCR及测序鉴定后,成功扩增出lsrB基因的上下游同源臂片段L1与L2,通过重叠PCR得到基因片段L1L2,并成功构建出重组自杀性质粒pRE-112-lsrB和得到接合转移供体菌株WM3064(pRE-112-lsrB),通过一次接合转移与二次同源重组成功得到lsrB基因缺失菌株ΔlsrB;与A.veronii TH0426菌株相比,ΔlsrB菌株的生长性能保持不变,但在含3%琼脂的LB固体培养基中运动距离减小,同时ΔlsrB菌株中15个鞭毛主要调控基因的表达量显著高于A.veronii TH0426菌株(P<0.05)。说明lsrB基因可影响A.veronii TH0426菌株的运动性。 展开更多
关键词 维氏气单胞菌 lsrB基因 生长性能 运动性 同源重组
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Toxic effects of polychlorinated biphenyls (Aroclor 1254) on human sperm motility 被引量:3
15
作者 Li-Gang Jiang Lai-Yang Cheng +6 位作者 Shu-Hui Kong Yang Yang Yan-Jun Shen Chao Chen Xiao-Hui Deng Shu-Zhen Liu Lan Chao 《Asian Journal of Andrology》 SCIE CAS CSCD 2017年第5期561-566,共6页
Polychlorinated biphenyls (PCBs) are common environmental contaminants that represent a considerable risk to reproductive toxicity in exposed human populations. Although some experimental studies have suggested an a... Polychlorinated biphenyls (PCBs) are common environmental contaminants that represent a considerable risk to reproductive toxicity in exposed human populations. Although some experimental studies have suggested an association between the levels of PCBs and semen quality, the direct effects of PCBs on human sperm parameters remain largely unexplored. To this aim, a short-term in vitro incubation experiment that better imitated the putative exposure of sperm to Aroclor 1254 (a commercial PCB mixture) in male reproduction tissue was conducted. Human sperm were incubated with various concentrations (0, 1, 5, or 25 mg |^-1) of Aroclor 1254 for different amounts of time (3 and 6 h) in vitro. Sperm motility parameters were analyzed with computer-assisted sperm analysis (CASA). The proportion of sperm with high mitochondrial membrane potential (ΔΨm) and the levels of intracellular reactive oxygen species (ROS) were detected to explore the probable cause of sperm impairment. Human sperm exposed to continuous Aroclor 1254 exhibited: (i) reduced sperm motility and kinematic parameters, (ii) a proportion of sperm with high ΔΨm that decreased in a dose-dependent manner (P 〈 0.05), and (iii) increased levels of ROS compared with controls (P 〈 0.05). In conclusion, Aroclor 1254 can decrease sperm motility, which may culminate in increased ROS and general mitochondrial dysfunction, thus affecting the fertilization potential of sperm. Our findings suggest a broader understanding of the effect of Aroclor 1254 on human soerm. 展开更多
关键词 Aroclor 1254 CASA human sperm mitochondrial membrane potential reactive oxygen species sperm motility
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精子活力与精浆氧化还原电位的相关性研究
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作者 关小川 于月新 +6 位作者 张宁 于佳平 王禹 刘星池 侯开波 王博伦 杜超 《中国临床实用医学》 2023年第3期12-16,共5页
目的探讨精浆中的氧化还原电位(ORP)与精子活力参数的相关性。方法本研究为前瞻性队列研究,选取2023年2—3月北部战区总医院生殖医学科收治的40例男性不育患者作为不育组,年龄(32.68±4.74)岁,年龄范围为25~47岁。同期选取健康男性... 目的探讨精浆中的氧化还原电位(ORP)与精子活力参数的相关性。方法本研究为前瞻性队列研究,选取2023年2—3月北部战区总医院生殖医学科收治的40例男性不育患者作为不育组,年龄(32.68±4.74)岁,年龄范围为25~47岁。同期选取健康男性志愿者49例作为健康组,年龄(32.14±4.43)岁,年龄范围为20~41岁。检测精液参数并评估,测量ORP。同时将所有纳入者按精子活力是否正常分为活力异常组和活力正常组,比较两组精浆静态氧化还原电位(sORP)水平,并生成受试者操作特征曲线来确定sORP截值。结果不育组与健康组精浆sORP水平均与精子活力呈显著负相关(P<0.05)。不育组前向运动精子百分率[(39.32±16.80)%]低于健康组[(55.96±10.65)%],不育组sORP水平[(14.13±19.54)mv/(106·ml-1)]高于健康组[(7.80±5.36)mv/(106·ml-1)],差异有统计学意义(P<0.05)。活力异常组的精子总数[(88.68±67.12)×106个]、精子浓度[(18.90±14.36)×106个·ml-1]显著低于活力正常组[(144.61±89.73)×106个、(31.78±19.91)×106个·ml-1],sORP水平[(22.88±29.45)mv/(106·ml-1)]显著高于活力正常组[(8.29±5.63)mv/(106·ml-1)],差异有统计学意义(P<0.05)。sORP区分精子活力正常和异常受试者的最佳截断值为7.5 mv/(106·ml-1)。结论精浆中的ORP水平可以准确的反映并预测精子活力。 展开更多
关键词 精液 精浆 精子活力 活性氧 氧化还原电位
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粪便气单胞菌培养在小儿炎症性肠病严重程度和临床结局中的价值 被引量:2
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作者 张晓艳 陈彧 《中国中西医结合消化杂志》 CAS 2020年第1期47-51,共5页
[目的]探讨粪便阳性气单胞菌培养在小儿炎症性肠病患者中的重要性。[方法]收集2016年6月~2018年6月在我院就诊的37例胃肠病患儿,收集患儿粪便并进行气单菌的培养,通过基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDL-TOF-Ms)鉴定气单菌。比较... [目的]探讨粪便阳性气单胞菌培养在小儿炎症性肠病患者中的重要性。[方法]收集2016年6月~2018年6月在我院就诊的37例胃肠病患儿,收集患儿粪便并进行气单菌的培养,通过基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDL-TOF-Ms)鉴定气单菌。比较分析气单胞菌的分布,患者的临床特征和严重感染的危险因素等。[结果]共鉴筛选出37例肠胃病患儿,其中11例为炎症性肠病(IBD)。37例患儿中,由气单菌感染引起的胃肠道疾病共32例,22例为气单胞菌引起轻度自限性胃肠道感染,10例为气单胞菌引起轻度至中度胃肠道感染,其中4例患儿轻度至中度胃肠道感染的患儿还伴有肠外并发症。11例IBD患儿中,共有8例为克罗恩病(CD)的患儿,3例为溃疡性结肠炎患儿。相比之下,1例患溃疡性结肠炎患儿和2例患有CD的患儿中气单胞菌仅引起轻微的胃肠道感染。在4例患有CD的患儿中,气单胞菌的活跃程度与致病作用并没有相关性。[结论]气单胞菌主要引起轻度感染,但也可引起中度和重度感染。气单胞菌在非炎性肠病的患儿中也可引起较轻微的感染。 展开更多
关键词 气单胞菌 炎症性肠病 溃疡性结肠病 克罗恩病
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五子衍宗丸含药血清对活性氧致大鼠精子活力下降的保护作用 被引量:12
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作者 刘保兴 张圣强 +4 位作者 谢春雨 李兰群 周强 王传航 姚怀国 《北京中医药大学学报(中医临床版)》 2010年第1期13-15,共3页
目的观察五子衍宗丸含药血清对活性氧致大鼠精子活力下降的保护作用。方法收集8只SD大鼠附睾精子,将精子分为正常组、活性氧组、五子衍宗丸含药血清低剂量组、五子衍宗丸含药血清中剂量组、五子衍宗丸含药血清高剂量组、维生素C组,除正... 目的观察五子衍宗丸含药血清对活性氧致大鼠精子活力下降的保护作用。方法收集8只SD大鼠附睾精子,将精子分为正常组、活性氧组、五子衍宗丸含药血清低剂量组、五子衍宗丸含药血清中剂量组、五子衍宗丸含药血清高剂量组、维生素C组,除正常组外,各组均与活性氧体外共孵育,其中五子衍宗丸含药血清低、中、高剂量组和维生素C组分别同时加入相应血清和维生素C,30min后取精子,采用计算机辅助精子分析系统观察精子运动参数的变化。结果五子衍宗丸含药血清低、中、高剂量组精子活力、精子活率、直线运动速度(VSL)、平均路径速度(VAP)、曲线运动速度(VCL)与活性氧组比较显著升高(P<0.05),但仍显著低于正常组和维生素C组(P<0.05)。结论五子衍宗丸含药血清对活性氧造成的精子活力下降具有一定的保护作用。 展开更多
关键词 五子衍宗丸 含药血清 活性氧 精子活力
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