表皮生长因子协同上调不分型流感嗜血杆菌诱导的MUCSAC表达及其信号通路

目的探索表皮生长因子（EGF）协同上调不分型流感嗜血杆菌（NTHi）诱导MUC5AC黏液素基因表达的细胞分子机制。方法荧光定量PCR及Luciferase分析EGF协同上调NTHi诱导的MUC5AC表达。Western印迹法检测EGF及NTHi对P38有丝分裂原活化蛋白激酶（P38MAPK）、细胞外信号调节激酶（ERK）、P21激活激酶（PAK）4磷酸化的协同作用。采用P38MAPK或EGF特异性抑制剂，共转染P38MAPK、ERK显性失活质粒及PAK4 siRNA，判断对EGF协同上调NTHi诱导MUC5AC表达的影响，并研究PAK4显性失活质粒对EGF及NTHi所致的P38MAPK及ERK协同激活的影响。结果在HM3、HeLa和HMEEC-1细胞mRNA及转录水平上，EGF协同上调NTHi诱导的MUC5AC基因表达。EGF及NTHi对P38MAPK、ERK、PAK4磷酸化有协同作用；P38MAPK、ERK特异性抑制剂或共转染P38MAPK、ERK显性失活质粒、PAK4siRNA，可显著抑制EGF对NTHi诱导的MUC5AC表达的协同作用，PAK4显性失活质粒抑制EGF和NTHi诱导的P38MAPK和ERK磷酸化的协同作用。结论EGF通过PAK4依赖的P38MAPK及ERK细胞信号通路协同上调NTHi诱导的MUC5AC黏液素基因表达。

二陈汤对慢性支气管炎气道黏液高分泌的影响

目的观察二陈汤对慢性支气管炎大鼠气道黏液高分泌的影响及其机制。方法采用香烟烟熏加内毒素脂多糖制备慢性支气管炎大鼠模型,大鼠随机分为正常组,模型组,二陈汤低、中、高剂量组,急支糖浆组。正常组和模型组灌胃生理盐水6 ml/d,急支糖浆组灌胃给予太极急支糖浆12 g/kg,二陈汤低、中、高剂量组分别灌胃2.45、4.90、9.80 g/kg,连续14 d。免疫组化检测黏蛋白(MUC)5AC和水通道蛋白(AQP)5在支气管组织中的表达。结果与正常组相比,模型组MUC5AC蛋白表达显著增强,AQP5蛋白表达显著减弱(均P<0.01),MUC5AC与AQP5蛋白表达呈负相关(r=-0.55,P<0.01);与模型组相比,二陈汤中剂量组MUC5AC蛋白表达显著减弱,AQP5蛋白表达增强(均P<0.01),MUC5AC与AQP5蛋白表达呈负相关(r=-0.75,P<0.01)。结论二陈汤对慢性支气管炎气道黏液高分泌有调节作用,其机制可能与抑制MUC5AC、上调AQP5蛋白表达有关。

胃和肠表型标记物在进展期胃癌组织中的表达及其临床意义

目的:研究进展期胃癌组织中MUC2、MUC5AC、MUC6和CD10的表达,探讨胃和肠表型标记物在胃癌组织中的表达及其与临床病理学特征的关系。方法:对104例进展期胃癌进行MUC2、MUC5AC、MUC6和CD10的免疫组化EnV ision法检测,并根据免疫组化结果将胃癌分为四种类型。结果:黏蛋白MUC2、MUC5AC、MUC6和CD10在胃癌组织中的阳性表达率分别为35.6%、68.3%、61.5%和19.2%。黏蛋白MUC5AC的表达与肿瘤的大小密切相关(P<0.05);未分化型胃癌中黏蛋白MUC6的表达高于分化型(P<0.05),淋巴结转移阳性者高于阴性者(P<0.01);CD10的表达与胃癌的组织学类型和脉管侵犯有明显相关性(P<0.01);黏蛋白MUC2的表达与胃癌临床病理参数无关(P>0.05)。104例进展期胃癌组织中,胃型(G型)、胃肠混合型(G I型)、肠型(I型)和未分类型(U型)胃癌分别为37.5%(39例)、42.3%(44例)、16.3%(17例)和3.8%(4例)。G型中未分化型胃癌比例明显高于I型(P<0.01);G I型胃癌中侵及浆膜层和浆膜外者高于G型胃癌(P<0.01);TNM分期中,ⅢB和Ⅳ期在G I型胃癌中高于G型(P<0.05);G型、G I型和I型胃癌在淋巴结转移和脉管侵犯上均无差异(P>0.05)。结论:检测胃癌组织中胃和肠表型有助于判断不同类型胃癌的生物学行为。

基于“肺主通调水道”理论研究泽漆化痰方对COPD大鼠气道黏液高分泌的影响

目的基于"肺主通调水道"理论观察中药复方泽漆化痰方对烟熏合脂多糖(LPS)气道内滴入诱导的慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠模型气道黏液高分泌的影响。方法 48只大鼠随机分为空白组、模型组、阳性药物沐舒坦对照组、泽漆化痰低剂量组、泽漆化痰中剂量组、泽漆化痰高剂量组,每组8只。于第30日处死大鼠,采集标本。采用HE染色和阿辛兰-过碘酸雪夫染色(AB-PAS)的组织学检查;免疫组化检测气管和肺内气道的MUC5AC、AQP5。结果与正常组比较,模型组大鼠气管黏膜上皮黏蛋白、MUC5AC蛋白表达升高,AQP5蛋白表达降低(P<0.05)。与模型组比较,泽漆化痰高剂量组黏蛋白、MUC5AC蛋白水平降低,AQP5蛋白水平升高(P<0.05)。与沐舒坦对照组比较,泽漆化痰高剂量组MUC5AC蛋白水平降低(P<0.05)。各剂量组对模型大鼠肺内气道的总黏蛋白、MUC5AC、AQP5水平的影响不明显。结论中药复方泽漆化痰方较高剂量具有抑制气道黏液高分泌的作用,且影响部位以大气道为主。

中西医结合治疗消化性溃疡疗效观察

目的:探讨中西医结合治疗消化性溃疡(PU)的临床疗效及机制.方法:将PU患者120例随机分为6组,另选10个经内镜证实无PU,但有消化道症状者为对照组.在用药1个月后观察临床疗效.结果:健胃愈疡颗粒+雷尼替丁胶囊治疗消化性溃疡在临床证候及症状改善方面优于雷尼替丁胶囊(P＜0.01～0.05);健胃愈疡颗粒+雷尼替丁胶囊、健胃愈疡颗粒、雷尼替丁胶囊在治疗溃疡愈合率、Hp清除率方面无显著差异(P＞0.05).健胃愈疡颗粒+雷尼替丁胶囊治疗消化性溃疡可显著上调胃黏膜MUC5AC mRNA的表达(P＜0.01);下调ETAR(内皮素-1A受体) mRNA的表达(P＜0.01).结论:健胃愈疡颗粒+雷尼替丁胶囊治疗PU具有明显优势,其治疗机制可能是上调MUC5AC mRNA的表达改善胃黏膜黏蛋白屏障保护作用,下调ETAR mRNA的表达改善胃黏膜血流.

钙激活的氯通道gob-5和粘蛋白基因Muc5ac在小鼠哮喘模型肺部的表达

目的:研究“钙激活的氯通道”成员之一gob-5和粘蛋白基因Muc5ac在小鼠哮喘模型肺部的表达。方法:22只清洁级BALB/c小鼠随机分成哮喘组和对照组,用逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)和免疫组化法分别测定肺组织gob-5mRNA和粘蛋白基因Muc5ac蛋白的表达。结果:小鼠哮喘组肺组织gob-5mRNA表达阳性(0·2297±0·0186,A),而对照组未出现gob-5mRNA的表达(P<0·01);哮喘组Muc5ac蛋白表达(0·6637±0·0127,A)明显高于对照组(0·2060±0·0179,A)(P<0·01);哮喘组肺组织gob-5mRNA表达与Muc5ac蛋白表达呈直线正相关(r=0·864,P<0·05)。结论:Gob-5mRNA表达的上调可能在哮喘小鼠气道粘液过度分泌中起着关键作用;抑制gob-5的表达将为哮喘的治疗提供新的策略。

不同强度跑台训练对BALB/c小鼠气道muc5ac和aqp5表达的影响

目的:研究不同强度跑台训练对BALB/c小鼠气道muc5ac和aqp5表达的影响,探讨运动性支气管痉挛(EIB)发生的潜在机理。方法:清洁级雌性BALB/c小鼠48只,随机分为4组:对照组(C组)、小强度运动组(L组)、中等强度运动组(M组)和大强度运动组(H组)。L组、M组和H组小鼠分别给予不同强度的跑台训练:速度分别为4 m/min(58%VO2 max)、12 m/min(76%VO2 max)、17 m/min(84%VO2 max),坡度均为0°,每周运动6天,持续2周,每次训练前均做10min热身运动(速度1m/min,跑台坡度0°)。用实时定量荧光PCR法检测气道内muc5ac mRNA和aqp5 mRNA的表达,分别用免疫组化法和免疫印迹法检测muc5ac蛋白和aqp5蛋白在小鼠气道的表达,对气道muc5ac蛋白含量与aqp5蛋白含量进行Spearman等级相关分析。结果:运动各组小鼠气道内muc5ac mRNA及其蛋白表达均明显高于C组(P﹤0.05),而aqp5 mRNA及其蛋白表达均显著低于C组(P﹤0.05);并且气道muc5ac蛋白含量与aqp5蛋白含量呈负相关(r=-0.826,P﹤0.001)。结论:运动可能通过改变气道内muc5ac和aqp5的表达而使气道反应性升高,从而潜在地增加了EIB的发病风险。

人中性粒细胞弹性蛋白酶诱导气道黏液高分泌细胞模型的建立及其机制的初步研究

目的:以人中性粒细胞弹性蛋白酶(HNE)为诱导因素,研究建立黏蛋白(MUC)5AC和5B高表达的细胞模型,同时对黏蛋白高表达机制进行初步研究。方法:培养人肺腺癌细胞A549,以HNE为刺激因素,EGFR中和抗体、表皮细胞生长因子受体(EGFR)磷酸化阻断剂AG1478为干预因素,分组培养。采用四甲基偶氮唑盐光吸收法(MTT法)检测HNE对细胞活性的影响;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测MUC5AC mRNA,MUC5B mRNA的变化;酶联免疫吸附测定法(ELISA)定量分析MUC5AC和MUC5B蛋白含量的差异;细胞免疫化学以及激光共聚焦技术进一步直观观察MUC5AC,MUC5B,p-EGFR蛋白表达的变化。结果:HNE对A549细胞活力的影响呈剂量依赖性;HNE刺激组的MUC5AC,MUC5B基因转录和蛋白表达水平均明显高于对照组,差异有统计学意义(均P<0.01);HNE刺激组p-EGFR蛋白表达显著增多,EGFR中和抗体、AG1478能显著降低HNE诱导的MUC5AC高表达,但对MUC5B高表达无干预作用。结论:人肺腺癌细胞A549同时表达MUC5AC和MUC5B,HNE能有效刺激A549细胞高表达MUC5AC和MUC5B,黏蛋白高表达细胞模型的建立为研究气道粘液高分泌疾病提供了实验基础。HNE通过激活EGFR信号转导通路诱导MUC5AC的高表达,但MUC5B高表达机制与之不同,有待进一步研究。

不可分型流感嗜血杆菌诱导NCI-H292细胞产生MUC5AC的分子机制

目的:探讨不可分型流感嗜血杆菌(nontypeable Haemophilus influenzae,NTHi)诱导气道上皮细胞表达黏蛋白MUC5AC的影响,并探讨其可能的分子机制。方法:体外培养NCI-H292细胞,用NTHi感染后,采用ELISA检测MUC5AC和基质金属蛋白酶9(MMP-9)的水平;明胶酶谱实验分析MMP-9的酶活性;同时分别采用表皮生长因子受体(EGFR)、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、NADPH氧化酶、活性氧簇(ROS)、和MMP-9特异性抑制剂AG1478、LY294002、DPI、NAC和GM6001预处理NCI-H292细胞,检测MUC5AC以及MMP-9的水平。结果:NTHi能以时间依赖性方式诱导NCI-H292细胞产生MMP-9,并上调其酶活性,同时增加Rac1的活性并诱导ROS生成;采用AG1478和LY294002处理后,Rac1活性显著降低;采用DPI或Rac1抑制剂NSC23766处理后,ROS含量明显减少;当NCI-H292细胞用NAC或NSC23766预处理后,可显著下调MMP-9的表达与活性。此外,采用GM6001处理后,MUC5AC的分泌明显降低。结论:NTHi经EGFR/PI3K/Rac1/NADPH氧化酶/ROS/MMP-9通路诱导NCIH292细胞产生MUC5AC。

罗格列酮对哮喘小鼠气道黏液高分泌的影响

目的:探讨过氧化物酶体增殖物激活受体-γ激动剂罗格列酮对哮喘小鼠气道黏液高分泌的影响及可能机制。方法:小鼠随机分为正常对照组、哮喘组和罗格列酮干预组,分别用RT-PCR法和免疫组织化学法测定小鼠肺组织T-betmRNA和气道黏蛋白Muc5ac蛋白的表达。结果:(1)哮喘组肺组织T-betmRNA的表达明显低于对照组(P<0.01),而哮喘组气道Muc5ac蛋白的表达显著高于对照组(P<0.01)。(2)罗格列酮组小鼠肺组织T-betmRNA的表达明显高于哮喘组(P<0.01),而罗格列酮组气道Muc5ac蛋白的表达则显著低于哮喘组(P<0.01)。(3)哮喘组T-betmRNA与Muc5ac蛋白呈线性负相关(P<0.05)。结论:罗格列酮能抑制哮喘时气道Muc5ac蛋白的表达,可能与其上调T-betmRNA的表达有关。

烟曲霉菌提取物对人支气管上皮细胞Muc5ac表达的影响

目的:探讨烟曲霉菌对呼吸道上皮细胞的黏液蛋白Muc5ac表达的影响及其可能机制。方法:分别应用不同浓度(0、8、16、20mg/L)的烟曲霉菌提取物(AFE)作用体外培养人支气管上皮细胞16HBE-14o不同的时间。实验还应用热处理的AFE(HT-AFE)、丝氨酸蛋白酶抑制剂(抑肽酶)和蛋白激酶激活受体-2(PAR-2)阻断剂(FSLLRY-NH2)。应用细胞免疫组织化学和酶联免疫法(ELISA)检测细胞Muc5ac蛋白量,同时应用RT-PCR检测Muc5acmRNA的表达。结果:正常未给予AFE刺激培养条件下的对照组细胞仅表达少量Muc5ac,而给予不同浓度的AFE作用后,细胞合成和分泌Muc5ac的量明显高于对照组(P<0.01),并呈明显的时间和浓度依赖性。丝氨酸蛋白酶抑制剂和PAR-2特异性阻断剂可以明显抑制AFE的上述作用。另外,热处理的AFE蛋白酶活性完全灭活,不能促进细胞Muc5ac表达增加。结论:AFE依赖其蛋白酶活性激活受体PAR-2,促进呼吸道上皮细胞Muc5ac表达增加,使黏液分泌增加。

TLR4在慢性支气管炎大鼠气道粘液高分泌中的作用及多粘菌素B干预的影响

目的观察TLR4在细菌内毒素(LPS)致慢性支气管炎大鼠气道粘液高分泌中的作用及多粘菌素B(PMB)干预的影响,并探讨其可能的机制。方法 SPF级雄性Wistar大鼠40只,随机分为正常对照组(NS组)、慢性支气管炎组(LPS组)、多粘菌素B干预组(LPS+PMB组)和多粘菌素B自身对照组(PMB组)各10只。用气管内注入LPS 200μg/200μl及每日LPS溶液雾化吸入1小时的方法建立慢性支气管炎动物模型,3周后收集支气管肺泡灌洗液(BALF)进行细胞学计数和白细胞分类检测,酶联免疫吸附实验(ELISA)测定BALF中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量,病理学检测大鼠肺组织阿先蓝-过碘酸雪夫(AB-PAS)阳染面积,用免疫组化法检测粘蛋白Muc5AC、TLR4在支气管肺内的表达及荧光定量RT-PCR法检测Muc5AC mRNA、TLR4mRNA在肺内的表达。结果 LPS组在BALF中细胞总数、中性粒细胞、TNF-α含量及AB-PAS阳染面积、粘蛋白Muc5AC、TLR4蛋白及Muc5AC mRNA、TLR4mRNA表达与LPS+PMB组比较,差异均有显著性(均P<0.05),NS组和PMB组上述指标间差异无显著性(P>0.05)。结论TLR4介导LPS诱发的慢性呼吸道炎症反应可能导致气道粘蛋白基因Muc5AC mRNA的高表达和粘蛋白Muc5AC的高分泌。PMB可能通过抑制肺组织TLR4 mRNA及其蛋白的表达而抑制气道粘液高分泌。

羊膜泪道修复支架对兔泪小管损伤后愈合过程的影响

目的探讨羊膜泪道修复支架对兔泪小管损伤后愈合过程的影响。方法选择新西兰大白兔40只(80眼),其中31只兔制作兔泪小管损伤模型,4只造模失败,将造模成功的27只兔(54眼)随机分为3组,泪道羊膜组(A组):将兔双侧泪小管进行羊膜泪道修复支架植入;硅胶组(B组):进行双侧泪小管兔泪道硅胶支架植入;造模组(C组):造模后不作任何处理。剩余9只正常兔作为空白对照,分别于术后1周、2周、4周三个不同时间点观察兔泪小管的组织学变化情况。结果术后3组均可见兔泪小管组织上皮层细胞数量不同程度减少,伴大量炎症细胞浸润,3组各时间点炎症细胞数比较,A组<B组<C组,以术后4周最为明显,A组(3.0±1.7)个、B组(8.0±2.5)个、C组(10.0±3.6)个,3组间两两比较差异均有统计学意义(均为P<0.05)。正常兔泪小管组织中黏蛋白Muc5AC表达阴性;术后3组间各时间点比较,α-平滑肌蛋白的积分光密度值差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论兔泪小管上皮缺乏杯状细胞,羊膜作为泪道生物性的修复支架材料,能减轻炎症反应程度和抑制受损兔泪小管的基质纤维化水平,用于重建修复受损泪道黏膜及抑制泪道瘢痕性狭窄具有较大的潜力。

卵巢上皮性肿瘤中黏蛋白MUC2和MUC5AC的表达及意义

目的研究卵巢上皮性肿瘤中黏蛋白MUC2和MUC5AC的表达,探讨它们在卵巢上皮性肿瘤恶性进展中的作用及其临床意义。方法采用免疫组化方法SP法检测20例良性、23例交界性和37例恶性卵巢上皮性肿瘤中黏蛋白MUC2和MUC5AC的表达。结果黏蛋白MUC2和MUC5AC表达水平随卵巢黏液性肿瘤恶性程度的增加而表达增高。黏蛋白MUC2的表达与肿瘤的病理分级和临床分期密切相关,而黏蛋白MUC5AC与病理分级和临床分期无关。结论卵巢黏液性肿瘤发生早期肿瘤细胞即有胃型和肠型的分化,并且随着肿瘤的恶性进展持续存在。检测黏蛋白MUC2的表达可作为预测卵巢癌预后的有价值的指标。

复发性翼状胬肉中MUC5AC与iNOS的表达及意义

目的检测MUC5AC及诱导型一氧化氮合酶(inducible nitrc oxide synthase,iNOS)在复发性翼状胬肉组织中的表达水平,初步探讨MUC5AC和iNOS在翼状胬肉复发过程中的作用机制。方法 应用SP免疫组织化学染色法检测5例正常结膜组织、6例原发性翼状胬肉组织及22例复发性翼状胬肉组织中MUC5AC和iNOS的免疫学定位及表达,所有病例术前均检查泪膜破裂时间(breakup time,BUT)、SchirmerⅠ试验,并分析各影响因素之间的相关性。结果 正常结膜组、原发性翼状胬肉组及复发性翼状胬肉组的SchirmerⅠ试验结果分别为(10.86±0.80)mm、(9.97±0.34)mm、(9.32±0.51)mm,BUT分别为:(10.40±0.16)s、(9.65±0.26)s、(9.00±0.55)s,各组间比较差异均有统计学意义;复发性翼状胬肉组中MUC5AC的着色强度与正常结膜组比较差异有统计学意义(P<0.05),MUC5AC阳性细胞数与正常结膜组和原发性翼状胬肉组比较差异均有统计学意义(均为P<0.05);经半定量分析,3组间iNOS的表达,差异均有统计学意义;Spearman相关分析,MUC5AC的表达与BUT呈负相关(r=0.616,P<0.01),与iNOS呈正相关(r=0.385,P<0.05)。结论 翼状胬肉切除术后泪膜稳定性下降、杯状细胞形态功能发生改变、MUC5AC的高表达可能与翼状胬肉术后复发有关。

水通道蛋白5在香烟致肺部炎症中的作用

目的:探讨水通道蛋白5(AQP5)在香烟致肺部炎症中的作用。方法:香烟提取物(CSE)刺激小鼠肺上皮细胞株MLE-12后,实时定量PCR检测其AQP5 mRNA和MUC5AC mRNA的表达。同时,用香烟烟熏BALB/C小鼠4周,检测其肺组织AQP5 mRNA和MUC5AC mRNA的表达。结果:与正常不含CSE的DMEM培养液相比较,CSE(10%)刺激MLE-12后,细胞AQP5 mRNA的表达水平降低,MUC5AC mRNA的表达水平升高。同样,香烟烟熏BALB/C小鼠1个月,其肺组织AQP5 mRNA的表达水平降低,MUC5 ACmRNA的表达水平升高。结论:CSE刺激可以降低MLE-12细胞上AQP5 mRNA的表达,香烟烟熏BALB/C小鼠1个月,其肺组织AQP5 mRNA的表达水平降低。AQP5 mRNA的下调可能通过影响其MUC5AC mRNA的表达从而参与香烟致肺部炎症的发病过程。

莫西沙星经ERK1/2通路抑制铜绿假单胞菌诱导气道上皮细胞产生MUC5AC

目的:研究喹诺酮类抗生素莫西沙星(moxifloxacin,MXF)对铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)诱导气道上皮细胞表达产黏蛋白MUC5AC的影响,并探讨其可能的分子机制。方法:体外培养NCI-H292细胞,用不同浓度的PA、产藻酸盐型PA脂多糖(光滑型,sPA-LPS)、非藻酸盐型PA脂多糖(粗糙型,rPA-LPS)刺激,然后加入不同浓度MXF孵育24h,分别采用ELISA和实时定量PCR检测MUC5AC蛋白和mRNA的表达情况,Westernblot检测NCI-H292细胞内ERK1/2的激活情况。结果:PA、sPA-LPS和rPA-LPS能明显诱导NCI-H292细胞产生和表达MUC5AC,并能促进ERK1/2磷酸化。而MXF处理后,能以剂量依赖性方式抑制PA、sPA-LPS或rPA-LPS诱导的MUC5AC蛋白表达,并有效抑制ERK1/2的磷酸化。结论:MXF能抑制PA诱导的黏蛋白表达,因此有望用于PA诱导的黏蛋白过度分泌的治疗。

MUC-5AC核粘蛋白在早期胃癌中的表达和意义

目的 探讨胃正常粘膜、不典型增生以及早期胃癌中MUC-5AC核粘蛋白的表达状态及临床病理意义。方法 应用免疫组织化学s-p法检测人正常胃粘膜、不典型增生及早期胃癌组织中的表达。结果 人正常胃粘膜中浅表1/3范围内广泛分布MUC-5Ac核粘蛋白(100％)。不典型增生和早期胃癌组织中表达的阳性率分别为70％和41.7％。早期胃癌中MUC-5AC核粘蛋白的表达与患者的性别、肿物的部位、大小、浸润深度、淋巴结转移和分化程度、异型度及癌旁肠化生和癌旁淋巴反应无关(P>0.05)。但与Lauren’s分型(肠型、胃型、混合型)密切相关,且差异显著(P<0.05)。结论 MUC-5AC核粘蛋白在胃粘膜不典型增生和胃癌早期阶段即出现不同程度的异常表达,整个过程呈下调趋势。且与Lauren's分型密切相关。

IL-13对小鼠AGR2表达的影响及其在哮喘气道黏液过度分泌中的作用

目的研究白细胞介素-13(IL-13)对AGR2mRNA和蛋白在哮喘小鼠肺组织中表达的影响,探讨AGR2在哮喘气道黏液过度分泌中的作用。方法 18只雌性小鼠随机分为哮喘组、对照组和IL-13组,IL-13组于26d-28d激发前经鼻滴入100μg重组小鼠IL-13。收集支气管肺泡灌洗液(BALF)计嗜酸性细胞分类计数。Real time-PCR方法检测肺组织AGR2mRNA表达。免疫组化法分别检测AGR2蛋白和Muc5ac蛋白在小鼠肺组织的表达。结果哮喘组BALF中嗜酸性细胞分类计数(19.1±6.34)%较正常组(0.28±0.29)%明显增多(P<0.01);IL-13组BALF中嗜酸性细胞分类计数(30.05±9.32)%较哮喘组明显升高(P<0.01)。IL-13组小鼠肺组织中AGR2mRNA(1.702±0.046)和蛋白(0.617±0.028)的表达较哮喘组(1.52±0.071,P<0.01;0.505±0.078,P<0.05)升高,IL-13组AGR2mRNA与Muc5ac蛋白的表达水平呈直线正相关(r=0.862,P<0.05);AGR2蛋白与Muc5ac蛋白水平呈直线正相关(r=0.847,P<0.05)。结论 AGR2可能参与了哮喘气道黏液过度分泌发病机制,IL-13可通过上调其表达,进一步促进黏蛋白Muc5ac表达。

磷酸二酯酶4抑制剂对大鼠肺粘液分泌的影响

目的探讨磷酸二酯酶4(PDE4)抑制剂YM976对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠肺粘液分泌的影响。方法将40只SD大鼠随机等分为4组:正常对照组、药物对照组、COPD模型组、药物干预组。测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中的细胞总数和巨噬细胞绝对计数及百分比,阿辛蓝和MUC5AC免疫组化染色检测MUC5AC表达,RT-PCR检测MUC5AC mRNA在肺组织中的表达。结果YM976可以降低丙烯醛诱导的COPD大鼠BALF中的细胞总数和肺泡巨噬细胞计数及百分比,降低其肺组织MUC5AC的mRNA水平和MUC5AC蛋白表达。结论YM976能有效减少大鼠BALF中细胞总数和巨噬细胞数,从蛋白和基因水平抑制大鼠肺组织MUC5AC的表达。