HPLC-ELSD法测定新疆药桑葚中可溶性糖的种类和含量

【目的】建立高效液相色谱-蒸发光散射(HPLC-ELSD)法测定新疆药桑葚中可溶性糖种类和含量的方法。【方法】采用HPLC-ELSD法,HPLC条件为:Waters-Carbohydrate Analysis色谱柱(3.9×300 mm),柱温为室温,流动相为乙睛-水(体积比为80∶20),流速为0.80 m L/min;ELSD参数:漂移管温度为50℃,氮气压力40 psi,增益值100。【结果】4种药桑葚中均含有果糖和葡萄糖,果糖和葡萄糖在线性范围0.10~0.80 mg/m L和0.20~1.60 mg/m L内线性关系良好,加标回收率分别是97.59%、99.13%。和田药桑(鲜果)、库车药桑(鲜果)、和田药桑(干果)、库车药桑(干果)果糖含量分别为106.24、91.41、229.23、188.77 mg/g,葡萄糖含量分别为80.66、72.25、225.93、183.48 mg/g。【结论】HPLC-ELSD法具有操作简便、准确、重复性好等优点,可快速准确测定桑果实中糖的类型及其含量。

响应曲面法优化新疆药桑桑皮总多酚提取工艺

采用响应曲面法对新疆药桑桑皮中多酚类化合物的提取工艺进行优化。在单因素试验的基础上,选择乙醇体积分数、提取温度、提取时间,进行三因素三水平的Box-Behnken中心组合试验设计,采用响应曲面法(RSM)分析3个因素对响应值的影响。结果表明:最佳提取工艺条件为溶剂中乙醇体积分数78%、提取温度70℃、提取时间240min、液料比30:1(mL/g),在此条件下,总多酚的得率达到0.793%。该工艺稳定可靠,可在生产中应用。

桑树花青素还原酶基因MaANR的克隆和表达分析

花青素还原酶(ANR)是原花青素单体生物合成过程中的关键酶之一,对花青素在植物组织中的积累有重要调控作用。通过检索川桑(Morus notabilis)基因组数据库鉴定获得了ANR候选基因序列,并以人工四倍体果桑品种嘉陵30号的桑椹c DNA为模板克隆了ANR基因(Ma ANR),其CDS序列长1 014 bp,编码337个氨基酸残基。聚类分析结果表明Ma ANR与草莓、西洋梨的花青素还原酶Fa ANR和Pc ANR的亲缘关系较近。实时荧光定量PCR检测Ma ANR在桑椹中的表达量最高,在桑树其他部位和组织中的表达量极低,在茎中几乎检测不到表达;Ma ANR在生长发育早期的桑椹中表达量较低,在快速生长过程的桑椹中高量表达,而在花青素大量合成的桑椹成熟时期表达量极低。初步推测Ma ANR可能是桑椹中花青素积累的重要负调控因子。

新疆药桑桑椹中的主要营养活性成分检测分析

检测分析新疆药桑桑椹中的主要营养成分及功能活性成分与体外抗氧化活性,为利用珍稀新疆药桑资源研发营养食品和功能性生物制品提供科学依据。新疆药桑桑椹中的粗蛋白、碳水化合物和维生素C的含量明显低于对照果桑品种大10,但新疆药桑桑椹中必需氨基酸占总氨基酸的比率(EAA/TAA)为41.84%,必需氨基酸与非必需氨基酸的比值(EAA/NEAA)为0.719 7,均高于果桑大10(EAA/TAA为35.11%,EAA/NEAA为0.541 0);新疆药桑桑椹中的矿质元素钙、钠、镁和铁的质量比分别高达3.5×103、159.6、1.2×103和499.3 mg/kg,显著高于果桑大10;新疆药桑桑椹中的总多酚、总多糖和总黄酮的含量明显低于果桑大10,但体外抗氧化活性测试发现新疆药桑桑椹含有的总多酚、总多糖对.OH的清除效率则显著高于果桑大10,0.4 mg/mL新疆药桑桑椹总多酚、总多糖对.OH的清除率分别高达91.48%和90.19%,而果桑大10桑椹中的总多酚、总多糖质量浓度在1.6、1.2 mg/mL时,对.OH的清除率才能达到92.34%和89.31%。因此认为,新疆药桑桑椹的营养成分和抗氧化活性成分含量虽然低于果桑大10的桑椹,但其氨基酸组成比例较为合理,矿质元素含量更为丰富,抗氧化活性更强,作为矿质元素补充食品、抗氧化功能性保健产品开发,新疆药桑桑椹具有较高的经济价值。

新疆药桑桑枝中桑色素的提取分离及鉴定

研究新疆药桑桑枝中桑色素的分离纯化工艺。采用乙醇浸提,有机溶剂萃取,聚酰胺树脂吸附色谱法对桑色素进行分离纯化;薄层层析色谱与高效液相色谱相结合的方式进行鉴定和检测。结果表明,经乙酸乙酯萃取,聚酰胺分离两次可纯化出桑色素;此外,在波长370nm处桑色素具有良好的色谱吸收峰。聚酰胺能分离得到较高纯度的桑色素,是分离黄酮类化合物较好的材料。

黑桑椹的营养成分和抗氧化作用的研究

本文分析了山西地产黑桑椹的13种微量无素和VC、VE、β-胡萝卜素、黄酮等多种营养成分,并观察了其对大鼠机体脂质过氧化作用和果蝇寿命的影响。用10%桑椹鲜果或原汁饲喂大鼠8w,可显著降低大鼠血浆和肝脏组织中脂质过氧化产物丙二醛(MAD)含量及肝脏中脂褐素含量(p<0.05～0.01),增加超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性(p<0.05～0.01)。黑桑椹能显著延长果蝇寿命(p<0.05～0.01)。

桑树染色体加倍后桑叶和桑果的部分品质性状变化

为了明确多倍体育种对果叶兼用桑树品质性状的改良作用,测定了四倍体果叶兼用桑树新品种嘉陵30号及其二倍体亲本中桑5801桑叶和桑果的部分品质性状成绩。与二倍体亲本比较,四倍体品种嘉陵30号成熟叶片干物中的粗蛋白含量增加2.90个百分点、可溶性糖含量增加1.34个百分点,桑叶用于家蚕饲养的万蚕产茧量提高6.2%、万蚕茧层量提高4.7%,果用品质中的鲜果榨汁率增加6.3个百分点、糖度增加1.5～2.0个百分点,且桑籽的可育性降低。同时检测6个人工诱导四倍体桑树育种材料桑叶中的可溶性蛋白含量及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)活性均较二倍体亲本提高。由此表明,染色体加倍后桑树的部分生理代谢活性增强,多倍体果叶兼用桑树品种的桑果和桑叶品质都有不同程度改善,其经济价值提高。

35份果桑资源果实品质分析与综合评价

【目的】构建果桑果实品质综合评价体系,为筛选优良果桑资源提供依据。【方法】以35份果桑成熟果为试验材料,分析测定果实16项品质指标,采用主成分分析法、相关性分析及变异系数筛选出核心评价指标,基于13项品质指标利用因子分析法以及基于核心评价指标,利用层次分析法和灰色关联分析法构建果桑果实品质综合评价体系。【结果】不同资源材料的果实品质存在差异,其中A5单果质量,A4、B1和一串红和长果1号果实中可溶性固形物含量,B1总糖含量以及A3和A4果实中花色苷含量、总酚含量和总黄酮含量远高于其他材料;品质指标间普遍存在相关性;通过主成分分析、相关性分析和变异系数筛选出单果质量、色差L*、SSC、总酸含量、维生素C含量、花色苷含量为果桑果品核心评价指标;通过因子分析法和灰色关联分析法皆筛选出A3、A4、A5和B1为品质优良果桑资源。【结论】分别基于因子分析法和灰色关联分析法构建了果桑品质综合评价体系,为优良果桑资源筛选提供参考依据。

新疆药桑桑皮总黄酮提取工艺的优化

用回流提取法提取新疆药桑桑皮中的总黄酮,采用紫外分光光度法测定桑皮提取液总黄酮含量,并通过单因素和正交试验确定最佳提取工艺条件。研究结果表明提取工艺的最佳优化条件为:回流温度80℃、固液比1∶50、回流时间120min、乙醇体积分数70%vol;该工艺条件下总黄酮的提取率为32.65mg/g;桑皮中总黄酮的提取方法和工艺可行、合理。

桑树超高立体嫁接试验初报

为了建立适合休闲观光需求的桑树栽培技术体系,研发了一种桑树超高立体嫁接方法。这种嫁接方法可用3~10 m高的桑树植株作砧木,在其1年生或多年生枝条上嫁接单一品种(花叶长果桑)的接穗,可在砧木8 m以上部位选择1年生或多年生枝条分别嫁接2个品种(火炬桑和垂枝桑)的接穗,以及再在向下生长的垂枝桑条分别嫁接3个品种(火炬桑、垂枝桑、果桑)的接穗。采用该嫁接方法以及相应的田间管理措施养成的桑树,其树形高大、姿态优美,既可以观形、赏叶,又可观花、赏果,适合在发展休闲观光农业的乡村推广种植。

药桑桑椹总多酚的提取工艺条件优化及抗氧化活性分析

归属黑桑种(Morus nigra L.)的药桑是新疆蚕区特有的天然44倍体(n=7)桑种质资源,药桑的桑椹是广为应用的传统中药,其中桑椹总多酚是重要的药效成分。以药桑的桑椹为材料,采用超声波辅助乙醇提取法提取桑椹总多酚,通过单因素试验和Plackett Burman分析明确影响药桑桑椹总多酚提取得率的3个主要因素是提取次数、超声波处理温度以及乙醇体积分数,在此基础上通过响应面分析法(Box-Behnken试验)确定药桑桑椹总多酚提取的最佳工艺条件为:提取次数3次,超声波处理温度67℃,乙醇体积分数77%。采用优化的工艺条件提取药桑桑椹总多酚的提取得率达到3.72%,与试验模型预测值(3.77%)的相对误差仅有1.43%。以此优化的工艺条件提取11个桑品种的桑椹总多酚,结果显示药桑桑椹的总多酚提取得率最高,较提取得率最低的品种高出137倍。对药桑桑椹总多酚的体外抗氧化活性进行测试,结果表明其对ABTS、DPPH自由基的清除率以及还原能力比VC更强(P<0.01),显示药桑桑椹总多酚具有较强的抗氧化活性。

基于桑葚转录组测序的SSR位点分析

采用转录组测序技术对三个时期的桑葚进行转录组测序,建立桑葚的EST数据库。基于生物信息学方法分析桑葚转录组数据库的简单重复序列位点。从51895条Unigenes中共检索出23641条Unigenes含有44867个简单重复序列位点,共计252种基序类型。在所有基序类型中,以A/T与AT/AT型出现次数最多。单核苷酸基序类型与二核苷酸基序类型出现频率最高,共计75.69%。基序长度以10~20 bp为主,重复次数集中5~18次。设计27149对引物,随机选择20对引物,通过PCR验证,在4个桑树品种中展现出良好的重现性与通用性。桑葚转录组SSR位点类型丰富,具备开发出适宜于果桑选育的分子标记的潜力。