新型鹅细小病毒徐州分离株(NGPV XZ-01株)对半番鸭生长发育的影响

为了探究新型鹅细小病毒徐州分离株(NGPV XZ-01株)对半番鸭生长发育的影响,试验将180只健康非免疫半番鸭随机分为3组,分别为对照组、3日龄攻毒组和7日龄攻毒组,每组60只,对照组于3日龄时皮下注射灭菌生理盐水0.2 mL,3日龄攻毒组和7日龄攻毒组分别于3日龄和7日龄时皮下注射NGPV XZ-01株病毒液(第7代,效价为5.7 lgELD_(50)/mL)0.2 mL,攻毒后观察并记录各组的生长发育情况、临床症状、发病和死亡情况,并对喙长和体重进行测定,于25日龄时全部扑杀,进行剖检、病理切片观察和X光检查。结果表明:攻毒后,3日龄攻毒组和7日龄攻毒组均生长发育迟缓或成僵鸭;24日龄时,3日龄攻毒组和7日龄攻毒组的体型明显小于对照组,3日龄攻毒组体型明显小于7日龄攻毒组。试验期间,3日龄攻毒组和7日龄攻毒组表现为精神萎靡不振、喜卧、打堆、排白色或黄白色粪便,部分患鸭出现运动障碍、瘫痪等症状;随着日龄的增长,上下喙变短及舌头外露的症状逐渐明显。其中3日龄攻毒组发病率为90.0%、死亡率为11.7%;7日龄攻毒组发病率为76.7%、死亡率为6.7%;对照组无发病和死亡情况。10~22日龄时,3日龄攻毒组和7日龄攻毒组的体重和喙长均显著低于对照组(P<0.05),3日龄攻毒组的体重和喙长均显著低于7日龄攻毒组(P<0.05)。3日龄攻毒组和7日龄攻毒组剖检可见泄殖腔膨大,肠道内容物稀薄,肝脏均出现水肿、质脆等病变;病理切片观察可见十二指肠肠绒毛顶端上皮细胞坏死,十二指肠绒毛不同程度脱落,部分肠腺坏死;部分肝细胞出现坏死,肝窦淤血,有炎性细胞浸润;其他脏器未见明显病变。对照组未见明显异常。X光检查可见3日龄攻毒组和7日龄攻毒组下喙、翅、腿等部位明显小于对照组,且胫骨长度远低于对照组。说明NGPV XZ-01株可使半番鸭的生长发育明显受阻,具有很强的致病性,且对半番鸭的影响随感染日龄的增加而减小。

Artificial Insemination of Cherry Valley Ducks with Muscovy Ducks

[Objective] To explore artificial insemination technique for production of mule ducks. [Method] Female Cherry Valley ducks were artificially inseminated with semen collected from male Muscovy ducks by massage method and vagina-insemination method to investigate the effects of insemination dose, insemination interval, insemination time and diluents on fertilization rate. [ Result ] The average fertilization rate was only 39.58%, when the female Cherry Valley ducks naturally mated with the male Muscovy ducks. However, it was increased to 74.79% by artificial insemination. The fertilization rate was 75.24% after semen was diluted by PBS buffer, while it was 75.16% after semen was diluted by Lake＇s buffer; however, there was not significant difference between the fertilization rate of the diluted semen and that of fresh semen （74.10%）. After semen was respectively diluted by PBS buffer and Lake＇s buffer and then stored at 5 ℃ for 24 h, the fertilization rate was low, respectively 23.76% and 34133%. [ Conclusion] Artificial insemination technology can reduce insemination dose and increase fertilization rate in production of mule ducks.

基于气相色谱-质谱技术的骡鸭肝脏代谢组学研究

为研究不同日龄骡鸭肝脏生长代谢物的变化差异情况,试验通过代谢组学分析70和90日龄公骡鸭肝脏差异代谢物。结果显示:70和90日龄骡鸭肝脏显著差异代谢物共44种,除包括氨基酸类(9种)、脂肪酸类(7种)、有机酸类(4种)、碳水化合物(9种)、维生素(4种)和核苷酸类(6种)等物质外,还有尿囊素、肾上腺素和D-鞘氨醇等显著差异代谢物。与70日龄骡鸭相比,90日龄骡鸭的肝脏差异代谢物表达上调的有6种,表达下调的差异代谢物有38种。代谢通路分析表明嘌呤代谢、癌症中的中枢碳代谢、环腺苷酸信号途径、脂肪细胞脂解的调控、蛋白质的消化与吸收等代谢通路在70和90日龄骡鸭的肝脏代谢中起主要调节作用。研究表明,这些代谢物的变化差异和参与的代谢通路大部分对骡鸭的肝脏生长均起到一定的保护作用,维持肝脏的生长。

酵母硒、黄芪多糖及其复合剂对半番鸭生长性能、肉品质和抗氧化能力的影响

本文旨在研究酵母硒、黄芪多糖及其复合剂对半番鸭生长性能、肉品质和抗氧化能力的影响。从同一批饲养的22日龄半番鸭中挑选出体重相近的144只,随机分为4组,每组3个重复,每个重复12只鸭,试验期为49 d。采用2×2因子水平设计,对照组饲喂基础饲粮,试验Ⅰ组饲喂基础饲粮＋0.3%酵母硒,试验Ⅱ组饲喂基础饲粮＋300 mg/kg黄芪多糖,试验Ⅲ组饲喂基础饲粮＋复合剂（300 mg/kg黄芪多糖＋0.3%酵母硒）。试验期间测定生长性能指标,并于70日龄每组随机选择12只（每重复4只）进行屠宰,测定其胸肌肉品质和抗氧化指标。结果显示：1）试验Ⅰ组和试验Ⅱ组平均日增重、平均日采食量及料重比与对照组相比差异均不显著（P〉0.05）;试验Ⅲ组平均日增重显著高于对照组（P〈0.05）,平均日采食量和料重比与对照组无显著差异（P〉0.05）。2）与对照组相比,试验Ⅰ组、试验Ⅱ组和试验Ⅲ组24 h p H均显著或极显著提高（P〈0.05或P〈0.01）,48 h滴水损失率、蒸煮损失率、剪切力显著或极显著降低（P〈0.05或P〈0.01）;试验Ⅲ组肉色红度（a＊）值显著提高（P〈0.05）;试验Ⅱ组和试验Ⅲ组肉色黄度（b＊）值均显著降低（P〈0.05）。3）试验Ⅰ组、试验Ⅱ组和试验Ⅲ组24~120 h的超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性及总抗氧化能力（T-AOC）均显著或极显著高于对照组（P〈0.05或P〈0.01）;试验Ⅰ组、试验Ⅱ组48~120 h和72~120 h的丙二醛（M DA）含量分别显著或极显著低于对照组（P〈0.05或P〈0.01）,试验Ⅲ组24~120 h的MDA含量极显著低于对照组（P〈0.01）。随储存时间延长,各组SOD、GSH-Px活性和T-AOC均呈下降趋势,MDA含量则呈上升趋势,但3个试验组各抗氧化指标的变化速度比对照组缓慢。4）酵母硒和黄芪多糖对肌肉24 h p H、剪切力、24~120 h的SOD活性、48~120 h的GSH-Px活性、120 h的M DA含量有显著或极显著交互作用（P〈0.05或P〈0.01）。由此可见,酵母硒、黄芪多糖均可改善半番鸭肌肉品质和提高抗氧化能力,降低脂质过氧化程度,有效延长货架期,且二者对于肌肉抗氧化、p H和嫩度改善均具有明显的协同效应。

半番鸭与番鸭精巢组织差异表达转录组测序分析

【目的】研究半番鸭与番鸭精巢组织转录组差异表达基因,为进一步阐明半番鸭不育的遗传机制奠定理论基础。【方法】利用转录组测序方法对半番鸭和番鸭的精巢组织进行研究,筛选其差异表达基因,并对其功能进行注释和荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,QRT-PCR)验证。【结果】测序共获得43.84Gb Clean Data,组装后共获得193 535条Unigene。DESeq分析发现3 597个基因在两个鸭品种间差异表达,其中上调基因1 194个和下调基因2 403个,包括与生殖功能相关的基因,如成纤维细胞生长因子(fibroblast growth factor,FGF)、蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)、丝裂原活化蛋白激酶7(mitogen-activated protein kinase 7-like,partial,BMK)、生长因子受体结合蛋白2(growth factor receptor-bound protein 2,GRB2)、c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)和肿瘤坏死因子受体超家族成员6(tumor necrosis factor receptor superfamily member 6,FAS)等。GO(gene Ontology)分析发现382个差异基因获得功能注释,其中97个基因涉及发育繁殖生物学过程。KEGG(kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes)通路分析表明差异表达基因共富集到50条信号通路中,其中17个通路显著富集,包括丝裂原活化蛋白激酶信号转导通路(mitogen-activated protein kinase signaling pathway,MAPK)、甘油酯代谢(glycerolipid metabolism)以及钙信号途径(calcium signaling pathway)信号通路等,与生殖功能密切相关的有促性腺激素释放激素信号通路(gonadotropin releasing hormone(Gn RH)signaling pathway)和MAPK信号转导通路。经QRT-PCR验证,差异基因表达变化模式与转录组测序结果一致,测序结果可靠。【结论】在转录组水平上筛选出半番鸭和番鸭精巢组织差异表达基因,揭示了Gn RH和MAPK信号通路在鸭的生殖活动中发挥了重要作用,为进一步探索半番鸭生殖系统的分化机理提供可靠的参考依据。

不同杂交组合半番鸭生长和肉用性能的研究

以法国番鸭为父本,分别以樱桃谷鸭、金定鸭和樱桃谷鸭与金定鸭杂交后代为母本,采用人工授精的方法生产番樱、番金和番樱金半番鸭。测定3种半番鸭的生长性能、屠宰性能、胸腿肌和肝脏营养成分。结果表明:番樱半番鸭10 周龄体重、饲料转化率明显优于其他两个组合,番樱金半番鸭其次,番金半番鸭最低。番樱半番鸭屠体重、全净膛重高于番樱金、番金半番鸭。番樱金半番鸭屠宰率、全净膛率最高,番金半番鸭其次,番樱半番鸭最低。番樱杂交鸭胸、腿肌肉中水分和粗脂肪含量高于番金和番樱金半番鸭。

不同能量和蛋白质水平对骡鸭生产性能的影响

采用CR71公番鸭×M14奥百星母鸭杂交产生的骡鸭雏苗 36 0羽 ,初生重为 (5 1.6± 3.11)g ,进行能量、蛋白质 2× 3因子试验。日粮ME设 12 .12MJ/kg和 12 .5 4MJ/kg两个水平 ,CP设 2 1.0 %、19.0 %和 17.0 %三个水平共六个处理 (添加剂均相同 )。结果表明 ,六个处理中 0～ 3周龄增重以 2组最高 ,ME 12 .12MJ/kg高于 12 .5 4MJ/kg (P <0 .0 5 ) ;CP2 1.0 %和 19.0 %显著高于 17.0 % (P <0 .0 5 ) ,2 1.0 %与 19.0 %无显著差异 (P >0 .0 5 )。饲料转化率ME间无显著差异 (P >0 .0 5 ) ,CP2 1.0 %和 19.0 %显著高于 17.0 % (P <0 .0 5 )。六个处理中 4～ 7周龄增重以 2组最高 ,ME 12 .12MJ/kg高于 12 .5 4MJ/kg (P <0 .0 5 ) ;CP水平间无显著差异 (P >0 .0 5 )。饲料转化率ME 12 .12MJ/kg高于 12 .5 4MJ/kg (P <0 .0 5 ) ,CP水平间无显著差异 (P >0 .0 5 )。结果显示 ,0～ 7周龄骡鸭生长日粮能量皆不宜过高 ,以 12 .12MJ/kg为宜 ,蛋白质 0～ 3周龄 19.0 %、4～ 7周龄 17.0 %即可获得理想的效果。

半番鸭网床平养与地面平养对比试验

为探讨半番鸭网床饲养效果,将大型白羽半番鸭采用网床平养与地面平养2种饲养方式进行对比试验,分析其生产性能、屠宰性能、肌肉品质、血清生化指标和经济效益。结果表明:网床平养组平均每只净增重比地面平养组多119.87g(3.90%)(P<0.05),2种养殖模式对半番鸭饲料报酬、成活率、屠宰性能和肌肉品质的影响没有显著差异(P>0.05);血清生化指标中,白蛋白、直接胆红素、肌酸激酶、二氧化碳和载脂蛋白B 2组间差异显著(P<0.05),血糖、门冬氨酸氨基转移酶、CK同工酶、乳酸脱氢酶、羟丁酸脱氢酶和钠2组间差异极显著(P<0.01)。综上,网床平养半番鸭的饲养效益优于地面平养。

酵母硒和黄芪多糖对半番鸭屠宰性能、血清生化及抗氧化指标的影响

为了研究酵母硒、黄芪多糖对半番鸭屠宰性能和血清生化、抗氧化指标的影响,从22日龄健康半番鸭中选出体质量相近的144只,采用单因子试验设计,随机分为4组(3个试验组,1个对照组),对照组饲喂基础饲粮,试验组在基础饲粮中分别添加0.3%酵母硒、300 mg/kg黄芪多糖和二者的复合物(300 mg/kg黄芪多糖+0.3%酵母硒),每组3个重复,每个重复12只。结果显示:除复合剂组半番鸭半净膛率显著高于对照组(P<0.05)外,各试验组半番鸭较对照组的屠体率、全净膛率、胸肌率、腿肌率均呈升高趋势(P>0.05),而腹脂率和皮脂率均低于对照组(P>0.05)。复合剂组血清尿酸含量极显著低于对照组(P<0.01),且与黄芪多糖组差异有统计学意义(P<0.05);复合剂组血清尿素氮含量显著低于对照组和黄芪多糖组(P<0.05);各试验组半番鸭血清乳酸脱氢酶活性均显著低于对照组(P<0.05),但各试验组间差异无统计学意义(P>0.05);各试验组半番鸭血清白蛋白及球蛋白含量较对照组呈上升趋势(P>0.05),而总蛋白含量、白球比、胆固醇含量、谷草转氨酶和碱性磷酸酶活性均呈降低趋势(P>0.05)。复合剂组半番鸭血清谷胱甘肽过氧化物酶活性、总抗氧化能力较对照组显著增加(P<0.05),且复合剂组血清总抗氧化能力显著高于黄芪多糖组(P<0.05);各试验组半番鸭血清超氧化物歧化酶活性较对照组呈增加趋势(P>0.05);复合剂组和酵母硒组半番鸭血清丙二醛含量较对照组显著降低(P<0.05)。综上所述,在基础饲粮中添加酵母硒、黄芪多糖及其复合剂对半番鸭屠宰性能无明显影响,但在一定程度上可提高半番鸭机体的代谢水平和抗氧化能力,且复合剂的添加效果尤为显著。

黑色素基因在半番鸭及番鸭不同羽色中的差异表达研究

黑色素对动物毛(羽)色的形成具有重要作用。为探寻半番鸭和番鸭MC1R和TYR基因表达对其羽色的遗传效应,采用实时荧光定量PCR技术分析MC1R和TYR基因在半番鸭和番鸭不同羽色皮肤组织中的表达情况。结果显示:MC1R和TYR基因在半番鸭和番鸭黑羽皮肤中的mRNA表达量均极显著高于白羽皮肤(P<0.01),MC1R基因在半番鸭和番鸭黑羽皮肤中的表达量分别为白羽皮肤的9.08倍和3.13倍,TYR基因在半番鸭和番鸭黑羽皮肤中的表达量分别为白羽皮肤的2.50和14.54倍。由此说明,TYR和MC1R基因表达水平与羽色形成有一定的关系。

人工授精技术在骡鸭生产中的应用

番鸭与家鸭为不同属的鸭种,自然交配受精率较低,平均受精率为30%～40%。本研究采用人工授精技术,对公番鸭进行隔离调教,按摩法采精,母家鸭以翻肛法输精。结果表明:公番鸭调教1周即可使用,每天采精1次,采精量可达0.8毫升/只;精子在输精后第4天活力最强,两次输精间隔以4天为宜;常温下采出的新鲜精液应在30分钟用完;每只母家鸭每次输精0.05毫升,种蛋受精率平均达71.5%。

半番鸭白色羽毛性状的选择及其效应分析

本文报道了以番鸭为父本测试品系 ,对半番鸭母本进行后裔半番鸭白羽性状选育的世代进展及选择效果分析。结果表明经 4个世代选择 ,半番鸭 1～ 3级羽色从 58 40 %提高到 93 49% ,半番鸭白羽色评分的世代平均值从 5 77提高到 8 42 ,实现遗传力 3代平均为 0 6 6 38,选育效果明显 ,同时还显示了半番鸭羽色遗传的复杂性和白羽性状选育的难度。

不同填饲量对骡鸭生产性能、胴体品质和体脂沉积的影响

旨在研究不同填饲量对骡鸭生长性能、胴体品质及体脂沉积的影响。本试验选取91日龄健康、大小均匀的雄性骡鸭(巴巴里番鸭♂×北京鸭♀)56只,随机分成7个处理,每个处理8个重复,每个重复1只鸭。试验期为12d,试验鸭在91和92日龄时分别填饲330和390g.d-1的玉米型日粮,之后10d各处理填饲量保持不变,分别为450、540、630、720、810、900、990g.d-1。结果表明:(1)不同填饲量对骡鸭试验末重影响显著(P<0.05),并随填饲量的提高而逐渐提高。骡鸭平均日增重在填饲量为900g.d-1时达到最大,当进一步提高填饲量时,骡鸭死亡率明显增大。不同填饲量对料重比影响不显著(P>0.05)。以平均日增重为评定指标,采用折线模型估算的适宜填饲量为884.0g.d-1(R2=0.992,P<0.000 1)。(2)不同填饲量对骡鸭屠体率、全净膛率、胸肌重、胸肌率、腿肌重和腿肌率无显著影响(P>0.05)。(3)骡鸭皮脂重、皮脂率、腹脂重、腹脂率、肝脏重和肝重率随填饲量的提高而逐渐提高,不同填饲量对肝脏重和肝重率影响显著(P<0.05)。以肝重率为评定指标,采用折线模型估算的适宜填饲量为879.8g.d-1(R2=0.916,P=0.007 0)。由此可见,填饲能快速提高骡鸭平均日增重和体脂沉积量,但填饲量超过900g.d-1时,骡鸭生产性能基本保持稳定。

白羽半番肉鸭坦布苏病毒的分离鉴定及结构蛋白基因分析

自肝脏表现不规则出血的白羽半番肉鸭脏器中分离获得1株病毒(命名为ZZ40株),经(RT-)PCR检测为鸭坦布苏病毒,可被鸭坦布苏病毒高免阳性血清特异性中和。应用鸭坦布苏病毒特异性引物从该株病毒基因组中成功获得结构蛋白基因片段,该片段与近年来我国分离的禽源坦布苏病毒株核酸序列同源性均在99.1%以上,而与蚊媒源坦布苏病毒MM-1775株同源性仅为88.6%;分子进化分析表明该株病毒与BYD-1等近年来的鸭坦布苏病毒分离株共处于一个进化分支。以上结果表明,我国白羽半番肉鸭存在坦布苏病毒感染,且该分离毒株的抗原性与我国早期分离于种(蛋)鸭的坦布苏病毒差异不明显。

番鸭与樱桃谷鸭人工授精的研究

[目的]探讨半番鸭生产中的人工授精技术。[方法]选用公番鸭和樱桃谷母鸭为试验材料,采用按摩采精法和翻肛输精法进行人工授精试验,探讨输精量、输精间隔时间、输精时间以及稀释液对受精率的影响。[结果]公番鸭和樱桃谷母鸭自然交配受精率很低,平均受精率为39.58%,人工授精受精率可达74.79%。用磷酸缓冲液和Lake’s液稀释精液的受精率比较高,分别为75.24%和75.16%,与原精液组受精率(74.10%)差异不显著。精液稀释后在5℃保存24h后输精,其受精率均较低,分别为23.76%和34.33%。[结论]在半番鸭生产中,采用人工授精技术可降低精液使用量和提高受精率。

大型白羽半番鸭母本的选育研究

以番鸭为父本测试品系,对以北京鸭为母本的后裔半番鸭白羽率进行测定,分析半番鸭白羽性状选育的世代进展及选择效果。结果表明:经过4个世代的选育,半番鸭A^B级的白羽率从19.55%提高到76.86%,A^C级白羽率从61.51%提高到99.17%;平均实现遗传力为0.697 9。

半番鸭和北京鸭MC1R基因的克隆与序列分析

羽色是半番鸭一个重要的经济性状。黑素皮质素受体1(melanocortin receptor1,MC1R)基因是控制动物黑色素合成的重要基因。根据鸡、鹌鹑、雪雁、孔雀等MC1R基因同源序列的保守区设计1对引物,以半番鸭、北京鸭总DNA为模板,PCR扩增,克隆测序。结果,获得了2个长度为900bp的基因片段,并提交GenBank,登录号分别为EU877265和EU877264。经比对,发现北京鸭与半番鸭核苷酸序列存在8个变异位点,其中位于184bp(T/A)、229bp(G/A)、364bp(A/G)、385bp(G/A)处的变异导致了氨基酸序列分别在第62位(C/S)、77位(E/K)、122位(T/A)和129位(V/I)发生突变。为进一步研究半番鸭羽色MC1R基因单核苷酸多态性(SNP)奠定了基础;通过BLAST进行相似性搜索,结果表明,鸭与黑雁MC1R基因的核苷酸序列同源性最高为98.4%,与其他家禽的同源性也保持在92.8%～98.2%之间。可见禽类的MC1R基因编码区序列具有高度的保守性;系统进化分析表明,半番鸭、北京鸭与雪雁、黑雁、皇雁亲缘关系相近,从分子角度验证了它们在动物学分类上的地位。

半番鸭胚中鹅细小病毒的分离鉴定及其基因组分子特征分析

通过胶体金试验、电镜观察及PCR扩增等方法,自半番鸭胚及孵化的雏半番鸭中分离获得了鹅细小病毒(GPV)毒株(命名为MDE株),并进行了病毒全基因组分子特征分析。结果表明,该病毒粒子为直径20~24nm的球形、无囊膜粒子。胶体金试验结果呈GPV阳性。该毒株基因组全长为5 106bp,与GenBank登录的15株GPV基因组序列相似性为93.2%~98.1%,其中与SH株及疫苗株SYG61v株等的相似性较高,而与半番鸭源的GPV重组病毒M15株相似性最低。基于病毒VP1和NS1基因的遗传进化分析表明,分离毒株MDE与GPV疫苗毒株的亲缘关系最近,处于同一个独立的分支上,与番鸭细小病毒的亲缘关系较远。与疫苗毒株SYG61v株比较,MDE株VP1区的糖基化位点增加了703NRTS糖基化位点。以上结果表明,本研究揭示了GPV可通过半番鸭胚垂直传播给雏鸭,丰富了GPV的生态学内容。

低粗蛋白质补充氨基酸饲粮对白羽半番鸭屠宰性能和胸肌成分的影响

本试验旨在研究低粗蛋白质（ CP）补充氨基酸饲粮对白羽半番鸭屠宰性能和胸肌肌肉成分的影响。选取1日龄白羽半番鸭450只,随机分为3组,每组5个重复,每个重复30只鸭,公母各占1/2。对照组饲喂常规CP水平（1～21日龄19.0%,22～56日龄16.0%）的饲粮,试验组（试验Ⅰ组、试验Ⅱ组）分别饲喂在对照组饲粮基础上CP分别降低1、2个百分点并补充氨基酸的饲粮,试验期56 d。结果表明：1）各组56日龄的屠宰性能（屠宰率、全净膛率、腹脂率、腿比率、腿肌率、胸肌率、瘦肉率、皮脂率）均差异不显著（ P〉0.05）。2）与对照组相比,饲粮CP降低1、2个百分点时,白羽半番鸭胸肌中粗脂肪含量分别上升10.9%、28.3%（P〈0.05）,胸肌中CP含量分别下降1.1%、2.5%（ P〈0.05）,各组白羽半番鸭胸肌中大部分氨基酸含量差异不显著（ P〉0.05）,仅试验Ⅱ组母鸭胸肌中蛋氨酸、蛋氨酸＋半胱氨酸含量显著降低（P〈0.05）。由此可见,在氨基酸需要得到满足的条件下,饲粮CP降低1～2个百分点可提高白羽半番鸭胸肌中粗脂肪含量,降低胸肌中CP的含量,对其屠宰性能、胸肌大部分氨基酸含量及生长性能无显著影响。

半番鸭羽色相关基因均一化差减文库的构建和鉴定

【目的】分离半番鸭羽色相关基因,探索半番鸭羽色基因表达调控的分子机制。【方法】以半番鸭白羽皮肤和黑羽皮肤分别作为试验组(tester)和驱动组(driver),利用双链特异性核酸酶(duplexspecificnuclease,DSN)介导的均一化消减杂交方法,构建半番鸭羽色相关基因消减cDNA文库,同时采用实时荧光定量PCR方法对文库质量进行验证。【结果】①从文库中随机选取144个阳性克隆进行测序分析,最终共获得64条有效序列,平均长度为1 031 bp;经BLAST比对发现,21条具有同源序列,且同源性平均为92.8%;43条未找到匹配序列,推测可能为羽色相关新基因;②Geneontology功能分析表明,已知基因参与信号转导、细胞结构、物质转运、细胞凋亡、细胞与机体防御、转录与表达调控等诸多生物学过程,并且与色素形成和转运存在不同程度的相关性。【结论】经实时荧光定量PCR鉴定后,所建文库质量良好,能够有效地富集白羽皮肤特异表达基因。