短暂性脱髓鞘导致长期认知障碍、髓鞘改变和神经网络同步缺陷

在成年大脑中,活动依赖性髓鞘可塑性是正确学习和记忆巩固所必需的。因此,髓鞘的丢失、改变,甚至细微的结构变更都会损害神经网络活动,导致功能障碍。在多发性硬化症中,虽然自发的髓鞘修复过程是可能的,但患者之间存在异质性。髓鞘修复有时会导致功能恢复,这通常在运动水平比在认知水平更明显。在铜宗处理的小鼠模型中,大量脑脱髓鞘随后发生自发且强烈的髓鞘再生。然而,重组髓鞘虽然具有功能,但可能不会表现出与发育髓鞘相同的形态特征,这可能会对神经网络的活动产生影响。基于此,本研究使用铜腙处理的小鼠模型来分析短暂性脱髓鞘对脑结构、功能和认知的长期影响。本研究结果表明,尽管脱鞘事件后存在髓鞘再生,但仍会导致长期认知障碍,例如空间工作记忆、社交记忆、认知灵活性和多动症的缺陷。这些缺陷与内侧前额叶皮质(m PFC)和海马体(HPC)髓鞘含量的减少以及结构髓鞘修饰有关,表明这些结构中的髓鞘再生过程可能不完善。在体电生理记录表明,脱髓鞘事件改变了HPC-mPFC活动的同步性,这对于记忆过程至关重要。总而言之,本研究数据表明,短暂脱髓鞘后的髓鞘修复过程不允许完全恢复皮质结构中的初始髓鞘特性。这些细微的变更改变了神经网络特征并导致小鼠长期认知缺陷。

miRNA-92a通过mTOR糖酵解调节CD4+T细胞在多发性硬化中的机制研究

目的:研究microRNA-92a(miRNA-92a或miR-92a)在实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠中枢神经系统CD4^(+)T细胞分化中的作用,以及miR-92a通过糖酵解途径调控T淋巴细胞分化的过程,并以哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)为下游关键分子靶点,探讨miR-92a影响EAE病理过程的分子机制。方法:利用C57BL/6J或miR-92a-/-小鼠成功构建EAE模型后,分离脊髓CD4^(+)T细胞体外培养,采用流式细胞术检测1型辅助性T(Th1)细胞1、Th2、Th17和调节性T细胞(Treg)细胞比例,利用Seahorse能量代谢分析仪检测细胞糖酵解水平,利用RT-qPCR检测相关基因变化水平;诱导体外培养的初始CD4^(+)T细胞分化为Th1或Treg细胞,在此基础上调控miR-92a水平并结合糖酵解激动剂或抑制剂,检测细胞分化比例;利用Western Blot检测C57BL/6J或miR-92a^(-/-)小鼠CD4^(+)T细胞中mTOR和磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)表达变化,用质粒转染过表达mTOR后,检测CD4^(+)T细胞糖酵解水平和细胞分化水平。结果:miR-92a可导致EAE后CD4^(+)T细胞分化比例失衡,即Th1和Th17细胞比例增加,Th2和Treg细胞比例减少;miR-92a通过促进糖酵解调控CD4^(+)T细胞分化,抑制糖酵解后促进Treg细胞分化;miR-92a表达的增加能够通过激活mTOR信号通路提高细胞糖酵解水平,从而影响细胞分化。结论:miR-92a通过激活mTOR信号通路促进T淋巴细胞糖酵解,破坏CD4^(+)T细胞分化平衡,从而参与多发性硬化(MS)和EAE的病理过程。

小鼠口服胰岛素复乳后降血糖效果的实验研究

以二步乳化法制备w/o/w型胰岛素复乳,包裹率为77.2％。实验性糖尿病小鼠口服给以恢复乳70 IU/kg,与口服相同剂量的胰岛素水溶液相比,复乳的降血糖效果显著,可使血糖值在30～40min内由154.7±36.1下降至最低值40.1±25.3mg/dl(p<0.001),并能维持低血糖值60min(p<0.05)。

C57BL/6J小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎模型的建立及其病理特征

目的探讨C57BL/6J小鼠建立实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)模型的可能性及其发病特点。方法使用PLP139-151抗原及其C57BL/6J小鼠自制脑脊髓匀浆(spinal cord homogenate,SCH)免疫C57BL/6J小鼠,使用完全福(氏)免疫佐剂为免疫佐剂,并在尾静脉注射百日咳杆菌,建立EAE模型,与经典的PLP139-151免疫的SJL/J小鼠EAE模型进行对比。结果PLP139-151免疫C57BL/6J小鼠仅有一只小鼠表现为尾部张力明显降低;自制SCH免疫C57BL/6J小鼠可见明显脱髓鞘改变。与PLP139-151免疫SJL/J小鼠组相比发病率较低(P<0.05),神经功能评分比较没有明显差异(P>0.05),但发病时间长于PLP139-151免疫SJL/J小鼠组(P<0.05)。结论SCH免疫C57BL/6J小鼠的EAE动物模型,主要表现为急性单相病程,从临床表现和病理学特点来看符合人类MS的病理特点,值得在以后的研究中进一步研究探讨。

多发性骨髓瘤局部成瘤小鼠模型的建立

本研究探讨多发性骨髓瘤小鼠模型建立的方法。于BALB/c小鼠皮下接种6×105MPC-11骨髓瘤细胞,待荷瘤小鼠出现皮下结节后随机将其中5只处死,取其皮下结节进行HE染色及免疫组织化学(CD138,κ轻链)检测。同时,在荷瘤第5、7、9、11、12、35、65天进行荷瘤小鼠血清免疫固定电泳的动态监测。在荷瘤前、荷瘤后第15天和30天对荷瘤小鼠进行血红蛋白的检测。在荷瘤第35及65天进行荷瘤小鼠血清IL-6水平检测。每周观察荷瘤小鼠的生存情况,测量荷瘤小鼠的肿瘤大小,体重变化。结果表明:荷瘤小鼠出现皮下结节的高峰为荷瘤后12-15天,在荷瘤第12天荷瘤小鼠血清中可检测到单克隆免疫球蛋白。皮下结节HE染色、免疫组织化学检测CD138(+)及κ轻链(+)证实了瘤组织为浆细胞来源。荷瘤后第12天时可在小鼠血清中检测出M蛋白,表现为IgG及κ轻链的浓聚条带。荷瘤小鼠的死亡高峰为荷瘤后第20-40天,中位生存时间为31天。在荷瘤第15天时小鼠开始逐渐出现贫血,荷瘤组与正常对照组小鼠的Hb水平在荷瘤第15天及30天时差异有统计学意义(p<0.05)。荷瘤小鼠血清IL-6水平高于正常对照组。结论:采用MPC-11骨髓瘤细胞于BALB/c小鼠皮下接种(接种浓度为6×105个肿瘤细胞)建模,具有造模简单、荷瘤成功率较高、肿瘤生长变化易于观察等优点。监测本模型肿瘤大小的变化、血清IL-6水平及血清免疫固定电泳的变化可用于对多发性骨髓瘤疗效的评价。

不同剂量MOG_(35-55)抗原诱导EAE小鼠模型的免疫组织化学比较

目的比较不同剂量髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(myelin oligodendrocyte glycoprotein,MOG)35-55免疫诱导C57BL/6小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)的作用以及相关免疫组织学观察。方法将C57BL/6小鼠分为正常组和三个不同剂量MOG35-55诱导的EAE模型组,共4组。模型组分别以每只300、150、50μg的MOG35-55与等量完全弗氏佐剂(complete Freund's adjuvant,CFA)混合的乳化抗原皮下注射诱导EAE模型,正常组以生理盐水代替。观察不同剂量MOG35-55对C57BL/6小鼠体重、发病率、死亡率以及神经功能评分等的影响,同时HE染色观察小鼠脑和脊髓组织神经病理学改变以及免疫组化法观察脑和脊髓组织少突胶质细胞转录因子2(oligodendrocyte transcription factor 2,Olig2)、髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)、神经胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)的表达情况。结果三组不同剂量MOG35-55均能诱导EAE模型,呈慢性单相病程,病理学观察发现小鼠脑和脊髓组织有炎性细胞浸润、脱髓鞘等改变。但小剂量组在体重减轻、神经功能评分及病理学改变、大脑及脊髓特定部位Olig2、MBP、GFAP表达等方面均较其他模型组明显。结论用MOG35-5550μg免疫诱导的C57BL/6小鼠EAE模型稳定可靠,可以作为研究多发性硬化(multiple sclerosis,MS)的理想模型。

利用患者骨髓瘤细胞建立NOD/SCID小鼠多发性骨髓瘤模型

目的：探讨利用多发性骨髓瘤患者骨髓瘤细胞经植入兔骨建立 NOD/SCID 小鼠多发性骨髓瘤模型的可行性。方法分离取出新西兰白兔股骨与胫骨,清除肌肉、骨膜及软骨组织,沿中间轻柔截断；准备4~6周体质量约25~30 g的 NOD/SCID 小鼠,腹腔注射麻醉,将兔骨植入小鼠后背部,4周后检测兔骨植入成活情况。将分选的多发性骨髓瘤患者 CD38＋/CD45-的浆细胞5×106经过免疫荧光标记后,由远侧端缓缓注入植入兔骨内。每周观察成瘤情况,采用 living-Imaging 方法检测小鼠体内浆细胞的生长情况,病理检测肿块性质。结果兔骨植入后4周成活,将分选的多发性骨髓瘤患者骨髓瘤细胞注入兔骨后,2周可见 NOD/SCID 小鼠荷瘤,8周后肿瘤体积大小约100 mm3。living-Imaging方法检测结果显示,在注射后2周可见兔骨局部有浆细胞浓聚,随着注射时间的延长,至注射后8周局部浆细胞浓聚现象更加明显（2.4×104 vs .1.5×105,P 〈0.05）。肿块病理活检可见大量浆细胞浸润,植入兔骨结构破坏,破骨细胞增多。结论NOD/SCID 小鼠兔骨植入可有效支持多发性骨髓瘤患者浆细胞局部注射,并建立 NOD/SCID 小鼠骨髓瘤模型,为骨髓瘤相关体内实验及临床药物筛选提供实验模型。

百日咳毒素减轻实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠模型炎症反应的机制研究

目的探讨百日咳毒素(PTx)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠模型的作用及机制。方法将C57BL/6小鼠随机分为正常对照组、EAE组和PTx治疗组,每组12只。EAE组和PTx治疗组用MOG 35-55诱导EAE模型。PTx组于建模后第7天给予腹腔注射1000 ng的PTx。随后观察两组临床症状,组织学染色评价炎症反应和脱髓鞘改变,并观察VEGF和血管新生现象,并用Western blot检测脊髓VEGF和Collagen IV的整体水平。在体外,用PTx刺激原代培养的神经元,评价PTx对在体外对神经元VEGF表达的影响。结果 PTx能减轻EAE模型的炎症反应和脱髓鞘改变,在大脑PTx将炎症评分从(3.4±0.55)分降至(1.2+0.45)分,P<0.01;脱髓鞘评分从(3.6+0.55)分降至(1.4+0.55)分,P<0.01。在脊髓PTx将炎症评分从(3.6+0.55)分降至(1.0+0.71)分,P<0.01;脱髓鞘评分从(4.2+0.84)分降至(1.4+0.55)分,P<0.01。Western blot检测显示,与正常对照组比较,EAE组VEGF下降49.0%(P<0.01),Collagen IV下降36.0%(P<0.01);PTx治疗后,与EAE组比较,VEGF上升59.5%(P<0.01),Collagen IV上升45.0%(P<0.01)。体外实验显示,PTx治疗24 h后VEGF在神经元上的表达增加,与正常对照相比,100 ng/ml组上调34.6%(P<0.01),400 ng/ml组上调76.9%(P<0.01)。结论 PTx可上调神经元内源VEGF的表达和血管新生现象,继而在EAE模型中起保护作用。

BALB／c小鼠多疫苗接种的安全性和有效性研究

[目的]研究小鼠多疫苗联合接种的安全性和有效性。[方法]研究要求6种(炭疽、鼠疫、出血热、霍乱、痢疾、钩体疫苗)疫苗进行联合接种,根据6种疫苗的联合接种方式、疫苗接种间隔和接种的先后顺序,设计3种疫苗快速接种方案(2～3w完成接种)。对研究对象连续观测了119d,以体重、免疫反应、生化指标及自发活动等指标对疫苗联合接种的安全性和有效性进行评价。[结果]研究过程中实验动物在疫苗联合接种中副反应发生比较明显。在某些时间点体重、白细胞计数、淋巴细胞百分比、AST、ALT和肌酐有变化。6种疫苗联合接种后,小鼠能够对各疫苗产生免疫反应。但是,不同方案疫苗免疫反应不同。其中以出血热疫苗的免疫反应受方案的影响更加明显。[结论]出血热、霍乱、痢疾、钩体疫苗等疫苗在采用恰当的接种顺序和接种间隔的情况下可以联合使用,但是可能存在一定的风险,尤其在此基础上加入炭疽和鼠疫疫苗。

磷酸酶Wip1基因敲除表型及机制研究进展

野生型p53诱导的磷酸酶1(Wild-type p53-induced phosphatase1,Wip1)是PP2C(The type 2Cfamily of protein phosphatases)磷酸酶家族中的一员。在DNA损伤修复中起重要作用,并作为原癌基因受到越来越多的关注。Wip1敲除小鼠虽然能够存活,但寿命缩短,并出现多系统异常,包括生殖系统、免疫体系、内分泌系统、神经系统等,具体表现:雄性生殖器官萎缩及雄性不育、对病原体敏感、T细胞和B细胞功能受损、胰岛素抵抗、体重增长受限、脂肪量减少、焦虑和抑郁样行为增加等。相关机制研究发现,Wip1通过去磷酸化不同蛋白底物而在多种生理和病理过程中发挥重要作用。本文旨在对小鼠Wip1基因缺失所致表型及其初步的分子机制进行综述,为进一步研究Wip1的生物学功能以及哺乳动物体内生理和病理过程的发生机制提供参考。

mpt64-卡介苗重组疫苗免疫原性研究

目的研究mpt64-卡介苗重组疫苗的免疫原性。方法以生理盐水、卡介苗、mpt64-卡介苗重组疫苗免疫小鼠,采用ELISA法检测小鼠血清中特异性抗体,MTS法分析小鼠脾淋巴细胞增殖指数。结果mpt64-卡介苗重组疫苗组小鼠体重变化与对照组相比,无显著性差异。应用不同抗原检测各组小鼠不同时间采集的血清,mpt64-卡介苗重组疫苗组有MPT64特异性抗体产生,而卡介苗组无MPT64特异性抗体产生;卡介苗、mpt64-卡介苗重组疫苗免疫后15d,抗体水平已有升高,45d达到最高水平。用不同抗原刺激实验组及对照组小鼠脾淋巴细胞,平均刺激指数均达2.0以上。结论结核分枝杆菌mpt64基因在卡介苗中能够表达特异的蛋白,刺激小鼠产生特异性抗体。

补肾活血固齿方对小鼠颅顶前成骨细胞增殖活性及细胞周期影响的实验研究

目的:观察补肾活血固齿方对小鼠颅顶前成骨细胞(MC3T3-E1细胞)增殖活性及细胞周期变化的影响,探讨该方剂治疗牙周炎的作用机理。方法:MC3T3-E1细胞分别于5%、10%、15%、20%补肾活血固齿方含药血清,10%无药血清,10%胎牛血清中培养12、24、36、48、60、72 h,MTT法检测补肾活血固齿方对MC3T3-E1细胞增殖活性的影响。另外MC3T3-E1细胞分别于10%补肾活血固齿方含药血清、无药血清、胎牛血清中培养24、48、72 h,用流式细胞仪检测该方剂对MC3T3-E1细胞细胞周期的影响。结果:含药血清与胎牛血清、无药血清组相比,MC3T3-E1细胞增殖活性及细胞周期差异无显著性(P>0.05)。结论:补肾活血固齿方对MC3T3-E1细胞增殖活性及细胞周期无影响,其可能是通过促进该细胞向成骨细胞分化、促进牙槽骨的再生而发挥药物作用。

CircBACH1调节miR-140-5p/MDM2轴对多发性骨髓瘤细胞增殖、凋亡和化疗敏感性的影响

目的探讨CircBACH1对多发性骨髓瘤(MM)细胞增殖、凋亡和化疗敏感性的影响以及在此过程中对miR-140-5p/MDM2轴的调节机制。方法收集MM组和正常对照组骨髓浆细胞,将人MM细胞系U266细胞分为未转染(Control)组、si-NC组、si1-CircBACH1组、si2-CircBACH1组、si-CircBACH1+anti-miR-NC组、si-CircBACH1+anti-miR-140-5p组。实时荧光定量PCR检测细胞中CircBACH1、miR-140-5p、鼠双微体2(MDM2)mRNA的表达;CCK-8法检测细胞增殖活性;流式细胞术检测细胞凋亡及对硼替佐米的敏感性;Western blot检测细胞中B细胞淋巴因子2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、裂解的胱天蛋白酶(cleaved caspase)-3蛋白的表达;双萤光素酶报告基因实验验证CircBACH1、miR-140-5p、MDM2三者的靶向关系。结果与正常对照组相比,MM组的骨髓浆细胞及U266细胞中CircBACH1、MDM2 m RNA表达升高,miR-140-5p表达降低(P<0.05);与Control组和si-NC组相比,siCircBACH1组细胞中CircBACH1、MDM2的mRNA表达、细胞增殖活性、Bcl-2蛋白表达均降低,miR-140-5p的表达、细胞凋亡率、化疗敏感性及cleaved caspase-3、Bax表达均升高(P<0.05);而回补实验中,si-CircBACH1对MM细胞的影响被anti-miR-140-5p逆转,且MDM2的表达也升高(P<0.05)。双萤光素酶基因报告实验验证了CircBACH1、MDM2均与miR-140-5p存在靶向关系。结论敲低CircBACH1能够上调miR-140-5p表达,下调MDM2的表达,抑制MM细胞的增殖,促进MM细胞凋亡,提高化疗敏感性。

停车场控制系统中语言提示功能的实现

针对停车场控制系统中语音的准确分段播放问题,根据同步原理,提出了一种鼠标并 联继电器语音分段播放方法.结果表明,其语音播放时间误差为125ms.该设计具有较强的稳定性与 实用性.

噬菌体对多重耐药肺炎克雷伯菌所致小鼠肺炎和体外生物被膜的作用

目的探究噬菌体对多重耐药肺炎克雷伯菌所致的肺炎小鼠模型的治疗效果及其对体外生物被膜的作用。方法选取2019年1月至2021年12月就诊于江西省人民医院的肺炎患者,分别从肺炎患者痰液和医院处理前废水中获取提纯病原菌和噬菌体,经检测结果分析为多重耐药肺炎克雷伯菌和裂解性噬菌体。提纯的宿主菌和噬菌体分别进行体外和体内实验。先测定共培养物650 nm处吸光度值,观察炎症噬菌体在体外的裂解效果。体内实验对构建的肺炎小鼠模型通过滴鼻给药的方式进行噬菌体干预,对比小鼠存活情况,以观察噬菌体对肺炎的治疗效果。结果体外实验表明,噬菌体在体外具有很好的裂解效果。噬菌体在体内可以有效地治疗肺炎克雷伯菌引起的小鼠肺炎。噬菌体对小鼠感染肺炎的保护作用与感染复数呈正相关。结论噬菌体可治疗多重耐药肺炎克雷伯菌引发的小鼠肺炎,提示临床治疗多重耐药菌肺炎也可采用噬菌体进行治疗,为多重耐药肺炎克雷伯菌肺炎提供新的治疗思路。

二次免疫诱导C57BL/6J小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎动物模型的建立

目的:探讨C57BL/6J小鼠建立实验性自身免疫性脑脊髓炎模型的可能性及其发病特点。方法:使用小鼠脑脊髓匀浆(spinal cord homogenate,SCH)免疫C57BL/6J小鼠,完全福(氏)免疫佐剂为免疫佐剂,并在尾静脉注射百日咳杆菌,建立EAE模型。结果:自制SCH免疫C57BL/6J小鼠可见明显脱髓鞘改变。两次免疫法与一次免疫法相比,发病率较高(P>0.05),神经功能评分较高(P>0.05),发病时间延长(P>0.05)。结论:SCH免疫C57BL/6J小鼠的EAE动物模型,主要表现为急性单相病程,从临床表现和病理学特点来看符合人类MS的病理特点,值得在以后的研究中进一步研究探讨。

微小RNA-335-3p靶向小鼠双微体基因调控骨髓瘤细胞的增殖和凋亡

目的探讨微小RNA(miR)-335-3p对骨髓瘤细胞增殖和凋亡的影响及作用机制。方法2018年5月至2019年1月,培养正常骨髓细胞MNC和骨髓瘤细胞KM3和U266,实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测细胞中miR-335-3p表达水平。将KM3细胞分为miR-NC组(转染模拟对照序列)、miR-335-3p组[转染miR-335-3p模拟物(miR-335-3p mimics)]、pcDNA3.1+miR-335-3p组(共转染空载体和miR-335-3p mimics)和pcDNA3.1-MDM2+miR-335-3p组[共转染小鼠双微体基因(MDM2)过表达载体和miR-335-3p mimics],MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡的影响,蛋白质印迹法(Western blotting)检测细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂1A(P21)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)蛋白和Bcl-2相关X(Bax)蛋白表达。双荧光素酶报告基因实验验证KM3细胞中miR-335-3p与MDM2调控关系。结果骨髓瘤细胞KM3和U266中miR-335-3p表达水平分别为0.24±0.01、0.38±0.02,显著低于正常骨髓细胞MNC中的miR-335-3p表达水平0.77±0.03(均P<0.05)。与miR-NC组比较,miR-335-3p组KM3细胞吸光度[48 h:(0.60±0.03)比(0.99±0.06);72 h:(0.82±0.05)比(1.67±0.07)]、细胞中cyclin D1和Bcl-2蛋白表达均降低(均P<0.05),细胞凋亡率[(24.31±0.99)%比(8.13±0.83)%]、细胞中P21和Bax蛋白表达均升高(均P<0.05)。miR-335-3p在KM3细胞中负调控MDM2表达。与pcDNA3.1+miR-335-3p组比较,pcDNA3.1-MDM2+miR-335-3p组KM3细胞吸光度[48 h:(0.80±0.05)比(0.63±0.04);72 h:(1.28±0.06)比(0.88±0.05)]、细胞中cyclin D1和Bcl-2蛋白表达均升高(均P<0.05),凋亡率[(15.34±0.66)%比(23.98±1.41)%]、细胞中P21、Bax蛋白表达均降低(均P<0.05)。结论miR-335-3p可能通过下调MDM2表达抑制骨髓瘤细胞的增殖,并诱导细胞凋亡。

Flt3配体对多器官功能障碍综合征小鼠脏器功能和结构的保护作用

目的观察Flt3配体(Flt3L)对酵母多糖致多器官功能障碍综合征(multiple organ dysfunc-tion syndrome,MODS)小鼠多脏器功能和结构损伤的防护作用。方法采用腹腔注射酵母多糖的方法复制小鼠MODS模型。雄性C57BL/6小鼠随机分为正常组(n=10),MODS组(n=30)和Flt3L治疗组(n=30)。MODS组在致伤后腹腔注入生理盐水;Flt3L治疗组在致伤后第5 d起腹腔注射Flt3配体(5μg/kg),连续给药7 d。观察酵母多糖致伤12 d动物死亡率,检测各组血丙氨酸转氨酶活性(alanine aminotransforase activity,ALT)、尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)和肌酐(cre-atinine,Cr)水平,外周血T淋巴细胞亚群变化,镜下观察致伤后12 d动物肝、肺、肾、心等脏器的组织病理学改变。结果在酵母多糖致伤后12 d,MODS组小鼠死亡率达18%,Flt3L治疗组的小鼠死亡率为7%。MODS组小鼠血浆AIT、BUN和Cr在伤后12 d升高,而同时间点经Flt3L治疗的小鼠血浆AIT、BUN和Cr趋于正常,明显低于MODS组。MODS组小鼠肝脏、肺脏、肾脏和心脏发生明显的病理改变,主要表现为脏器实质细胞多呈变性与灶状坏死改变,而Flt3L治疗组小鼠上述病变明显减轻。MODS组小鼠CD4+T细胞数目减少,而CD8+T细胞数目呈明显增高,CD4/CD8比值显著下降;而Flt3L治疗组CD4+T细胞数目增加恢复至正常水平,CD4/CD8比值较MODS组明显上调。结论给予Flt3L可以改善机体免疫状态,降低MODS期动物的死亡率,减轻脏器功能和结构的损伤,对MODS期的脏器损伤具有保护作用。

ag85b-卡介苗重组疫苗免疫原性研究

目的研究ag85b-卡介苗重组疫苗的免疫原性。方法以生理盐水、卡介苗、ag85b-卡介苗重组疫苗免疫小鼠,采用ELISA法检测小鼠血清中特异性抗体,MTS法分析小鼠脾淋巴细胞增殖指数。结果ag85b-卡介苗重组疫苗组小鼠体重变化与对照组相比,无显著性差异。应用不同抗原检测各组小鼠不同时间采集的血清,ag85b-卡介苗重组疫苗组、卡介苗组均有抗Ag85B特异性抗体产生,ag85b-卡介苗重组疫苗组抗Ag85B特异性抗体水平高于卡介苗组;卡介苗、ag85b-卡介苗重组疫苗免疫后15d,抗体水平已有升高,45d达到最高水平。用不同抗原刺激实验组及对照组小鼠脾淋巴细胞,平均刺激指数均达2.0以上。结论结核分枝杆菌ag85b基因在卡介苗中能够表达特异的蛋白,刺激小鼠产生特异性抗体。

多发性骨髓瘤细胞体内生长特性的实验研究

目的:为建立人多发性骨髓瘤(Multiple Myeloma,MM)荷瘤SCID小鼠模型,研究人多发性骨髓瘤在SCID小鼠体内生长的特性。方法:体外培养IL-6依赖的人MM细胞株XG7,接种于SCID小鼠皮下;观察肿瘤生长状态,通过流式细胞技术监测肿瘤细胞表型。结果:成瘤后的肿瘤细胞CD28、CD138等分子的表达与接种前没有明显变化。结论:通过研究人MM细胞的体内生长特性可为MM的治疗奠定良好的基础。