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Nitric oxide production and inducible nitric oxide synthase protein expression in human abdominal aortic aneurysms and cultured aneurismal smooth muscle cells
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作者 廖明芳 景在平 +6 位作者 包俊敏 赵志青 梅志军 陆清声 崔佳森 曲乐丰 张素贞 《Journal of Medical Colleges of PLA(China)》 CAS 2006年第2期101-107,共7页
Objective:To investigate the production of nitric oxide(NO) and the expression of inducible nitric oxide synthase (iNOS), and their possible role in abdominal aortic aneurysm (AAA). Methods: A total of 28 pati... Objective:To investigate the production of nitric oxide(NO) and the expression of inducible nitric oxide synthase (iNOS), and their possible role in abdominal aortic aneurysm (AAA). Methods: A total of 28 patients with AAA, 10 healthy controls, and 8 patients with arterial occlusive disease were enrolled into this study. Standard colorimetric assay was used to examine NO concentration in plasma from patients with AAA and normal controls, and in cultured smooth muscle cells (SMCs). Expression of iNOS in aortas and cultured SMCs were detected by immunochemistry. The correlation of iNOS expression with age of the patient, size of aneurysm, and degree of inflammation was also investigated by Cochran-Mantel-Haenszel χ^2 test and Kendall correlation. Results : Expression of iNOS increased significantly in the wall of aneurism in the patients with AAA compared to the healthy controls (P〈0.05) and the patients with occlusive arteries (P〈0.05). iNOS protein and media NOx (nitrite+nitrate) also increased in cultured SMCs from human AAA (n=4, P〈0.05), while plasma NOx decreased in patients with AAA (n= 25) compared to the healthy controls (n=20). There was a positive correlation between iNOS protein and the degree of inflammation in aneurismal wall (Kendall coefficient = 0. 5032, P= 0. 0029). Conclusion: SMCs and inflammatory cells are main cellular sources of increased iNOS in AAA, and NO may play a part in pathogenesis in AAA through inflammation, SMCs and oxidative stress. 展开更多
关键词 nitric oxide nitric oxide synthase inducible abdominal aortic aneurysm smooth muscle cells inflammation
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Homocysteine-induced Enhanced Expression of Tissue Factor in Human Vascular Smooth Muscle Cells 被引量:5
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作者 刘芳 黄瑞滨 +4 位作者 姚军霞 魏文宁 胡豫 宋善俊 李军 《Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences)》 SCIE CAS 2008年第5期520-524,共5页
The homocysteine (Hcy)-induced tissue factor (TF) expression in human vascular smooth muscle cells (VSMCs) and the effect of Hcy on the activity of nuclear factor-kappaB (NF-кB) and the expression of inducibl... The homocysteine (Hcy)-induced tissue factor (TF) expression in human vascular smooth muscle cells (VSMCs) and the effect of Hcy on the activity of nuclear factor-kappaB (NF-кB) and the expression of inducible nitric oxide synthase (iNOS) were investigated. Human umbilical artery VSMCs were cultured by tissue explanting method, identified by α-actin immunohistochemistry, and incubated with different concentrations of Hcy/PTDC (NF-кB inhibitor). Semi-quantitative RT-PCR was performed to detect the expression of TF mRNA in VSMCs. Flow cytometry was used to assay the expression of TF protein on the surface of VSMCs and the expression of iNOS in VSMCs. Western blot was carried out to detect the expression of NF-кB protein in nuclei. The results showed that Hcy could induce VSMCs expressing TF mRNA significantly after the VSMCs were incubated with Hcy at concentrations of 10, 100, 500 μmol/L respectively. There was low expression level of TF protein on the surface of the resting VSMCs and Hcy could also induce VSMCs expressing TF pro- tein on the cell surface in different concentrations. Additionally, Hcy could rapidly induce the activation of NF-кB and this effect could be significantly inhibited by PDTC. Hcy alone could not induce the expression of iNOS in VSMCs. It was concluded that Hcy could significantly induce the expression of TF in VSMCs and enhance the activation of NF-ΚB, subsequently mediate TF gene expression and protein synthesis. NF-кB-mediated expression of TF in VSMCs might be the important mechanism of atherosclerosis and thrombosis induced by Hcy. 展开更多
关键词 HOMOCYSTEINE vascular smooth muscle cell tissue factor nuclear factor kappaB inducible nitric oxide synthase
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Effects of Needle-knife Therapy on iNOS Activity and NO Content in Skeletal Muscles in the L_3 Transverse Process Syndrome Model Rat 被引量:3
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作者 乔晋琳 李金牛 +5 位作者 汲广成 马广昊 付本升 向东东 陈裔英 路平 《Journal of Traditional Chinese Medicine》 SCIE CAS CSCD 2011年第2期83-87,共5页
Objective: To study on relationship of inducible nitric oxide synthase (iNOS) activity and nitric oxide (NO) content in the injured local soft tissue with injured degrees of the soft tissue in the third lumbar vertebr... Objective: To study on relationship of inducible nitric oxide synthase (iNOS) activity and nitric oxide (NO) content in the injured local soft tissue with injured degrees of the soft tissue in the third lumbar vertebrae (L3) transverse process syndrome model rat and to observe the effect of needle-knife therapy. Methods: One hundred and sixty male SD rats were randomly divided into normal group, model group, aminoguanidine (AG) group, needle-knife group, 40 rats in each group. The L3 transverse process syndrome rat model was established, and after treatment of needle-knife and AG, iNOS activities and NO contents and histomorpholocal changes in the soft tissues around L3 transverse process on 1, 3, 7 and 14 days were observed in the groups. Results: Compared with the normal group, iNOS activity and NO content in the model group were significantly increased (P<0.01); Compared with the model group, iNOS activities and NO contents were significantly decreased in both the needle-knife group and the AG group (both P<0.01); And both iNOS activities and NO contents were identical with both local inflammation response and injured degrees of the injured tissue in the groups. Conclusion: Needle-knife therapy can significantly inhibit generation of NO, alleviate inflammatory response and injured degree of the injured soft tissue, improve microcirculation, prevent formation of pathological scar tissue, and promote repair of the chronic soft tissue injury. 展开更多
关键词 trauma and injury skeletal muscle nitric oxide nitric oxide synthase needle-knife therapy
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Effect of LPS on the proliferation and viability of rat vascular smooth muscle cell in vitro 被引量:1
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作者 李剑 林树新 +2 位作者 李莹 赵贺玲 贾斌 《Journal of Medical Colleges of PLA(China)》 CAS 1999年第1期37-40,共4页
Objective: To investigate the effect of LPS on the proliferation and viability of rat vascular smoothmuscle cell in vitro. Methods: In cultured vascular smooth muscle cells(VSMCs) of SD rat, it was found that 1× ... Objective: To investigate the effect of LPS on the proliferation and viability of rat vascular smoothmuscle cell in vitro. Methods: In cultured vascular smooth muscle cells(VSMCs) of SD rat, it was found that 1× 10 -1~1 × 10-5 g/ml LPS markedly stimulated the proliferation and DNA synthesis of VSMC in a dose--dependentmanner (P CO. 05). 5 × 10- 4-- 10 -3 g/ml LPS markedly inhibited the proliferation, DNA synthesis and viabilityof VSMC in a time--dependent manner (P <0. 01). N (--Nitro--L--Arginine (L--NNA )which could decrease theproduction of NO by inhibiting nitric oxide synthase (NOS) and antagonize the inhibitory effect of LPS. Thecontents of NO3, NO2 in medium were markedly increased in LPS group (P <0. 01), 48 h group vs 24 h groupincreased by 9. 1%, 72 h group vs 48 h group increased by 4. 5%. In high dose LPS group, positiveimmunohistochemical staining for inducible nitric oxide synthase was observed. Results:It was demonstrated thatlow dose LPS stimulated the proliferation and DNA synthesis of VSMC, while LPS at high dose markedly inhibitedthe proliferation, DNA synthesis and viability of VSMC. Conclusion: The inhibition of VSMC proliferationinduced by LPS is probably due to the increased release of NO by VSMC. 展开更多
关键词 LPS SMOOTH muscle cells PROLIFERATION NO INDUCIBLE nitric oxide synthase
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神经营养素-3过表达诱导多能干细胞治疗糖尿病性勃起功能障碍大鼠的实验研究 被引量:1
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作者 陈赓 王健 刘强 《实用临床医药杂志》 CAS 2023年第5期97-103,共7页
目的 探讨神经营养素-3过表达诱导多能干细胞(iPSC-NT-3)对糖尿病性勃起功能障碍(DIED)大鼠的治疗作用。方法 腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病模型大鼠,皮下注射阿扑吗啡对DIED模型进行验证。选择24只造模成功的DIED大鼠,随机分为模型对... 目的 探讨神经营养素-3过表达诱导多能干细胞(iPSC-NT-3)对糖尿病性勃起功能障碍(DIED)大鼠的治疗作用。方法 腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病模型大鼠,皮下注射阿扑吗啡对DIED模型进行验证。选择24只造模成功的DIED大鼠,随机分为模型对照组、诱导多能干细胞(iPSC)治疗组和iPSC-NT-3治疗组;腹腔注射柠檬酸钠-柠檬酸缓冲液的8只SD大鼠作为正常对照组。各组大鼠腹腔注射戊巴比妥钠进行麻醉,iPSC治疗组和iPSC-NT-3治疗组分别将iPSC和iPSC-NT-3用微量注射针注射入大鼠阴茎海绵体内,正常对照组和模型对照组同法注射同体积的磷酸缓冲液。治疗后第4周,观察各组大鼠的一般情况,评估性功能和阴茎勃起功能。采用定量聚合酶链反应(q-PCR)和Western blot实验检测神经营养素-3(NT-3)、CD31、血管内皮生长因子(VEGF)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、结蛋白(Desmin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的mRNA和蛋白的表达。结果 治疗前和治疗后4周,模型对照组、iPSC治疗组和iPSC-NT-3治疗组大鼠体质量和血糖水平的组内、组间差异均无统计学意义(P>0.05)。在大鼠首次爬背时间比较中,模型对照组较正常对照组延长,iPSC治疗组、iPSC-NT-3治疗组较模型对照组缩短,iPSC-NT-3治疗组较iPSC治疗组缩短,差异均有统计学意义(P<0.05);在舔嗅次数、骑跨次数和插入次数的比较中,模型对照组均较正常对照组减少,iPSC治疗组、iPSC-NT-3治疗组较模型对照组增加,iPSC-NT-3治疗组较iPSC治疗组增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。在ICP和ICP/MAP的比较中,模型对照组较正常对照组降低,iPSC治疗组、iPSC-NT-3治疗组较模型对照组升高,iPSC-NT-3治疗组较iPSC治疗组升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。在大鼠阴茎海绵体NT-3、CD31、VEGF、eNOS、Desmin和α-SMA的mRNA表达水平比较中,模型对照组较正常对照组降低,iPSC治疗组、iPSC-NT-3治疗组较模型对照组升高,iPSC-NT-3治疗组较iPSC治疗组升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。在大鼠阴茎海绵体NT-3、CD31、VEGF、eNOS、Desmin、α-SMA蛋白水平比较中,模型对照组较正常对照组降低,iPSC治疗组、iPSC-NT-3治疗组较模型对照组升高,iPSC-NT-3治疗组较iPSC治疗组升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 iPSC-NT-3可通过促进海绵体组织eNOS、血管内皮及平滑肌的生成而改善DIED大鼠的性功能和勃起功能,是一种潜在的治疗DIED的方法。 展开更多
关键词 诱导多能干细胞 神经营养素-3 糖尿病性勃起功能障碍 内皮型一氧化氮合酶 Α-平滑肌肌动蛋白 血管内皮生长因子
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针刀干预对L_3横突综合征模型大鼠骨骼肌NOS及NO的影响 被引量:16
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作者 李金牛 乔晋琳 +7 位作者 郭长青 汲广成 马广昊 付本升 向东东 陈裔英 路平 刘灿坤 《中国骨伤》 CAS 2009年第11期844-847,共4页
目的:研究L3横突综合征模型大鼠损伤局部软组织NOS活性及NO含量与软组织损伤程度的关系,并观察针刀干预后的影响。方法:成年雄性SD大鼠128只随机分为正常组、模型组、氨基胍组、针刀组,每组32只。建立L3横突综合征动物模型,造模后14d,... 目的:研究L3横突综合征模型大鼠损伤局部软组织NOS活性及NO含量与软组织损伤程度的关系,并观察针刀干预后的影响。方法:成年雄性SD大鼠128只随机分为正常组、模型组、氨基胍组、针刀组,每组32只。建立L3横突综合征动物模型,造模后14d,对造模局部软组织的硬结和条索状物无菌条件下用一次性针刀行纵行切割3刀,横行切割1刀,随即出针刀。氨基胍组从造模14d开始,按50mg/kg剂量经腹膜内给药,2次/d,直至处死前一天为止。通过针刀、氨基胍干预后在1、3、7、14d检测各组L3横突周围软组织NOS活性、NO含量及观察组织形态学变化。结果:①模型组iNOS活性及NO含量比正常组明显升高(F=522.860,P<0.01),针刀组、AG组比模型组明显降低(FiNOS=28.894,P<0.01),且各组iNOS活性及NO含量与损伤局部炎症反应及组织损伤程度相一致。②模型组、针刀组eNOS阳性表达增强,7d达到峰值,针刀组与模型组比较差异有统计学意义(FeNOS=3.454,P<0.05)。③模型组、氨基胍组、针刀组nNOS阳性表达较高,组间比较无统计学意义(FnNOS=0.962,P>0.05)。结论:针刀干预后可明显抑制高浓度NO的生成,减轻损伤软组织炎症反应和损伤程度,改善微循环,防止病理性瘢痕组织的形成,对慢性软组织损伤动物模型有明显的促修复作用。 展开更多
关键词 第三腰椎横突综合征 骨骼 一氧化氮 一氧化氮合酶
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eNOS、CAV1、PI3K/Akt信号通路在同型半胱氨酸促进大鼠血管平滑肌细胞迁移、增殖中的作用研究 被引量:13
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作者 纪昕 王鑫 +3 位作者 岳晓乐 赵丹丹 郭玉楷 李永军 《中国全科医学》 CAS 北大核心 2017年第12期1469-1473,共5页
目的探讨内皮型一氧化氮合酶(e NOS)、小凹蛋白-1(CAV1)、磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路在同型半胱氨酸(Hcy)促进大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)迁移、增殖中的作用。方法 2016年1—6月采用组织贴块法分离SDF级SD大鼠胸主... 目的探讨内皮型一氧化氮合酶(e NOS)、小凹蛋白-1(CAV1)、磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路在同型半胱氨酸(Hcy)促进大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)迁移、增殖中的作用。方法 2016年1—6月采用组织贴块法分离SDF级SD大鼠胸主动脉中膜并传代培养VSMCs,取4~7代细胞用于实验。细胞分为4组,分别为空白对照组、100μmol/L Hcy组、200μmol/L Hcy组、500μmol/L Hcy组,使用相应浓度Hcy(0、100、200、500μmol/L)进行干预培养,采用Transwell法检测VSMCs迁移能力、MTT法检测VSMCs增殖情况[以光密度(OD)值表示],硝酸还原酶法测定VSMCs释放NO情况,Western blotting检测VSMCs e NOS、CAV1、PI3K、p-Akt蛋白表达情况。结果 VSMCs穿膜细胞数与Hcy浓度呈正相关(r=0.582,P=0.020)。OD值与Hcy浓度呈正相关(r=0.620,P=0.015)。100、200、500μmol/L Hcy组释放NO低于空白对照组(P<0.05)。NO(r=-0.479,P=0.028),e NOS蛋白表达水平(r=-0.544,P=0.033)与Hcy浓度呈负相关。NO与e NOS蛋白表达水平呈正相关(r=0.721,P=0.009)。100、200、500μmol/L Hcy组VSMCs CAV1、PI3K、p-Akt蛋白表达水平均高于空白对照组(P<0.05)。CAV1蛋白表达水平(r=0.505,P=0.042),PI3K蛋白表达水平(r=0.428,P=0.030)、p-Akt蛋白表达水平(r=0.389,P=0.047)与Hcy浓度均呈正相关。结论 Hcy可能通过促进CAV1蛋白表达,抑制e NOS活性和NO释放,活化PI3K/Akt信号通路,从而诱导VSMCs的迁移和增殖,导致动脉粥样硬化。 展开更多
关键词 半胱氨酸 肌细胞 平滑肌 一氧化氮合酶 小凹蛋白 磷脂酰肌醇3-激酶
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诱导型一氧化氮合酶在17β-雌二醇诱导的血管平滑肌细胞周期阻滞中的作用 被引量:5
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作者 杨丹 付晓东 +3 位作者 李永勇 谈智 王庭槐 潘敬运 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期684-691,共8页
利用大鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMC)作为模型,观察17β-雌二醇(17β-estradi-ol,E2)对VSMC诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)活性和蛋白表达的影响,并探讨其在内皮素-1(endothlin 1,ET... 利用大鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMC)作为模型,观察17β-雌二醇(17β-estradi-ol,E2)对VSMC诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)活性和蛋白表达的影响,并探讨其在内皮素-1(endothlin 1,ET-1)刺激的VSMC周期循环中的作用。检测指标包括同位素法测定iNOS的活性,免疫印迹法(western blot)检测iNOS蛋白表达,流式细胞仪检测细胞周期,观察一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)抑制剂NG-硝基左旋精氨酸甲酯(NG-nitro-L-arginine methylester,L-NAME)对E2抑制VSMC细胞周期的影响。结果显示,E2明显增加iNOS的活性和蛋白表达,在30 min和12 h时能诱导VSMC的iNOS活性明显增加,而60 min和24 h时VSMC的iNOS活性与对照组无显著差异,不呈明显浓度依赖性,雌激素受体(estrogen receptor,ER)拮抗剂Tamoxifen和L-NAME能明显抑制E2诱导的VSMC iNOS活性增加;E2增加VSMC的iNOS蛋白表达的作用在3 h时起效,12 h达高峰,以后逐渐下降,呈浓度依赖性,Tamoxifen能明显抑制E2诱导的VSMC iNOS蛋白表达;E2明显抑制ET-1诱导的S期细胞百分比和G2+S/G1增加,使VSMC在G1期发生细胞周期阻滞,这些作用可被预先给予L-NAME所明显减轻。上述结果提示,E2使ET-1刺激的VSMC细胞周期循环在G1期发生阻? 展开更多
关键词 血管平滑肌 雌激素 一氧化氮 一氧化氮合酶 细胞周期
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一氧化氮在17-β雌二醇抑制血管平滑肌细胞增殖和原癌基因c-fos表达中的作用 被引量:4
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作者 杨丹 谈智 +2 位作者 刘培庆 潘敬运 王庭槐 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期17-22,共6页
实验利用大鼠血管平滑肌细胞 (vascularsmoothmusclecells ,VSMC)作为模型 ,观察 17 β雌二醇 (E2 )对VSMC增殖和原癌基因c fos表达的影响 ,并探讨VSMC源性一氧化氮 (NO)在其中的作用。检测指标包括NO释放的测定、细胞计数、3 H Tdr掺... 实验利用大鼠血管平滑肌细胞 (vascularsmoothmusclecells ,VSMC)作为模型 ,观察 17 β雌二醇 (E2 )对VSMC增殖和原癌基因c fos表达的影响 ,并探讨VSMC源性一氧化氮 (NO)在其中的作用。检测指标包括NO释放的测定、细胞计数、3 H Tdr掺入、噻唑蓝 (MTT)测定和c fosmRNA表达。结果显示 ,E2 ( 10 12 ~ 10 -8mol/L)呈浓度依赖性地促进VSMC中NO的释放 ;10 -8mol/LE2 能明显抑制 10 %小牛血清 (FCS)和 10 -7mol/L内皮素 1(ET 1)诱导的细胞增殖和DNA合成 ,E2 的抑制作用均可被雌激素受体 (ER)拮抗剂tamoxifen ( 10 -7mol/L)和一氧化氮合酶抑制剂L NAME( 10 -6 mol/L)明显减轻 ;E2 ( 10 -8mol/L)可明显抑制 10 -7mol/LET 1诱导的VSMCc fos表达 ,这种抑制作用可被L NAME ( 10 -6 mol/L)明显减轻。这些结果提示E2 能抑制VSMC增殖和原癌基因c fos表达 ,这和促进VSMC的NO释放密切相关 。 展开更多
关键词 血管平滑肌细胞 雌激素 一氧化氮 一氧化氮合酶 C-FOS 原癌基因表达 细胞增殖 抑制作用
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内源性一氧化氮合酶抑制物上调4周运动大鼠骨骼肌收缩功能和线粒体生物合成 被引量:7
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作者 邱霓 方伟进 +2 位作者 李聪 李晓媚 熊燕 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期1259-1265,共7页
目的:观察内源性一氧化氮合酶(NOS)抑制物非对称性二甲基精氨酸(ADMA)及其信号通路在4周运动大鼠NO水平及骨骼肌收缩功能与线粒体生物合成中的调节作用。方法:建立4周运动大鼠模型,检测离体比目鱼肌对电刺激的单次、强直和疲劳收缩的最... 目的:观察内源性一氧化氮合酶(NOS)抑制物非对称性二甲基精氨酸(ADMA)及其信号通路在4周运动大鼠NO水平及骨骼肌收缩功能与线粒体生物合成中的调节作用。方法:建立4周运动大鼠模型,检测离体比目鱼肌对电刺激的单次、强直和疲劳收缩的最大张力;并检测骨骼肌中ATP和线粒体DNA含量以及过氧化物酶增殖体受体γ辅激活因子1α(PGC-1α)、核呼吸因子(NRF)mRNA的表达以反映线粒体生物合成及功能;用高效液相色谱测定血清ADMA浓度;用Western blot法检测骨骼肌中内源性ADMA生成酶PRMT1和ADMA代谢酶DDAH2种亚型以及NOS 3种亚型蛋白的表达;用比色法测定NOS活性及一氧化氮(NO)含量等。结果:与正常对照组相比,运动组大鼠比目鱼肌对电刺激诱导的各种收缩张力均明显增强,比目鱼肌ATP含量、线粒体DNA含量和PGC-1α、NRF mRNA增加显著(P<0.01)。运动组大鼠比目鱼肌中构成型NOS(cNOS)的蛋白表达及其NOS活性明显上调(P<0.01),而NO含量仅小幅增加(P<0.05);同时,4周运动增加大鼠血清ADMA浓度,并伴有骨骼肌DDAH2表达下调。结论:短期耐力运动增强比目鱼肌单次收缩、强直收缩和抗疲劳收缩肌功能,其机制可能与过度增加的cNOS促使ADMA水平反馈性升高,从而维持骨骼肌NO低幅度增加,促进线粒体生物合成有关。 展开更多
关键词 耐力运动 骨骼肌 收缩功能 一氧化氮 线粒体生物合成
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同型半胱氨酸诱导血管平滑肌细胞组织因子表达增强 被引量:9
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作者 洪梅 黄瑞滨 +3 位作者 姚军霞 魏文宁 胡豫 宋善俊 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第11期2081-2085,共5页
目的:研究同型半胱氨酸(Hcy)诱导人血管平滑肌细胞(VSMCs)组织因子(TF)表达的作用,及其对核转录因子(NF-κB)活性和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达的影响。方法:培养人脐动脉VSMCs,将不同浓度的Hcy和/或NF-κB抑制剂PDTC与VSMCs孵育不同... 目的:研究同型半胱氨酸(Hcy)诱导人血管平滑肌细胞(VSMCs)组织因子(TF)表达的作用,及其对核转录因子(NF-κB)活性和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达的影响。方法:培养人脐动脉VSMCs,将不同浓度的Hcy和/或NF-κB抑制剂PDTC与VSMCs孵育不同时间,用RT-PCR方法检测TF mRNA表达,用Western blotting检测核NF-κB水平,用流式细胞术(FCM)检测细胞表面TF蛋白水平和iNOS水平。结果:10μmol/LHcy作用4h,TF表达开始升高,500μmol/L达峰值,Hcy能显著诱导VSMCs表达TF mRNA;对照组VSMCs细胞膜表面有低水平的TF蛋白表达,10μmol/LHcy作用4h即可诱导VSMCs表达TF蛋白,500μmol/L达高峰,Hcy能显著诱导VSMCs表达TF;500μmol/LHcy作用1h,细胞核NF-κB水平明显升高,Hcy可诱导VSMCsNF-κB活化;NF-κB抑制剂PDTC可明显抑制Hcy对TF mRNA和细胞TF表达的诱导作用;单独Hcy作用不能诱导VSMCs表达iNOS。结论:Hcy能显著诱导VSMCs表达TF,增强VSMCs的NF-κB活化,从而介导TF基因表达和蛋白合成,通过NF-κB介导VSMCs表达TF可能是Hcy导致AS、血栓形成的重要机制。 展开更多
关键词 高半胱氨酸 血管平滑肌细胞 凝血致活酶 NF-κB 一氧化氮合酶
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加压训练和传统增肌训练对优秀男子手球运动员部分激素及生物活性因子的影响 被引量:21
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作者 赵之光 程金娜 +2 位作者 魏文哲 孙科 王明波 《中国体育科技》 CSSCI 北大核心 2019年第5期20-29,共10页
目的:探讨单次、多次加压训练与传统增肌训练,对优秀男子手球运动员与肌肉合成、分解相关的部分激素和生物活性因子的影响。方法:将18名优秀男子手球运动员按照年龄随机分为实验组和对照组。实验组在加压(下肢加压,加压带宽度5cm,压力值... 目的:探讨单次、多次加压训练与传统增肌训练,对优秀男子手球运动员与肌肉合成、分解相关的部分激素和生物活性因子的影响。方法:将18名优秀男子手球运动员按照年龄随机分为实验组和对照组。实验组在加压(下肢加压,加压带宽度5cm,压力值:着装压45mmHg,训练压200mmHg)下完成每周3次的深蹲、硬拉、负重剪蹲和推雪橇车前行练习,对照组按照传统的训练方式训练。分别在首次训练前晨起(PRE)、训练后即刻(POST-0)、训练后次日晨(POST-1d)和连续训练两周后晨起(POST-14d)采集血液样本,检测睾酮、皮质醇、胰岛素、HGH、MSTN及IGF-1、IL-6、NOS等指标,进行组间和组内的对比分析。结果:1)HGH:与PRE相比(下同),实验组和对照组在POST-0分别上升962.2%(P<0.01)和568.2%(P<0.01),组间比较P<0.05;在POST-1d分别上升14.3%和0.3%;在POST-14d分别升高16.6%和8.7%。2)IGF-1:实验组和对照组在POST-0分别升高2.6%(P<0.05)和下降3.8%,在POST-1d分别下降2.7%和1.2%;在POST-14d分别下降1.6%和7.2%(P<0.01)。3)NOS:实验组在POST-0上升5.8%、POST-1d下降3.7%(P<0.01),而对照组为持续下降1.3%和7.4%,在POST-0,组间比较P<0.05;在POST-14d实验组和对照组分别下降11.8%(P<0.01)和16.3%(P<0.01)。4)睾酮:实验组和对照组在POST-0分别下降30.9%和35.3%;在POST-1d分别下降7.3%和9.7%;在POST-14d分别下降1.3%和5.6%,组间比较P<0.05。结论:对于竞技水平较高的运动员来说,与传统增肌训练相比,加压训练能更加有效地促进与肌肉合成相关的NOS、HGH等激素和生物活性因子的良性变化,且由于负荷相对较小,加压训练更有利于竞技状态的保持。加压训练值得在高水平运动队中推广和应用。为达到更好的训练效果,进行加压训练同样需要随着机体的适应而调整个体的训练压力和训练负荷。 展开更多
关键词 加压训练 优秀运动员 增肌 一氧化氮合成酶 生长激素 生长抑素
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在大鼠骨骼肌急性损伤修复过程中按摩对神经型一氧化氮合成酶、肝细胞生长因子mRNA表达的影响 被引量:8
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作者 杨辉 唐成林 +6 位作者 常青 黄思琴 唐念珍 谢辉 陈晓琳 田源 张毅 《中国康复医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期224-230,共7页
目的:研究按摩对大鼠骨骼肌急性损伤修复过程中肌卫星细胞激活关键因子神经型一氧化氮合成酶(n NOS)、肝细胞生长因子(HGF)m RNA表达的影响,探讨按摩对于骨骼肌急性损伤修复的作用。方法:将44只SPF级成年雄性SD大鼠按随机抽样法分为3组... 目的:研究按摩对大鼠骨骼肌急性损伤修复过程中肌卫星细胞激活关键因子神经型一氧化氮合成酶(n NOS)、肝细胞生长因子(HGF)m RNA表达的影响,探讨按摩对于骨骼肌急性损伤修复的作用。方法:将44只SPF级成年雄性SD大鼠按随机抽样法分为3组,正常对照组(A组,n=4),自然恢复组(C组,n=24),按摩组(M组,n=16)。A组不做任何处理,C、M组用改良打击器制备大鼠腓肠肌急性损伤模型。C组不给予按摩,M组于造模后第3天介入按摩治疗。C、M组于造模后第7天、第14天、第21天及第28天取实验动物腓肠肌样本,HE染色观察组织病理改变,实时荧光PCR检测肌卫星细胞中n NOS、HGF m RNA表达量。结果:按摩干预治疗后,M、C组与A组比较,各时间点n NOS、HGF m RNA表达量均高于A组,且具有显著差异(P<0.01);M组与C组比较,在7天、第14天、第21天及第28天n NOS、HGF m RNA表达量M组均高于C组(P<0.01)。M组与C组比较,损伤区域成肌细胞更多,肌丝稠密,肌卫星细胞增殖明显,血供更丰富,坏死组织恢复更快。结论:按摩可有效提高肌卫星细胞中n NOS、HGF m RNA表达水平,激活更多的肌卫星细胞,促进受损骨骼肌的修复再生。 展开更多
关键词 按摩 肌卫星细胞 神经型一氧化氮合酶 肝细胞生长因子
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葛根素对大鼠离体肠道平滑肌运动的影响及其机制 被引量:4
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作者 刁汇玲 孙晖 +3 位作者 高金祥 马中女 田伟 马春蕾 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第16期3897-3899,共3页
目的探讨葛根素对大鼠离体肠道平滑肌收缩活动的影响及其作用机制。方法应用PowerLab信号处理仪观察葛根素对大鼠离体肠道平滑肌收缩活动的影响及诱导型NO合酶(iNOS)是否介导葛根素对肠道平滑肌的作用;应用NO试剂盒测定葛根素对结肠内N... 目的探讨葛根素对大鼠离体肠道平滑肌收缩活动的影响及其作用机制。方法应用PowerLab信号处理仪观察葛根素对大鼠离体肠道平滑肌收缩活动的影响及诱导型NO合酶(iNOS)是否介导葛根素对肠道平滑肌的作用;应用NO试剂盒测定葛根素对结肠内NO含量的影响;应用Western印迹观察葛根素是否上调结肠中iNOS的含量。结果 0.12、0.24、0.48 g/L葛根素对各段肠道平滑肌运动都有明显抑制作用,并随浓度增加而加强。应用SMT(iNOS抑制剂)对结肠平滑肌预处理后再加入葛根素,其对平滑肌作用减弱。0.12、0.24、0.48 g/L葛根素都可提高结肠平滑肌内NO和iNOS含量。结论葛根素可抑制肠道平滑肌的收缩活动,其机制可能与肠内iNOS表达上调有关。 展开更多
关键词 葛根素 离体肠道平滑肌 NO 诱导型NO合酶
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一氧化氮合酶抑制剂对失神经肌萎缩的延缓作用 被引量:6
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作者 王全震 王发斌 +1 位作者 洪光祥 康皓 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第8期805-808,共4页
目的研究一氧化氮合酶(nitricoxidesynthase,NOS)竞争性抑制剂L-硝基精氨酸甲酯(NG-nitro-L-argininemethylester,L-NAME)对失神经肌萎缩的延缓作用,为失神经肌萎缩的预防与治疗提供新手段。方法制备36只成年SD大鼠右下肢腓肠肌失神经... 目的研究一氧化氮合酶(nitricoxidesynthase,NOS)竞争性抑制剂L-硝基精氨酸甲酯(NG-nitro-L-argininemethylester,L-NAME)对失神经肌萎缩的延缓作用,为失神经肌萎缩的预防与治疗提供新手段。方法制备36只成年SD大鼠右下肢腓肠肌失神经支配模型,随机分为L-NAME组(A组)和对照组(B组)。A组:腓肠肌注射L-NAME,于5个不同位点分别注射20μl,总注射剂量为10mg/kg;B组:注射同等体积的生理盐水。于术后2、4和8周测定肌湿重维持率、肌细胞横切面积、肌肉蛋白含量、细胞凋亡数,并观察超微结构的改变。结果术后2、4周A组的肌湿重维持率、肌细胞横切面积、肌肉蛋白含量均明显高于B组,但细胞凋亡数低于B组,差异均有统计学意义(P<0.05)。超微结构显示,术后2周,肌细胞线粒体、内质网及细胞核改变不明显,两组间无显著性差异;术后4周,A组退变的细胞核较B组少,核质染色均匀。术后8周两组各参数间差异无统计学意义(P>0.05)。结论NOS抑制剂L-NAME能在短期内延缓失神经肌萎缩。 展开更多
关键词 一氧化氮合酶抑制剂 失神经 肌萎缩
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eNOS对大鼠颈动脉球囊损伤后平滑肌细胞增殖的影响 被引量:3
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作者 盛净 陆平 +3 位作者 蔡文玮 刘德莉 苏海霞 刘伟 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第10期1197-1200,共4页
目的研究内皮型一氧化氮合酶(eNOS)对大鼠球囊损伤后平滑肌细胞增殖的影响。方法构建腺病毒-eNOS(AdCMV-eNOS)质粒,以脂质体介导转染293细胞,扩增后转染SD大鼠球囊损伤后平滑肌细胞(实验组),以转染Ad-LacZ重组质粒的平滑肌细胞作为对照... 目的研究内皮型一氧化氮合酶(eNOS)对大鼠球囊损伤后平滑肌细胞增殖的影响。方法构建腺病毒-eNOS(AdCMV-eNOS)质粒,以脂质体介导转染293细胞,扩增后转染SD大鼠球囊损伤后平滑肌细胞(实验组),以转染Ad-LacZ重组质粒的平滑肌细胞作为对照组。RT-PCR技术观察转染后平滑肌细胞eNOS mRNA的表达;细胞计数法分别检测实验组、对照组、正常组和单纯球囊损伤组平滑肌细胞的增殖能力。。结果RT-PCR检测发现实验组平滑肌细胞表达eNOS mRNA,而对照组无表达。各时间点细胞计数结果显示,正常组均明显少于单纯球囊损伤组(P<0.05),而实验组均明显少于单纯球囊损伤组和对照组(P<0.05)。结论重组腺病毒表达载体构建正确;eNOS可以抑制平滑肌细胞增殖。为eNOS预防经皮腔内冠状动脉成形术术后再狭窄基因转染奠定了基础。 展开更多
关键词 内皮型一氧化氮合酶 腺病毒 平滑肌细胞 增殖 一氧化氮
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低氧诱导肺血管平滑肌细胞诱生型一氧化氮合酶基因表达 被引量:11
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作者 林红 蔡英年 +5 位作者 邓希贤 李世强 梁兵 周晓梅 蔡起蔷 杨燕芬 《基础医学与临床》 CSCD 1997年第3期199-203,共5页
本研究采用原位杂交、免疫组织化学、酶组织化学染色方法从三个层次分别证明低氧诱导大鼠肺血管中膜平滑肌细胞一氧化氮合酶(NitricOxideSynthase,NOS)的基因和蛋白表达,并使中膜平滑肌细胞具有NOS活性;... 本研究采用原位杂交、免疫组织化学、酶组织化学染色方法从三个层次分别证明低氧诱导大鼠肺血管中膜平滑肌细胞一氧化氮合酶(NitricOxideSynthase,NOS)的基因和蛋白表达,并使中膜平滑肌细胞具有NOS活性;离体培养的肺动脉平滑肌细胞实验也证明低氧使肺动脉平滑肌细胞NOS活性增加,NO生成增多。提示诱生型NOS基因可能是一种低氧诱导基因,低氧诱导NOS表达可能是细胞感受低氧的一种重要机制。 展开更多
关键词 低氧 肺血管平滑肌 诱生型 一氧化氮合酶
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一氧化氮部分介导吡格列酮抑制培养兔胸主动脉平滑肌细胞增殖 被引量:4
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作者 陈鹭颖 徐江平 +1 位作者 庞建新 史道华 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2005年第6期642-645,共4页
目的:观察吡格列酮(PIO)对高糖高胰岛素诱导兔胸主动脉平滑肌细胞(VSMCs)增殖的影响及其与一氧化氮(NO)的关系。方法:模拟胰岛素抵抗(IR)状态培养VSMCs,四甲基氮唑盐(MTT)比色法测定细胞增殖,试剂盒分别检测细胞液中NO含量及细胞总一氧... 目的:观察吡格列酮(PIO)对高糖高胰岛素诱导兔胸主动脉平滑肌细胞(VSMCs)增殖的影响及其与一氧化氮(NO)的关系。方法:模拟胰岛素抵抗(IR)状态培养VSMCs,四甲基氮唑盐(MTT)比色法测定细胞增殖,试剂盒分别检测细胞液中NO含量及细胞总一氧化氮合酶(NOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)活性。结果:PIO干预后,正常培养组和模拟IR培养组VSMCs含MTT溶解物的吸光值(A490)均低于各自对照组(P<0.01)。PIO显著增加VSMCs总NOS活性、iNOS活性以及NO含量(P<0.01)。PIO上述作用在模拟IR培养时更强,均可被NOS抑制剂LNAME部分阻断。结论:在正常或模拟IR培养时,PIO抑制VSMCs增殖的作用部分通过NO介导。 展开更多
关键词 一氧化氮 一氧化氮合酶 吡格列酮 血管平滑肌细胞 胰岛素抵抗
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慢性肾功能衰竭性勃起功能障碍大鼠阴茎海绵体有效成分的测定 被引量:5
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作者 吴建军 邵继春 +3 位作者 王久源 张蜀武 常德贵 黄秀深 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 2005年第12期925-929,共5页
目的:探讨慢性肾功能衰竭(CRF)性勃起功能障碍(ED)的发病机制。方法:应用SD雄性大鼠分两期行5/6肾脏切除术,建立CRF动物模型。将假手术组(NCRF组,n=30)、CRF模型大鼠(CRF组,n=45)分别随机均分为Ⅰ(2周)、Ⅱ(4周)、Ⅲ(6周)3组,并分别于2... 目的:探讨慢性肾功能衰竭(CRF)性勃起功能障碍(ED)的发病机制。方法:应用SD雄性大鼠分两期行5/6肾脏切除术,建立CRF动物模型。将假手术组(NCRF组,n=30)、CRF模型大鼠(CRF组,n=45)分别随机均分为Ⅰ(2周)、Ⅱ(4周)、Ⅲ(6周)3组,并分别于2、4、6周注射阿朴吗啡(APO,80μg/kg)后观察大鼠阴茎勃起情况,筛选CRF性ED模型大鼠;测定阴茎海绵体组织一氧化氮合酶(NOS)的活性,及其组织的M asson染色图像分析。结果:CRF性ED大鼠阴茎海绵体组织NOS活性及平滑肌面积显著降低(P<0.01或P<0.05),胶原纤维略有增加,且上述变化与CRF病程密切相关。海绵窦血管腔无明显变化。结论:CRF严重影响阴茎勃起功能,阴茎海绵体组织NOS活性降低及阴茎海绵体平滑肌面积的减少可能是其重要的发病机制。 展开更多
关键词 勃起功能障碍 慢性肾功能衰竭 阴茎海绵体平滑肌 一氧化氮合酶 大鼠
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西罗莫司联用阿托伐他汀对大鼠血管平滑肌细胞氧化应激损伤和一氧化氮合酶的影响 被引量:4
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作者 龚勋 吴赛珠 +3 位作者 傅国华 马懿 彭文杰 汤敏 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 北大核心 2014年第5期518-521,共4页
目的探讨西罗莫司和阿托伐他汀联合使用对大鼠血管平滑肌细胞氧化应激损伤和一氧化氮合酶(NOS)的影响。方法取大鼠血管平滑肌细胞进行实验,分为空白组、DMSO组、西罗莫司组(100nmol/L)、阿托伐他汀组(3μmol/L)和联合组(西罗莫司100nmo... 目的探讨西罗莫司和阿托伐他汀联合使用对大鼠血管平滑肌细胞氧化应激损伤和一氧化氮合酶(NOS)的影响。方法取大鼠血管平滑肌细胞进行实验,分为空白组、DMSO组、西罗莫司组(100nmol/L)、阿托伐他汀组(3μmol/L)和联合组(西罗莫司100nmol/L加阿托伐他汀3μmol/L)。实验各组细胞给予相应药物干预2h后,加入三丁基过氧化氢诱导氧化应激损伤,24h后检测各项指标。结果与空白组比较,DMSO组、西罗莫司组、阿托伐他汀组和联合组细胞增殖率明显下降(P<0.01)。与空白组和DMSO组比较,阿托伐他汀组和联合组超氧化物歧化酶水平明显上升和丙二醛水平明显下降(P<0.05,P<0.01)。与空白组、DMSO组、西罗莫司组比较,阿托伐他汀组和联合组诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA和蛋白表达明显下降(P<0.01);联合组iNOS mRNA和蛋白表达较阿托伐他汀组明显下降(P<0.05,P<0.01)。结论在氧化应激状态下,西罗莫司和阿托伐他汀均能抑制大鼠血管平滑肌细胞增殖和抗氧化损伤,维持NOS系统平衡,联合应用的效果优于单独应用。 展开更多
关键词 西罗莫司 平滑 血管 氧化性应激 一氧化氮合酶
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