长期游泳运动对2型糖尿病大鼠Musclin分泌和脂质代谢的影响

目的:研究2型糖尿病大鼠血清和骨骼肌musclin含量的变化,并初步探讨长期的游泳运动对2型糖尿病大鼠血清和骨骼肌musclin含量以及脂质代谢的影响及其关系。方法:雄性SD大鼠60只,随机抽取8只作为正常对照组(C组,n=8),喂以标准普通饲料。其余大鼠喂以高糖高脂饲料,6周后,禁食10 h,按30 mg/kg体重的剂量腹腔注射1%链尿佐菌素(STZ)溶液,并继续喂以高糖高脂饲料。7天后,有39只大鼠形成2型糖尿病。抽取19只DM大鼠随机分为糖尿病对照组(DM组,n=9)和糖尿病运动锻炼组(DME组,n=10)。C组和DM大鼠不进行游泳运动锻炼,DME组大鼠适应性游泳运动1周后再进行每周6次、每次60min、持续12周的无负重游泳运动。13周后,检测大鼠空腹血糖(FBG)、血清胰岛素(FINS)和血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)含量以及血清、骨骼肌musclin的含量。结果与C组相比,DM组大鼠血清Ins含量明显降低,FBG、TG、TC显著增加,血清和骨骼肌musclin含量显著升高;与DM组相比,DME组大鼠血清Ins含量显著升高,FBG和血TC水平显著降低,血清和骨骼肌musclin含量均显著降低。结论①2型糖尿病大鼠血清和骨骼肌musclin含量显著增加,可能与2型糖尿病发生和发展过程中糖脂代谢紊乱有关。②长期游泳运动可以降低2型糖尿病大鼠血清和骨骼肌musclin的含量,有效改善糖尿病机体的糖脂代谢紊乱。

猪Musclin基因的组织表达特征及其与生脂基因的相关性分析

根据人、大鼠、小鼠Musclin基因序列设计引物,从大白猪肌肉组织提取总mRNA,RT-PCR扩增猪Musclin cDNA;利用半定量(Semi Quantitative,SQ)RT-PCR检测猪Musclin mRNA在不同组织、以及不同生长阶段和不同品种猪脂肪与肌肉组织中的表达量,研究不同品种猪皮下脂肪组织Musclin基因与脂肪酸合成酶(FAS)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)、甘油三酯水解酶(TGH)基因mRNA表达量的相关性。结果表明:猪Musclin基因片段与其他物种的同源性达59%以上,该基因在内脏脂肪和皮下脂肪表达丰度最高,脾脏表达量最低(P<0.05);随月龄增长猪肌肉和皮下脂肪组织中Musclin mRNA表达量呈显著下降(P<0.05);瘦肉型猪肌肉和皮下组织Musclin mRNA表达显著高于脂肪型猪(P<0.05);皮下脂肪组织中该基因mRNA表达与FAS、PPARγ分别呈显著负相关和正相关(P<0.05),与TGH相关性不显著(P>0.05)。因此,猪Musclin基因除在肌肉中表达外,在脂肪等其他组织也能表达;该基因的表达与猪生长阶段、品种有关,且与生脂基因FAS、PPARγ密切相关。推测该基因可能在脂代谢中起到一定的作用。

猪Musclin基因编码蛋白的生物信息学分析

【目的】克隆猪Musclin基因,分析和预测其编码蛋白的结构与功能。【方法】从猪肌肉组织中提取总RNA,RT-PCR扩增获得Musclin基因,对其进行克隆和测序,并根据生物信息学分析方法,利用Tmpred、SignalP3.0、TargetP 1.1等分析软件,对猪Musclin蛋白的跨膜结构、信号肽、细胞定位、结构特征等进行分析和预测。【结果】猪Musclin蛋白主要集中在分泌途径上,存在于细胞外,其核苷酸序列与家兔的具有较高的相似性,氨基酸序列32～45位和55～63位存在2个可能的强跨膜螺旋区,该蛋白的空间结构以α螺旋、β转角和无规则卷曲为主;其1～26位氨基酸序列是一段信号肽,在26与27位氨基酸之间存在1个酶切位点;其羧基端含有较多的转角结构,同时该区域的抗原指数较高,亲水性指数和呈现在蛋白表面的可能性均较大。【结论】Musclin是一种含有信号肽序列的跨膜蛋白。

Musclin与胰岛素抵抗

Musclin又名Osteocrin,是骨骼肌和骨分泌的一种生物活性因子,其结构与钠尿肽家族存在同源区域。Musclin mRNA的表达受到胰岛素、肾上腺素、胰岛素样生长因子-1以及镉等调节。Musclin主要通过旁分泌或自分泌方式参与机体葡萄糖代谢与脂肪代谢。Musclin与胰岛素抵抗有关,并且参与2型糖尿病和代谢综合征的发病过程。

Vc对Cd中毒小鼠骨骼肌中Musclin基因及生脂基因表达的影响

为探讨维生素C(Vc)调控Cd中毒小鼠骨骼肌中Musclin基因及生脂基因的转录表达规律,用RT-PCR方法研究小鼠Musclin基因及生脂基因(FAS、PPARγ、TGH)表达水平的变化。结果表明,Cd对小鼠Musclin基因及生脂基因的表达具有显著抑制作用(P<0.05),Vc+Cd组与只加Cd组比较,小鼠Musclin基因及生脂基因的表达水平明显升高,Musclin与FASmRNA表达存在显著负相关(P<0.01),与PPARγ基因存在显著正相关(P<0.05),与TGH基因相关性不显著(P>0.05)。研究结果说明,Vc可提高Cd中毒小鼠骨骼肌中的Musclin基因及生脂基因的表达水平。

猪Musclin基因片段克隆与序列分析

【研究目的】克隆并分析猪musclin基因;【方法】肌肉组织提取总RNA,利用设计的引物进行RT-PCR,PCR产物与pMD19-T连接后转化E.coliDH5α,检测阳性克隆并测序;【结果】克隆的猪musclin基因片段与人、大鼠、小鼠同源性分别为86%、78%、75%,预测的氨基酸序列含有“KKKR”结构和与小鼠ANP、BNP、CNP蛋白的同源性区域;【结论】克隆了猪musclin基因片段并注册GenBank(Ac-cession.EF369511)。

游泳运动锻炼对Ⅱ型糖尿病大鼠血清和骨骼肌musclin含量的影响

目的研究Ⅱ型糖尿病大鼠血清和骨骼肌musclin含量的变化,并探讨运动训练对Ⅱ型糖尿病大鼠血清和骨骼肌musclin含量的影响。方法 SD大鼠随机分为正常对照组(C,n=8)、糖尿病对照组(DM,n=9)和糖尿病运动锻炼组(DME,n=10)。检测大鼠空腹血糖和血清、腓肠肌musclin含量。结果与C组相比,DM组大鼠血清胰岛素含量和胰岛素敏感性明显降低,空腹血糖水平显著增加;且血清和腓肠肌musclin含量显著升高;与DM组相比,DME组大鼠血清胰岛素和胰岛素敏感性显著升高,空腹血糖水平显著降低;且血清和腓肠肌musclin含量显著降低。结论 Musclin在Ⅱ型糖尿病过程中可能起着非常重要的作用;长期的有氧运动锻炼可能通过降低Ⅱ型糖尿病大鼠血清和腓肠肌musclin的含量,增加骨骼肌从血液中摄取葡萄糖的能力,从而降低血糖。

有氧运动对2型糖尿病大鼠血清Musclin含量的干预作用研究

目的:研究2型糖尿病大鼠血清musclin含量的变化,并初步探讨游泳运动锻炼对2型糖尿病大鼠血清musclin含量的影响。方法:随机抽取8只大鼠作为正常对照组(C组,n=8),喂以标准普通饲料。19只2型糖尿病大鼠随机分为糖尿病对照组(DM组,n=9)和糖尿病运动锻炼组(DME组,n=10)。13周后检测大鼠FINS、FBG水平和血清musclin含量。结果:与C组相比,DM组大鼠血清胰岛素含量明显降低,空腹血糖水平显著增加,DM组大鼠血清musclin含量显著高于C组大鼠;与DM组相比,DME组大鼠血清胰岛素水平显著升高,空腹血糖水平较DM组显著降低;DME组大鼠血清musclin含量要显著低于DM组大鼠。结论:①2型糖尿病大鼠血清musclin含量升高,提示其可能在2型糖尿病发病过程中起着重要作用。②长期的有氧运动锻炼降低了2型糖尿病大鼠血清musclin的含量,从而改善了糖尿病症状。

Musclin与运动的研究进展

本文在文献资料的基础上,对Musclin的发现、结构与分布、Musclin与糖代谢、Musclin与脂代谢的情况进行了阐述,对影响MusclinmRNA表达的因素、Musclin与胰岛素抵抗及胰岛素抵抗相关疾病进行了分析,对运动对Musclin影响的研究进行了总结,旨在为Musclin与运动研究者提供参考。

代谢综合征人群中的musclin与胰岛素抵抗的关系探讨

目的：探讨代谢综合征人群中musclin与胰岛素抵抗的关系；方法按照中华医学会糖尿病学分会代谢综合征的诊断标准，随机选取门诊病人300人，分为健康对照组合代谢综合征组，生化常规方法检测血糖、血脂，化学发光法检测血清胰岛素，采用ELISA法测量肌肉素的含量。结果：代谢综合征组与健康对照组相比，体质指数，空腹血糖，餐后2小时血糖，血压，血脂，血清胰岛素，胰岛素抵抗指数P＜0.05，具有统计学意义，健康对照组和代谢综合征组血清musclin蛋白含量相比P＜0.05，具有统计学意义。结论：代谢综合征人群中，胰岛素抵抗导致了musclin水平的上升，可能是通过胰岛素抵抗导致了胰岛素上调musclin的表达。

绵羊Musclin基因真核表达载体的构建及其对肌细胞糖代谢和胰岛素作用的影响

为了研究绵羊Musclin对糖代谢和胰岛素作用的影响,本试验运用生物信息学软件对其结构特征进行预测,并构建绵羊Musclin基因真核表达载体。分4组对绵羊胎儿成肌细胞进行处理:空载体组(pcDNA3.1)、Musclin过表达组(pcDNA3.1-Musclin)、空载体+胰岛素组(pcDNA3.1+Insulin)、Musclin过表达+胰岛素组(pcDNA3.1-Musclin+Insulin)。然后分别在分化48和72 h时收集细胞,检测Musclin对正常或添加胰岛素培养的分化状态绵羊肌细胞糖代谢的影响,并利用荧光定量PCR检测相关基因表达的变化。酶切鉴定和测序结果表明,成功构建了表达载体pcDNA3.1-Musclin。生物信息学分析表明,绵羊Musclin蛋白含有一个信号肽,并在28氨基酸位点处存在一个酶切位点。亚细胞定位在胞外,属于分泌蛋白。其二级和三级结构以α螺旋和无规则卷曲为主。细胞试验表明,绵羊Musclin基因过表达明显减少了正常或胰岛素处理的绵羊肌细胞糖原含量并增加了培养液中葡萄糖含量。诱导分化72 h时,过表达Musclin抑制了Musclin过表达组和Musclin过表达+胰岛素组绵羊肌细胞中IRS1、AKT1、AKT2、GLUT1、GLUT4基因mRNA表达,并促进了GSK3βmRNA表达;而诱导分化48 h时,只有GLUT4基因的表达受到抑制。综上所述,绵羊Musclin基因过表达可以影响肌细胞糖代谢并减弱胰岛素的作用,二者相互协调以维持糖代谢稳态。其作用机制涉及到上述相关基因的表达变化,且与绵羊成肌细胞的分化状态有关。

VC对镉染毒小鼠骨骼肌中Musclin基因表达的影响

为探讨VC调控镉中毒小鼠骨骼肌中Musclin基因转录表达规律,用RT-PCR方法研究小鼠Musclin基因表达水平的变化。结果表明,镉对小鼠Musclin基因的表达具有显著抑制作用(P<0.05),VC加镉组与加镉组比较,小鼠Musclin基因的表达水平明显升高。表明VC可提高镉中毒小鼠骨骼肌中的Musclin基因的表达水平。

牛Musclin基因片段克隆与序列分析

[目的]对牛Musclin基因片段进行克隆与序列分析。[方法]通过电子克隆技术克隆牛Musclin基因,并通过软件分析牛Musclin基因与小鼠、大鼠、人、猪和鸡的同源性。[结果]通过电子克隆技术成功克隆了牛Musclin基因;分析结果表明,牛Musclin基因与小鼠、大鼠、人、猪和鸡同源性分别为81.0%、80.8%、90.0%、89.1%和62.4%,预测的氨基酸序列含有"KKKR"结构和与小鼠ANP、BNP、CNP蛋白的同源性区域,并将克隆的牛Musclin基因片段注册GenBank(EF646361)。[结论]该试验为进一步研究Musclin在牛骨骼肌中的生物学功能提供了基础资料。

血清ALP、musclin、cathepsin S水平与冠心病疾病严重程度的关系

目的探讨血清碱性磷酸酶(ALP)、musclin、cathepsin S水平与冠状动脉粥样硬化性心脏病(CHD)严重程度的关系。方法选择84例CHD患者为CHD组,并选择同期冠状动脉造影的健康体检者110例为对照组。根据Gensini总积分将CHD患者分为轻度病变组、中度病变组和重度病变组。比较各组血清ALP、musclin、cathepsin S水平。结果CHD组血清ALP和cathepsin S水平高于对照组(P<0.05),musclin水平低于对照组(P<0.05);且随CHD严重程度增加,患者血清ALP、musclin和cathepsin S水平差异更为显著(P<0.05)。Spearman相关性分析显示,ALP和cathepsin S与CHD严重程度呈正相关,musclin与其呈负相关(P<0.05)。Logistic回归分析显示ALP、musclin和cathepsin S为预测高Gensini积分的独立预测因子。结论CHD患者血清ALP和cathepsin S水平与CHD严重程度呈正相关,musclin水平与CHD严重程度呈负相关,可作为CHD患者早期敏感指标。

阿托伐他汀钙对糖尿病大鼠骨骼肌musclin、myonectin mRNA表达的影响

目的观察糖尿病大鼠骨骼肌中musclin、myonectin mRNA的表达及阿托伐他汀钙对其表达的影响。方法选取8周龄SPF级雄性Wistar大鼠50只,随机分为5组:空白对照组、高糖高脂模型组、糖尿病模型组、高糖高脂治疗组及糖尿病治疗组,每组10只。空白对照组大鼠给予普通饲料喂养,高糖高脂模型组及治疗组大鼠采用高糖高脂饲料喂养,糖尿病模型组及治疗组大鼠采用高糖高脂饲料联合小剂量链脲菌素法行2型糖尿病大鼠造模,造模成功后高糖高脂治疗组和糖尿病治疗组大鼠予阿托伐他汀钙8.4 mg/kg灌胃,余3组使用同等剂量0.9%氯化钠注射液灌胃。6周后,观察光镜下各组大鼠骨骼肌形态学变化,并采用实时定量聚酶链式反应检测大鼠骨骼肌musclin、myonectin mRNA表达水平。结果高糖高脂模型组和糖尿病模型组大鼠骨骼肌musclin、myonectin mRNA表达水平均显著高于空白对照组大鼠(P<0.05);高糖高脂治疗组大鼠musclin、myonectin mRNA表达较高糖高脂模型组大鼠明显降低(P<0.05);糖尿病模型组与糖尿病治疗组musclin、myonectin mRNA表达比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论高糖高脂状态下大鼠骨骼肌中musclin、myonectin mRNA表达增强,使用阿托伐他汀钙干预后可明显抑制糖尿病前期大鼠musclin、myonectin mRNA表达,但对糖尿病大鼠无明显改善作用。

兔Musclin基因片段克隆与序列分析

依据大鼠的musclin基因序列(NM_207612)和牛电子克隆的osteocrin基因序列(XM_588390)设计的引物,成功克隆了兔Muslin基因。克隆的兔musclin基因包含一个完整的开放阅读框架,其全长为409bp,编码有132个氨基酸。克隆的Musclin基因与小鼠、大鼠、人、猪和鸡的同源性分别为78.2%、79%、87.9%、98.2%和46.7%,推测的氨基酸序列同源性分别为73.1%、74.2%、87.9%、96.2%和56.8%,氨基酸序列含有"KKKR"结构和与小鼠ANP,BNP,CNP蛋白的同源性区域。试验克隆的兔Musclin基因注册于Gen Bank(EF547185)。

日粮蛋氨酸水平对大骨鸡肌肉SLC12A5、Musclin mRNA表达影响的研究

试验旨在研究日粮蛋氨酸水平大骨鸡腿肌和胸肌SLC12A5、Musclin mRNA表达量的影响。选择240只16周龄公鸡,随机分为3组,每组10个重复,每个重复8只。H组、M组和L组日粮中蛋氨酸(Met)水平分别为0.42%、0.34%、0.25%,其中M组为对照组。试验期8 w。结果显示,H组各周龄公鸡血清Met含量均极显著低于M组(P<0.01);各周龄L组公鸡腿肌Musclin mRNA表达量均极显著高于H组(P<0.01);第16 w,H组、L组公鸡胸肌Musclin mRNA表达量极显著均低于M组(P<0.01),H组显著高于L组(P<0.05);第16 w,L组公鸡腿肌SLC12A5 mRNA表达量极显著高于H组(P<0.01),L组显著低于M组(P<0.05);第24 w,H组胸肌SLC12A5 mRNA表达量显著低于其他两组(P<0.05)。研究表明,日粮Met水平能够影响血清Met含量和胸肌和腿肌的蛋白质合成;但SLC12A5基因表达量与Met水平不呈剂量-效应关系。

长期高脂饲养大鼠骨骼肌musclin表达上调及其与胰岛素抵抗的相关性

研究高脂饮食状态下Wistar大鼠骨骼肌中musclin基因表达及其与胰岛素抵抗以及糖尿病、葡萄糖转运蛋白4（GLUT-4）等的关系，结果提示musciin的表达增加（1．39±0．36vs0．31±0．07，P〈0．01）可能与胰岛素抵抗有关，有可能是胰岛素抵抗、糖尿病的一个前期信号，其作用可能与GLUT-4（1．27±0．32vs1．84±0．24，P〈0．01）有一定的关系。

绵羊Musclin基因5’调控区元件的预测和分析

Musclin是由Nishizawa等(2004)采用信号序列捕获(signal sequence trap,SST)技术在小鼠首次发现的一种肌源性细胞因子,与肌肉的营养代谢有关。为了研究Musclin基因在骨骼肌的转录调控机制,我们克隆了绵羊Musclin基因的部分5’调控区序列,分析了不同物种之间的同源性。