理筋手法调控兔骨骼肌损伤修复中瘢痕形成的作用机制

背景:理筋手法能够促进骨骼肌修复,治疗骨骼肌损伤。但骨骼肌损伤在修复过程中的纤维化形成、瘢痕组织增生等与损伤修复质量密切相关。开展理筋手法对纤维化形成、瘢痕组织增生的调控作用研究,有利于阐述理筋手法提高骨骼肌损伤修复质量的相关机制。目的:探索理筋手法提高兔骨骼肌损伤后修复质量的作用机制,为临床治疗提供科学依据。方法:45只健康成年日本大耳白兔随机分为空白组、模型组、理筋组,每组15只。其中模型组和理筋组均进行腓肠肌打击造模;造模后理筋组于第3天开始进行理筋手法干预,1次/d,15 min/次。各组在造模后的第7,14,21天分别处死5只兔进行观察。苏木精-伊红染色法观察腓肠肌形态及炎性细胞量,Masson染色法观察腓肠肌胶原纤维量,ELISA法检测腓肠肌白细胞介素6和白细胞介素10的表达量,Western blot和RT-PCR检测配对盒基因7、成肌分化因子、肌细胞生成素、肌动蛋白α、转化生长因子β1、Ⅰ型胶原蛋白的蛋白及mRNA表达,免疫组织化学法检测Ⅰ型胶原蛋白的表达。结果与结论:①苏木精-伊红染色及Masson染色结果显示,与模型组比较,理筋组各观察点炎性细胞浸润减少,胶原纤维量减少(P<0.01),肌纤维逐渐愈合;②ELISA结果显示,与模型组比较,理筋组白细胞介素6表达持续降低(P<0.05),而白细胞介素10在造模后第7天时升高(P<0.05),随后呈下降趋势(P<0.05);③Western blot和RT-PCR结果显示,与模型组比较,理筋组造模后第14天配对盒基因7、成肌分化因子、肌细胞生成素的蛋白及mRNA表达量均显著升高(P<0.05),而第21天时却较之前下降(P<0.05);理筋组各观察点肌动蛋白α、转化生长因子β1、Ⅰ型胶原蛋白的蛋白及mRNA表达量相较于模型组均显著降低(P<0.05);④免疫组化结果显示,理筋组各观察点Ⅰ型胶原蛋白的表达量相较于模型组均显著降低(P<0.05);⑤结果表明,理筋手法能够通过抑制炎症、促进肌卫星细胞的增殖分化、减少纤维化的生成,从而提高兔骨骼肌损伤的修复质量。

“柔筋温通”手法干预家兔骨骼肌慢性损伤的作用机制

目的探讨“柔筋温通”手法干预家兔骨骼肌慢性损伤的作用机制。方法选用40只健康成年家兔,30只造模成功后分别设为实验组、对照组、模型组各10只,余下10只设为正常组。实验组采用“柔筋温通”手法干预,对照组采用地塞米松药物治疗,共治疗10次,模型组和正常组均正常喂养,治疗结束后取材检测,采用ELISA法检测TNF-α、IL-6的含量以及采用Western blot检测TGF-β1、CTGF的蛋白表达。结果实验组兔骨骼肌中TNF-α、IL-6含量显著降低;CTGF、TGF-β1蛋白表达明显降低。结论通过研究,“柔筋温通”手法通过降低骨骼肌损伤局部炎性因子(TNF-α、IL-6)的含量以及通过降低的TGF-β1、CTGF的蛋白表达,来抑制炎性粘连和炎症纤维组织增生,促进骨骼肌慢性损伤的修复。

推拿■法对兔骨骼肌钝挫伤修复及Wnt/β-catenin信号通路的影响

目的探讨推拿■法对家兔骨骼肌钝挫伤修复及Wnt/β-catenin信号通路的影响。方法36只健康成年新西兰大耳白兔,随机分为对照组、模型组、■法组(每组12只),再根据不同取材时间点分为1、3、6 d 3个亚组(每组4只)。对照组实验全程正常饲养不予处理。模型组与■法组采用自制改良重力锤打击装置制备骨骼肌钝挫伤模型,于造模成功后7 d开始治疗,滚动频率140次/min,3 min/次,2次/d,共治疗3 d。分别于干预结束后1、3、6 d进行取材。通过HE和Masson染色观察家兔股四头肌病理改变;ELISA检测家兔血清中白细胞介素-6(interleukin 6,IL-6)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)表达;Western blot检测家兔股四头肌Wnt3α、β-catenin、糖原合成酶激酶-3β(glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β)、磷酸化糖原合成酶激酶-3β(phosphorylated glycogen synthase kinase-3β,p-GSK-3β)、转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、Ⅰ型胶原蛋白(CollagenⅠ,COL-Ⅰ)表达。结果(1)HE和Masson染色结果显示:对照组可见肌纤维排列规整有序,结构完整;模型组肌纤维大小、粗细、形态不一,排列紊乱,间隙增宽,炎细胞浸润、结缔组织增生以及胶原纤维沉积明显;■法组肌纤维无明显变性坏死,结构相对完整,可见少量炎细胞浸润,结缔组织增生与胶原纤维沉积皆明显减少,修复优于模型组。(2)ELISA与Western blot检测结果:与对照组相比,模型组家兔血清IL-6、TNF-α以及股四头肌中Wnt3a、β-catenin、p-GSK-3β、TGF-β1、COL-Ⅰ表达量在1、3、6 d均显著升高(P<0.01),GSK-3β表达量显著降低(P<0.01);与模型组比较,■法组于1、3、6 d家兔血清IL-6、TNF-α与股四头肌中Wnt3a、β-catenin、p-GSK-3β、TGF-β1、COL-Ⅰ表达量皆明显降低(P<0.01),GSK-3β表达量明显升高(P<0.05,P<0.01)。结论推拿■法能有效减轻骨骼肌损伤后体内炎症反应,减少胶原蛋白沉积,抑制骨骼肌纤维化,进而减轻骨骼肌损伤,促进骨骼肌损伤修复,其机制可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路活性有关。

振腹手法对抑郁症大鼠模型的干预机制研究

目的:探讨振腹手法对抑郁症大鼠模型骨骼肌组织炎症损伤的干预作用。方法:将32只大鼠随机抽取8只作为正常组,其余大鼠进行3周的慢性不可预见性温和应激方法(CUMS)造模并随机分为模型组、振腹组和氟西汀组,干预4周,在第7周末完成行为学检测,取大鼠骨骼肌组织样本分别检测白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-4、IL-6、IL-8、IL-10、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量,沉默信息调节因子1(SIRT1)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活物-1α(PCG-1α)、核因子κB(NF-κB)的蛋白及信使核糖核酸(mRNA)含量。结果:第7周末,与模型组大鼠比较,振腹组大鼠的糖水偏好率、绝望时间、总移动距离、穿格次数均显著改善(P<0.01)。第7周末,与模型组大鼠比较,振腹组大鼠的IL-4、IL-10显著升高(P<0.01),IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α含量显著降低(P<0.01);核因子κB蛋白含量下降(P<0.05),mRNA含量显著下降(P<0.01);SIRT1蛋白含量、mRNA含量显著升高(P<0.01);PGC-1α蛋白含量升高(P<0.05),mRNA含量显著升高(P<0.01)。结论:振腹推拿手法可以改善抑郁症模型大鼠的抑郁症状,其作用机制可能是抑制骨骼肌组织核因子κB蛋白的表达,促进SIRT1、PGC-1α蛋白的表达,从而增加抑炎因子的含量,减少炎症介质的含量。

推拿㨰法对兔骨骼肌急性钝挫伤组织TNF-α及SphK1、S1PR3表达的影响

目的观察推拿㨰法干预对骨骼肌急性钝挫伤兔肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及鞘氨醇激酶-1(SphK1)、1-磷酸鞘氨醇受体3(S1PR3)表达的影响,探讨㨰法治疗骨骼肌钝挫伤的作用机制。方法将15只新西兰兔随机分为空白组、模型组和㨰法组,每组5只。模型组和㨰法组采用自制重力锤打击装置制备兔股四头肌急性钝挫伤模型。造模成功后第7日开始干预,㨰法组用自制㨰法按摩器在股四头肌损伤处进行㨰法按摩,3 min/次,每日上下午各1次,连续3 d,空白组和模型组捆绑相同时间。HE、Masson染色观察股四头肌损伤部位病理变化,ELISA检测股四头肌组织TNF-α含量,Western blot检测股四头肌组织SphK1、S1PR3蛋白表达。结果模型组肌纤维变形断裂,肌细胞坏死严重,肌膜模糊、不完整,且有肌纤维溶解后形成的空泡结构,炎性细胞浸润较明显,可见少量核居中的新生肌纤维,有大量胶原纤维;与空白组比较,模型组股四头肌组织TNF-α含量明显增加(P<0.01),SphK1、S1PR3蛋白表达明显升高(P<0.01)。与模型组比较,㨰法组炎性细胞浸润明显减轻,可见大量细胞核居中且大小不等的新生肌纤维及多核肌管,胶原纤维明显减少;股四头肌组织TNF-α含量明显减少(P<0.05),SphK1、S1PR3蛋白表达明显降低(P<0.05)。结论㨰法干预能通过下调骨骼肌急性钝挫伤兔受损组织TNF-α含量及SphK1、S1PR3表达,降低组织炎症反应,减缓纤维化,进而促进骨骼肌损伤修复。

推拿㨰法介导机械敏感性离子通道Piezo1对骨骼肌损伤模型大鼠细胞凋亡的影响

目的观察推拿㨰法对骨骼肌损伤模型大鼠的机械敏感性离子通道Piezo1及细胞凋亡的影响,探讨推拿㨰法治疗骨骼肌损伤的作用机制。方法32只SD大鼠随机分成正常组、模型组、㨰法组、㨰法+抑制剂组,每组8只。采用肌内注射200μL虎蛇毒素(notexin,NTX)(10μg/mL)制备大鼠腓肠肌损伤模型。造模24 h后,㨰法组使用实验动物㨰法器模拟㨰法治疗,滚动频率为140次/min,每天2次,每次3 min,连续治疗3 d;㨰法+抑制剂组在实施㨰法治疗前,给予腹腔注射Piezo1抑制剂GsMTx4(270μg/kg),每天1次,连续注射3 d;正常组和模型组腹腔注射等体积生理盐水。采用平衡木测试进行行为学评估,HE染色观察腓肠肌组织显微结构变化,TUNEL染色计算腓肠肌组织细胞凋亡率,Western blot法检测大鼠腓肠肌组织Piezo1、B淋巴细胞瘤-2(B-lymphoma-2,Bcl-2)、B淋巴细胞瘤2相关X蛋白质(B-lymphoma-2 related X protein,Bax)、胱天蛋白酶-3(cysteine aspartic acid specific protease-3,Caspase-3)表达。结果与正常组比较,模型组和㨰法+抑制剂组平衡木行走时间延长(P<0.01),滑爪次数增加(P<0.01),腓肠肌细胞凋亡率升高(P<0.01),腓肠肌组织Piezo1、Bcl-2蛋白表达降低(P<0.01),Bax、Caspase-3蛋白表达升高(P<0.05),肌细胞破裂、坏死、大小不一,排列稀疏、无规律,周围有大量中性粒细胞和淋巴细胞浸润。与模型组比较,㨰法组平衡木行走时间缩短(P<0.01),滑爪次数减少(P<0.01),腓肠肌细胞凋亡率降低(P<0.01),腓肠肌组织Piezo1、Bcl-2蛋白表达升高(P<0.01),Bax、Caspase-3蛋白表达降低(P<0.05),肌细胞病理情况好转,有少量细胞破裂、萎缩、坏死,细胞间隔缩小,轻度局灶性炎性细胞浸润。与㨰法组比较,㨰法+抑制剂组平衡木行走时间延长(P<0.01),滑爪次数增多(P<0.01),腓肠肌细胞凋亡率增高(P<0.01),腓肠肌组织Piezo1蛋白表达降低(P<0.05),Caspase-3蛋白表达升高(P<0.01),见较多肌细胞萎缩、坏死、大小不一,排列间隔较大,周围仍有一定数量中性粒细胞和淋巴细胞浸润。结论推拿㨰法可促进骨骼肌运动功能恢复,缓解骨骼肌损伤,其作用机制可能与激活Piezo1,抑制细胞凋亡有关。

手法对兔颈椎间盘退变模型骨骼肌超微结构的影响

目的:观察手法干预对实验性兔颈椎间盘退变模型骨骼肌超微结构的影响。方法:建立兔颈椎间盘退变模型,2 5只成年新西兰大白兔随机分为正常对照组、模型组、手法预防组、手法治疗组,应用透射电镜观察手法干预对兔颈后部骨骼肌超微结构的影响。结果:模型组兔颈后部骨骼肌表现出肌原纤维萎缩,粗细不均,肌原纤维间隙增宽,明、暗带消失,肌节不清晰,大量线粒体肿胀等病变。手法干预能不同程度地阻止骨骼肌的上述病变,并且手法早期干预的效果优于晚期干预。结论:通过阻止骨骼肌损害恢复颈椎动力平衡可能是手法防治椎间盘退变的主要途径之一。

推拿法对大鼠骨骼肌细胞SOD MDA CK的影响

目的:探索推拿法舒筋效应的细胞学机制。方法:采用细胞培养技术,培养大鼠四肢骨骼肌细胞,建立骨骼肌细胞损伤模型,将正常细胞和损伤细胞分别分为对照组、推拿组、推拿+维拉帕米组及损伤细胞学员推拿组,分别对各组细胞内SOD活力、MDA含量、CK活力进行检测。结果:损伤大鼠骨骼肌细胞在推拿法作用下细胞内SOD活力显著提高、MDA含量显著减少,细胞培养上清中CK活力显著下降。但加入钙离子拮抗剂维拉帕米以后各项指标的变化均受到明显抑制。结论:推拿法舒筋效应是通过钙离子的转运功能,提高了损伤骨骼肌细胞胞浆内自由基SOD活力,降低了MDA含量,减少了CK漏出,最终改善了肌张力,达到舒筋效应。

超声引导臂丛麻醉下手法松解加内热式骨骼肌附着点松解术用于冻结肩的疗效分析

目的探讨超声引导臂丛麻醉下手法松解加内热式骨骼肌附着点松解术用于冻结肩的临床疗效。方法选取2019年1月至2020年6月南京大学医学院附属鼓楼医院疼痛医学科诊断为冻结肩的62例患者为研究对象。按随机数字表法分为A、B组,A组(30例)在超声引导的臂丛下接受手法松解,辅以口服非甾体类药物,并嘱患者行肩关节锻炼;B组(32例)在A组基础上加行内热式经皮骨骼肌附着点松解术。比较两组治疗前和治疗后7、30、90 d的视觉模拟评分法(VAS)评分及Constant-Murley肩关节功能评分;比较两组临床疗效,记录治疗过程中不良反应的发生情况。结果治疗后,两组各时间点VAS评分与治疗前比较,差异均有统计学意义(P<0.05);B组各时间点VAS评分低于A组,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组各时间点Constant-Murley肩关节功能评分与治疗前比较,差异均有统计学意义(P<0.05);B组各时间点Constant-Murley肩关节功能评分高于A组,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗后7、30、90 d,两组愈显率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。两组均未见神经损伤,局麻药中毒及肩周肌肉、肌腱损伤等并发症。结论超声引导臂丛麻醉下手法松解加内热式骨骼肌附着点治疗冻结肩的效果可靠,具有安全性高、见效快、效果持久、不良反应少等优点。

外旋牵引指推法治疗老年人肩关节前脱位

目的:探讨一种治疗老年人肩关节前脱位的复位方法。方法:自2011年10月至2012年6月,采用外旋牵引指推法治疗老年人肩关节前脱位27例,男7例,女20例;年龄65~86岁,平均77岁;病程1 h^1 d。患者呈方肩畸形,Dugus征阳性,X线片示肩关节前脱位。术后采用Dugus位固定,3周后去除外固定行患肩功能锻炼。按肩关节损伤的功能评定标准进行疗效评定。结果:患者均1次复位成功,25例获随访,时间为术后3个月,术后未出现再次脱位。按肩关节损伤的功能评定标准进行评定,优22例,良2例,中1例。结论:外旋牵引指推法治疗老年人肩关节前脱位具有简便、易行、痛苦小、可避免医源性损伤等优点,适合推广。

荣肌揉筋手法治疗成人肱骨髁间骨折术后肘关节僵硬

目的:观察荣肌揉筋手法治疗成人肱骨髁间骨折术后肘关节僵硬的临床疗效。方法:将84例成人肱骨髁间骨折患者随机分为2组,每组42例,分别采用荣肌揉筋手法和传统手法治疗。每日治疗1次,每次20 min,10 d为1个疗程,疗程间休息2 d,连续治疗6个疗程。分别于治疗前和治疗6个疗程后记录并比较2组患者肘关节屈伸活动度和美国特种外科医院(hospital for special surgery,HSS)肘关节功能评分。结果:部分患者未能坚持完成全部疗程而脱落,其中荣肌揉筋手法组8例、传统手法组10例。治疗前2组患者肘关节屈曲活动度、HSS肘关节功能评分比较,组间差异均无统计学意义[48.76°±9.84°,53.76°±7.81°,t=0.391,P=0.697;(43.84±11.62)分,(44.73±12.15)分,t=0.437,P=0.752]。治疗6个疗程后,荣肌揉筋手法组肘关节屈曲活动度与传统手法组比较,差异无统计学意义(123.57°±9.24°,113.27°±7.14°,t=1.357,P=0.235);HSS肘关节功能评分高于传统手法组[(93.28±8.74)分,(73.82±8.18)分,t=3.412,P=0.037];2组肘关节屈曲活动度、HSS肘关节功能评分均高于治疗前(t=0.542,P=0.024;t=0.614,P=0.042;t=0.561,P=0.025;t=0.576,P=0.031)。结论:荣肌揉筋手法和传统手法均能增加肘关节活动范围,改善肘关节功能;但是在改善肘关节功能方面,荣肌揉筋手法的疗效优于传统手法。

手法对家兔不同急性损伤骨骼肌卫星细胞影响观察

目的:观察手法对急性损伤骨骼肌卫星细胞增殖的影响,分析机械损伤和失神经因素在肌卫星细胞增殖中的作用和手法促进骨骼肌增殖的机制与途径。方法:取6月龄新西兰家兔258只建立家兔单纯钝挫伤、单纯失神经、钝挫伤+失神经动物模型,于造模后第2天行手法治疗,于造模后第1、2、3周和第1、2、4、6个月各取1小组家兔观察肌卫星细胞数目变化情况,按照日期对肌卫星细胞的增殖情况作一连续动态观察。结果:失神经后骨骼肌卫星细胞数目比无神经损伤组增加明显,在第3周达到峰值,而后迅速下降,4个月后低于正常水平。结论:神经因素在骨骼肌卫星细胞的激活与增殖中有重要作用,手法可以加快失神经早期骨骼肌卫星细胞激活与增殖速度,可能加速了肌卫星细胞向成肌纤维的肌组织转化。

一种安全有效的动物骨骼标本制作方法

文中对以往的骨骼标本制作方法进行了改进。制作过程除去了二甲苯或汽油的使用,更加安全,适合学生利用课余时间独立完成动物骨骼标本的制作。其作为兴趣实验开出,既锻炼了学生的动手能力,又能让学生在实践中熟悉实验动物的骨骼系统,帮助他们更好地理解理论知识,加强理论与实践的结合。

推拿手法对家兔骨骼肌失神经支配后雪旺氏细胞S-100蛋白表达的影响

目的通过观察推拿家兔骨骼肌失神经支配后肌湿重、雪旺氏细胞S-100蛋白表达水平,探讨推拿手法对受损神经及失神经支配骨骼肌的影响。方法新西兰家兔120只,分为正常对照组、模型组、神经生长因子(NGF)治疗组、手法治疗组,每组30只,分别于手法干预2周、3周、1个月、2个月、4个月后,每组各取6只家兔,称量腓肠肌肌湿重,计算术侧与健侧的肌湿重比值;测定雪旺氏细胞S-100蛋白表达水平。结果(1)腓肠肌肌湿重比:与模型组比较,手法治疗组各时间点均增加[2周:(0.72±0.05)%比(0.53±0.01)%,3周:(0.55±0.04)%比(0.41±0.03)%,1个月:(0.55±0.99)%比(0.40±0.03)%,2个月:(0.49±0.03)%比(0.38±0.05)%,4个月:(0.50±0.03)%比(0.38±0.05)%,P均<0.05]。手法治疗组4个月时则显著高于NGF治疗组[(0.50±0.03)%比(0.42±0.02)%,P<0.05]。(2)雪旺氏细胞S-100蛋白表达:手法治疗组在各时期均高于模型组[2周:(27.00±6.29)比(10.33±1.51),3周:(33.17±5.27)比(20.83±3.87),1个月(51.00±4.56)比(21.17±4.62),2个月:(75.83±9.66)比(30.67±3.27),4个月:(116.67±3.10)比(53.17±7.52),P均<0.05]。手法治疗组在1个月、2个月均高于NGF治疗组[1个月:(51.00±4.56)比(32.83±4.12),2个月:(75.83±9.66)比(47.00±5.06),P均<0.05]。结论推拿手法可以延缓周围神经损伤后骨骼肌萎缩、变性,促进损伤神经的修复。

推拿按法对慢性激痛点模型大鼠骨骼肌超微结构的影响

目的观察推拿按法对慢性激痛点模型大鼠骨骼肌超微结构的影响,探讨推拿按法对慢性激痛点的治疗作用。方法将健康雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、按法组、利多卡因组,每组6只。采用钝性打击结合离心运动方式建立慢性激痛点大鼠模型。按法组大鼠予按法刺激局部激痛点,隔天治疗1次,每次7.5 min,共治疗7次;利多卡因组大鼠予0.5 mL的1%利多卡因注射液治疗,6 d 1次,共治疗3次。2周干预结束后,采用HE染色观察各组大鼠骨骼肌显微结构变化;采用透射电镜观察各组大鼠骨骼肌组织超微结构变化。结果(1)光镜下,模型组可见异常梭形形态肌纤维,表现为中间膨大,两端变窄,伴大量炎症细胞浸润和核内移现象;与模型组比较,按法组和利多卡因组均可见肌纤维粗细均匀、排列较整齐,炎症细胞减少。(2)电镜下,模型组肌原纤维排列紊乱,大量肌纤维断裂、破损,线粒体数量减少,结构异常,出现肿胀变圆、嵴结构减少或呈空泡状;按法组和利多卡因组表现接近,与模型组比较,肌原纤维排列趋于整齐,线粒体数量增多,结构恢复正常,呈细长杆状和卵圆形,或出现融合形态。各组肌节长度测量结果显示,模型组与空白组比较,肌节长度明显缩短,差异有显著统计学意义(P<0.01);模型组与按法组、利多卡因组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论慢性激痛点病理特征为骨骼肌肌节挛缩、线粒体结构和数量受损。按法治疗能够舒张挛缩的肌节、促进线粒体的损伤修复,起到对慢性激痛点的去活化作用。

小鱼际■法对骨骼肌钝性损伤家兔生长分化因子8与F-肌动蛋白的影响

目的研究小鱼际■法对家兔钝性损伤骨骼肌内生长分化因子8 (growth differentiation factor,GDF-8)、F-肌动蛋白(F-actin)、转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)与白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)表达的影响,探讨小鱼际■法治疗骨骼肌损伤的生理过程。方法选取18只3月龄新西兰大耳白兔,雌雄各半,随机分为空白组、模型组、治疗组,每组各6只。空白组除正常饲养外不进行任何处理;模型组通过自制重锤击打右后肢股四头肌构建骨骼肌钝伤模型,其后正常饲养;治疗组与模型组进行相同的造模处理,并在造模成功后第5天开始对损伤处进行小鱼际■法治疗,每天2次,每次5分钟,持续治疗3天。饲养第8天取材,取受损处肌肉组织(空白组取相同位置),使用苏木精—伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色技术观察肌肉组织形态,使用Western Blot法检测所取组织中GDF-8与F-肌动蛋白的表达情况,使用ELISA法检测组织中炎症因子TGF-β1和IL-6的表达情况。结果 HE染色结果显示,与空白组相比,模型组有严重的肌肉纤维损伤,表明骨骼肌损伤模型造模成功;与模型组相比,治疗组的肌肉肌纤维恢复状态更好,肌肉受损程度更低,炎性细胞与不规则的结缔组织更少。Western Blot法检测结果表明,与空白组相比,模型组受损肌肉中GDF-8与F-肌动蛋白指标显著升高;与模型组相比,治疗组受损肌肉中GDF-8与F-肌动蛋白指标明显降低。ELISA法检测结果表明,模型组TGF-β1指标高于空白组,治疗组TGF-β1相比于模型组又有明显上升;模型组、治疗组IL-6含量均高于空白组,治疗组IL-6含量相比于模型组有明显下降。所有组间指标差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论使用小鱼际■法治疗骨骼肌钝伤家兔能有效加速骨骼肌的恢复,并减缓受伤骨骼肌恢复过程中的纤维化程度与炎症反应,提升恢复后的肌肉运动能力。

经筋手法干预膝骨关节炎模型兔骨骼肌收缩力学的改变

背景:团队前期研究发现,足阳明经筋及足太阳经筋在膝骨关节炎的发病中起重要的作用,二者循行对应的是腘绳肌及股四头肌。在经筋辨证指导下以手法治疗膝骨关节炎取得较好疗效,但其作用机制尚不明确。目的:观察经筋手法对兔膝骨关节炎骨骼肌收缩力学改变的影响。方法:12只新西兰兔随机分为经筋手法组、常规手法组和对照组,每组4只,均以Videman右后膝伸直位固定制动法构建右膝关节炎模型。经筋手法组及常规手法组分别在造模后第2天接受经筋手法及常规手法治疗,3次/周,治疗2周;对照组造模成功后正常饲养。治疗结束后1周对各组兔大腿股四头肌及腘绳肌进行收缩力学实验测试。实验经广州中医药大学实验动物伦理委员会批准(批准号:20190221018)结果与结论:①在治疗2周后2个手法组股四头肌及腘绳肌的单收缩幅度、强直收缩幅度、弹性模量优于对照组(P<0.05)。经筋手法组的单收缩幅度、强直收缩幅度优于常规手法组(P<0.05);②结果说明,经筋手法可以有效改善兔膝关节炎模型骨骼肌的收缩力学指标,从而改善临床症状,延缓疾病的进展。

推拿手法对家兔骨骼肌失神经支配后成肌调节因子Myf-5、Myogenin表达的影响

目的观察推拿手法对家兔失神经支配骨骼肌干预后肌湿重、成肌调节因子中生肌因子5(Myogenic factor 5,Myf-5)、肌细胞生成素(Myogenin)表达的影响。方法普通级新西兰雄性家兔随机分为正常对照组、模型对照组、神经生长因子(nerve growth factor,NGF)治疗组和手法治疗组,每组30只。每组再随机分为2周、3周、1个月、2个月和4个月五个亚组,每组6只。模型对照组、NGF治疗组及手法治疗组家兔建立腓肠肌失神经支配模型,NGF治疗组给予肌注注射用鼠神经生长因子,手法干预组进行推拿干预,模型对照组及正常对照组不进行其他操作。分别干预后处死取材,称量腓肠肌肌湿重,计算术侧与健侧的腓肠肌肌湿重比值;检测腓肠肌组织Myf-5 mRNA、Myogenin mRNA表达水平。结果(1)腓肠肌肌湿重比:NGF治疗组在2周(0.79±0.03)%、3周(0.70±0.06)%、1个月(0.58±0.04)%、2个月(0.44±0.05)%,手法治疗组在2周(0.72±0.05)%、3周(0.55±0.04)%、1个月(0.55±0.09)%、2个月(0.49±0.03)%、4个月(0.50±0.03)%高于模型对照组同期[2周(0.53±0.01)%、3周(0.41±0.03)%、1个月(0.40±0.03)%、2个月(0.38±0.05)%、4个月(0.38±0.05)%,P<0.05]。手法治疗组在2周(0.72±0.05)%、3周(0.55±0.04)%低于NGF治疗组[2周(0.79±0.03)%、3周(0.70±0.06)%],4个月(0.50±0.03)%时则高于NGF治疗组(0.42±0.02)%(P<0.05)。(2)腓肠肌Myf-5 mRNA表达:NGF治疗组在2周(18.50±1.79)、3周(12.52±0.58)、1个月(5.30±1.76)、2个月(2.82±0.23),手法治疗组在2周(20.48±2.20)低于模型对照组同期[2周(40.91±10.31)、3周(25.25±1.27)、1个月(13.91±1.40)、2个月(8.83±0.86),P<0.05],手法治疗组在1个月(16.50±1.17)、2个月(12.20±0.84)、4个月(5.32±0.60)高于模型对照组[1个月(13.91±1.40)、2个月(8.83±0.86)、4个月(3.82±0.54),P<0.05]。手法治疗组在3周(37.21±9.10)、1个月(16.50±1.17)、2个月(12.20±0.84)、4个月(5.32±0.60)时高于NGF治疗组[3周(12.52±0.58)、1个月(5.30±1.76)、2个月(2.82±0.23)、4个月(3.88±0.57),P<0.05]。(3)腓肠肌Myogenin mRNA表达:NGF治疗组在2周(94.31±23.87)、3周(165.95±29.58)、1个月(156.59±64.76)、4个月(4.05±0.51),手法治疗组在4个月(5.74±1.35)低于模型对照组同期[2周(185.92±48.71)、3周(359.21±116.88)、1个月(597.50±146.66)、4个月(63.13±12.24),P<0.05],手法治疗组在2个月(1026.75±132.63)高于模型对照组(168.84±31.85),P<0.05。手法治疗组在2周(209.80±91.25)、3周(482.37±97.95)、1个月(667.73±97.95)、2个月(1026.75±132.63)均高于NGF治疗组[2周(94.31±23.87)、3周(165.95±29.58)、1个月(156.59±64.76)、2个月(140.63±40.18),P<0.05]。结论推拿手法可能通过改善成肌调节因子Myf-5、Myogenin表达来延缓失神经支配后骨骼肌的萎缩,远期疗效较NGF良好。

电针、推拿和红外线理疗治疗周围神经损伤的比较实验研究──Ⅰ．对神经损伤肌肉影响的组织形态学和组织化学研究

采用手术方法造成周围神经损伤的动物模型，术后分成电针、推拿和红外线理疗三种方法对神经损伤动物进行治疗。分别于术后１、３、５月对各组动物作比目鱼肌、胫后肌和跖肌肉眼与湿重，比目鱼肌最大肌肉横切面积与酶组化切片，肌肉常规组织学切片的观察。结果显示周围神经损伤后电针和推拿治疗能有效地改善失神经肌肉的结构、代谢和功能失调状态，其中，对肌肉萎缩恢复上电针优于推拿治疗，对肌肉酶代谢恢复上，推拿优于电针治疗。红外线理疗对失神经肌肉有一定影响。

民族理筋手法对大鼠运动性骨骼肌损伤血清标志物影响的研究

目的:通过对大鼠骨骼肌损伤血清标志物的研究,探索回族理筋手法对大鼠运动性骨骼肌损伤的治疗作用及其机制。方法:选用SPF级健康雄性SD大鼠63只,随机分为模型对照组9只、空白组18只、自然恢复组18只、治疗组18只。除空白组外,其余各组均在跑台上进行一次性持续下坡跑运动,造模4周结束后,治疗组给予回族理筋手法治疗。治疗结束后分别对各组大鼠股四头肌处应用红外线热成像仪进行损伤局部温度测定,同时对损伤标志物血清肌酸激酶同工酶(Creatine kinase isoenzyme,CK-MM)、乳酸脱氢酶(Lactate dehydrogenase,LDH)及肌红蛋白(Myoglobin,Mb)进行检测。结果:造模4周结束后,与空白组比较,模型对照组局部温度、血清CK-MM、LDH、Mb指标均增高(P<0.01);治疗1周组血清CK-MM、LDH水平较自然恢复1周组下降明显(P<0.05),治疗2周后各项指标均恢复至正常水平。结论:回族理筋手法可能通过对血清标志物的调节,从而达到一定的治疗效果。