25例肝癌中p16基因状态的研究

目的：研究原发性肝细胞性肝癌中ｐ１６基因的状态。方法：采用多重ＰＣＲ分析法、ＳＳＣＰ分析法及以ＰＣＲ为基础的甲基化分析法分别对四川地区人群２５例原发性肝细胞性肝癌标本及其相应的癌旁组织中ｐ１６基因的缺失、突变及甲基化情况进行了检测。结果：２５例肿瘤标本中，发现３例ｐ１６基因缺失，其中２例纯合子缺失，１例半合子缺失，未发现１例突变，在未发现基因缺失的２２例肿瘤标本中发现６例有ｐ１６基因高甲基化存在。全部相应的癌旁组织中均未发现有ｐ１６基因缺失、突变或甲基化存在。结论：ｐ１６基因的异常改变在原发性肝癌的发生与发展中可能起重要作用，其改变以甲基化为主。

新疆维吾尔族与汉族非小细胞肺癌EGFR突变的差异

目的:探讨新疆地区汉族及维吾尔族非小细胞肺癌(NSCLC)患者EGFR突变发生率及差异。方法:采用ARMS法对54例汉族及50例维吾尔族非小细胞肺癌组织进行EGFR突变检测,并统计两组中EGFR突变民族差异性及相关因素差异。结果:维吾尔族非小细胞肺癌组中EGFR突变率为22.0%,汉族非小细胞肺癌组中EGFR突变率为40.7%,差异有统计学意义(P<0.05)。在EGFR突变中,均以19外显子缺失、21外显子L858R突变为主,且两者在两个民族所占比率比较无统计学差异。其他相关因素比较,如病理类型、吸烟情况与性别,两组均以腺癌、不吸烟、男性患者为主,无统计学差异(P>0.05)。结论:EGFR突变率在两个民族中存在差异,其余外显子突变情况及相关因素均无差异。

HBsAg和HBsAb双阳性检测结果的初步分析

目的对临床检测中少见的HBsAg和HBsAb双阳性结果进行分析,寻找可能的产生原因。方法对3家医院初筛HBsAg和HBsAb双阳性的81份血标本进行同种和不同种试剂盒复检,并检测HBsAg145位氨基酸变异(G145R变异)、HBV DNA基因型和血清型分析。结果81份双阳性标本经复检有30例(37%)仍然为双阳性;对30例复检双阳性标本应用不同试剂盒再次检测,HBsAg/HBsAb仍为双阳性者18例(22.2%);18例双阳性标本G145R检测全部为阴性;其中8例HBV DNA阳性血清的基因型分布为B型2例和C型6例,血清型分布为adw 2例、adr 5例和ayr 1例,与9份对照血清的检测结果比无显著性差异。结论HBsAg和HBsAb双阳性检测结果大多数与操作或试剂的质量有关,少数可能为S基因变异或不同血清型的再次感染等有关。

甲醛诱导球形红假单胞菌絮凝性能

光合细菌球形红假单胞菌经甲醛（ＦＡ）诱变获得高絮凝菌株的最佳反应组合条件是１５ｍＭ的ＦＡ、３５℃的反应温度，５ｍｉｎ反应时间和ｐＨ为７的反应液。经初、复筛后获得高絮凝性能理想菌株Ｐ９４７９，其１００ｍｉｎ自然絮凝沉降效率是出发菌株的２．３４倍。聚合硫酸铁絮凝Ｐ９４７９与出发菌株Ｐ９１００的最佳浓度分别为０．７７‰和２．４‰根据测定的Ｅ～ｔ曲线，在絮凝３０ｍｉｎ的同等条件下，Ｐ９４７９在人工废水中菌液絮凝效率达９０％，比出发菌株高出１７％，而聚合硫酸铁的用量比出发菌株低６８％。在ＣＯＤｃｒ为８７２０ｍｇ／Ｌ味精度水中絮凝Ｐ９４７９的最佳聚铁浓度为２‰，絮凝３０ｍｉｎ的效率达８０％，而出发菌株Ｐ９１００的聚合硫酸铁最佳浓度为４‰，效率仅为５０％。在同等絮凝效果的前提下Ｐ９４７９比Ｐ９１００节约聚合梳酸铁６９％。

人脑胶质瘤IDH1突变状态与MGMT启动子甲基化、P53和TERT突变相关性

目的探讨脑胶质瘤异柠檬脱氢酶1(IDH1)突变与O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)启动子甲基化状态、P53和端粒酶逆转录酶(TERT)突变之间的相关性。方法收集2016年6月至2017年9月手术切除并经病理诊断为胶质瘤标本72例(WHOⅡ级14例,Ⅲ级19例,Ⅳ级39例)。采用PCR荧光探针法检测MGMT基因启动子甲基化状态,毛细管电泳法检测基因IDH1、P53、TERT突变情况;采用列联系数分析IDH1突变与MGMT基因启动子甲基化、P53、TERT突变状态的相关性。采用多因素Logistic回归分析检验IDH1突变的相关因素。结果 72例中,IDH1突变率为29.2%,MGMT启动子甲基化率为47.2%,P53突变率为41.4%,TERT突变率为50%。相关性分析发现IDH1突变与MGMT启动子甲基化(列联系数=0.44;P<0.001)、P53突变(列联系数=0.32;P<0.05)均有显著相关性,但与TERT启动子突变无明显相关性(P>0.05)。IDH1野生型胶质瘤中MGMT启动子甲基化与TERT启动子基因突变具有相关性(列联系数=0.28,P<0.05)。IDH1突变型胶质瘤中MGMT启动子甲基化与P53基因突变具有相关性(列联系数=0.27,P<0.05)。多因素Logistic回归分析,结果显示病人年龄、MGMT启动子甲基化是IDH1突变独立相关因素(P<0.05)。结论胶质瘤IDH1突变可能与MGMT启动子甲基化、P53和TERT突变之间存在复杂的相互调节作用。

正己烷的微核实验

目的 检测正己烷的致突变作用。 方法 骨髓微核试验。 结果 正己烷的微核试验为阳性。

散发性Alzheimer病早老素-1基因第8号和第10号外显子突变研究

目的 :探讨散发性 Alzheimer病 (SAD)与早老素 - 1(PS- 1)基因突变的关系。方法 :采用聚酶链反应 -单链构象多态性 (PCR- SSCP)分析技术对 6 8例 SAD患者的 PS- 1基因第 8号和第 10号外显子进行突变检测。结果 :所有病例 PS- 1基因第 8号外显子的 PCR- SSCP分析结果均两条单链和一条双链 ,第 10号外显子的 PCR- SSCP分析结果均显示三条单链和一条双链 ,未发现异常泳动 ,推断没有存在突变。结论 :SAD的致病原因与 FAD不同 ,PS- 1基因第 8号和第 10号外显子突变并非

大麦离体诱变效应的研究

以二稜皮大麦品种舟麦2号和秀四的幼胚及其愈伤组织为离体诱变材料,研究了γ射线不同剂量辐照后的离体培养反应、生理损伤及诱变效应。结果表明,用γ射线辐照离体大麦幼胚及其愈伤组织的适宜剂量是10—20Gy,MR_2代的突变频率可比常规诱变技术(300Gy γ射线辐照干种子)分别提高33.9％—82.1％和32.7％—229.6％;比离体培养技术分别提高84.0％—150.3％和82.4％—352.9％,而且仍可维持相对较好的培养反应。用30Gy辐照幼胚的诱变效果则可提高9—13倍,但严重抑制了离体培养物的再生能力,并导致了MR_1代严重的生理损伤。

毛细管电泳──基因突变及多态性分析新方法

着重介绍基因突变及多态性分析方法以及毛细管电泳在该领域中的应用。主要包括单链构象多态性分析，变性梯度及温度梯度电泳，杂合子分析，限制性片段多态性分析，等位基因特异性扩增，核酸杂交，引物扩展及小卫星和微卫星分析。

眼皮肤白化病Ⅲ型研究进展

眼皮肤白化病Ⅲ型（OCA3）由酪氨酸酶相关蛋白1基因（TYRP1）突变所致，该基因与酪氨酸酶基因（TYR）结构相似。有研究显示，TYRP1在黑色素的合成过程中发挥重要作用，但具体机制尚未完全明了。较早前已确定了TYRP1基因S166X和1104delA两种病理性突变，最近在巴基斯坦和德国先后发现3种TYRP1基因新突变R373X、R356E、L36X，但它们与OCA3的关系有待进一步确定。以前曾认为OCA3只发生在黑色人种，最近在巴基斯坦和德国发现的这两例极可能是OCA3的病例却为高加索人种，这可能会更新人们对OCA3表型与亚型的认识。

产胞外青霉素酰化酶菌株的选育

以短小杆菌（B．pumilus）B－97为出发菌株，经过连续两次紫外线诱变处理，分离得一突变株B－U－29。其酶活力为4．56U／ml，较出发菌株酶活力提高113．3％。对B－U－29菌株进行连续两次亚硝酸处理，分离得一正变稳定株B—H－29，酶活力为4．93u／ml，较出发菌株酶活力提高了20％。

中国人新SRY基因突变类型－Codon76CGC→CCC的发现

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）体外快速扩增６例４６，ＸＹ女性性反转综合征患者的ＳＲＹ基因片段，并用一种简单准确的ＰＣＲ产物直接测序法进行序列分析，发现一种Ｃｏｄｏｎ７６ＣＧＣ→ＣＣＣ的新突变类型，对该直接测序法的关键和应用进行了讨论。

非星形细胞脑肿瘤罕见 P_(16) 基因突变

在人脑星形细胞瘤中存在着很高的Ｐ１６基因突变率且与其演化有关已被证实，但Ｐ１６基因在非星形细胞脑肿瘤中的存在状况研究甚少。为了解Ｐ１６基因及其蛋白表达在非星形细胞脑肿瘤中存在状况及在其演化上的作用。采用复合ＰＣＲ－ＳＳＣＰ技术检测了７６例非星形细胞脑肿瘤标本的Ｐ１６基因第２外显子突变情况，并用ＳＰ免疫组化法检测其蛋白表达。结果：７６例标本没发现Ｐ１６基因缺失和蛋白丢失，仅１例ＷＨＯⅢ级少枝胶质细胞瘤发现ＳＳＣＰ存在泳动变位。Ｐ１６基因在非星形细胞脑肿瘤中突变罕见，在其演化上并不起主要作用。

自适应两段克隆选择算法及其函数优化应用

研究了免疫克隆选择算法的一种新的改进算法,称作自适应两段克隆选择算法(adaptive two phase clone selection algorithm,ATPCSA),并应用到函数优化问题中。证实了提出的自适应位变异、编码逐位增加及两段克隆选择对函数优化的求解精度及求解的稳定性是效性的。

Y-STR基因座在法庭科学领域的发展及应用

Y-STR分析在法庭科学领域发挥着越来越重要的作用,其父系遗传特点使Y-STR基因座成为了法医DNA鉴定和人类遗传学研究中非常有价值的工具。科研人员对Y-STR的多态性和突变率等方面开展了大量相关研究,迄今为止,NCBI数据库中收录的Y-STR基因座达726个。随着Y-STR DNA数据库中数据量的不断增加,无关男性个体的单倍型随机匹配概率也在提高,为了确保Y-STR的证据性价值,扩充Y-STR的核心基因座是十分必要的。目前,我国将核心基因座扩充到20个,并且优选了15个基因座作为备选的核心基因座。本文综述了Y-STR基因座、核心基因座、快速突变基因座的发展历程以及Y-STR基因座的突变率和多态性研究进展,并展望了未来Y-STR基因座的发展方向。

p53基因在涎腺多形性腺瘤发生中的基因序列突变

目的检测涎腺多形性腺瘤p53基因第7、8外显子的碱基突变，探讨该瘤的发生及生物学特征。方法从手术标本中选择涎腺多形性腺瘤14例。采用聚合酶链反应.单链构象多态性分析技术及DNA核酸序列测定方法对涎腺多形性腺瘤7例第7外显子异常者。3例第8外显子阳性者。5例第7外显子SSCP，阳性（其中3例第8外显子SCP也呈阳性）的肿瘤进行核酸序列测定。结果发现SSCP阳性的肿瘤相应的外显子碱基序列已发生突变。第7外显子的突变方式是碱基替换（点突变），突变位点在第242号密码子上（T→C）。第8外显子突变的密码子分别位于第281-296号位点上，突变的方式有碱基替换（C→A）和移码突变，包括碱基缺失（C缺失）以及碱基插人（G插入）。结论（1）延腺多形性腺瘤发生中p53基因第7、8外显子突变方式有多种，涉及多个密码子;（2）涎腺多形性腺瘤p53基因突变与恶性肿瘤基因突变类似，从基因水平揭示了该瘤“好种植、易复发”的生物学特征。（3）同一肿瘤中可发生多个密码子的碱基改变。

镍诱导pSP189质粒的非定标性突变及其与DNA损伤的关系

目的 检测醋酸镍诱导pSP189质粒在Vero细胞中的非定标性突变及其DNA损伤 ,分析其间的关系 ,为探讨镍的致癌机制提供线索。方法 醋酸镍染毒Vero细胞 2 5h ,再常规培养 2 4h后 ,转染野生型质粒pSP189,获取经该哺乳动物细胞复制过的质粒 ,转化其进入大肠杆菌MBM70 70 ,通过特殊培养基筛选突变子 ;用改良的单细胞凝胶电泳法检测开始转染时Vero细胞的DNA损伤。结果 醋酸镍浓度为 2 5 0 μmol/L和 10 0 0 μmol/L剂量组诱导出了非定标性突变 ,其突变率分别为 9 46×10 4 和 15 0 1× 10 4 ,是对照组的 4 41和 6 98倍 ,各剂量组的DNA链断裂、DNA 蛋白交联和DNA DNA交联均显著高于对照组 ,但无剂量 效应关系 ;突变率和DNA DNA交联均出现了剂量跳跃现象。结论 醋酸镍在穿梭质粒系统中可诱导出非定标性突变 ,并与宿主细胞的DNA

六安市新型冠状病毒肺炎病例流行病学及病原学分析

目的了解六安市新型冠状病毒肺炎病例流行病学特征和基因组变异情况,为疫情防控提供依据。方法收集六安市69例新型冠状病毒肺炎确诊病例流行病学资料,进行统计学分析。运用全基因组靶向捕获技术和纳米孔单分子测序技术对其中的58份临床样本进行全基因组测序,通过MEGA 4.0软件中的MUSCLE方法进行序列比对和分析,将全基因组序列上传至国家基因组科学数据中心鉴定变异位点。结果69例新型冠状病毒肺炎确诊病例中,男性44例,女性25例,男女性比为1.79:1;年龄范围从10月龄~78岁;重症9例,45岁以上占6例,无死亡病例;输入性病例28例(40.58%);69例确诊病例中城区(含县城)22例(31.88%),农村47例(68.12%);其中58份样本经三代测序得到37个完整的全基因组序列,经全球共享流感数据倡议组织(GISAID)网站分析,4株为S型,28株为L型,其余5株为其他型。与参考株(GenBank Acession:NC_045512.2)比对,24个基因组中共有36个核苷酸位点发生了变异,引起氨基酸变异的有21个。结论六安市重症病例以中老年为主;疫情由输入性向本地续发过渡,输入性病例多属早期病例;新冠病毒主要为L型,与武汉地区基本一致。

胚系来源RUNX1新突变致家族性血小板疾病一家系研究

目的:探讨伴胚系来源Runt相关转录因子(RUNX)1突变的家族性血小板疾病(FPD)的临床及生物学特征。方法:对2016年2月至2021年12月在武汉市第一医院血液内科就诊的伴RUNX1突变的骨髓增生异常综合征(MDS)/急性髓系白血病(AML)患者临床资料进行回顾性分析,筛选伴胚系来源RUNX1突变的FPD患者,对其进行家系分析、体细胞基因检测和胚系基因验证,分析其临床表现、生物学演变等并应用生物信息学软件评估胚系突变位点的致病性,预测基因突变对蛋白功能的影响。结果:34例携带RUNX1突变的MDS/AML患者中,有3例患者携带胚系来源RUNX1突变。其中1个确诊的FPD家系携带RUNX1 c.562A>C和RUNX1 c.1415T>C突变。该基因变异为先证者父系来源,应用生物信息学软件分析显示,其2个突变位点分别引起变异型RUNX1基因(AML-1G型)上第188、472位氨基酸的改变,这2个位点在不同物种之间高度保守,可能导致蛋白结构不稳定,进而影响蛋白功能,评价为很可能具有致病性。携带父系来源RUNX1突变的9例成员中,2例进展至AML死亡;1例表现为AML,接受造血干细胞移植后无病存活;4例表现为轻中度血小板减少,2例无血小板减少。在先证者及其儿子的疾病发展过程中,先后出现RUNX1、NRAS和/或CEBPA、KIT等基因突变,肿瘤细胞在免疫表型上表现为CD7的表达逐渐增强;4例仅表现为血小板减少的成员未检测出肿瘤相关热点基因变异,至随访截止均存活。结论:RUNX1相关FPD(RUNX1-FPD)临床罕见,RUNX1 c.562A>C和c.1415T>C突变可能是导致本家系发生RUNX1-FPD的致病基因,获得性突变可促使其发生恶性转化。对RUNX1-FPD家系成员需定期监测疾病生物学演变,必要时早期干预治疗。

云南省10个非综合征性聋家系mtDNA 12S rRNA A1555G突变流行病学调查及分析

目的:探讨云南省10个非综合征性感音神经性聋家系的mtDNA 12SrRNA A1555G突变筛查、流行状况、遗传规律及对于特定药物干预预防的意义。方法:对10个家系以现场问卷方式调查母系家族耳聋的发病情况并绘制出详细的母系家系图,然后对自愿参与检测的母系成员采外周静脉血提取DNA,PCR扩增目的片段、限制性酶切检测A1555G突变阳性个体。结果:10个家系中参与采血者共96例,其中听力正常36例,感音神经性聋患者60例;经过筛查,4例无A1555G位点突变,92例(95.8%)有A1555G位点突变,其中7例为异质性表现,85例为均质性突变;73例有明确氨基苷类抗生素用药史,其余抗生素用药史不明确。结论:云南省药物性聋患者的比例较大,并且mtDNA 12SrRNA A1555G突变率高,对该地区进行mtDNA 12SrRNA A1555G突变筛查及药物干预预防宣教有重要意义。