光谱与停流荧光法研究肌红蛋白及其突变体D60K与表面活性剂的相互作用

用停流荧光法、紫外光谱法、荧光光谱法和圆二色(CD)光谱法研究了肌红蛋白(Mb)及其突变体Mb(D60K)分别与两种表面活性剂的相互作用.停流荧光数据表明不同浓度的十二烷基硫酸钠(SDS)和十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)与Mb及Mb(D60K)相互作用均为(准)一级反应,虽然Mb(D60K)只是将肌红蛋白表面的60位天冬氨酸突变为赖氨酸,但二者性质差异显著,说明60位氨基酸对蛋白质性质影响较大.紫外、荧光与圆二色谱的结果也表明在上述表面活性剂作用下肌红蛋白及其突变体结构与功能均发生变化,其适应性和稳定性有一定差异.综合数据分析得知,肌红蛋白突变体D60K在表面活性剂溶液中性质更加稳定.

D60K Mb定点突变对肌红蛋白结构及荧光量子产率的影响

为了探究肌红蛋白表面60位的Asp突变为Lys后对蛋白荧光强度的影响,在模拟生理条件下,利用荧光法和圆二色法对WT Mb及D60K Mb的结构及荧光光谱特性进行了对照研究,结果表明D60K Mb的荧光量子产率远大于WT Mb。通过研究pH值和结构对荧光量子产率的影响,发现Mb 60位天冬氨酸(Asp)突变为赖氨酸(Lys)后,蛋白表面电荷发生改变,导致蛋白的荧光量子产率明显增强;同时使蛋白内部的芳香族氨基酸较原来更暴露,极性增强,激发态分子的去激发过程由原来的无辐射能量转移为主转变为辐射能量转移为主,最终导致荧光强度增强。

光谱法对照研究肌红蛋白及其突变体Mb(D60K)与H2O2的相互作用

为了解肌红蛋白(Mb)表面60位天冬氨酸(Asp)突变为赖氨酸(Lys)后对蛋白结构稳定性的影响,本文通过紫外-可见吸收光谱、荧光光谱和停流荧光光谱对照研究了模拟生理条件下野生型肌红蛋白Mb(WT)及其突变体Mb(D60K)与过氧化氢(H2O2)的相互作用。结果表明:在Mb(D60K)与H2O2发生相互作用过程中,铁卟啉部位的紫外和荧光发射光谱数据与Mb(WT)相比,性质与功能均表现出显著差异。虽然只有一个氨基酸的改变,但其结构和性质发生明显变化,说明60位氨基酸在稳定蛋白结构中有重要的作用。同步荧光光谱和停流光谱的结果同样表明Mb(D60K)的结构与功能受H2O2的影响较小,Mb(WT)受H2O2影响明显。综合分析表明,Mb(D60K)在与H2O2相互作用过程中,蛋白结构稳定性提高。

1,25-二羟基维生素D_3和维生素K_2联合诱导HL-60细胞分化及凋亡的研究

目的:研究1,25-二羟基维生素D3[1,25(OH)2D3,简称D3]与维生素K2(VK2)联合应用对HL-60细胞分化及凋亡的影响。方法:通过四唑氮蓝(MTT)比色,细胞形态,流式细胞仪(FCM)测定细胞周期、凋亡率及CD-14的表达,观察D3、VK2对HL-60细胞的影响。结果:D3与VK2都能抑制HL60细胞增殖,并且联合使用抑制作用显著。10-8mol/LD3与10μmol/LVK2联合处理HL-60细胞72h后CD-14的表达率为63.15%,且G0/G1期细胞显著增多,与单独一种比较差异有统计学意义(P<0.05)。10μmol/L、20μmol/LVK2作用于HL-60细胞72h凋亡率分别为11.31%、20.36%,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01);而10μmol/LVK2与10-8mol/LD3联用72h细胞的凋亡率为5.41%,与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:D3与VK2联合使用可以使D3诱导分化作用加强,而VK2诱导凋亡作用受到抑制。

多种肌红蛋白突变体与Cu(Ⅱ)相互作用机制光谱法研究

运用多种光谱法研究PCR定点突变获得的肌红蛋白突变体(D44K、D60K、K56D)与Cu(Ⅱ)的相互作用.结果表明:Cu(Ⅱ)对突变体的猝灭机理与野生型相同,均为静态猝灭,但结合常数、结合位点数、热力学常数、结合距离以及三维构象方面发生了一些变化.在相同温度下,蛋白与Cu(Ⅱ)的结合能力顺序为Mb(WT)<Mb(D60K)<Mb(K56D)<Mb(D44K),结合力主要以静电和疏水相互作用为主;结合距离顺序为Mb(WT)<Mb(K56D)<Mb(D60K)<Mb(D44K).同时,借由多种光谱测定了Cu(Ⅱ)引起肌红蛋白及其突变体的构象变化情况,得出突变后蛋白更易与Cu(Ⅱ)发生相互作用,α-螺旋含量下降的幅度更大.总之,肌红蛋白表面44、60、56位带电氨基酸突变后对其构象和功能产生了一定影响.

4K3D60fps格式电影前期拍摄测试和DIT应用

本文针对4K3D60fps格式电影前期拍摄过程中随机出现的"时间码一致画面内容不一致"的技术问题,做了分析和整体的前后期制作测试,在对比几种后期制作环节如何实现摄制镜头3D立体同步的基础上,给出基于时间码同步3D立体素材(左右眼文件)的批处理技术解决方案。该方案推荐在前期拍摄阶段不对DIT环节做3D立体同步的(用于临时校验3D立体效果等需求除外)处理,而是在剪辑定稿之后,于3D立体时间线套底校色环节实现基于时间码同步的批处理。该流程可以大大减少原始素材在DIT阶段进行3D立体同步的工作量以及后续流程可能因此产生的重复工作,对4K3D60fps格式电影制作的整体工作效率有明显提升。

4K/3D/60fps格式电影后期制作和发行放映

本文梳理了4K/3D/60fps格式电影的后期剪辑、视效制作、后期套底、视差校正和校色、母版制作、数字影院放映等工艺流程,并针对整个4K/3D/60fps格式后期处理中最难解决的后期套底问题,给出了解决办法。该方法简单易用,在现有软硬件条件下,可以方便地用于4K/3D/60fps格式电影后期制作。

创面愈合过程中创缘表皮干细胞的再分布

目的:研究皮肤干细胞在全层皮肤创面愈合过程中的分布与增殖分化特征,以及该特征在创面愈合过程中的作用。方法:10只Wistar大鼠背部各制备4个面积为2.54cm^2的全层皮肤创面,将创面随机分为2组,即银锌霜治疗组(20个创面),空白对照组(20个创面)。分别于伤后3d、1周、2周和3周以组织学检查动态观察各组治疗效果,并以β_1整合素、角蛋白19(K19)免疫组化法检测表皮干细胞在创面愈合过程中的表达情况。结果:两面创面愈合率为银锌霜组80%(16/20)。两组创面肉芽组织于各时相点均未见β_1整合素、K19阳性细胞出现,但于创缘表皮的层或颗粒层出现了散在的β_1整合和K19同时染色阳性细胞。且越接近创面这些阳性细胞越密集,组织学上与基底层的阳性细胞无直接联系,其数量随着创面的缩小渐渐增加,直到创面愈合。上皮化后,这些阳性细胞逐渐减少,并随着愈合创面表皮脚的出现而消失,而感染创面的阳性细胞数量明显少于未感染创面的阳性细胞数。结论:表皮干细胞能动地与创面的修复,创缘表皮干细胞再分布的主要功能可能促进创面再上皮化。

智能多路温度巡检仪设计

为了解决现有温度监控需要的仪表数量多,组网困难的问题,设计了一种智能多路温度巡检仪。使用STC15F2K60S2作为核心处理器,巡回检测16路温度传感器。仪表具有多种类型输入功能,可与多种类型传感器、变送器配合使用。具有测量显示、超限报警控制、数据采集记录及RS 485通信功能,方便组成监控网络,大大减少了测量仪表的数量。方案采用多项创新技术,经实际测试具有测控精确稳定和抗干扰能力强等优点。

08单反全接触 尼康D60&宾得K200D

继上期介绍的两款中端数码单反后,本期即将登场的是尼康D60和宾得K200D。作为各自厂家的入门级机型,二者秉承各自传统并跟随数码潮流,"进化"出了这两位技术成熟、价格低廉、受初学用户青睐的低端入门单反。作为曾经日本单反市场的四大家族成员,尼康、宾得的衰落。