nisin Z铰链区电荷突变体抑菌性的研究

以含nis Z基因的质粒pHJ201为模板,对乳链菌肽铰链区进行定点突变,并以pMG36e为载体,转入受体菌L.lactis NZ9800进行表达,研究不同电荷铰链区突变体的特性及结构.结果表明,9个突变体中除N20E nisin Z,M21E nisin Z和K22E nisin Z失去抑菌活性外,其余突变体的抑菌活性均有下降;N20K nisin Z和M21K nisin Z突变体的抑菌谱发生了变化,其对革兰氏阴性菌沙门氏菌、志贺氏菌和假单胞菌均有抑菌活性.CD谱表明,在波长210～220 nm区,N20K nisin Z和M21K nisin Z的α-helix值均较野生型nisin Z略有提高.

Z突变α_1-抗胰蛋白酶缺乏症的研究进展

α_1-抗胰蛋白酶(α_1-AT)属于丝氨酸蛋白酶抑制剂家族(Serpin),是人血浆中最重要的蛋白酶抑制剂,能抑制多种蛋白酶,从而抑制组织的降解。经典的α_1-AT缺乏症由Z突变(Glu342Lys)引起,该突变导致蛋白在肝细胞内形成多聚体并聚积,引起肝细胞损伤,同时由于血浆中该蛋白浓度的减少,破坏了蛋白酶与蛋白酶抑制剂之间的平衡,故可引起肺气肿和新生儿肝炎等疾病。该文主要从α_1-AT的分子结构、基因多态性,及其相关疾病的治疗等方面概述Z突变所致的α_1-AT缺乏症的致病机制和相关预后的研究进展。

细菌和人短型tRNase Z^S与粟酒裂殖酵母长型tRNase Z^L功能保守性研究

tRNase Z是一种参与tRNA前体3'末端加工的核酸内切酶,根据氨基酸残基数目分为长型(tRNase ZL)和短型(tRNase ZS)两类.细菌只有短型,而真核生物既可以有短型也可以有长型,并且绝大部分真核生物只有一个长型.为了研究短型tRNase Z和长型tRNase Z的功能保守性,分别构建表达编码枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)短型tRNase Z(BsuTrz1)、人短型tRNase Z(ELAC1)以及海栖热袍菌(Thermotoga maritima)短型tRNase Z(TmaTrz1)的酵母低表达载体,并转化tRNase ZL温敏型粟酒裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe)进行互补救活实验.结果显示,与粟酒裂殖酵母tRNase ZL(SpTrz1)相比,ELAC1能在37℃完全救活酵母tRNase ZL温敏型菌株,而BsuTrz1的救活能力略弱.但具有不同底物特异性的TmaTrz1则完全不能救活.此外,催化活性受损的ELAC1组氨酸模体突变体(ELAC1-H62A和ELAC1-H64A)救活酵母tRNase ZL温敏型菌株的能力极大受损.这些结果表明,枯草芽孢杆菌和人的tRNase ZS能替代粟酒裂殖酵母的tRNase ZL,并且这些蛋白具有功能保守性.这些实验进一步支持了长型tRNase Z基因是由短型tRNase Z基因复制后序列进化形成的观点.

新型抗真菌抗生素尼可霉素Z高产菌株的育种

目的以唐德链霉菌Streptomyces tendae ATCC 31160为原始菌株,通过选育获得高产突变株,并研究高产菌株的工业化发酵工艺。方法根据尼可霉素Z的生物合成途径,通过离子束注入方法,选育对关键中间产物2-吡啶-甲醛(PA)和3-甲基天冬氨酸的结构类似物S-(2-氨基乙基)-L-半胱氨酸(AEC)具有耐受性的突变菌株,使突变菌株的代谢能够朝着产物NIK合成的方向。结果最终筛选到一支高产突变菌株,其抗生素产量达到3000mg/L,较出发菌株提高150倍以上。在此基础上,建立了小试发酵工艺路线。结论高产突变株的筛选和发酵工艺的确定为该项目产业化奠定了基础。

植物叶绿体分裂的分子机制

叶绿体是植物细胞内一种重要的细胞器.它不仅是光合作用的场所,还是其它多种中间代谢的场所.叶绿体起源于蓝细菌,与其原核祖先类似,通过二分裂方式进行增殖.最近的研究表明,叶绿体的分裂装置包含原核起源和真核起源的蛋白质,它们在叶绿体的内膜内侧和外膜外侧协同作用以完成叶绿体的分裂.在过去十几年里,包括丝状温度敏感蛋白Z(FtsZ)、Min系统蛋白、质体分裂蛋白(PDV)和ARC蛋白等在内的多个叶绿体分裂相关组分被分离鉴定.本文简要介绍了叶绿体分裂装置各成员的发现、叶绿体被膜的收缩和叶绿体分裂位点的选择机制.另外,植物发育过程中叶绿体分裂可能受到细胞的控制,但目前对细胞如何调控叶绿体分裂知之甚少.本文对该领域的最新研究进展也进行了综述.