肉豆蔻木脂素的体外代谢初步研究

目的:建立诱导的大鼠肝微粒体药物代谢酶体外转化模型,评价肉豆蔻木脂素的体外代谢情况,为规模化制备肉豆蔻木脂素的代谢产物提供方法。方法:将肉豆蔻木脂素与苯巴比妥诱导的大鼠肝微粒体药物代谢酶共温孵,用高效液相色谱法检测肉豆蔻木脂素及其代谢产物。结果:肉豆蔻木脂素在苯巴比妥诱导的大鼠肝微粒体药物代谢酶作用下,可以被代谢,并且发现了7个代谢产物。结论:建立的肝微粒体药物代谢酶模型可靠有效,可用于肉豆蔻中肉豆蔻木脂素的体外代谢研究。

(-)-(1R,2S)-肉豆蔻木脂素的不对称合成

报道了天然产物(-)-肉豆蔻木脂素的全合成.以香草醛为起始原料,经Wittig反应、LiAlH4还原和Sharplass不对称双羟化等反应构建了苏式结构的中间体;以焦性没食子酸为原料,经Claisen重排反应制得另一种苯丙素片段;2个中间体通过Mitsunobu反应,缩合并使构型翻转,得到赤式-(-)-肉豆蔻木脂素.为赤式8-O-4'新木脂素的合成提供了一种新方法.

基于HPLC指纹图谱和多成分含量测定结合化学计量学的暖宫七味丸质量评价研究

目的 建立HPLC指纹图谱与多成分含量测定方法,结合化学计量学分析,评价暖宫七味丸(Nuangong Qiwei Pills,NQP)的质量。方法 采用RP-HPLC法,色谱柱为Grace Alltima HP C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为甲醇-水,梯度洗脱;体积流量为1.0 mL/min;检测波长为220 nm。对4家生产企业14批NQP进行指纹图谱及4种指标性化学成分含量测定,利用化学模式识别法通过SPSS 20.0对含量测定数据进行聚类分析和通过SIMCA 14.1软件对NQP 4种定量成分进行主成分分析(principal component analysis,PCA)并将共有峰按峰面积进行差异性分析。结果 建立了NQP指纹图谱,共匹配出21个共有峰,分别归属沉香、丁香、肉豆蔻、豆蔻4味药材,指纹图谱相似度>0.98;对照品指认沉香四醇(6号峰)、丁香酚(8号峰)、肉豆蔻木脂素(14号峰)、去氢二异丁香酚(20号峰)4种化学成分,质量分数分别为0.120~0.416、1.574~5.018、0.103~0.205、0.093~0.139 mg/g;当平方欧式距离为15时,14批样品通过聚类分析分成3类,PCA结果与聚类分析结果一致;通过对共有峰峰面积为变量进行正交偏最小二乘-判别分析建模分析,RX2为0.696,Q2为0.597,均大于0.5,建立的模型稳定可靠,对照品指认的4种化学成分均为重要差异性标志化合物。结论 指纹图谱及含量测定方法准确可靠,可用于NQP质量控制及综合评价。

肉豆蔻木脂素通过PI3K/AKT信号通路诱导胃癌细胞凋亡的研究

目的探讨肉豆蔻木脂素(myrislignan,MYR)对胃癌细胞凋亡的影响及与磷脂酰肌醇-3-激酶(phosphatidylinositol 3 kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)信号通路的关系。方法采用不同浓度的MYR(即0、25、50、100和200μmol/L)作用胃癌细胞(SGC-7901)48 h和72 h,CCK8法检测细胞活性。选择MYR(50、100和200μmol/L)作用胃癌细胞(SGC-7901)48 h,同时设置正常对照(Control)组和溶剂对照(0.1%DMSO)组,采用流式细胞仪检测凋亡率,蛋白质印迹法检测PI3K、AKT、Bcl2关联X蛋白(Bcl-2 associated X protein,BAX)、半胱天冬酶(cysteine-dependent aspartate-specifc protease,Caspase)-3和Caspase-9蛋白的表达水平。特异性PI3K激活剂(20μmol/mL)作用胃癌细胞(SGC-7901)48 h(分组为:Control组、0.1%DMSO组、MYR组和MYR+PI3K激活剂组),观察其对MYR诱导胃癌细胞凋亡和调控PI3K、AKT、BAX、Caspase-3和Caspase-9蛋白表达的影响。结果与对照组比较,MYR在50、100和200μmol/L时以剂量依赖关系抑制胃癌细胞增殖,诱导胃癌细胞凋亡,下调PI3K和AKT蛋白表达水平,上调BAX、Caspase-3和Caspase-9蛋白表达水平(P<0.05)。PI3K激活剂减弱了MYR诱导胃癌细胞凋亡和对PI3K、AKT、BAX、Caspase-3和Caspase-9蛋白表达的调控作用(P<0.05)。结论肉豆蔻木脂素通过抑制PI3K/AKT信号通路诱导BAX、Caspase-3和Caspase-9蛋白表达,促进胃癌细胞凋亡。