华蟾素注射液对乳腺癌MDA-MB-231细胞E-cad、N-cad表达的影响

目的观察华蟾素注射液对乳腺癌MDA-MB-231细胞E-cad、N-cad表达的影响,探讨华蟾素注射液对乳腺癌细胞上皮间质转化(EMT)的影响,探讨华蟾素注射液抑制乳腺癌转移机制。方法采用四氮唑蓝(MTT)比色法观察高、中、低剂量华蟾素注射液(100mg/L、25mg/L、6.25mg/L)对MDA-MB-231细胞增殖的影响;实时荧光定量PCR(q RT-PCR)检测法检测MDA-MB-231细胞中E-cad/N-cad m RNA表达水平;蛋白印迹法(Westernblot)检测MDA-MB-231细胞中E-cad/Ncad蛋白表达水平。结果高浓度组华蟾素注射液48h对MDA-MB-231细胞抑制率较中、低剂量组明显(54.54%比50.20%、37.80%),差异有统计学意义(P<0.05),q RT-PCR实验结果显示空白对照组、华蟾素注射液高剂量组、中剂量组、低剂量组E-cad相对表达量依次为(1.05±0.04)%、(8.77±1.54)%、(3.74±1.56)%、(1.64±0.30)%,N-cad相对表达量依次为(1.18±0.19)%、(0.34±0.19)%、(0.79±0.20)%、(0.84±0.07)%。华蟾素可以上调E-cad表达,下调N-cad表达,与空白对照组比较差异有统计学意义(P<0.01)。Westernblot结果显示华蟾素注射液能降低N-cad蛋白的表达,上调E-cad蛋白的表达。结论华蟾素能通过上调E-cad表达和下调N-cad表达,抑制MDA-MB-231细胞的上皮间质转化(EMT)转变,从而降低乳腺癌MDA-MB-231细胞的转移能力。

扶正抑癌方含药血清对结肠癌lovo细胞E-cad、N-cad和Snail蛋白表达的影响

[目的]通过观察扶正抑癌方含药血清对结肠癌lovo细胞E-cad、N-cad和Snail蛋白表达的影响,探讨扶正抑癌方对结肠癌细胞EMT的影响,从而进一步明确扶正抑癌方抑制结肠癌转移的机制。[方法]lovo细胞体外培养,制备大鼠不同浓度含药血清后,MTT法测定不同浓度含药血清对细胞增殖的影响;免疫荧光法检测E-cad、N-cad的表达,Western Blot检测Snail蛋白的表达。[结果]高剂量含药血清组24h对lovo细胞抑制率较中剂量、低剂量组更加明显,差异具有统计学意义(P<0.01),免疫荧光结果显示扶正抑癌方含药血清可以下调lovo细胞N-cad的表达和上调E-cad表达,与正常组和空白组相比,差异具有统计学意义(P<0.05);Western Blot检测结果显示扶正抑癌方含药血清能降低lovo细胞转录因子Snail蛋白的表达,与正常组和空白组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。[结论]扶正抑癌方含药血清通过上调E-cad表达和下调N-cad的表达,抑制lovo细胞的EMT转变,从而降低lovo细胞的侵袭力和运动能力。

慢性萎缩性胃炎痰瘀互结证患者胃窦组织中Lgr5、E-cad、N-cad、p65蛋白及miR-21表达研究

目的观察慢性萎缩性胃炎痰瘀互结证患者胃窦组织中Lgr5、E-cad、N-cad、p65蛋白及miR-21表达变化。方法33例慢性萎缩性胃炎痰瘀互结证患者(研究组)作为研究对象,33名健康志愿者作为健康对照组(对照组)。电子胃镜组织活检获取两组胃窦黏膜组织,采用Western Blot技术观察两组胃窦黏膜组织中Lgr5、E-cad、N-cad、p65蛋白表达的差异;采用实时荧光定量PCR检测两组胃窦黏膜组织中miR-21表达变化。结果研究组Lgr5、N-cad、p65蛋白相对表达量较对照组升高(P<0.01),E-cad蛋白相对表达量较对照组降低(P<0.01);研究组miR-21相对表达量较对照组升高(P<0.01)。结论慢性萎缩性胃炎痰瘀互结证患者胃窦组织中Lgr5、E-cad、N-cad、p65蛋白及miR-21表达异常,可能与慢性萎缩性胃炎的发生有关。

E-钙黏素和N-钙黏素在胃肠道间质瘤中的表达及其临床意义

目的探讨胃肠道间质瘤(GISTs)中E-钙黏素(E-cad)和N-钙黏素(N-cad)的表达及其临床意义。方法应用免疫组化SP法检测216例GISTs中E-cad和N-cad的表达情况,分析二者与胃肠道间质瘤临床病理参数的关系。结果GISTs中E-cad阳性表达率为59.26%,N-cad阳性表达率为76.39%,E-cad和N-cad表达与GISTs的发生年龄、性别、部位、组织学类型无关,而与GISTs的病理分级和是否远处转移有关(P<0.05),且E-cad和N-cad的表达呈显著性负相关。结论E-cad和N-cad联合检测可作为判定GISTs恶性程度及预后的参考指标。

肺岩宁对人高转移95-D肺癌细胞上皮-间质细胞标志因子表达的影响

背景与目的前期体内实验证实肺岩宁方具有上调上皮细胞标志因子、Alpha-catenin、beta-catenin、E-Cadherin和下调间质细胞标志因子N-cadherin、Fibronectin的作用,而对Vimentin无明显作用。在此基础上,本研究旨在进一步以人高转移95-D肺癌细胞为研究对象,探讨肺岩宁方对上皮-间质细胞标志因子基因和蛋白表达的影响。方法采用不同浓度肺岩宁血清干预治疗人高转移肺癌细胞95-D的基础上,采用Real-timePCR及Westernblot方法检测对上皮-间质细胞标志因子Alpha-catenin、beta-catenin、E-Cadherin、N-cadherin、Fibronectin、Vimentin基因和蛋白表达的影响。结果 Real-timePCR结果表明:与对照组相比较,20%肺岩宁处理组Alpha-catenin表达上调(P<0.05),20%、25%肺岩宁处理组E-Cadherin表达上调(P<0.05,P<0.01);各肺岩宁处理组beta-catenin表达无明显改变;5%、10%肺岩宁处理组间质细胞标志因子Vimentin表达下调(P<0.01),各肺岩宁处理组N-cadherin、Fibronectin无明显改变;Westernblot结果表明:5%、10%、15%、20%、25%肺岩宁处理组E-Cadherin蛋白表达上调(P<0.01),各肺岩宁处理组Alpha-catenin、beta-catenin蛋白表达无明显改变;5%、10%肺岩宁处理组N-cadherin、Fibronectin蛋白表达下调(P<0.01),各肺岩宁处理组Vimentin蛋白表达无明显改变。结论肺岩宁方通过调控部分上皮-间质细胞标志因子的表达,从而抑制肿瘤异质粘附能力和运动能力来参与肺癌的侵袭和转移。

金龙蛇颗粒对缺氧环境下胃癌BGC-823细胞上皮间质转化的影响

目的探讨金龙蛇颗粒对缺氧状态下胃癌BGC-823细胞上皮间质转化(EMT)的影响并初步研究该过程的相关机理。方法将胃癌BGC-823细胞分成3组:常氧对照组、缺氧对照组(加入150μmol/L的Co Cl2)、金龙蛇颗粒含药血清组。观察3组细胞形态变化;RT-PCR检测3组细胞E-cad、N-cad、Vimentin mRNA表达变化。结果常氧对照组的胃癌BGC-823细胞排列较致密,为上皮样表现;缺氧对照组大部分细胞排列较前松散,形态较前拉长,呈间质样表现;金龙蛇颗粒含药血清组介于二者之间。金龙蛇颗粒含药血清组与缺氧对照组相比,E-cad mRNA表达升高,N-cad、Vimentin mRNA表达降低,差异有显著统计学意义(P<0.01)。结论金龙蛇颗粒可抑制缺氧环境中胃癌BGC-823细胞的上皮间质转化,可能与其下调N-cad、Vimentin mRNA表达,升高E-cad mRNA表达相关。

上皮间质转化相关标志物在胃癌组织中的表达及其临床意义研究

目的 探讨上皮间质转化相关标志物E-钙黏蛋白(E-cad)、β-连环素(β-cat)、N-钙黏蛋白(N-cad)在胃癌组织中的表达水平及其与患者各项临床和病理特征的关系.方法 应用免疫组化Envision法检测82例胃癌组织中E-cad、β-cat和N-cad的表达情况.结果 胃癌组织中E-cad和β-cat的高表达率为20.7%;异常表达率为79.3%,其中低表达率为34.1%,无表达率为18.3%,异位表达率为9.8%,表达分离率为17.1%;胃癌组织中E-cad和β-cat的异常表达与不同的Borrmann分型、浸润深度、组织学分级和TNM分期的差异均有统计学意义(均P<0.05或0.01),而与患者的年龄、性别、发生部位、肿瘤大小和是否有淋巴结转移、远处转移的差异均无统计学意义(均P>0.05).胃癌组织中N-cad阳性表达率为31.7%,其阳性表达程度与不同Borrmann分型、浸润深度、组织学分级、淋巴结转移和TNM分期的差异均有统计学意义(均尸P<0.05或0.01),而与患者的年龄、性别、发生部位、肿瘤大小和有无远处转移的差异均无统计学意义(均P>0.05).胃癌组织中E-cad和β-cat表达水平与N-cad表达程度的差异均有统计学意义(P<0.05).结论 胃癌组织在演变过程中存在上皮间质转化现象,并参与胃癌侵袭和转移的过程.

无线传感器网络克隆攻击检测协议

为提高在无线传感器网络安全威胁方面的克隆攻击技术的检测效率,延长网络的生存时间,提出一种克隆攻击检测技术,即N-CAD协议。引入一类新的检测节点,该类节点和普通传感器节点并行操作。模拟仿真结果显示,该类节点提高检测效率,使网络能量均匀消耗,延长网络的生存周期。与现有的克隆攻击检测协议相比,N-CAD协议具有较好的性能。

药芯焊丝的计算机辅助设计

通过计算机辅助设计的方法 ,根据对熔敷金属成分的要求和合金过渡系数设计药芯焊丝配方 ,再根据药芯的总质量、总体积、各组分的松装比和药芯焊丝外皮的几何断面积与药芯填充面积之比优选钢带规格 (钢带宽度和厚度 ) 。

非小细胞肺癌上皮间质转化的实验研究

目的:探讨上皮间质转化(EMT)在非小细胞肺癌(NSCLC)侵袭转移中的作用,为NSCLC的治疗和预后预测提供新的实验依据。方法:利用免疫组化检测97例EMT相关标志物上皮性钙粘蛋白(E-cad)、β-连环素(β-cat)和神经性钙粘蛋白(N-cad)、纤连蛋白(Fibronectin FN)、波形蛋白(Vimentin)在NSCLC中的表达情况。分析以上表达情况与肺癌临床病理特征的关系及其相关性。结果:(1)在97例NSCLC中,E-cad、β-cat、N-cad、FN、Vimentin阳性表达率分别是50.5%(49/97)、28.9%(28/97)、8.2%(8/97)、67.0%(65/97)、34.0%(33/97)。(2)E-cad在不同组织学分级及淋巴结有无转移分组中其表达有显著差异(P<0.05),β-cat在不同组织分级阳性表达有显著差异(P<0.05)。Vimentin在淋巴结有无转移分组中表达有显著差异(P<0.05),FN在在不同肿瘤大小、组织学分级及淋巴结有无转移分组中阳性表达有显著差异(P<0.05)。(3)NSCLC中,E-cad与β-cat表达存在正相关(P<0.05)。(4)VIM在NSCLC中与E-cad及β-cat表达呈明显负相关(P<0.05),FN表达与E-cad呈负相关(P<0.05),而与β-cat表达无差异(P>0.05)。(5)N-cad在NSCLC中阳性表达率为8.2%(8/97),在组织学类型及淋巴结有无转移分组中阳性表达有显著差异(P<0.05)。结论:E-cad、β-cat在NSCLC中表达发生了下调,而N-cad、FN、VIM表达升高,说明NSCLC中存在EMT现象。且与肿瘤侵袭转移相关,均可以作为NSCLC恶性程度、转移复发、预后的判断指标。

耳廓三维图像数据库的应用研究

目的:探索一种新的耳赝复体制作方法。方法:将耳廓三维图像数据库中的三维模型,在surfacer10.0软件平台上数据处理为CAD模型;并在此基础上,根据预修改内容设计标准,局部修改调整耳廓三维图像数据库中三维模型形态,建立预修改模型库和一种模拟的CAD功能。在MagicsRP5.41软件平台上完成耳廓三维模型按一定比例放大、缩小及镜像处理。运用快速成型技术完成最终三维模型向实体模型的转化过程,制作耳赝复体模型。结果:建立了一个耳廓三维图像数据库应用系统。结论:探索了一种新的,更加方便的制作耳赝复体的方法。

C-反应蛋白及食物中n-3脂肪酸与冠状动脉疾病的关系

目的 研究急相C 反应蛋白 (CRP)及食物n 3脂肪酸 (FA)与冠状动脉疾病 (CAD)的关系。方法 对临床疑为CAD的 2 6 9例病人施行血管造影术 ;针对鱼类摄入量 ,所有病人都接受食物问卷调查 ;利用气相层析法测定粒细胞膜中n 3多价不饱和脂肪酸 (PUFA)的含量 ;利用比浊法测定血清CRP含量 ,研究海产品中n 3PUFA对CRP水平的影响。结果 血管造影术证实 72例病人有心肌梗塞 (MI)病史。冠状动脉直径狭窄 >5 0 %的支数 1支的有 6 5例 ,2支的有 4 6例 ,3支的有 77例。总体CRP均值 (x)为 2 .97± 2 .36mg/L。CRP水平与鱼类摄入量无关。冠状动脉狭窄病例血清CRP水平明显高于那些冠状动脉造影无明显改变的病例 (P =0 .0 0 1) ;CRP水平较低者粒细胞中廿二碳六烯酸 (DHA)含量明显高于CRP水平较高者 (P =0 .0 2 )。结论 CRP与海产品中n 3PUFA、DHA呈负相关 。

用有理Bezier曲面光滑填充N边域

描述了用常规的有理Ｂｅｚｉｅｒ曲面光滑填充任意Ｎ边域的数学推导和算法细节，并给出该算法的实验结果。所产生的Ｎ边域过渡曲面形式符合ＳＴＥＰ标准。

家蚕细胞凋亡相关基因BmICAD的克隆、序列和功能分析及其在精巢中特异表达的初步研究

DREP-1基因在果蝇的细胞凋亡过程中对DNA的降解有重要调控作用。本研究将该基因序列在家蚕EST数据库中进行同源性检索,把检索到的EST序列进行电子延伸和克隆重叠群拼接,根据拼接结果设计引物进行PCR扩增并克隆测序验证,首次成功克隆了家蚕第一个ICAD基因BmICAD的cDNA:该cDNA全长844 bp,ORF长522 bp,编码含有174个氨基酸的蛋白;预测分子量为19.6 kDa,等电点为4.23,所编码蛋白与果蝇DREP-1的一致性(identity)为36%;虽然Northern印记杂交未检测到信号,但是RT-PCR结果显示,该基因在精巢中特异表达。

换热器计算机辅助布管模型研究

分析了管壳式换热器人工布管设计时繁重而枯燥的工作现状,提出了管壳式换热器的计算机布管模型,详细介绍了模型的主要特点,并给出了程序框图。最后简要介绍了自行开发的管壳式换热器CAD软件包。

基于参数映射的零件库技术的研究与实现

目前通用CAD系统开发的内嵌零件库存在动态扩充性能较差、只能处理系列值参数而不支持范围值参数和自定义值参数等问题。为此,本文将参数映射机制融入三维零件库的建立与调用,开发了基于参数映射的三维零件库系统,并应用于某大型航空企业的工装设计中,减少了重复劳动,缩短了工装设计周期,提高了工装设计的效率。

超高效液相色谱-电雾式检测器同时分析牙膏中三种表面活性剂

建立了超高效液相色谱-电雾式检测法同时检测牙膏中月桂醇硫酸酯钠、椰油酰胺丙基甜菜碱、月桂酰肌氨酸钠等3种表面活性剂的方法.牙膏样品经甲醇水溶液(1∶1)提取后,以乙腈−50 mmol·L^(−1)乙酸铵水溶液为流动相,经C18反相色谱柱分离,电雾式检测器进行定量测定.结果表明,3种表面活性剂在10—2000 mg·L^(−1)范围内,具有良好的线性关系,线性回归系数(r)均大于0.999.在3个添加水平下,样品的平均回收率为94.32%—105.15%,相对标准偏差(RSD)为0.82%—1.40%,检出限(S/N=3)为1.98—3.75 mg·L^(−1).采用该方法对市售牙膏样品进行检测,检测结果符合产品背标,检出范围在未检出—2%.

如何处理N─R迭代过程中的收敛问题

本文就电子线路ＣＡＤ中的非线性直流分析所采用的改善Ｎ－Ｒ迭代法，从其必要性到具体的算法作一分析，并指出各种方法适用范围。

补中益气汤对肺腺癌荷瘤裸鼠A549/DDP细胞上皮-间质转化的影响

目的:探讨补中益气汤对肺腺癌荷瘤裸鼠肿瘤细胞A549/DDP上皮-间质转化(EMT)的影响。方法:BALB/C裸鼠随机分为空载(A)组,模型(B)组,顺铂(C)组和补中益气汤低(D)、中(E)、高(F)剂量组。A组接种TGF-β1空载慢病毒转染的A549/DDP细胞,其余组接种TGF-β1稳定过表达的A549/DDP细胞。干预后处死裸鼠,取肿瘤组织。称量瘤重,计算抑瘤率;HE染色观察肿瘤细胞形态;免疫组化、Western Blot、Real-time PCR检测EMT分子标志物波形蛋白(Vim)、N-钙黏蛋白(N-cad)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、E-钙黏蛋白(E-cad)、α-连环蛋白(α-CA)的表达情况。结果:与B组比较,D、E、F组瘤重减小,抑瘤率上升(P<0.05);B组细胞纺锤样改变,D、E、F组细胞圆形或椭圆形增多;与B组比较,E、F组Vim、N-cad、α-SMA蛋白及mRNA表达均下调(P<0.05),E-cad、α-CA蛋白及mRNA表达均上调(P<0.05);各中药组EMT不同程度改善。结论:补中益气汤对肺腺癌A549/DDP细胞EMT有明显的抑制作用,并具有一定的剂量依赖性。

miRNA221对宫颈癌细胞株Siha侵袭转移行为的影响

目的 :探讨干扰miRNA221对宫颈癌细胞侵袭转移行为的影响。方法 :实验分为Siha,Siha-模拟物即(siha-mimic),阴性对照Siha-nc(mimic),Siha-抑制剂即(Siha-inhibitor),阴性对照Siha-nc(inhibitor)五组。采用q PCR、Western blotting、划痕实验和Transwell小室实验对miRNA221在宫颈癌siha细胞株侵袭转移中的作用。结果:在siha-mimic组,miRNA221表达明显高于Siha组和Siha-nc(mimic)组,E-钙粘素(E-cadherin,E-cad)表达水平明显降低,N-钙粘素(N-cadherin,N-cad)及波形蛋白(Vimentin)蛋白表达水平明显上调;在Siha-inhibitor组,miRNA221表达明显低于Siha组和Siha-nv(inhibitor)组,E-cad蛋白表达水平明显升高,N-cad和Vimentin表达水平显著下调。结论 :干扰miRNA221抑制宫颈癌细胞侵袭转移。