诱导调节性T细胞与肿瘤免疫研究进展

恶性肿瘤环境中存在多种类型的免疫抑制性细胞,目前认为调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)在肿瘤的发生、发展过程中发挥着极为重要的作用。研究发现,Treg细胞可分为2个重要亚群,分别为n Treg和i Treg,两者具有不同的生物学特性。i Treg在肿瘤环境诱导下由传统的T细胞转化而来,具有强大的免疫抑制功能,抑制抗肿瘤免疫、促进肿瘤的发生发展。而n Treg的功能主要是维持外周免疫耐受,控制肿瘤相关的炎症反应。因此,i Treg才是肿瘤免疫调控中发挥关键作用的免疫抑制性细胞,选择性去除或抑制i Treg将是肿瘤免疫治疗的新方向。

调节T细胞和1型糖尿病

1型糖尿病是一种T细胞介导的胰岛β细胞进行性损伤的自身免疫病。在自身免疫过程中不仅有自身反应性T细胞的参与,也有可抑制免疫反应的自身反应调节性T细胞(Tregs)的参与,因而提高Tregs的反应性抑制自身免疫从而治疗糖尿病是很有希望的治疗策略。Tregs存在不同类型,它们的作用方式和表型还需进一步界定。其中抗原特异的诱导型Tregs可以在病变器官内发挥作用,通过细胞因子介导的“抑制旁观者”机制不依赖于抗原特异性地抑制自身反应性T细胞。而无抗原特异性的自然生成CD4+CD25+Tregs的应用将导致全身性的免疫调节和抑制,可能更适用于全身性而非器官特异性的自身免疫紊乱。因此应用抗原特异的诱导型Tregs治疗1型糖尿病可能更可取,但其成功尚有赖于对其最适诱导抗原、精确表型及体内作用机制的进一步了解。

乳腺癌患者外周血CD_4^+CD_(25)^+细胞胞浆FoxP_3与胞膜CD_(127)的关系研究

目的:探讨人体外周血CD4+CD25+细胞胞浆FoxP3与胞膜CD127的关系,为用CD4+CD25+CD127-作为界定调节性T细胞(Treg)的标志提供依据。方法:利用三色流式细胞计数分别测定32份外周血CD4+CD25+T细胞和CD4+T细胞中CD4+CD25+CD127-细胞和CD4+CD25+FoxP3+细胞百分率,对两者作相关性研究分析。结果:人体外周血CD4+CD25+T细胞和CD4+T细胞中CD4+CD25+CD127-与CD4+CD25+FoxP3+细胞的百分率均呈正相关(r值分别为0.962和0.803,P<0.01),CD4+CD25+CD127-的检测比CD4+CD25+FoxP3+检测更简便快捷。结论:人体外周血CD4+CD25+T细胞和血CD4+T细胞中CD4+CD25+CD127-与CD4+CD25+FoxP3+细胞百分率呈正相关,CD4+CD25+CD127-可以作为界定Treg细胞的标志及其检测。

天然调节T细胞与诱导调节T细胞的生物学特性

CD4+CD25+FOXP3+的调节T细胞(regulatory T cells,Treg)在维持机体免疫平衡方面起着重要的作用。体外扩增Treg细胞用于治疗自身免疫病、哮喘及诱导器官移植免疫耐受引起人们极大的兴趣。Treg细胞可分为2个亚群,分别为nTreg和iTreg,两者有不同的生物学特性。nTreg在特定条件下,可以分泌具有促进炎症的IL-17;iTreg在体内可丢失FOXP3,失去其免疫抑制功能。Treg细胞用于临床治疗,还有许多问题需要研究解决。

高迁移率族蛋白通过Toll样受体4降低天然调节性T细胞的抑制功能及其机制

探讨Toll样受体4的内源性配体高迁移率族蛋白(high mobility group box protein 1,HMGB1)对天然调节性T细胞(natural regulatory T cells,n Tregs)抑制功能的影响及其机制。磁珠法分选健康人外周血中n Tregs,流式细胞术检测分选纯度后进行原代细胞培养。将不同浓度的HMGB1(0.01μg/m L,0.1μg/m L,1μg/m L)分别加入抗TLR4单抗封闭的n Tregs(即anti-TLR4+HMGB1组)和正常n Tregs(即Non anti-TLR4组)两组细胞、同时设定不加HMGB1作为对照组。采用实时定量PCR和酶联免疫吸附(ELISA)检测各组n Tregs中IL-10、TGF-β和IFN-γ的m RNA表达水平和细胞培养上清液中蛋白含量。采用CFSE法流式细胞术检测不同浓度HMGB1处理的n Tregs与CD4+T效应细胞混合培养后CD4+T细胞的增殖水平。Westernblotting检测HMGB1刺激后n Tregs的胞浆及胞核中NF-κBP65蛋白表达水平。结果分选得到的n Tregs纯度>82%(84.52±2.10%)。Non anti-TLR4组中CD4+CD25+Tregs的IL-10、TGF-β的RNA水平及蛋白含量均较无HMGB1刺激的对照组明显降低(p<0.05),而anti-TLR4组中较相应对照组显著增高(p<0.05);IFN-γ的RNA水平及蛋白含量在Non anti-TLR4组中较对照组增加(p<0.05),而在anti-TLR4组中明显低于相应对照组(p<0.05)。CD4+CD25+Tregs显著抑制CD4+T细胞的增殖,与CD3/CD28抗体活化的阳性对照组相比有差异(p<0.05)。经HMGB1刺激的Nonanti-TLR4组中,CD4+T细胞增殖指数较无HMGB1刺激的对照组增高(p<0.05);anti-TLR4组中,CD4+T细胞增殖指数较无HMGB1刺激的相应对照组明显降低(p<0.05)。1μg/m L HMGB1刺激两组CD4+CD25+Tregs后,Non anti-TLR4组胞浆蛋白中NF-κBp65的含量较无刺激对照组降低,而胞核中则相应增加;anti-TLR4组则无明显改变。当TLR4与内源性配体HMGB1结合后,CD4+CD25+Tregs表达及分泌抑制性因子IL-10、TGF-β降低而促炎性细胞因子IFN-γ增加,抑制CD4+T增殖能力减弱,其抑制功能减弱,功能变化机制与NF-κB信号分子的活化相关。