一种大批量制备眼镜蛇毒金属蛋白酶natrahagin的方法

目的 建立从中华眼镜蛇毒 (Najanajaatra)中大批量分离、纯化natrahagin的方法。 方法与结果 10 g眼镜蛇毒经超滤去除小分子组分后 ,再经Heparin -SehparoseCL - 6B亲和层析及SephadexG - 15 0分子筛层析 ,获得 91mgnatrahagin ,产率为0 91% ;SDS -PAGE显示natrahagin呈单一区带 ,相对分子质量约 4710 0 ,并具有水解纤维蛋白原和血小板膜糖蛋白Ib(PlateletmembraneglycoproteinIb ,GPIb)。 结论此实验成功建立的从中华眼镜蛇毒中大批量制备natrahagin的方法具有高效、简便的特点。

中国眼镜蛇毒蛋白酶natrahagin水解血小板膜糖蛋白Ⅰb和抑制血小板聚集的作用

目的 :观察从中国眼镜蛇 (Najanajaatra)毒中纯化的蛋白酶natrahagin水解血小板膜糖蛋白Ⅰb(plateletmembraneglycoproteinⅠb ,GPⅠb)和抑制血小板聚集的作用。方法 :通过SDS_聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS_PAGE)检测以及凝胶图像光密度分析系统分析natrahagin对血小板膜糖蛋白的水解作用。比浊法测定血小板聚集率。结果 :Natrahagin选择性地水解GPⅠb ,切除分子量约 3.3× 10 4 的片段。Natrahagin(0 0 2 5～ 0 .1mg kg)静脉注射可显著抑制低浓度凝血酶 (10 0U L)诱导的兔洗涤血小板聚集 ,效应呈剂量依赖性。结论 :Natrahagin具有水解GPⅠb和抑制后者介导的血小板聚集的作用。

眼镜蛇毒蛋白酶natrahagin水解纤维蛋白原的特性及对人血小板聚集的影响(英文)

目的:研究natrahagin水解纤维蛋白原的特性及其对血小板聚集的影响。方法:SDS-PAGE,水解纤维蛋白原活性测定,血小板聚集实验。结果:Natrahagin与纤维蛋白原以1:50(w/w)孵育,5min内A_α-链几乎完全降解,γ-链的完全降解则至少需6h;其水解可凝固纤维蛋白原的活性为0.349±0.044g·min^(-1)·g^(-1)。Natrahagin浓度依赖性地抑制利托菌素对富血小板血浆和凝血酶(80U·L^(-1))对洗涤血小板的聚集反应,IC_(50)(95％可信限)分别为56(40-79)和3.3(1.4-8.0)mg·L^(-1)。但即使natrahagin达200mg·L^(-1),对ADP和胶原诱导的血小板聚集仍无抑制作用。结论:Natrahagin是一种α,γ-纤维蛋白原溶解酶,可选择性抑制血小板膜糖蛋白Ib介导的血小板聚集。