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Comparative study of the hemolytic and cytotoxic activities of nematocyst venoms from the jellyfish Cyanea nozakii Kishinouye and Nemopilema nomurai Kishinouye 被引量:2
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作者 庞敏 徐金涛 +1 位作者 刘云龙 张学雷 《Journal of Oceanology and Limnology》 SCIE CAS CSCD 2018年第4期1255-1265,共11页
Two species of jellyfish, Cyanea nozakii Kishinouye and Nemopilema nomurai Kishinouye, have occurred offcoastal areas of the northeastern China Sea, Yellow Sea, and Bohai Sea in recent years. They influence marine eco... Two species of jellyfish, Cyanea nozakii Kishinouye and Nemopilema nomurai Kishinouye, have occurred offcoastal areas of the northeastern China Sea, Yellow Sea, and Bohai Sea in recent years. They influence marine ecosystem safety and fishery production, and also pose a risk to human health. The current study examined the hemolytic and cytotoxic activities of crude venoms extracted from the nematocysts of C. nozakii and N. nomurai. The results showed that there were more nematocysts on tentacles from C. nozakii than on tentacles of the same length from N. nomurai. The protein concentration per nematocyst extracted from N. nomurai was higher than that from C. nozakii. Both nematocyst venoms showed dose-and timedependent hemolytic activity on erythrocytes from chicken, pigeon, and sheep, with sheep erythrocytes being the most sensitive, with EC 50 values of 69.69 and 63.62 μg/m L over a 30-min exposure with N. nomurai and C. nozakii nematocyst venoms, respectively. A cytotoxic assay of both jellyfish venoms on A431 human epidermal carcinoma cells resulted in IC 50 values of 68.6 and 40.9 μg/mL after 24-h incubation, respectively, with venom from C. nozakii showing stronger cytotoxic activity than that from N. nomurai. The results of current study indicate that nematocyst venom from C. nozakii had stronger hemolytic and cytotoxic activities than that from N. nomurai and, thus, C. nozakii might be more harmful to the health of humans and other species than are N. nomurai when they appear in coastal waters. 展开更多
关键词 海域 海洋学 生态系统 理论研究
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Isolation and characterization of venom from nematocysts of jellyfish Rhopilema esculentum Kishinouye
2
作者 冯金华 于华华 +5 位作者 李翠萍 邢荣娥 刘松 王琳 蔡圣宝 李鹏程 《Chinese Journal of Oceanology and Limnology》 SCIE CAS CSCD 2009年第4期869-874,共6页
The present work is the first report of the biochemical characterization of the venom from nematocysts of the jellyfish Rhopilema esculentum Kishinouye.The nematocysts were isolated by autolysis and centrifugation and... The present work is the first report of the biochemical characterization of the venom from nematocysts of the jellyfish Rhopilema esculentum Kishinouye.The nematocysts were isolated by autolysis and centrifugation and separated by flow cytometry.Four types of nematocysts were identified:mastigophores,euryteles,and atrichous and holotrichous isorhiza.SDS-PAGE and amino acid analyses demonstrated that most of the proteins in the nematocyst extract were between 10 kDa and 40 kDa,and that glutamic acid was the main amino acid.A hemolytic activity assay showed that the activity of the nematocyst venom (RNV) was strongest in Tris-HCl buffer (50 mmol/L,pH 7.8,5% glycerol,0.5 mmol/L EDTA,0.1 mol/L NaCl).The hemolytic activity was related to protein concentration and the HU50 against chicken erythrocytes was 0.91 μg/mL. 展开更多
关键词 海蜇丝 分离 对虾 表征 蛇毒 乙二胺四乙酸 活性检测 溶血活性
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霞水母刺丝囊毒素溶血活性的稳定性研究 被引量:5
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作者 冯金华 于华华 +3 位作者 李荣锋 邢荣娥 刘松 李鹏程 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期49-56,共8页
从霞水母Cyanea sp.中分离刺丝囊,提取刺丝囊毒素(NV),并研究了温度、pH和几种化学组分对其溶血活性稳定性的影响。实验结果表明,在4~37℃范围内NV的溶血活性与温度变化密切相关,毒素在4℃以下几乎没有发生溶血反应,在37℃以下反应45 ... 从霞水母Cyanea sp.中分离刺丝囊,提取刺丝囊毒素(NV),并研究了温度、pH和几种化学组分对其溶血活性稳定性的影响。实验结果表明,在4~37℃范围内NV的溶血活性与温度变化密切相关,毒素在4℃以下几乎没有发生溶血反应,在37℃以下反应45 min以后,溶血活性达到最大值;毒素的溶血活性对pH敏感,在pH 7.8时,溶血活性最强,溶血率为93.53%。EDTA、NaCl和还原型谷胱甘肽(GSH)对NV溶血活性都具有稳定作用。通过正交实验发现,GSH对溶血活性的影响最大,当提取液中含有1.0 mmol/L GSH和5.0 mmol/L NaCl时毒素的溶血活性最强。DTT(二硫苏糖醇)明显降低毒素的溶血活性,说明毒素中溶血蛋白的活性很可能与分布在蛋白质表面的二硫键有关。Ca2+虽然能够增强毒素的溶血活性但是对毒素并没有稳定作用,所以Ca2+可能只是毒素溶血活性的活化剂。甘油对毒素的稳定作用不明显。 展开更多
关键词 霞水母Cyanea SP 刺丝囊毒素 溶血活性 稳定性
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发形霞水母毒素分离产物溶血活性的比较及其影响因素分析 被引量:5
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作者 聂菲 肖良 +4 位作者 张静 贺茜 樊军文 李玥 张黎明 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期83-86,共4页
目的:分离发形霞水母刺丝囊毒素(nematocyst venom,NV)与无刺丝囊触手提取物(tentacle-only extract,TOE),比较二者的溶血活性,分析其影响因素。方法:采用自溶、离心方法分离发形霞水母NV和TOE,比较二者的溶血活性,观察提取物浓度、温度... 目的:分离发形霞水母刺丝囊毒素(nematocyst venom,NV)与无刺丝囊触手提取物(tentacle-only extract,TOE),比较二者的溶血活性,分析其影响因素。方法:采用自溶、离心方法分离发形霞水母NV和TOE,比较二者的溶血活性,观察提取物浓度、温度和pH值等因素对二者溶血活性的影响。结果:成功分离到NV与TOE;二者浓度相关溶血活性曲线均呈"S"形,溶血分数50%时所对应的质量浓度(HU50)分别为8μg/ml和67μg/ml,前者溶血活性强度约为后者的8.4倍;温度对二者溶血活性影响较大,最大溶血活性都出现在40℃;pH值对二者溶血活性也有影响,在pH8处二者都具有最大的溶血活性,但后者较前者更为敏感。结论:发形霞水母毒素分离产物NV和TOE均具有溶血活性,且前者强于后者;二者溶血活性受浓度、温度和pH值的影响。 展开更多
关键词 发形霞水母 刺丝囊毒素 无刺丝囊触手提取物 溶血活性
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北部湾金黄水母Chrysaora helvola Brandt刺细胞毒液溶血活性 被引量:1
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作者 屈啸声 钟桃珍 +3 位作者 樊兰兰 夏祥华 李刚 陈莹 《广西科学》 CAS 2016年第1期79-85,共7页
【目的】探讨金黄水母Chrysaora helvolaBrandt刺细胞毒液(nematocysts venom,NV)的红细胞溶血活性特征及可能机制。【方法】通过分光光度法测定红细胞溶解释放血红蛋白的量来确认不同条件和药物对NV诱导红细胞溶血行为的影响。【结果... 【目的】探讨金黄水母Chrysaora helvolaBrandt刺细胞毒液(nematocysts venom,NV)的红细胞溶血活性特征及可能机制。【方法】通过分光光度法测定红细胞溶解释放血红蛋白的量来确认不同条件和药物对NV诱导红细胞溶血行为的影响。【结果】NV诱导的红细胞溶血与其总蛋白浓度存在依赖关系。溶液pH值、大分子非电解质渗透压保护剂PEGs均能显著影响其溶血活性;非电解质小分子糖类渗透压保护剂D-甘油和D-半乳糖对溶血活性影响很小,但D-葡萄糖能显著延缓溶血。NV同时具有Ca^(2+)依赖的弱磷酸酯酶A2(PLA_2)活性,且受组氨酸烷基化试剂p-BPB抑制。这一PLA2活性可能对其红细胞溶血活性也有贡献。【结论】NV的红细胞溶血活性可能由膜穿孔机制和所含PLA_2酶成分造成,并受到含葡萄糖单元结构的糖受体调节。 展开更多
关键词 红细胞 溶血 刺细胞毒液 磷酸酯酶A2 金黄水母
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沙蜇刺丝囊毒素的分离提取及其溶血活性稳定性研究
6
作者 江水 陈官芝 +4 位作者 张鲲鹏 葛红芬 潘敏 郁博 许璐璐 《临床皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期68-71,共4页
目的:研究沙蜇刺丝囊毒素的提取及其溶血活性稳定性的影响因素。方法 :通过自溶法制备沙蜇刺丝囊细胞,利用超声波破碎细胞提取毒素,再将毒素置于不同温度、不同pH值及不同浓度的乙二胺四乙酸(EDTA)、还原型谷胱甘肽(GSH)及二价金属离子... 目的:研究沙蜇刺丝囊毒素的提取及其溶血活性稳定性的影响因素。方法 :通过自溶法制备沙蜇刺丝囊细胞,利用超声波破碎细胞提取毒素,再将毒素置于不同温度、不同pH值及不同浓度的乙二胺四乙酸(EDTA)、还原型谷胱甘肽(GSH)及二价金属离子溶液中孵育后,加入到人血红细胞溶血反应体系中,测定上述理化因素对沙蜇刺丝囊毒素溶血活性稳定性的影响。结果:成功提取到沙蜇刺丝囊毒素,其半溶血率(HU_(50))约为26.38 mg/L;毒素的溶血活性受温度影响较大,37℃时溶血活性最强;溶血活性在弱酸性条件下较稳定,pH4.8时毒素的溶血活性最大;EDTA和GSH对毒素溶血活性具有稳定作用,而二价金属离子Ca^(2+)、Mn^(2+)、Cu^(2+)、Mg^(2+)、Ba^(2+)和Zn^(2+)能不同程度的抑制其活性。结论:沙蜇刺丝囊毒素具有溶血活性,其活性的稳定性受温度、pH值、EDTA、GSH及二价金属离子影响。 展开更多
关键词 沙蜇 刺丝囊毒素 溶血活性 稳定性
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组织研磨器细胞破碎法提取霞水母(Cyanea sp.)毒素的初步研究
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作者 李荣锋 于华华 +1 位作者 冯金华 李鹏程 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期794-797,共4页
采用Mini-Beadbeater组织研磨器破碎的方法进行了提取霞水母刺丝囊细胞毒素的研究。首先制备霞水母刺丝囊细胞,然后研究破碎频率、破碎时间对提取霞水母刺丝囊细胞毒素浓度的影响。结果表明,组织研磨器能够在2—3min内破碎约90%的霞水... 采用Mini-Beadbeater组织研磨器破碎的方法进行了提取霞水母刺丝囊细胞毒素的研究。首先制备霞水母刺丝囊细胞,然后研究破碎频率、破碎时间对提取霞水母刺丝囊细胞毒素浓度的影响。结果表明,组织研磨器能够在2—3min内破碎约90%的霞水母刺丝囊细胞,从而提高水母毒素的提取效率。SDS-PAGE结果显示,提取的水母毒素蛋白条带没有发生明显差异,是一种有效提取霞水母毒素的方法。 展开更多
关键词 组织研磨器 霞水母 刺丝囊细胞 毒素提取
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沙蜇(Stomolophus meleagris)刺丝囊毒素生物活性的初步分析 被引量:2
8
作者 李荣锋 于华华 +2 位作者 邢荣娥 刘松 李鹏程 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期43-47,共5页
从沙蜇触手提取刺丝囊细胞毒素,并对该毒素进行溶血活性、致死活性、SOD活性和抗肿瘤活性的研究。结果显示,沙蜇毒素具有明显的溶血活性,其半溶血率(HU50)约为10.5μg/ml;该毒素还对草鱼显示出较强的致死活性,半致死量(LD50)为50μg毒... 从沙蜇触手提取刺丝囊细胞毒素,并对该毒素进行溶血活性、致死活性、SOD活性和抗肿瘤活性的研究。结果显示,沙蜇毒素具有明显的溶血活性,其半溶血率(HU50)约为10.5μg/ml;该毒素还对草鱼显示出较强的致死活性,半致死量(LD50)为50μg毒素/g鱼;同时该毒素具有明显的SOD活性和抗肿瘤活性,当毒素浓度为18μg/ml时其总SOD活性为161 U/mg,而毒素浓度为1 mg/ml时,该毒素对肝癌细胞Bel-7402表现出显著的抑制效果,其抑制率达到54.9%。因此,有必要对沙蜇毒素内的生物活性组分进行深入研究,为沙蜇毒素的开发利用提供依据。 展开更多
关键词 沙蜇Stomolophus meleagris 刺丝囊毒素 溶血活性 致死活性 SOD活性 抗肿瘤活性
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蛋白酶抑制剂对霞水母毒素溶血活性的影响 被引量:3
9
作者 李荣锋 于华华 +1 位作者 冯金华 李鹏程 《中国海洋药物》 CAS CSCD 2011年第2期39-43,共5页
目的研究蛋白酶抑制剂对霞水母毒素溶血活性的影响。方法首先制备霞水母刺丝囊细胞,再利用Mini-Beadbeater组织研磨器破碎细胞提取毒素,然后向获得的霞水母毒素中加入不同种类及剂量的蛋白酶抑制剂,如金属酶抑制剂EDTA、酸性蛋白酶抑制... 目的研究蛋白酶抑制剂对霞水母毒素溶血活性的影响。方法首先制备霞水母刺丝囊细胞,再利用Mini-Beadbeater组织研磨器破碎细胞提取毒素,然后向获得的霞水母毒素中加入不同种类及剂量的蛋白酶抑制剂,如金属酶抑制剂EDTA、酸性蛋白酶抑制剂Pepstantin A、丝氨酸蛋白酶抑制剂PMSF和Aprotinin,巯基蛋白酶抑制剂Leupeptin,并且测定蛋白酶抑制剂对霞水母毒素溶血活性的影响。结果 EDTA和Pepstantin A能够明显抑制蛋白酶的活性从而增强霞水母毒素的溶血活性,1 mmol.L-1EDTA和4μg.ml-1 Pepstantin A使其溶血率分别从40%上升到93%和5%上升到78%;而PMSF、Aprotinin和Leupeptin却对霞水母毒素溶血活性的影响较小。结论金属蛋白酶抑制剂EDTA和酸性蛋白酶抑制剂Pepstantin A能有效地保护霞水母毒素的溶血活性,为深入研究霞水母毒素提供帮助。 展开更多
关键词 霞水母 刺丝囊毒素 蛋白酶抑制剂 溶血活性
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沙蜇毒素的提取及溶血活性分析
10
作者 郭容 周玉婷 +1 位作者 张凤杰 朱启忠 《国际生物医学工程杂志》 CAS 北大核心 2009年第3期153-156,共4页
目的血栓形成是引发严重心脑血管疾病的病理基础,溶栓药物可消除血栓并减轻并发症。本研究从生物组织中提取分离的具有溶血活性的物质,有望成为有效的溶栓制剂,为血栓的治疗提供新方法。方法通过海水自溶、离心、低温研磨等方法从沙... 目的血栓形成是引发严重心脑血管疾病的病理基础,溶栓药物可消除血栓并减轻并发症。本研究从生物组织中提取分离的具有溶血活性的物质,有望成为有效的溶栓制剂,为血栓的治疗提供新方法。方法通过海水自溶、离心、低温研磨等方法从沙蜇触手的刺丝囊中提取沙蜇毒素,对沙蜇毒素提取液进行分离纯化,测定了毒素的溶血活性并绘制溶血曲线;深入研究了温度、介质的pH值对其溶血潘陛的影响。结果研究证实:沙蛰毒素具有很强的溶血活性,且对温度敏感,其活性受pH变化影响很大。粗毒素提取液分离出性能完全不同的2个组分,其中仅第一组分有溶血活性,第二组分未检测到溶血活性。结论研究结果提示沙蛰毒素有望用于改善生物材料的抗血栓性能。 展开更多
关键词 沙蜇 刺细胞毒素 溶血活性 提取纯化
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