高压氧对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤模型NF-κB活化和神经细胞凋亡的影响

目的探讨高压氧(HBO)对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)模型神经细胞的凋亡和对NF-κB活化的影响。方法新生7日龄健康SD大鼠随机分为空白对照组(n=16)、假手术组(n=16)、HIBD组(n=17)及HBO组(n=18)。Western-blot检测神经细胞IκBα的表达,了解NF-κB的活化,TUNEL试剂盒检测神经细胞的凋亡。结果脑组织缺氧缺血后可在一定程度上诱导NF-κB的活化,HBO治疗可使NF-κB的活化增强;脑组织缺氧缺血后神经细胞的凋亡明显增加,其阳性凋亡数为368．62±8．25,HBO治疗后神经细胞的阳性凋亡数为278．32±10．34,较HIBD组明显减少(P<0．05)。结论HBO治疗可减轻缺氧缺血性脑损伤后神经细胞的凋亡,机制可能与其诱导了神经细胞NF-κB的活化有关。

低氧对新生大鼠下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素发育的影响

本文研究模拟高原低氧下新生和胚胎大鼠发育时，下丘脑内促肾上腺皮质激素（ＣＲＦ）及垂体环磷酸腺苷（ｃＡＭＰ）水平的变化。结果表明：５ｋｍ海拔高度抑制下丘脑ＣＲＦ的发育，当发育至２５天和３０天时，ＣＲＦ含量分别为对照组的６４．８％和５７．９％。此时，体重分别为４７．８％和５２．９％。３０天时，ｃＡＭＰ为２０．８％。本研究还显示，在７ｋｍ海拔高度，已怀孕大鼠难以完成正常的妊娠和胎儿发育过程，５ｋｍ海拔高度暴露１７天时，胚胎脑内ＣＲＦ含量高于对照。

海胆黄多糖SEP抑制高糖高胰岛素诱导的大鼠乳鼠心肌细胞肥大

目的观察海胆黄多糖SEP对高糖高胰岛素诱导的肥大心肌细胞的影响,并初步探索其作用机制。方法利用高糖高胰岛素模拟糖尿病机体微环境诱导乳鼠心肌细胞肥大模型,选择不同剂量海胆黄多糖SEP分组给药处理后,采用Lowrys法检测心肌细胞蛋白质含量;利用计算机图像分析系统检测心肌细胞表面积变化;采用RT-PCR法检测给药前后心肌细胞ANF和PPAR-αm RNA表达变化。结果与正常对照组相比,高糖高胰岛素组蛋白含量、细胞表面积、ANF和PPAR-αm RNA表达均明显增加;与高糖高胰岛素组相比,低、中、高给药组剂量依赖性降低了高糖高胰岛素诱导的肥大心肌细胞的蛋白含量、细胞表面积、以及ANF和PPAR-αm RNA表达。结论 SEP对高糖高胰岛素诱导的乳鼠心肌细胞肥大具有一定的抑制作用,PPAR-α信号通路可能参与了这一过程。

一种改良的原代大鼠乳鼠心肌细胞分离及培养方法

目的:本研究旨在探讨一种经改良后既稳定又高效的分离大鼠乳鼠心肌细胞的原代分离和培养方法,拟建立此种方法,为进一步研究单个心肌细胞上的各种电生理机制等诸多实验提供有利的前提保障。方法:取出生1-3天内SD大鼠心脏,联合应用胰蛋白酶和Ⅱ胶原酶两步消化,离心收集到心肌细胞,差速培养,加入5-溴脱氧尿嘧啶核苷纯化后得到原代心肌细胞,经高糖DMEM培养,即可得到立体感较强的大鼠乳鼠心肌细胞。结果:联合应用胰蛋白酶和Ⅱ胶原酶两步消化,经过高糖DMEM培养后得到的心肌细胞存活率高、纯度高、折光性好、立体感较强,有节律性搏动。结论:成功建立了一种既简便高效又稳定的分离大鼠乳鼠心肌细胞的方法,为今后研究乳鼠心肌细胞的功能及其基本电生理特性提供良好的单个细胞,可广泛应用于各种心血管疾病的研究中。

麻醉期间低体温对发育期大鼠学习记忆能力及海马凋亡率的影响

目的探讨麻醉期间低体温状态对发育期大鼠学习记忆能力及海马凋亡率的影响。方法出生7 d的SD新生大鼠40只,随机分为四组(n=10):对照组(C组)、麻醉保温组(A组)、麻醉低温组(AH组)、物理低温组(H组)。C组腹腔注射0.1 mL生理盐水并保持大鼠体温38~39℃;A组以25 mg/kg腹腔注射异丙酚0.1 mL,麻醉维持2 h,同方法保持体温38~39℃;AH组麻醉方式及时间与A组相同,控制室温为23℃,使体温下降;H组大鼠腹腔注射0.1 mL生理盐水,同条件使体温下降。苏醒即刻,每组取5只大鼠采用流式细胞术检测海马凋亡率;每组剩余5只大鼠继续饲养至30日龄行水迷宫实验并检测海马凋亡率。结果 AH、H组大鼠体温明显下降(P<0.05)。7日龄时,AH、H组海马凋亡率增高(P<0.05)。36日龄时,四组大鼠凋亡率及行为学检测比较差异无统计学意义。结论在本研究低体温范围内,麻醉期间体温降至25℃时可短期诱导新生大鼠海马组织凋亡率增高,而对其远期学习记忆能力无明显影响。

乳鼠培养心肌细胞蛋白质含量对血清浓度的依赖性

以纯化培养的乳鼠心肌细胞模型，分析在无血清和合１０％血清培养条件下，每瓶细胞数、蛋白质总量和单个细胞平均蛋白质含量。结果表明，细胞蛋白质含量可作为评价心肌生长肥大的重要指标；该指标与血清浓度呈非线性依赖关系．本实验为心肌细胞生长调控的研究提供了方法和基础资料。