神经肽Y/Y1受体激活β⁃catenin信号通路介导心肌细胞损伤

目的:研究神经肽Y(neuropeptide Y,NPY)/Y1受体信号转导在心肌细胞损伤中的作用及机制。方法:C57BL/6J小鼠皮下注射异丙肾上腺素(isoprenaline,ISO)构建心肌损伤模型,腹腔注射Y1受体特异性拮抗剂BIBO3304干预。小鼠随机分为对照组(生理盐水)、ISO组[20 mg/(kg·d)ISO]、BIBO3304+ISO组[0.1 mg/(kg·d)BIBO3304+20 mg/(kg·d)ISO]、BIBO3304组[0.1 mg/(kg·d)BIBO3304],每组10只,连续给药14 d。实时定量PCR和Western blot检测小鼠心肌组织中NPY表达。HE染色和Masson染色观察各组小鼠心肌纤维结构变化和纤维化程度;定量PCR检测小鼠心肌肥大基因心房钠尿肽(atrial natriuretic peptide,ANP)、β⁃肌球蛋白重链(β⁃myosin heavy chain,β⁃MHC)mRNA表达。采用Y1受体特异性激活剂[Leu31,Pro34]⁃NPY刺激H9C2细胞,检测ANP、β⁃MHC mRNA表达;CCK⁃8检测心肌细胞活力。Western blot检测各组小鼠心肌组织和H9C2细胞中activeβ⁃catenin、磷酸化糖原合成酶激酶⁃3β(phospho⁃glycogen synthesis kinase 3β,p⁃GSK3β)、总糖原合成酶激酶⁃3β(total glyco⁃gen synthesis kinase 3β,t⁃GSK3β)蛋白表达。免疫荧光染色检测心肌细胞β⁃catenin入核情况。利用β⁃catenin特异性抑制剂ICG001处理细胞,检测[Leu31,Pro34]⁃NPY诱导的心肌细胞肥大和细胞活力变化。结果:与对照组比较,ISO组小鼠心肌组织NPY mRNA和蛋白表达均显著增加(P<0.05),心肌纤维排列紊乱,心肌纤维化程度高,心肌肥大基因表达增加。与ISO组比较,BIBO3304+ISO组小鼠心肌损伤和纤维化得到有效缓解,心肌肥大基因表达下降(P<0.01)。与对照组比较,[Leu31,Pro34]⁃NPY增加H9C2细胞ANP、β⁃MHC mRNA表达,降低心肌细胞活力(P<0.01)。与对照组比较,ISO组小鼠心肌组织activeβ⁃catenin、p⁃GSK3β表达明显上调,p⁃GSK3β/t⁃GSK3β增加;与ISO组比较,BIBO3304+ISO组心肌组织activeβ⁃catenin、p⁃GSK3β表达降低(P<0.05)。与对照组比较,[Leu31,Pro34]⁃NPY显著增加心肌细胞activeβ⁃catenin、p⁃GSK3β表达(P<0.05),促进细胞核β⁃catenin积累。与[Leu31,Pro34]⁃NPY组比较,BIBO3304抑制细胞核β⁃catenin表达,ICG001显著缓解[Leu31,Pro34]⁃NPY诱导的心肌细胞肥大和细胞活力下降(P<0.01)。结论:NPY通过Y1受体转导激活β⁃catenin信号通路介导心肌细胞损伤和心肌纤维化。

早期和后期限饲对肉鸡采食量及下丘脑POMC、NPY和瘦素受体mRNA转录的影响

采用隔日限饲方式对0～2周龄(早期)和7～9周龄(后期)三黄肉鸡进行限饲处理,分别于2和9周龄时各组随机选取10羽肉鸡宰杀后采样。结果显示:与对照组相比,早期限饲组鸡体重极显著降低(P<0.01,n=40),后期限饲组鸡8周龄时体重显著降低(P<0.05,n=20),9周龄时无显著差异(P>0.05,n=10);早期限饲组鸡的平均日采食量低于对照组,而后期限饲组鸡平均日采食量升高;限饲期间肉鸡料重比增加,而自由采食期间无差异。Real-time PCR测定结果显示:肉鸡下丘脑神经肽Y(NPY)、阿片-促黑素细胞皮质素原(POMC)和瘦素(leptin)受体mRNA转录丰度均随日龄增加而显著升高(P<0.05,n=10);早期限饲仅引起下丘脑POMC基因转录的显著下调(P<0.05,n=10),后期限饲对下丘脑NPY、POMC和leptin受体mRNA无显著影响(P>0.05,n=10)。以上结果提示:早期2周的隔日限饲显著减少了肉鸡的采食量,从而最终导致体重的显著下降。下丘脑POMC、NPY和leptin受体基因在转录水平上表现出对慢性限饲的适应现象且差异不显著。

PTD-NPY融合基因的克隆及其在毕赤酵母中的分泌表达

应用重叠延伸PCR方法扩增HIV-1TAT蛋白转导结构域(PTD)与鼠源神经肽Y(NPY)的融合基因,克隆目的片段并插入酵母表达载体pPICZαA,构建成重组表达质粒pPICZα-PTD-NPY。PCR和酶切鉴定及测序正确后,经限制性内切酶SacI线性化重组表达质粒并通过电转化整合到巴斯德毕赤酵母菌GS115的染色体基因组中。阳性重组酵母菌用含1%甲醇的培养基诱导其分泌表达。经过120h的诱导,取上清浓缩除盐后进行SDS-PAGE电泳,表明该系统成功表达了PTD-NPY融合蛋白,Western blotting实验证实表达产物具有特异性。获得真核表达的PTD-NPY融合蛋白,为下一步的应用研究提供了物质基础。

急性脑梗死患者血浆VEGF、NPY含量的变化及三七皂甙对其影响

目的 研究急性脑梗死（ACI）患者血浆血管内皮细胞生长因子（VEGF）和神经肽Y（NPY）含量在不同时间段变化及三七皂甙（PNS）对其影响；方法 65例患者随机分为PNS组和对照组，用酶联免疫法和放射免疫法测定VEGF和NPY于第1、3、5、10天血浆含量的变化及应用PNS治疗后其变化情况。结果 ACI患者血浆VEGF和NPY的水平明显增加，不同时间段VEGF和NPY的含量比较有显著性差异（P〈0．05），各时间段VEGF含量显示第5-10天时血浆VEGF达高峰（P〈0．01）。NPY于第3-5天达峰值，之后逐渐下降，第10天的含量仍高于第1天。应用PNS治疗后血浆VEGF一直保持在一个相对较高的水平。血浆NPY的含量于第3天时明显下降，第5天升高，第10天又有所降低，但应用PNS治疗后不同时间段NPY的含量均低于对照组（P〈0．05）。结论 ACI后血浆VEGF和NPY水平开始增高，PNS能够明显增加VEGF的血浆含量，且能使其维持在一个较高的水平；同时PNS对ACI后NPY的表达有部分抑制作用，这可能是PNS能够减轻ACI后缺血缺氧的分子机制之一。

长期饮酒脑缺血大鼠血浆NPY、CGRP、ET含量的测定

目的 探讨长期饮酒对脑缺血大鼠血浆中神经肽 Y ( NPY )、降钙素基因相关肽 ( CGRP)、内皮素( ET)含量的影响。方法 选用 180～ 2 0 0 g雄性 Wistar大鼠 5 0只 ,分为饮水组与饮酒组 ,饮酒组以 7.2 %酒精喂养10 0 d,制作长期饮酒模型 ,后将两组用线拴法制作脑缺血模型 ,在缺血前、缺血 1h、3h、6 h分别取血 ,用放免法测定NPY、CGRP、ET。结果 各时间段饮酒组 NPY含量明显高于饮水组 P<0 .0 5 ,缺血 3h时 ,两组血浆 NPY含量明显升高 ,于 6 h逐渐下降 ;各时间段饮酒组 CGRP均低于饮水组 P<0 .0 1,饮水组于缺血 3h、饮酒组于缺血 1h时 ,血浆中 CGRP明显下降 ;饮酒组血浆 ET于缺血前及缺血 1h明显高于饮水组 P<0 .0 5 ,饮水组于缺血 3h、饮酒组于缺血1h血浆 ET明显升高。结论 脑梗死超早期伴有血浆 NPY、CGRP、ET的动态改变 ,长期饮酒可加重这些变化 ,增加血浆中缩血管物质的含量减少舒血管物质的含量 ,进一步减少脑部血液供应。

火绒草对2型糖尿病大鼠腺垂体内NPY和leptin表达的影响

目的:观察火绒草对2型糖尿病(T2DM)大鼠腺垂体内神经肽Y(NPY)及leptin表达的影响。方法:将24只SD大鼠随机分为3组,即正常组、模型组和火绒草预处理组。模型组、火绒草预处理组大鼠的建立用链脲佐菌素(STZ)诱导的T2DM大鼠模型,火绒草预处理组于注射STZ前给予火绒草灌胃35 d。大鼠血糖采用酶法检测,大鼠腺垂体内NPY和leptin蛋白及mRNA的表达采用免疫组织化学染色和RT-PCR。结果:火绒草预处理组大鼠血糖明显低于模型组(P<0.01)。免疫组织化学染色显示,NPY和leptin免疫阳性产物均为棕黄色颗粒状,免疫阳性细胞均为腺垂体内嗜色细胞,NPY主要位于细胞质,leptin主要位于细胞核。与模型组大鼠相比,火绒草预处理组大鼠NPY和leptin蛋白的表达明显降低(P<0.01)。RT-PCR结果表明,火绒草预处理组大鼠NPY和leptin mRNA的表达明显低于模型组(P<0.01)。结论:火绒草预处理可下调STZ诱导的大鼠腺垂体内NPY和leptin的高表达,对T2DM腺垂体损伤具有明显保护作用。

脑出血患者血浆NPY浓度测定及其临床意义

目的观察脑出血患者血浆神经肽Y(NPY)的含量变化及其临床意义。方法采用放射免疫方法测定30例脑出血患者发病后第1、3、5、7、14天及28例健康对照组血浆中神经肽Y(NPY)的含量。结果脑出血患者血浆中神经肽Y的含量明显增高,与健康对照组相比差异有统计学意义(P<0·05),且脑出血各组间比较差异有统计学意义(P<0·05)。结论血浆神经肽Y(NPY)与脑出血的发病,转归关系密切,参与了脑出血的病理生理过程,对疾病的观察、治疗具有重要意义。

不同肥胖程度儿童血浆NPY水平的研究

目的 神经肽Y(NPY)是与摄食行为有关的一种神经内分泌因子 ,可能与单纯性肥胖的发生有关。该文探讨NPY在不同程度单纯性肥胖儿童血浆中的水平及其在单纯性肥胖症中的作用机制。方法 选择 6～ 13岁肥胖程度不同的单纯性肥胖儿童 10 5例 (轻度、中度、重度肥胖各 35人 )和 35名正常体重儿童 ,用放免法测定血浆NPY ,比较肥胖组与对照组及不同肥胖程度组之间NPY水平的差异性。结果 单纯性肥胖组血浆NPY水平 (170 .75± 37.0 5 )pg/ml明显高于对照组 (12 6 .97± 32 .17)pg/ml;轻度肥胖组 (15 2 .89± 30 .82 )pg/ml明显高于对照组而低于中、重度组 (173.6 6± 37.2 5 ) pg/ml、(185 .71± 35 .97) pg/ml;中度肥胖组与重度肥胖组间无差异。结论 NPY在单纯性肥胖儿童血浆中明显升高 ,其在单纯性肥胖症的发生、发展中均可能起重要作用。

长短日照下绍鸭性成熟时间,下丘脑GnRH-I、POMC和NPY mRNA表达的差异

利用长日照和短日照环境调控绍鸭的性成熟时间,并采用反转录多聚酶链式反应(RT-PCR)方法, 检测两种日照组(n=6)鸭性成熟过程中下丘脑促性腺激素释放激素-Ⅰ(GnRH-Ⅰ)、阿片促黑激素皮质素 原(POMC)和神经肽Y(NPY)mRNA表达的发育性变化及日龄间差异。结果表明,长日照组性成熟时间较短 日照组提前30d。RT-PCR结果显示,两组鸭下丘脑GnRH-Ⅰ mRNA的发育性表达模式相似,从出雏至性成熟 过程中,其表达水平呈逐渐增加趋势;长日照组下丘脑GnRH-Ⅰ mRNA表达丰度均高于同日龄短日照组,并于 120日龄时其差异达显著水平。两组POMC mRNA的表达丰度呈现先增加后降低趋势,于性成熟前后显著下降; 日照长度对其基因表达具有显著影响。两组NPY mRNA表达水平分别于60和90日龄时显著升高,于性成熟时 显著下降,但光照对其基因表达无显著影响。下丘脑GnRH-Ⅰ基因表达的显著上调可能是禽类性成熟启动的关 键因素,也是长日照条件下绍鸭性早熟的主要原因;GnRH-Ⅰ表达的上调与下丘脑POMC和NPY mRNA表达变 化有关。

颅脑损伤患者血浆NPY含量变化的观察

目的：分析颅脑损伤患者血浆神经肽Y（NPY）含量变化的临床意义。方法：按GCS评分，将101例颅脑损伤患者分三组：即轻度（13—15分）44例、中度（9—12分）27例和重度（3—8分）30例。采用放射免疫分析分别测定患者和30例正常对照组血浆NPY含量。按年龄分为：50岁以下、50岁及以上两组；按男女性别分两组；分别进行统计学分析。结果：颅脑损伤轻、中、重度患者血浆NPY含量均明显高于正常对照组，中度组明显高于轻度组，重度组明显高于中度组，病情越重升高越显著；50岁以下患者明显高于≥50岁患者；男、女性别之间比较差异无统计学意义。结论：血浆NPY含量测定有助于对颅脑损伤患者临床病情的评估和预后判定。

气虚血瘀证血浆NPY、ET、CGRP的改变及相关性研究

目的 :同步观察气虚血瘀证患者血浆神经肽Y(NPY)、内皮素 (ET)、降钙素基因相关肽 (CGRP)的变化及其意义。方法 :用放射免疫分析法 (RIA)检测了 5 8例气虚血瘀证患者、2 3例青年健康者、15例老年健康者的血浆NPY、ET、CGRP水平。结果 :气虚血瘀组血浆NPY、ET水平明显高于青年健康组和老年健康组 (P <0 .0 1) ,同时 ,其血浆CGRP水平显著低于青年健康组和老年健康组 (P <0 .0 1)。老年健康组与青年健康组间血浆NPY、ET、CGRP水平均无显著性差异 (P >0 .0 1)。气虚血瘀组、青年健康组和老年健康组血浆NPY与ET、CGRP水平均无相关性 (P >0 .0 1)。老年健康组和青年健康组血浆ET、CGRP水平呈显著正相关 (P <0 .0 1) ,气虚血瘀组血浆ET、CGRP水平呈显著负相关 (P <0 .0 1)。结论 :血浆NPY、ET水平上升、CGRP水平下降可作为气虚血瘀证的微观诊断指标之一 ,在一定程度上反映气虚血瘀证患者病情的轻重。同步观察气虚血瘀证患者血浆NPY、ET、CGRP水平的动态变化 ,可作为判断病情进展和疗效的指标。

老年疾病患者HPAA活动及其相关肽NPY水平与T淋巴细胞分裂原反应性

本文观察了4种老年疾病患者的 HPAA 活动及相关肽 NPY 水平与外周血 T 细胞分裂原反应性的关系.结果表明,脑出血、脑梗塞患者 HPAA 活动增强,并与 NPY 水平增加呈伴随关系,HPAA、NPY与受抑的 T 细胞分裂原反应性呈负相关(P<0.01)。糖尿病患者 NPY、CRF、ACTH 含量与健康人比较无明显差异,皮质醇水平升高(P<0.05),后者与受抑的 T 细胞分裂原反应性无明显相关(P>0.05)。而原发性高血压疾病患者 HPAA 及 NPY、T 细胞分裂原反应性与健康者比较均无明显差异(P>0.05).上述资料提示,老年疾患 HPAA 活动及 NPY 水平因病种而异,其中脑血管意外患者的免疫功能变化与 HPAA 活动及 NPY水平有关.

电针对青春期前后大鼠下丘脑NPY表达的影响

目的:电针(EA)对青春发育早期正常大鼠下丘脑促性腺激素释放激素(GnRH)具有显著降调节作用。为揭示该效应的内在机制,本研究观察了电针后不同发育阶段大鼠下丘脑神经肽Y(NPY)表达的作用,以确定NPY是否是抑制GnRH释放调控的重要因素之一。方法:在4个不同发育阶段,分别给予电针穴位组和电针非穴位组大鼠以低频电针(3 Hz)持续治疗10 d,每天20 min。10 d后,测定下丘脑NPY的表达。结果:电针穴位组青春发育早期大鼠下丘脑NPY的表达显著低于空白组(P<0.05);与大鼠下丘脑GnRH表达的变化相比,电针穴位组青春发育早期大鼠下丘脑NPY表达与GnRH表达的变化呈同向波动趋势;而NPY表达的下降不影响大鼠体重的增加。结论:低频电针可有效下调青春发育早期正常大鼠下丘脑NPY的表达,推测NPY不是大鼠青春发育早期下丘脑GnRH释放调控的关键因素。

急性脑梗死患者治疗前后血清NSE、血浆NPY水平检测的临床意义

目的:探讨了急性脑梗死患者血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)和血浆神经肽Y(NPY)水平的变化及临床意义。方法:应用放射免疫分析对38例急性脑梗死患者进行了血清NSE和血浆NPY水平测定,并以35名正常健康人作比较。结果:急性脑梗死患者血清NSE和血浆NPY水平非常显著地高于正常人组(P<0.01),经治疗3个月后血清NSE和血浆NPY仍有差异(P<0.05)。结论:急性脑梗死患者血清NSE和血浆NPY水平的变化与急性脑梗死的发病机理有密切的关系。

NPY在心血管疾病诊断和治疗中的临床应用

目的:为了研究血浆神经肽Y(NPY)在心血管疾病诊断和治疗中的临床应用。方法:利用放射免疫分析(RIA)检测了180例冠心病(CHD)心力衰竭(Ⅰ级46例,Ⅱ级45例,Ⅲ级48例,Ⅳ级41例)。89例急性心肌梗死(AMI)。167例高血压(58例原发性高血压,109例妊娠高血压综合征)和47例正常对照组的血清NPY水平并做了比较分析。结果:全部患者的血浆NPY明显高于对照组(P<0.05～0.001),180例CHD心力衰竭中,41例Ⅳ级心力衰竭血浆NPY明显高于Ⅲ级,Ⅲ级明显高于Ⅱ级,Ⅱ级明显高于Ⅰ级,从而表明随着心力衰竭的严重程度血浆NPY水平亦增高;妊娠高血压综合征血浆NPY的水平与心力衰竭的严重程度的变化一致。结论:血浆NPY是心血管疾病诊断和治疗中的有效指标。

COPD患者血清NPY含量及其临床意义

目的 :探讨慢性阻塞性肺病 (COPD)患者血清神经肽Y(NPY)水平的变化及其临床意义。方法 :采用放射免疫分析测定 4 0例COPD患者和 30例非COPD患者的血清NPY水平进行统计分析。结果 :COPD组血清NPY水平显著高于对照组 (130 36± 2 0 5 8) pg/mlvs (86 6 2± 13 0 2 ) pg/ml(t =10 .2 0 1,P <0 0 1)。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期COPD患者间神经肽Y水平有显著差异 (F =2 0 .334,P <0 0 1)。结论 :COPD患者血清NPY显著升高 ,且与分期相关。

妊高征肾病患者血浆ET-1、leptin和NPY检测的临床意义

目的:探讨了妊高征肾病患者血浆内皮素-1(ET-1)、leptin和NPY水平的变化及意义。方法:应用放射免疫分析对30例妊高征肾病患者进行了血浆ET-1、leptin和NPY测定,并与35名正常健康人作比较。结果:妊高征肾病患者血浆ET-1、leptin和NPY水平均显著高于正常人组(P<0.01),妊高征肾病患者血浆ET-1、leptin和NPY水平呈明显的正相关(r=0.5812、0.6015,P<0.01)。结论:检测妊高征肾病患者血浆ET-1、leptin和NPY水平的变化对了解病情、观察预后均具有重要的临床价值。

脑出血和脑梗死患者血浆NPY RIA和血脂分析的临床应用

目的:为了探讨急性脑出血和脑梗死患者血中NPY和血脂分析的临床意义。方法:48例急性脑出血患者、46例脑梗死患者、35例正常对照组中血浆NPY应用RIA,血脂分析采用生化法。结果:48例脑出血患者和46例脑梗死患者血浆NPY水平明显高于35例正常对照组(P<0.05)。血脂分析中,48例脑出血患者血清TC、TG、LDL-C和LP(a)水平明显低于正常对照组(P<0.05～0.01),HDL-C明显高于正常对照组(P<0.05),ApoA和ApoB与正常对照组无明显差异;46例脑梗死患者血清TC明显高于正常对照组(P<0.01),HDL-C和LDL-C明显低于正常对照组(P<0.05～0.01),TG、ApoA、ApoB、LP(a)与正常对照组无明显差异(P>0.05)。结论:血浆NPY参与脑出血和脑梗死的发生和发展过程,它和血脂分析具有非常重要的临床应用价值。

NPY和NT在子痫前期患者胎盘组织中的表达及意义

目的检测子痫前期患者胎盘组织中神经肽Y（NPY）及神经降压素（NT）表达的变化。探讨妊娠期高血压疾病的发病机制。方法采用亲合免疫细胞化学技术链霉素-生物素-过氧化物酶复合物技术（SABC法）对30例正常妊娠妇女（正常妊娠组），30例轻度子痫前期组，30例重度子痫前期组患者胎盘组织中的NPY及NT进行测定。结果各组胎盘组织中均有NPY和NT的表达。随着妊娠高血压疾病病情的加重，胎盘组织中NPY的表达逐渐升高。轻度子痫前期NPY表达强度显著高于正常妊娠组，差异有统计学意义（X^2=2．06，P〈0．05），重度子痫前期组NPY表达强度显著高于轻度子痫前期组，差异有统计学意义（X^2=2．25，P〈0．05）；重度子痫前期组NT的表达弱于正常妊娠组，差异有统计学意义（X2=2．34，P〈0．05），重度子痫前期NT的表达弱于轻度子痫前期组，差异有统计学意义（X^2=2．10，P〈0．05），轻度子痫前期与正常妊娠组NT表达强度比较差异无统计学意义（X^2=1．16，P〉0．05）。结论NPY与NT在胎盘组织中的表达情况与妊娠高血压疾病的轻重程度密切相关。

精神分裂症患者血浆神经肽Y（NPY）含量的研究

目的：探讨精神分裂症患者血浆神经肽Y（NPY）变化。方法：采用放射免疫法测定38例精神分裂症患者及20例正常对照者的血浆神经肽Y含量。结果：精神分裂症患者血浆神经肽Y含量较对照组低,差异非常显著（t=9.49,P〈0.01）。精神分裂症患者经氯氮平治疗4周,患者症状好转后,其血浆神经肽Y含量较治疗前显著升高（t=2.20,P〈0.05）。结论：精神分裂症患者存在NPY代谢异常;氯氮平等抗精神病药物对体内血浆NPY代谢有一定影响。