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文昌鱼神经胚cDNA文库的构建和hedgehog基因的筛选 被引量:4
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作者 张燕君 陈忠科 +1 位作者 任前升 张红卫 《动物学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第S1期106-109,共4页
提取青岛文昌鱼 18h时期神经胚mRNA ,以NotⅠ oligo (dT) 18为引物 ,反转录合成cDNA ,在双链cDNA的 5′连接EcoRⅠ衔接头 ,与带有NotⅠ和EcoRⅠ突出末端并经过 5′脱磷的λExCellNotⅠ /EcoRⅠ /CIP载体DNA进行连接 ,经体外包装和感染N... 提取青岛文昌鱼 18h时期神经胚mRNA ,以NotⅠ oligo (dT) 18为引物 ,反转录合成cDNA ,在双链cDNA的 5′连接EcoRⅠ衔接头 ,与带有NotⅠ和EcoRⅠ突出末端并经过 5′脱磷的λExCellNotⅠ /EcoRⅠ /CIP载体DNA进行连接 ,经体外包装和感染NM5 2 2宿主菌 ,得到了 3 6× 10 4个独立的重组噬菌体克隆。从中随机选取 2个克隆提取DNA ,NotⅠ、EcoRⅠ双酶切 ,电泳结果显示 2个克隆含有不同的插入片段。以α 32 P dCTP标记的文昌鱼hedgehog基因片段为探针 ,通过噬菌斑原位杂交对cDNA文库进行了两次筛选 ,得到了 16个阳性克隆。由此认为文昌鱼神经胚cDNA文库确已建立。 展开更多
关键词 文昌鱼 神经胚 CDNA文库 hedgehog基因
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青岛文昌鱼神经胚中期cDNA文库的构建 被引量:5
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作者 张燕君 陈忠科 张红卫 《山东大学学报(理学版)》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期101-106,共6页
提取青岛文昌鱼 1 8小时神经胚中期mRNA ,以 5′脱磷的NotⅠ oligo(dT) 18为引物 ,反转录合成cDNA .双链cDNA的 5′端钝端连接上带EcoRⅠ突出末端的衔接头 ,再经NotⅠ酶切 ,在cDNA的 3′端形成NotⅠ突出末端 .以SizeSep离心层析柱除去 4... 提取青岛文昌鱼 1 8小时神经胚中期mRNA ,以 5′脱磷的NotⅠ oligo(dT) 18为引物 ,反转录合成cDNA .双链cDNA的 5′端钝端连接上带EcoRⅠ突出末端的衔接头 ,再经NotⅠ酶切 ,在cDNA的 3′端形成NotⅠ突出末端 .以SizeSep离心层析柱除去 4 0 0bp以下的小分子 ,与带有NotⅠ和EcoRⅠ突出末端并经过 5′端脱磷的λExCellNotⅠ /EcoRⅠ /CIP载体DNA进行连接 ,经体外包装和感染NM52 2宿主菌 ,得到了 3.6× 1 0 4个独立的重组噬菌体克隆 .从中随机选取 2个克隆提取DNA ,NotⅠ、EcoRⅠ双酶切 ,电泳结果显示 2个克隆含有不同的插入片段 .以α 32 P dCTP标记的文昌鱼hedgehog基因片段为探针 ,通过噬菌斑原位杂交对cDNA文库进行了 2次筛选 ,得到了 1 6个阳性克隆 .由此认为文昌鱼神经胚cDNA文库确已建立 . 展开更多
关键词 青岛文昌鱼 神经胚 CDNA文库
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Retinoic acid induction of genes associated with neural tube developmental defects
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作者 Xinjun Li Zhong Yang +5 位作者 Yi Zeng Hong Xu Hongli Li Yangyun Han Xiaodong Long ,Chao You 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2010年第21期1629-1633,共5页
To date, little information has been available regarding genes involved in the regulation of embryonic cell development, which participate in retinoic acid-induced neural tube defects in mice. Previous studies have re... To date, little information has been available regarding genes involved in the regulation of embryonic cell development, which participate in retinoic acid-induced neural tube defects in mice. Previous studies have revealed seven differentially expressed genes involved in neural tube developmental defects. However, gene expression and regulation is a complex process. Therefore, gene expression differences between normal and defective neural tubes at 9.5 and 10.5 days were compared. A total of eight differentially expressed genes exhibited coincident alterations at embryonic 9.5 and 10.5 days. In mice with retinoic acid-induced neural tube defects, NeK7, IGFBP5 ZW10, Csf3r, PSMC6, Cdk5, and Rbl expressions were downregulated, but Apoa-4 expression was upregulated. These results were confirmed by Northern blot hybridization. Results suggested that NeK7, IGFBP5, ZW10, Csf3r, PSMC6, Cdk5, Rb1, and Apoa-4 are important regulatory factors involved in neural tube defects. 展开更多
关键词 neural tube defects neurula DNA microarray retinoic acid regulatory factor
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