新型ELISA检测戊型肝炎病毒IgM抗体的敏感度与特异度评价

目的 评估基于戊型肝炎病毒（HEV）主要免疫表位多肽及其截短多肽的新型ELISA检测抗HEV IgM的敏感度与特异度.方法 根据抗HEV抗体与主要免疫表位多肽的高反应性以及与截短多肽的不反应性,分别以两种多肽为包被抗原,建立新型ELISA法,检测2007-2012年收集的612例可疑HEV感染者血清抗HEV IgM,并与万泰HEV IgM抗体诊断试剂盒检测结果比较,结果不一致血清用免疫印迹法（Western blotting）确认,χ^2检验比较两种试剂灵敏度和特异度.结果 抗HEV IgM检测中,新型ELISA阳性326例,阴性286例;万泰试剂阳性370例,阴性242例;两种试剂同时阳性320例,同时阴性236例.在万泰试剂阳性而新型ELISA阴性的50例中,Western blotting证实阳性21例,阴性29例;在万泰试剂阴性而新型ELISA阳性的6例中,Western blotting显示阳性与阴性各3例.以两种试剂同时阳性或Western blotting阳性为标准,万泰试剂与新型ELISA灵敏度分别为99.1％（95％ CI：0.972-0.998）和93.8％（95％ CI：0.907-0.961）,差异有统计学意义（χ^2=13.988,P＜0.001）;特异度分别为89.2％（95％ CI：0.847-0.925）和98.9％（95％ CI：0.965-0.997）,差异有统计学意义（χ^2=22.466,P＜0.001）.结论 与万泰试剂相比,新型ELISA检测抗HEV IgM敏感度略低,但特异度较好,可减少抗HEV IgM检测中的假阳性.

间接ELISA检测新型鸭瘟病毒抗体

以50%饱和度的硫酸铵粗提病毒,再经SephadexG＿200过柱层析纯化了新型鸭瘟病毒,以此作为包被抗原,并用自制油苗免疫雏鸭,获得了高效价的血清抗体,又经过各种条件优化,建立了检测血清抗体的间接ELISA方法。经对不同发病日龄和免疫油苗后雏鸭的血清检测,证明该检测方法有很高的敏感性、特异性和重复性,可作为快速诊断该病的一种可靠方法。

新布尼亚病毒IgG抗体间接ELISA检测方法的建立

目的:建立基于间接ELISA法检测新布尼亚病毒Ig G抗体的血清学检测方法。方法:应用基因工程原核表达的新布尼亚病毒核蛋白,初步建立用于新布尼亚病毒Ig G抗体检测的间接ELISA法,用该方法对267例发热伴血小板减少综合征患者急性期和恢复期双份血清和198份标本进行检测,并与间接免疫荧光法的结果进行对比。结果:所建立的新布尼亚病毒Ig G抗体间接ELISA检测方法重复性好,与其他病毒无交叉反应。与间接免疫法对267例发热伴血小板减少综合征病例的实验室诊断结果有较好的一致性(Kappa=0.69),健康人血清检测阳性率为5.56%。结论:建立的间接ELISA方法适用于新布尼亚病毒感染的实验室诊断及流行病学调查。

用MAB-ELISA对仔猪母源猪瘟抗体的试验

用猪瘟兔化弱毒苗4头份免疫后的母猪3头,分别于分娩后定期日龄采血分离24头份血清样品;初生仔猪16头,分别于出生后定期日龄前腔静脉采血分离128头份血清样品,用单抗酶联免疫吸附试验检测血清猪瘟抗体滴度。结果表明,母猪猪瘟抗体效价持续较高,达100%保护率;哺乳前仔猪抗体效价为0,吃初乳后抗体水平不断提高,但抗体总体效价较低,仅有57.89%的保护率;仔猪20日龄前母源抗体水平差异较大,与母猪抗体水平不呈正相关。

西藏高校学生乙型肝炎表面抗原携带情况调查与分析

目的:了解西藏高校学生的乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的携带情况,并分析其相关因素。方法:应用酶联免疫法(ELISA)检测1890名入校新生的HBV血清标志物,利用SPSS15统计学软件进行数据的录入和分析,率之间采用χ2检验。结果:1890名大学新生,其中男性1011名,女性879名;藏族1100名,汉族及其他民族790名;检出HBsAg阳性者为242例,阳性率为12.8%(其中男生为14.0%,女生为11.4%),男女阳性率差异无统计学意义(χ2=3.000,P>0.05)。比较城乡生源的阳性率,发现不同生源地入校新生阳性率比较差异无统计学意义(其中城市12.8%、农村13.1%,χ2=0.035,P>0.05)。藏族与汉族HBsAg阳性率比较差异有统计学意义(藏族15.8%,汉族8.5%,χ2=21.213,P<0.001);藏族学生HBsAg阳性率分地区比较差异无统计学意义(拉萨14.8%、日喀则5.7%、林芝13.4%、山南14.4%,χ2=0.383,P>0.05)。结论:西藏高校学生乙肝表面抗原阳性率高于全国平均阳性率。应加强教育,定期注射乙肝疫苗,增强抗病能力,有效控制乙肝在高校的传播。

大连地区新生儿弓形虫感染的免疫学检测

目的 探讨大连地区新生儿弓形虫感染的情况。方法 采用酶联免疫吸附试验三联诊断法对 93例新生儿脐带血清标本进行弓形虫感染的血清学检测。结果 新生儿弓形虫各单项检测阳性率分别为循环抗原 (CAg)4 3%、IgM 2 2 %、IgG 1 5 1 %,新生儿弓形虫平均感染率为 1 9 4%,其中近期感染率为 5 4%。 结论 新生儿弓形虫感染的危险性很高 ,应开展孕妇血清学监测及时采取措施 ,有效地预防先天性弓形虫感染。

雏鸵鸟新城疫的快速诊治报告

根据临床症状、病理变化,采用新城疫单抗酶联免疫试剂盒对病死鸵鸟的泄殖腔及喉气管黏膜刮取样品进行快速检验,初步确诊为新城疫(ND)病毒感染。因此,对患病鸵鸟及未发病的鸵鸟分别按治疗量和预防量注射提纯的山羊抗鸡新城疫血清,配合抗生素治疗,使病鸵鸟康复,控制了疫情。通过进一步的病毒分离培养,新城疫标准阳性血清、鸡法氏囊及禽流感标准阳性血清的中和试验确诊为鸵鸟新城疫。

两种新型HBsAg基因的毕赤酵母表达载体构建及其表达

目的:从乙肝患者血清中发现2个有突变的乙型肝炎病毒株,从中扩增出HBsAg(乙肝表面抗原)基因,构建酵母表达载体,并在巴斯德毕赤酵母中表达,以鉴定这2个基因表达产物的活性。方法:利用PCR技术从乙肝患者血清中扩增出乙肝表面抗原基因,并将其连接到pPIC3.5K中,转化毕赤酵母,通过甲醇诱导,利用SDS-PAGE和ELISA检测表达的蛋白。结果:通过序列测定结果表明成功地构建了毕赤酵母表达载体,聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和ELISA证明这2个基因在毕赤酵母中能有效表达,且表达产物均具有生物活性。结论:从实验结果发现乙肝表面抗原决定簇以外的少数氨基酸变化不影响其活性。因此可以利用这2个基因对乙肝表面抗原进行表达。

滤纸片干血斑在HIV-1 BED-CEIA新发感染检测方法中的应用

目的探讨在HIV-1 BED-CEIA新发感染检测中应用滤纸片干血斑的价值。方法研究纳入22个艾滋病自愿咨询检测(VCT)中心10226名咨询者血浆及干血斑样本作为目标实施HIV抗体检测,对通过免疫印迹法(WB)明确诊断为350例HIV感染患者的血浆样本及干血斑样本需同时实施BED-CEIA检测,观察滤纸片干血斑在HIV-1 BED-CEIA新发感染检测方法中稳定性、重复性,对两种样本检测结果存在的差异性进行对比。结果在HIV-1 BED-CEIA新发感染检测中应用滤纸片干血斑稳定性、重复性较高,重复性R^(2)值可高达0.9551。350例HIV感染患者样本检测结果中,其中295例患者样本被同时评估为长期感染,53例患者样本被同时评估为新近感染,两种样本对HIV BED-CEIA新发感染评估判定结果呈一致性(R^(2)值=0.95),一致性为99.42%。血浆样本及干血斑样本得到不同结果,样本An值均处于临界值附近(P<0.05)。结论在HIV-1 BED-CEIA新发感染检测中应用滤纸片干血斑的价值较高,检测结果稳定性、重复性较好,虽然部分样本检测结果存在一定的差异,但与血浆样本检测结果两者之间存在较佳的等效性,可广泛应用于临床HIV-1 BED-CEIA新近感染检测中。

湖南省衡东县某高中部入学新生乙肝病毒感染状况调查

目的了解近年来高中生乙肝病毒感染状况,为该人群的今后预防对策提供依据。方法选择某高中部2006-2009年入学新生2 756名,用酶联免疫吸附（ELISA）法检测乙肝HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe和抗-HBc。结果 2 756份血清标本中HBsAg阳性率为4.46%;2006-2009年阳性率为5.67%-2.73%;男女性别间阳性率为3.08%、2.3%。检测出HBsAg阳性123份血清标本中5种感染模式,以HBsAg、抗-HBe、抗-HBc三项阳性最高为47.15%,其次HBsAg、抗-HBc二项阳性为28.46%,HBsAg、HBeAg、抗-HBc三项阳性为16.26%,HBsAg、HBeAg二项阳性4.88%和HBsAg阳性为3.25%。结论近年来高中新生HBsAg感染率呈逐年下降趋势;HBsAg阳性者中HBeAg阳性率为21.14%,是可能导致乙肝病毒传播的危险因素,加强对HBV携带者的管理和采取乙肝疫苗预防接种等措施,对高中新生乙型肝炎防治具有重要意义。

2011年莱州市部分健康人群和家养动物新布尼亚病毒抗体调查

目的了解莱州市发热伴血小板减少综合症病毒(简称:新布尼亚病毒,SFTSV)在莱州市健康人群和家养动物中的流行特点,为疫情预防和控制提供依据。方法采用分层随机抽样方法,采集莱州市不同年龄组健康人群血清1 065份,用间接法ELISA检测SFTSV IgG抗体,分析不同年龄组、性别、职业间抗体阳性率的差异;采用随机抽样的方法,采集莱州家养动物(牛、羊、狗、猪、鸡)血清1 752份,用双抗原夹心法ELISA检测血清中SFTSV总抗体,对不同生长环境动物SFTSV抗体阳性率进行比较。结果共检测健康人群血清1 065份,SFTSV IgG抗体阳性率3.29%(35/1 065);5种家养动物血清1 752份,SFTSV总抗体阳性率36.64%(642/1 752),其中牛、羊、狗、猪、鸡血清样本SFTSV总抗体阳性率分别为48.50%、54.00%、24.73%、0.00%和55.17%。健康人群中不同性别和年龄组间抗体阳性率差异均无统计学意义(P>0.05)、不同职业间抗体阳性率差异有统计学意义(P<0.05);不同动物间SFTSV总抗体阳性率差异有统计学意义(P<0.01),散养动物与圈养动物血清SFTSV总抗体阳性率差异有统计学意义(P<0.01)。结论莱州市为SFTSV流行地区,健康人群和家养动物中均存在SFTSV的流行,且对SFTSV普遍易感,从事农业生产的劳动者感染风险较高,应加强自我防范意识。