不同醛化方法制备的红细胞对鸡NDV血凝试验的影响

进行了不同醛化方法制备的红细胞对新城疫的血凝(HA)影响试验。结果表明:2种红细胞在新城疫HA试验中的结果基本一致;而且用PBS液和生理盐水作稀释液的试验结果也基本一致。

NDV对小鼠H_(22)腹水瘤治疗作用的探讨

肿瘤逃避机体免疫排斥的机制之一,是肿瘤细胞存在的肿瘤相关抗原的免疫原性较弱,不足以引起宿主有效的抗肿瘤免疫反应。NDV可以改变或影响瘤细胞的免疫原性,诱发和促进机体对肿瘤的排斥反应。本文探讨了新城疫病毒(new castle disease virus,NDV)对小鼠H_(22)腹水瘤的治疗作用。对照组接种H_(22)瘤细胞后第8d死亡1只,至第16d10只小鼠全部死亡,存活率为0％,平均存活14.1d。实验组注射瘤细胞后第12d死亡2只,至23d死亡9只,1只无瘤存活,存活率为10％。死亡鼠平均存活天数为18d,比对照组延长3.9d,两组相差显著(P<0.05)。实验结果表明NDV对小鼠H_(22)腹水瘤有治疗作用,能抑制小鼠H_(22)腹水瘤的生长,可延长小鼠生存时间。NDV可作治疗肿瘤的一种新生物制剂。

NDV-ATV对肿瘤患者术后免疫功能的影响

目的 探讨肿瘤患者术后NDV ATV治疗对免疫功能的影响。方法 采用流式细胞仪分析 115例术后接受NDV ATV治疗的肿瘤患者外周静脉血T淋巴细胞亚群及NK细胞的变化情况 ,并以 4 2例术后未接受NDV ATV治疗的肿瘤患者作为对照。结果 接受NDV ATV治疗的肿瘤患者 ,术后外周血中CD3+ 、CD4 + 所占比率、NK细胞活性和CD4 + /CD8+ 均较治疗前显著增高 (P<0 0 1) ,且明显高于未接受NDV ATV治疗的手术对照组患者 (P <0 0 5 )。结论 NDV

大肠癌患者术后NDV-ATV治疗对细胞免疫功能的影响

目的 探讨大肠癌患者术后NDV -ATV治疗对细胞免疫功能的影响。方法 采用流式细胞仪分析 70例术后接受NDV -ATV治疗的大肠癌患者外周静脉血T淋巴细胞亚群及NK细胞活性的变化情况 ,并与 45例术后未接受NDV -ATV治疗的大肠癌患者作为对照。结果 NDV -ATV治疗组 ,术后外周血CD+3、CD+4、NK细胞和CD+4 CD+8均较治疗前显著增高 (P <0 0 1 ) ,且明显高于未接受NDV -ATV治疗的术后常规治疗组 (P <0 0 5 )。结论 NDV

NDV-ATV联合化疗对消化道肿瘤患者免疫功能的影响

目的:探讨新城鸡瘟病毒修饰的自体肿瘤细胞疫苗特异性主动免疫(NDV-ATV)联合化疗治疗消化道肿瘤的临床应用价值及对患者免疫功能的影响。方法:消化道肿瘤患者术后36例治疗组给予NDV-ATV及化疗,与单用化疗对照组22例进行比较,对其疗效进行判断评价,检测治疗前后外周血T细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+比值变化及NK细胞的活性I、gAI、gMI、gG免疫球蛋白水平。结果:NDV-ATV联合化疗治疗组,患者外周血CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、NK细胞和免疫球蛋白水平均较治疗前显著增高(P<0.05),且明显高于未接受NDV-ATV治疗的对照组(P<0.05),而对照组无明显变化(P>0.05)。近期随诊也表明NDV-ATV联合化疗效果明显优于单纯化疗组(p<0.01)。结论:NDV-ATV可以改善消化道肿瘤患者的免疫功能,联合化疗可提高治疗效果。

NDV对雏鸵鸟肾脏超微结构影响的研究

为了探讨新城疫病毒(NDV)对雏鸵鸟肾脏超微结构的影响。以45天雏鸵鸟为试验动物,分正常组和攻毒组(皮下注射鸡新城疫标准毒株F48E9);利用透射电镜(TEM)技术,观察攻毒组鸵鸟肾脏的超微结构。结果表明:攻毒组鸵鸟肾脏肾小体和肾小管均有明显变化,肾小体内皮细胞肿胀,囊腔缩小,滤过屏障受损;肾小管以空泡变性为主,上皮细胞肿胀,微绒毛减少或断裂,胞核固缩、染色质呈块状边集于核膜下或溶解减少,胞浆内可见大量溶酶体,线粒体嵴断裂、空泡化。结果提示,鸡源NDV对雏鸵鸟肾脏高度敏感,可引起肾脏组织明显的病理组织学变化。

过氧乙酸戊二醛复方消毒剂对NDV和IBDV的杀灭试验

探讨过氧乙酸戊二醛复方消毒剂杀灭新城疫病毒(NDV)和传染性囊病病毒(IBDV)的效果,为鸡病毒性传染病的防治提供依据。分别采用鸡胚接种法、血凝试验和悬浮杀灭试验测定过氧乙酸戊二醛复方消毒剂对NDV和IBDV的杀灭效果。过氧乙酸戊二醛复方消毒剂灭活NDV、IBDV的有效浓度均为0.04%,最快有效时间分别为10 min和30 min。过氧乙酸戊二醛复方消毒剂可有效杀灭NDV和IBDV。在有效杀灭浓度范围内,随浓度的增高和作用时间的延长对NDV和IBDV的灭活效果增强。

NDV/IL-2治疗小鼠H_(22)腹水瘤的生存期结果分析

目的:探讨NDV/IL—2联合治疗小鼠H_(22)腹水瘤的协同增效作用,以提高对肿瘤的治疗效果。方法:将H_(22)腹水瘤细胞接种小鼠腹腔后分成Hanks液,IL—2,NDV,NDV/IL—2组,每组10只,分别用Hanks液,IL—2,NDV,NDV/IL—2治疗。结果:Hanks液组平均存活14.3d,存活率0.0％,IL-2组存活15.4d,存活率0.0％,NDV组存活23.5d,存活率20.0％,NDV/IL—2组存活23.6d,存活率30.0％。结论:NDV与NDV/IL—2组治疗小鼠H_(22)腹水瘤,疗效无显著差异(P>0.05),二者协同增效作用较差。

油橄榄渣对青脚麻鸡生产性能和免疫功能的影响

为研究日粮中添加不同浓度的油橄榄渣(olive cake,OC)对青脚麻鸡生产性能、免疫功能及新城疫抗体水平的影响。试验采用1日龄青脚麻鸡720只,随机分为对照组、3%OC组、5%OC组、7%OC组,每组6个重复,每个重复30只鸡。对照组饲喂正常玉米-豆粕型基础日粮,试验组在基础日粮中分别添加3%、5%和7%的OC,试验分两阶段进行,1~21 d为第一阶段,22~42 d为第二阶段。结果表明:1~21日龄阶段,日粮中添加不同浓度的OC均可提高青脚麻鸡的日增重、半净膛率、全净膛率、屠宰率、胸肌率和腿肌率,降低料重比。7%OC组青脚麻鸡的日绝对生长率显著高于对照组(P<0.05),料重比显著低于对照组;与对照组相比,3%OC组青脚麻鸡法氏囊指数显著增高(P<0.05),青脚麻鸡胸腺指数显著增高(P<0.05);5%OC组青脚麻鸡血清内新城疫抗体水平显著高于对照组(P<0.05)。22~42日龄阶段,日粮中添加不同浓度的OC均可促进青脚麻鸡的日绝对生长量、半净膛率、全净膛率、屠宰率、胸肌率和腿肌率,降低料重比。7%OC组青脚麻鸡的生产性能显著优于对照组(P<0.05);5%OC组青脚麻鸡免疫器官(法氏囊、胸腺、脾脏)指数显著大于对照组(P<0.05),血清内新城疫抗体水平显著高于对照组(P<0.05)。综上所述,本试验条件下,在日粮中添加合适剂量的OC可有效提高青脚麻鸡的生产性能、免疫功能和新城疫抗体水平,以日粮中添加5%的油橄榄渣为宜。

鸡脾转移因子的制备及对雏鸡免疫应答的作用研究

采用透析法提取鸡脾转移因子(TF)并对其理化性质、生物活性、安全性进行了研究.通过对小白鼠腹腔注射低剂量、中剂量和高剂量转移因子(TF),和对10日龄未免疫健康雏鸡接种新城疫疫苗和不同剂量TF,观察TF对鸡红细胞的吞噬率和吞噬指数的影响以及TF的细胞免疫和体液免疫作用.结果表明:TF小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的最高比例和最高吞噬指数均产生在中剂量组,分别为60%和1.9,TF能增强T淋巴细胞转化率,与对照组相比新城疫抗体水平可提高3～4个滴度.

短发夹结构RNA干扰新城疫病毒的增殖

以新城疫病毒(NDV)NP基因为标靶,构建3个细胞内表达发夹样结构小干扰RNA(shRNA)的质粒载体,在鸡胚成纤维细胞(CEF)和鸡胚上进行了RNAi试验,筛选出一个有效抑制病毒复制的小分子ndv1.用阳离子脂质体转染试剂Silent-fect将ndv1转染CEF,以不相关shRNA质粒载体HK为阴性对照,4h后接种NDV,与对照相比,干涉组在病毒感染后3hNP基因的表达量降低2.3倍,6h降低21.1倍,9h降低9.8倍;ndv1能在48h内完全阻断NDV在CEF中的增殖,延缓病变出现时间,减轻病变程度.将Silent-fect-ndv1混合物与NDV同时注入10日龄SPF鸡胚绒毛尿囊腔,能使105ELD50NDV感染后17h鸡胚尿囊液中病毒增殖量减少94.4%,使106ELD50 NDV感染后17h鸡胚尿囊液中病毒增殖量减少62.5%.实验结果证实,在CEF中存在RNAi机制,抑制ND VNP基因的表达能有效阻断该病毒增殖,说明NP基因在NDV复制过程中起重要作用.实验结果为进一步利用RNAi技术在CEF和鸡胚中研究病毒基因组功能及筛选抗病毒小分子奠定了基础.

新城疫病毒F_(48)E_(8)株融合蛋白基因的克隆

以提纯的我国标准ＮＤＶＦ４８Ｅ８强毒株基因组ＲＮＡ为模板、化学合成的融合蛋白（Ｆ）基因特异寡核苷酸为引物，反转录合成Ｆ基因ｃＤＮＡ，并采用同聚物加尾的方法克隆到细菌质粒ｐＧＥＭ３Ｚｆ（－）。经ＡＩＸ平板筛选和酶切分析，并用Ｆ基因片段核酸探针作ｄｏｔ－ｂｌｏｔ检测，共获得插入片段长度在０．６～２．８ｋｂ之间的阳性克隆３４个，其中插入片段大于１．５ｋｂ的阳性克隆８个。用多种限制性内切酶对阳性克隆ｐＦ７（１．８ｋｂ）作酶切分析，其结果与国外报道的几株Ｆ基因相符。

新城鸡瘟病毒诱导巨噬细胞TNF-α基因表达及其继承性抗肺转移作用的实验研究

本文报道了新城鸡瘟病毒(NDV-L)感染小鼠腹腔巨噬细胞(PEMΦ)后,可诱TNF-α其因的表达;将NDV-L激活的PEMΦ静脉输入荷B16黑色素瘤小鼠具有明显的抑制其肺转移的作用.

车前草多糖对雏鸡新城疫疫苗免疫效果的影响

为研究车前草多糖对雏鸡新城疫疫苗免疫效果的影响,将350只雏鸡随机分为7组,于8日龄、22日龄进行新城疫疫苗首免和二免,同时给予车前草多糖,并以黄芪多糖和铝胶盐佐剂作为对照,分别在首免后第7、14天,二免后第7、14、21天进行血清抗体效价和淋巴细胞增殖率的测定,于二免后第21天用新城疫病毒进行攻毒,连续观察10d内鸡的发病及死亡情况。结果显示,车前草多糖能显著提高雏鸡新城疫疫苗的免疫抗体效价、增强雏鸡的淋巴细胞增值率,与黄芪多糖的作用无显著性差异(P>0.05),但车前草多糖提高抗体效价作用较黄芪多糖、铝胶盐佐剂的维持时间长;在新城疫病毒攻毒后10 d,未免疫组雏鸡全部死亡,车前草多糖高、中剂量组的攻毒保护率为100%,车前草多糖低剂量和黄芪多糖的保护率为90%,而铝胶佐剂和ND疫苗免疫组的保护率仅为70%。试验结果表明,车前草多糖能提高新城疫疫苗的抗体效价水平和增强T淋巴细胞的增殖率。

鸡新城疫病毒强毒株的分离鉴定及生物学特性研究

从黑龙江省某地发病鸡群中分离出一株病毒APMV1/chicken/China/HLJ_2 / 0 2 ,分离毒为速发型NDV强毒株 ,对经典NDVLaSota株免疫的雏鸡及高抗体母鸡仍有很强的致病力。本研究对分离株进行了生物学特性研究 ,并对部分基因进行了序列测定 ,序列已经发送GeneBank ,序列号为AY2 0 86 95。采用NDV分离毒株制备成多价油乳剂灭活苗 。

应用RT-PCR和病毒学方法诊断山东省鸡新城疫感染的比较研究

分别应用病毒分离和区分新城疫强弱毒株的RT-PCR技术,对山东各地疑似鸡新城疫感染的25份病料进行了实验室诊断。结果表明:从18份病料中既扩增到了新城疫强毒基因,也分离到了新城疫病毒;3份病料未分离到病毒,仅扩增到了新城疫强毒基因;4份病料分离到了新城疫病毒,但未检测到相关基因。研究表明,将RT-PCR和病毒分离鉴定两种方法相结合,可更好的满足快速、灵敏、准确的新城疫诊断要求。

蒙东地区蛋鸡新城疫免疫效果监测及分析

对蒙东地区25家蛋鸡养殖场12 400羽蛋鸡的新城疫免疫情况及免疫效果进行跟踪监测及对比分析,结果所有蛋鸡群的新城疫抗体效价和免疫合格率均符合农业部规定标准;产蛋前采用新城疫Ⅰ系+灭活苗免疫的鸡群抗体效价及生产性能要优于用Ⅳ系+灭活苗免疫的鸡群;产蛋期不免疫新城疫的鸡群,其抗体效价、免疫合格率和生产性能均较高;产蛋期免疫越频繁,蛋鸡的抗体水平和生产性能越低。表明鸡群产蛋前采用新城疫Ⅰ系+灭活苗的方式免疫效果较好;产蛋期间不宜频繁免疫新城疫疫苗;新城疫抗体水平的高低与鸡群的健康状况及安全生产指数存在正相关。

LT粘膜佐剂对鸡新城疫疫苗的免疫增强作用研究

研究大肠杆菌热敏性肠毒素突变体蛋白(heat-labile enterotoxin,LTRG)对鸡新城疫(Newcastle disease virus,NDV)疫苗经不同途径接种效果的影响。以NDV LaSota株作为共免疫原,与LTRG重组蛋白经滴鼻、口服及肌肉注射三种途径接种雏鸡,通过血清IgG抗体、HI抗体及粘膜分泌型IgA抗体水平变化,评价不同途径接种LTRG对NDV疫苗的免疫效果的影响。结果显示:①三种途径接种,LTRG均能显著增强NDV疫苗的免疫抗体水平,免疫雏鸡血清抗体和粘膜抗体水平均高于NDV疫苗单独免疫组;②LTRG对NDV疫苗免疫增强作用,以滴鼻接种最显著:二、三免后LTRG+NDV滴鼻组与NDV组血清IgG、粘膜IgA差异均显著(P<0.01、P<0.05);LTRG+NDV口服与NDV组血清IgG差异不显著(P>0.05)、粘膜IgA差异极显著(P<0.01);LTRG+NDV肌注与NDV组IgG差异不显著(P>0.05)、粘膜IgA差异显著(P<0.05);③三种免疫途径比较:血清IgG抗体水平差异均不明显(P>0.05);滴鼻、口服免疫可诱导雏鸡产生较高的粘膜IgA抗体、血清HI抗体。由此可见:LTRG粘膜佐剂对NDV疫苗免疫增强作用,以粘膜(滴鼻、口服)途径接种效果最为显著,能诱导高水平的粘膜IgA抗体及血清抗体。

强毒鸡新城疫病毒的分离鉴定及免疫防制研究

从陕西发病鸡群中分离出8株病毒,分离毒大多为速发型NDV强毒株,对经典NDVLaSota株免疫的雏鸡及52周龄高抗体母鸡仍有强的致病力。采用NDVSH1-SH8毒株制备成多价油乳剂灭活苗,免疫鸡群有良好的保护力。

肉鸽新城疫并发葡萄球菌感染的诊治

对陕西咸阳某鸽场的疑似新城疫发病鸽群经临床诊断和实验诊断 ,确诊为新城疫并发葡萄球菌感染。用VG/GA 株新城疫疫苗与鸽新城疫油乳剂灭活疫苗同时进行紧急预防接种 ,并应用氨苄青霉素、维生素B1以及复合维生素 ,死亡率控制在 4 5 % ,病程缩短为 12d。