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Studies on Synthesis of Stationary Phase Containing Nicotinamide Adenine Dinucleotide(NAD) Bonded to Phospholipid-Coated Aminated Silica for HPLC
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作者 Jin Mao YOU Zong Qin RUAN Jing Wu KANG (Lanzhou Institute of Chemical Physics, Chinese Academy of Sciences, 730000) 《Chinese Chemical Letters》 SCIE CAS CSCD 1997年第3期243-246,共4页
Recently biospecific affinity chromatography has been widely used for the separation and purification of various enzymes and nucleic acids. In this paper, a series of synthetic reactions of solid-liquid phase were car... Recently biospecific affinity chromatography has been widely used for the separation and purification of various enzymes and nucleic acids. In this paper, a series of synthetic reactions of solid-liquid phase were carried out on silica surface, using a macroporous(30 mu m), microspherical silica (8 mu m) as the matrix and gamma-aminopropyltriethoxysilane as the activating agent, the nicotinamide adenine dinucleotide(NAD) was bonded through its amino groups to the carboxylic groups of linked phospholipid which was bonded covalently on aminated support. The bonded stationary phase has high thermal stability, and could be used to separate of nucleotides with good resolution. 展开更多
关键词 nad Bonded to Phospholipid-Coated Aminated Silica for HPLC Studies on Synthesis of Stationary Phase Containing nicotinamide adenine dinucleotide
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NADPH氧化酶4在心血管损伤中的作用机制
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作者 石丹丹 宁梓淇 +1 位作者 刘美霞 刘剑刚 《心血管病学进展》 CAS 2024年第2期136-140,共5页
心血管结构和功能损伤是许多心血管疾病的重要病理基础,许多研究表明氧化应激在缺血性心脏病、动脉粥样硬化、高血压等诸多病理性心血管损伤中发挥重要作用。NADPH氧化酶(Nox)是调控氧化还原信号的关键酶,而血管内的活性氧主要来源于Nox... 心血管结构和功能损伤是许多心血管疾病的重要病理基础,许多研究表明氧化应激在缺血性心脏病、动脉粥样硬化、高血压等诸多病理性心血管损伤中发挥重要作用。NADPH氧化酶(Nox)是调控氧化还原信号的关键酶,而血管内的活性氧主要来源于Nox4。随着研究的不断深入,发现Nox4在不同阶段或不同刺激下会发挥不同甚至截然相反的作用,如双向调节动脉粥样硬化的进展、双向作用影响血压等。现总结Nox4在不同心血管损伤中的不同影响及作用机制,为后续的研究提供一定的理论基础。 展开更多
关键词 nadPH氧化酶4 活性氧 心血管损伤
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Panax Notoginseng Saponins Inhibits Atherosclerotic Plaque Angiogenesis by Down-Regulating Vascular Endothelial Growth Factor and Nicotinamide Adenine Dinucleotide Phosphate Oxidase Subunit 4 Expression 被引量:13
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作者 乔云 张鹏举 +5 位作者 鹿晓婷 孙巍巍 刘桂林 任敏 闫磊 张继东 《Chinese Journal of Integrative Medicine》 SCIE CAS CSCD 2015年第4期259-265,共7页
Objective: To investigate the mechanism of Panax notoginseng saponins (PNS), an effective component extracted from Panax notoginseng, on atherosclerotic plaque angiogenesis in atherosclerosis-prone apolipoprotein E... Objective: To investigate the mechanism of Panax notoginseng saponins (PNS), an effective component extracted from Panax notoginseng, on atherosclerotic plaque angiogenesis in atherosclerosis-prone apolipoprotein E-knockout (ApoE-KO) mice fed with high-fat, high-cholesterol diet. Methods: Twenty ApoE-KO mice were divided into two groups, the model group and the PNS group. Ten normal C57BL/6J mice were used as a control group. PNS (60 mg/kg) was orally administered daily for 12 weeks in the PNS group, The ratio of plaque area to vessel area was examined by histological staining. The tissue sample of aortic root was used to detect the CD34 and vascular endothelial growth factor (VEGF) expression areas by immunohistochemistry. The expression of VEGF and nicotinamide adenine dinucleotide phosphate oxidase subunit 4 (NOX4) were measured by reverse transcription polymerase chain reaction and Westem blotting respectively. Results: After treatment with PNS, the plaque areas were decreased (P〈0.05). CD34 expressing areas and VEGF expression areas in plaques were significantly decreased (P〈0.05). Meanwhile, VEGF and NOX4 mRNA expression were decreased after treatment with PNS, VEGF and NOX4 protein expression were also decreased by about 72% and 63%, respectively (P〈0.01). Conclusion: PNS, which decreases VEGF and NOX4 expression, could alleviate plaque angiogenesis and attenuate atherosclerosis. 展开更多
关键词 Panax notoginseng saponins ATHEROSCLEROSIS plaque angiogenesis vascular endothelial growth factor nicotinamide adenine dinucleotide phosphate oxidase subunit 4
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NADPH氧化酶4抑制剂对缺氧诱导的人RPE细胞中VEGF表达的抑制作用 被引量:1
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作者 李静 杨静 康前雁 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期4-9,共6页
目的观察还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化酶4(NOX4)抑制剂对缺氧诱导的人视网膜色素上皮(RPE)细胞中血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法将APRE-19细胞分为Avastin干预组和VAS2870干预组,并按照药物剂量不同将Avastin干预组亚分为... 目的观察还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化酶4(NOX4)抑制剂对缺氧诱导的人视网膜色素上皮(RPE)细胞中血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法将APRE-19细胞分为Avastin干预组和VAS2870干预组,并按照药物剂量不同将Avastin干预组亚分为常氧对照组、缺氧对照组及0.25 mg/ml、0.50 mg/ml和0.75 mg/ml Avastin干预组,将VAS2870干预组亚分为1μmol/ml、3μmol/ml和5μmol/ml VAS2870干预组,缺氧对照组采用终浓度为300μmol/L CoCl2处理ARPE-19细胞以建立细胞化学缺氧模型。采用细胞免疫荧光染色技术对不同干预组细胞中NOX4和VEGF表达进行测定和定位,采用Western blot法对不同干预组细胞中NOX4和VEGF蛋白相对表达量进行测定和比较。结果Western blot法检测显示,常氧对照组、缺氧对照组及0.25 mg/ml、0.50 mg/ml和0.75 mg/ml Avastin干预组NOX4蛋白相对表达量分别为0.657±0.153、1.000±0.200、1.206±0.300、1.260±0.200和1.413±0.273,VEGF-A蛋白相对表达量分别为0.821±0.110、1.210±0.100、0.672±0.100、0.340±0.120和0.300±0.130,组间总体比较差异均有统计学意义(F=17.631,P<0.001;F=4.777,P=0.020),其中0.75 mg/ml Avastin干预组细胞中NOX4蛋白表达量明显高于常氧对照组,差异有统计学意义(P<0.001),0.25、0.50和0.75 mg/ml Avastin干预组VEGF-A表达量均明显低于缺氧对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。常氧对照组、缺氧对照组及1μmol/ml、3μmol/ml和5μmol/ml VAS2870干预组细胞中NOX4的蛋白相对表达量分别为0.970+0.120、1.060+0.130、0.880+0.130、0.567+0.135和0.450+0.120,VEGF-A蛋白相对表达量分别为0.387+0.135、0.627+0.125、0.370+0.140、0.363+0.140和0.160+0.100,组间总体比较差异均有统计学意义(F=12.933,P<0.001;F=4.948,P<0.05),其中3μmol/ml和5μmol/ml VAS2870干预组细胞中NOX4蛋白相对表达量明显低于缺氧对照组,差异均有统计学意义(均P<0.001);1μmol/ml、3μmol/ml和5μmol/ml VAS2870干预组细胞中VEGF-A蛋白相对表达量明显低于缺氧对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论NOX4抑制剂可抑制人RPE细胞中VEGF-A表达。 展开更多
关键词 缺氧 视网膜色素上皮细胞 还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化酶4 血管内皮生长因子 抑制剂
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Nicotinamide adenine dinucleotide(NAD^(+))reduction enabled by an atomically precise Au-Ag alloy nanocluster
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作者 Ling Chen Yonglei Du +6 位作者 Ying Lv Daoqing Fan Junfei Wu Lingbao Wu Mengting Cui Haizhu Yu Manzhou Zhu 《Nano Research》 SCIE EI CSCD 2023年第5期7770-7776,共7页
The redox property of the ultrasmall coinage nanoclusters(with several to tens of Au/Ag atoms)has elucidated the electrontransfer capacity of nanoclusters,has been successfully utilized in a variety of redox conversio... The redox property of the ultrasmall coinage nanoclusters(with several to tens of Au/Ag atoms)has elucidated the electrontransfer capacity of nanoclusters,has been successfully utilized in a variety of redox conversions(such as from CO_(2)to CO).Nevertheless,their biological applications are mainly restricted by the scarcity of atomically precise,water-soluble metal nanoclusters,the limited application(mainly on the decomposition of H_(2)O_(2)in these days).Herein,mercaptosuccinic acid(MSA)protected ultrasmall alloy AuAg nanoclusters were prepared,the main product was determined[Au_(3)Ag_(5)(MSA)_(3)]−by electrospray ionization mass spectrometry(ESI-MS).The clusters can not only mediate the decomposition of H_(2)O_(2)to generate hydroxyl radicals,but is also able to mediate the reduction of nicotinamide adenine dinucleotide(NAD)to its reduced form of NADH.This is the first time that the atomically precise metal nanoclusters were used to mediate the coenzyme reduction.The preliminary mechanistic insights imply the reaction to be driven by the hydrogen bonding between the carboxylic groups(on the surface of MSA)and the amino N–H bonds(on NAD).In this context,the presence of the carboxylic groups,the sub-nanometer size regime(~1 nm),the synergistic effect of the Au-Ag clusters are pre-requisite to the NAD reduction. 展开更多
关键词 redox-activity alloy AuAg nanocluster nicotinamide adenine dinucleotide(nad)reduction synergistic effect size-effect
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血清NOX4 MUC1表达水平与Ⅲ期非小细胞肺癌患者放疗疗效及随访1年总生存率的关系研究
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作者 陆珏 蔡梦娇 张莹冰 《河北医学》 CAS 2024年第12期2028-2033,共6页
目的:研究血清还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(NOX4)、黏蛋白1(MUC1)表达水平与Ⅲ期非小细胞肺癌(NSCLC)患者放疗疗效及随访1年总生存率的关系。方法:选取2020年4月至2023年3月我院收治的102例Ⅲ期NSCLC患者,均进行放疗干预,并... 目的:研究血清还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(NOX4)、黏蛋白1(MUC1)表达水平与Ⅲ期非小细胞肺癌(NSCLC)患者放疗疗效及随访1年总生存率的关系。方法:选取2020年4月至2023年3月我院收治的102例Ⅲ期NSCLC患者,均进行放疗干预,并在放疗前检测血清NOX4、MUC1水平,另选择51例健康志愿者作为对照,比较两组血清NOX4、MUC1水平,以及放疗前不同临床特征的Ⅲ期NSCLC患者血清NOX4、MUC1水平。根据放疗效果将Ⅲ期NSCLC患者分为疗效良好组和疗效不佳组,对比两组血清NOX4、MUC1水平。所有患者均进行随访,以中位血清NOX4、MUC1水平为界,比较不同血清NOX4、MUC1水平的患者1年总生存率,并采用单因素和多因素Cox回归分析Ⅲ期NSCLC患者1年生存的影响因素。结果:NSCLC组血清NOX4、MUC1水平均高于对照组(P<0.05)。放疗前不同性别、年龄、体质指数(BMI)、肿瘤位置、肿瘤最大直径、病理分型的Ⅲ期NSCLC患者血清NOX4、MUC1水平比较差异均无统计学意义(P>0.05)。本次102例Ⅲ期NSCLC患者放疗结果显示,疗效良好组例数为55例,疗效不佳组例数为47例。疗效良好组血清NOX4、MUC1水平低于疗效不佳组(P<0.05)。高水平NOX4组患者1年总生存率低于低水平NOX4组(P<0.05),高水平MUC1组患者1年总生存率低于低水平MUC1组(P<0.05)。单因素和多因素Cox回归分析结果显示,血清NOX4、MUC1水平是Ⅲ期NSCLC患者放疗后1年生存的影响因素(P<0.05)。结论:Ⅲ期NSCLC患者血清NOX4、MUC1表达水平与其放疗疗效及随访1年总生存率有关,检测血清NOX4、MUC1水平有利于辅助评估患者放疗疗效和早期预后生存情况。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 Ⅲ期 放疗 还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4 黏蛋白1
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NOX4 promotes tumor progression through the MAPK-MEK1/2-ERK1/2 axis in colorectal cancer
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作者 Yu-Jie Xu Ya-Chang Huo +4 位作者 Qi-Tai Zhao Jin-Yan Liu Yi-Jun Tian Lei-Lei Yang Yi Zhang 《World Journal of Gastrointestinal Oncology》 SCIE 2024年第4期1421-1436,共16页
BACKGROUND Metabolic reprogramming plays a key role in cancer progression and clinical outcomes;however,the patterns and primary regulators of metabolic reprogramming in colorectal cancer(CRC)are not well understood.A... BACKGROUND Metabolic reprogramming plays a key role in cancer progression and clinical outcomes;however,the patterns and primary regulators of metabolic reprogramming in colorectal cancer(CRC)are not well understood.AIM To explore the role of nicotinamide adenine dinucleotide phosphate oxidase 4(NOX4)in promoting progression of CRC.METHODS We evaluated the expression and function of dysregulated and survival-related metabolic genes using Gene Ontology and Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes.Consensus clustering was used to cluster CRC based on dysregulated metabolic genes.A prediction model was constructed based on survival-related metabolic genes.Sphere formation,migration,invasion,proliferation,apoptosis and clone formation was used to evaluate the biological function of NOX4 in CRC.mRNA sequencing was utilized to explore the alterations of gene expression NOX4 over-expression tumor cells.In vivo subcutaneous and lung metastasis mouse tumor model was used to explore the effect of NOX4 on tumor growth.RESULTS We comprehensively analyzed 3341 metabolic genes in CRC and identified three clusters based on dysregulated metabolic genes.Among these genes,NOX4 was highly expressed in tumor tissues and correlated with worse survival.In vitro,NOX4 overexpression induced clone formation,migration,invasion,and stemness in CRC cells.Furthermore,RNA-sequencing analysis revealed that NOX4 overexpression activated the mitogen-activated protein kinase-MEK1/2-ERK1/2 signaling pathway.Trametinib,a MEK1/2 inhibitor,abolished the NOX4-mediated tumor progression.In vivo,NOX4 overexpression promoted subcutaneous tumor growth and lung metastasis,whereas trametinib treatment can reversed the metastasis.CONCLUSION Our study comprehensively analyzed metabolic gene expression and highlighted the importance of NOX4 in promoting CRC metastasis,suggesting that trametinib could be a potential therapeutic drugs of CRC clinical therapy targeting NOX4. 展开更多
关键词 Colorectal cancer Metabolic reprogramming METASTASIS nicotinamide adenine dinucleotide phosphate oxidase 4 Mitogen-activated protein kinase signaling
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生物细胞内NAD水平分析技术的研究进展
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作者 徐涛 金磊 夏鹏志 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期1076-1085,共10页
烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)是所有活细胞中普遍存在的关键辅助分子,在细胞代谢中担任着重要角色。NAD是细胞能量合成过程中的重要因子,参与DNA损伤修复,调控细胞内钙离子浓度等重要生命过程,在细胞的代谢反应中发挥着关键的作用。关于... 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)是所有活细胞中普遍存在的关键辅助分子,在细胞代谢中担任着重要角色。NAD是细胞能量合成过程中的重要因子,参与DNA损伤修复,调控细胞内钙离子浓度等重要生命过程,在细胞的代谢反应中发挥着关键的作用。关于生物细胞内NAD检测的研究一直是近20年生命科学研究中的热点之一。该文从NAD结构特性、合成途径角度着手,总结了国内外关于生物细胞NAD水平检测方法的研究进展,详细介绍了各种方法的原理、优缺点及适用范围并展望了其发展趋势,以期为相关研究提供参考。 展开更多
关键词 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(nad)水平 代谢流程 结构特性 检测方法 综述
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手性NAD类似物合成及其辅酶应用 被引量:1
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作者 李青 刘武军 +2 位作者 郭潇佳 王倩 赵宗保 《化工进展》 EI CAS CSCD 北大核心 2021年第9期5214-5221,共8页
烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)是生命体中必不可少的氧化还原辅因子。NAD具有β-NAD和α-NAD两种差向异构体,而大多数NAD依赖酶偏好β-NAD。近年来,已合成大量结构简化的NAD类似物,并探索其作为氧化还原辅因子应用于生物催化反应。通常认... 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)是生命体中必不可少的氧化还原辅因子。NAD具有β-NAD和α-NAD两种差向异构体,而大多数NAD依赖酶偏好β-NAD。近年来,已合成大量结构简化的NAD类似物,并探索其作为氧化还原辅因子应用于生物催化反应。通常认为酶天然具有立体选择性,而很多结构简化的NAD类似物不含手性中心,暗示有必要合成手性NAD类似物以评估其性能。本研究拟设计合成手性NAD类似物,并初步探讨部分氧化还原酶利用它们作为辅酶的催化性能。以商品化光学纯的氨基-3-苯基丙酸为手性原料,合成了两对NAD类似物对映体,并用来源于巨芽孢杆菌的突变型细胞色素P450单加氧酶(P450 BM3 R966D/W1046S)和来源于硫化叶菌的突变型葡萄糖脱氢酶(SsGDH I192T/V306I),测试这些NAD类似物作为辅酶的催化活性。结果发现,P450 BM3 R966D/W1046S利用还原型S构型NAD类似物的催化效率高于对应的R构型NAD类似物;而SsGDH I192T/V306I则对NAD类似物对映体均没有活性。研究初步表明,氨基酸可作为手性原料制备立体构型明确的NAD类似物,而氧化还原酶表现出偏好特定手性NAD类似物的现象,也提示需要合成更多的手性NAD类似物,并系统测试和匹配氧化还原酶及其突变体,以创建出基于辅酶依赖型氧化还原酶的新催化体系。 展开更多
关键词 生物催化 辅酶 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸类似物 立体化学 氧化还原酶
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鼻咽癌组织中NOX4、miR-421的表达水平及其与患者临床病理特征和放疗敏感性的相关性 被引量:1
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作者 陈梅林 苏贞绍 +2 位作者 韦霞琳 梁丹 林栓全 《广西医学》 CAS 2022年第17期1945-1949,共5页
目的探讨鼻咽癌组织中烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(NOX4)、miR-421的表达水平及其与患者临床病理特征和放疗敏感性的相关性。方法选取50例鼻咽癌患者(病例组)和30例慢性鼻咽炎患者(对照组)。系统治疗前取两组患者鼻咽部病变组织,... 目的探讨鼻咽癌组织中烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(NOX4)、miR-421的表达水平及其与患者临床病理特征和放疗敏感性的相关性。方法选取50例鼻咽癌患者(病例组)和30例慢性鼻咽炎患者(对照组)。系统治疗前取两组患者鼻咽部病变组织,采用免疫组化法检测NOX4表达情况,采用实时荧光定量PCR检测miR-421表达水平。分析鼻咽癌病变组织中的NOX4表达情况和miR-421表达水平与患者临床病理特征的关系。在放疗结束后3个月对鼻咽癌患者进行放疗敏感性评价,分析鼻咽癌组织中NOX4表达情况和miR-421表达水平与放疗敏感性的关系。结果病例组病变组织中的NOX4阳性表达率和miR-421表达水平均高于对照组(均P<0.05)。T_(3~4)期、N_(2~3)期、M_(1)期、Ⅲ~Ⅳ期鼻咽癌患者病变组织中的NOX4阳性表达率和miR-421表达水平均分别高于T_(1~2)期、N_(0~1)期、M_(0)期、Ⅰ~Ⅱ期鼻咽癌患者(均P<0.05)。放疗敏感的鼻咽癌患者病变组织中的NOX4阳性表达率和miR-421表达水平均低于放疗不敏感的鼻咽癌患者(均P<0.05)。结论鼻咽癌患者病变组织中NOX4、miR-421表达水平升高,NOX4、miR-421表达水平与鼻咽癌患者的临床病理特征、放疗敏感性密切相关。 展开更多
关键词 鼻咽癌 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4 微小RNA-421 临床病理特征 放疗敏感性
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NAD^+在纳米金胶上的组装、表征及其应用研究 被引量:2
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作者 顾海鹰 《淮阴师范学院学报(自然科学版)》 CAS 2002年第2期48-53,共6页
将NAD+ 固定在纳米金胶 半胱胺修饰的金电极表面构建一种新型的纳米仿生功能界面 ,用电化学交流阻抗、反射紫外 可见光谱和电化学分析法对其组装过程以及活性进行了表征 .基于这种功能界面构建的新型酶生物传感器对乳酸的电催化响应呈... 将NAD+ 固定在纳米金胶 半胱胺修饰的金电极表面构建一种新型的纳米仿生功能界面 ,用电化学交流阻抗、反射紫外 可见光谱和电化学分析法对其组装过程以及活性进行了表征 .基于这种功能界面构建的新型酶生物传感器对乳酸的电催化响应呈现良好的线性 ,米氏常数为 8.8μmol/L ,检测限为 6.0× 1 0 -8mol/L (S/N =3) ,且对NAD+ 展开更多
关键词 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(辅酶 nad^+) 乳酸 生物传感器 纳米仿生功能界面 金胶
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NOX4对高糖代谢乳腺癌细胞侵袭转移能力的作用
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作者 李雪娜 尹雅芙 +1 位作者 杜补林 李亚明 《同位素》 CAS 2016年第2期76-81,共6页
利用2-氟[18F-2]脱氧葡萄糖([18 F]fluorodeoxyglucose,18F-FDG)乳腺癌细胞摄取实验筛选高糖酵解率的乳腺癌细胞;采用基因沉默技术,降低细胞烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(NOX 4)表达;采用免疫印迹方法检测三组细胞(空白对照组、非... 利用2-氟[18F-2]脱氧葡萄糖([18 F]fluorodeoxyglucose,18F-FDG)乳腺癌细胞摄取实验筛选高糖酵解率的乳腺癌细胞;采用基因沉默技术,降低细胞烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(NOX 4)表达;采用免疫印迹方法检测三组细胞(空白对照组、非特异性siRNA转染组和特异性NOX 4-siRNA转染组)的上皮间质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)相关分子HIF-1α和TGF-β表达水平;通过细胞侵袭实验分析三组细胞的侵袭能力差异。结果显示,高侵袭力的MDA-MB-231较低侵袭力的MCF-7乳腺癌细胞系具有高糖酵解率(t=10.52,P<0.05);抑制MDA-MB-231细胞的NOX 4表达,降低了细胞EMT相关因子HIF-1α、TGF-β表达(P均<0.01)与细胞侵袭能力(t=-8.0,P<0.01)。本研究初步证实NOX 4失活能够降低高糖代谢乳腺癌细胞的侵袭转移能力。 展开更多
关键词 乳腺癌 氟18-脱氧葡萄糖 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4 肿瘤转移
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慢性阻塞性肺疾病早期远端肺小动脉重塑及相关NOX4表达水平研究
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作者 高超 郭晓桐 +3 位作者 郝斌威 曹霞 范玉春 陈娟 《宁夏医科大学学报》 2022年第2期133-140,共8页
目的研究慢性阻塞性肺疾病(COPD)早期远端肺小动脉重塑情况及还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(NOX4)在肺小动脉的表达水平。方法收集2018年9月至2020年3月宁夏医科大学总医院收治的需行手术治疗的肺部肿瘤患者,根据术前肺功能及... 目的研究慢性阻塞性肺疾病(COPD)早期远端肺小动脉重塑情况及还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(NOX4)在肺小动脉的表达水平。方法收集2018年9月至2020年3月宁夏医科大学总医院收治的需行手术治疗的肺部肿瘤患者,根据术前肺功能及入组标准将受试者分为COPD组(24例)及对照组(20例),所有受试者术前均行心脏彩超检查以明确有无肺动脉高压。(1)术中取病变周围正常的肺组织,使用а-平滑肌肌动蛋白抗体(а-SMA)标记肺动脉平滑肌细胞。采用Image-Pro Plus software 6.0(IPP)图像分析软件测量远端肺小动脉(血管横断面外径为100~500μm)血管平滑肌层厚度(WT)、血管外径、血管平滑肌层面积(WA)、血管总面积;采用免疫组织化学法、蛋白免疫印迹法(Western blot)检测目的蛋白表达,应用IPP软件半定量计算目的蛋白平均光密度(AOD)值。(2)培养人原代肺动脉平滑肌细胞(HPASMC),使用重组人转化生长因子-β1(TGF-β1,2 ng·mL^(-1))蛋白作用于HPASMC,以检测目的蛋白表达。结果COPD组患者肺小动脉WT、平滑肌层厚度占血管外径的百分比(WT%)、平滑肌层面积占血管总面积百分比(WA%)均较对照组增高(P均<0.05)。COPD组肺小动脉平滑肌Ⅰ型胶原蛋白(Collagen I)、Ⅳ型胶原蛋白(CollagenⅣ)、层粘连蛋白(LN)、纤维连接蛋白(FN)、а-SMA及NOX4 AOD值均较对照组增强(P均<0.05),COPD组患者肺组织а-SMA、NOX4蛋白表达较对照组增强(P均<0.05)。肺动脉重塑指标WA%、WT%与第一秒用力呼气容积/用力肺活量(FEV1/FVC)、第一秒用力呼气容积占预计值百分比(FEV1%pred)均呈负相关(P均<0.05)。肺小动脉平滑肌CollagenⅠ、CollagenⅣ、LN、FNAOD值与FEV1/FVC、FEV1%pred均呈负相关(P均<0.05)。免疫细胞化学法、免疫细胞荧光法检测TGF-β1(2 ng·mL^(-1))作用于HPASMC 24 h后,NOX4、а-SMA、CollagenⅠ蛋白AOD值较未作用前增高(P均<0.05)。结论COPD患者早期存在以平滑肌层增厚以及细胞外基质蛋白沉积为主的肺小动脉重塑,其机制可能与TGF-β1介导的NOX4相关氧化应激信号通路有关。 展开更多
关键词 慢性阻塞性肺疾病 肺小动脉重塑 还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4 肺动脉高压 细胞外基质
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芦荟苷对糖尿病肾病大鼠NOX4/ROS/p38 MAPK信号通路及足细胞功能的影响 被引量:16
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作者 马冰沁 钱唯韵 +1 位作者 罗振国 汪良芝 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2020年第9期1-7,共7页
目的探讨芦荟苷对糖尿病肾病(DN)大鼠足细胞功能及尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(NOX4)/活性氧(ROS)/p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)信号通路的影响。方法高糖高脂饲料饲养大鼠4周,腹腔注射40 mg/kg STZ建立DN大鼠模型,随机分为... 目的探讨芦荟苷对糖尿病肾病(DN)大鼠足细胞功能及尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(NOX4)/活性氧(ROS)/p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)信号通路的影响。方法高糖高脂饲料饲养大鼠4周,腹腔注射40 mg/kg STZ建立DN大鼠模型,随机分为模型组、阳性对照组、(低、中、高)剂量实验组;正常组大鼠不进行处理。阳性对照组灌胃9.45 mg/(kg·d)糖适平;(低、中、高)剂量实验组分别灌胃10、20、40 mg/(kg·d)芦荟苷,正常组、模型组灌胃等体积蒸馏水,连续6周。血糖仪检测空腹血糖水平;酶联免疫吸附(ELISA)检测血清中白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;HE染色观察大鼠肾组织形态;超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、活性氧(ROS)试剂盒检测肾组织中SOD、MDA、ROS水平;蛋白免疫印迹检测肾组织中NOX4、p38 MAPK、phospho-p38 MAPK、肾小球足细胞裂隙跨膜蛋白Nephrin、Podocin水平。结果给药前,与正常组相比,模型组、阳性对照组、(低、中、高)剂量实验组空腹血糖水平升高(P<0.05)。给药后,模型组肾组织肾小球肥大,系膜增厚和肾小球基底膜增厚,间质炎症浸润;(低、中)剂量实验组肾小球肥大现象逐渐缓解,肾小球系膜轻-中度增生,肾小管扩张减缓;高剂量实验组肾组织形态正常,结构清晰,肾小球、肾小管形态规则。与正常组相比,模型组空腹血糖,血清中IL-1β、TNF-α,肾组织中MDA、ROS,NOX4、phospho-p38 MAPK蛋白水平升高(P<0.05),肾组织中SOD水平、SOD/MDA,Nephrin、Podocin蛋白水平降低(P<0.05)。与模型组相比,阳性对照组、高剂量实验组空腹血糖,血清中IL-1β、TNF-α,肾组织中MDA、ROS,NOX4、phospho-p38 MAPK蛋白水平降低(P<0.05),肾组织中SOD水平、SOD/MDA,Nephrin、Podocin蛋白水平升高(P<0.05);中剂量实验组空腹血糖,血清中IL-1β、TNF-α,肾组织中MDA、ROS,NOX4蛋白水平降低(P<0.05),肾组织中SOD水平、SOD/MDA,Nephrin、Podocin蛋白水平升高(P<0.05);低剂量实验组空腹血糖,血清中IL-1β、TNF-α,肾组织中MDA,NOX4蛋白水平降低(P<0.05);肾组织中SOD水平水平升高(P<0.05)。与给药前相比,给药后阳性对照组、(低、中、高)剂量实验组空腹血糖水平降低(P<0.05)。结论芦荟苷可能通过下调NOX4/ROS/p38信号通路,实现抗炎和对足细胞的恢复。 展开更多
关键词 芦荟苷 糖尿病肾病 足细胞 尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4/活性氧/p38丝裂原活化蛋白激酶信号通路
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Nox4在糖尿病及慢性并发症中的作用研究进展 被引量:10
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作者 于婷 李雷 +1 位作者 许飞 辛青 《医学综述》 2019年第10期2016-2022,2028,共8页
随着生活方式的改变和预期寿命的延长,世界范围内糖尿病及其慢性并发症的患病率逐年升高。糖尿病慢性并发症(糖尿病肾病、糖尿病大血管病变、糖尿病心肌病、糖尿病视网膜病变、糖尿病神经病变等)是糖尿病患者致死致残的主要原因。还原... 随着生活方式的改变和预期寿命的延长,世界范围内糖尿病及其慢性并发症的患病率逐年升高。糖尿病慢性并发症(糖尿病肾病、糖尿病大血管病变、糖尿病心肌病、糖尿病视网膜病变、糖尿病神经病变等)是糖尿病患者致死致残的主要原因。还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(Nox4)是催化氧生成活性氧类(ROS)的关键酶,Nox4的活性直接受组织氧分压的调控,由Nox4生成的ROS通过氧化应激在糖尿病及其慢性并发症的发病及进展过程中发挥重要作用。 展开更多
关键词 糖尿病 还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4 过氧化氢 活性氧自由基 糖尿病慢性并发症
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miR-322-5p通过NOX4调控细胞凋亡抑制大鼠神经管畸形发生 被引量:2
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作者 黄琬淇 刘玉思 +1 位作者 顾卉 袁正伟 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第7期582-587,共6页
目的探讨miR-322-5p调控烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(NOX4)的表达及改善细胞凋亡对大鼠神经管闭合的作用。方法采用全反式维甲酸(ATRA)诱导大鼠神经管畸形(NTDs)模型。通过实时定量PCR检测miR-322-5p在ARTA诱导的大鼠胚胎脊髓中的... 目的探讨miR-322-5p调控烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(NOX4)的表达及改善细胞凋亡对大鼠神经管闭合的作用。方法采用全反式维甲酸(ATRA)诱导大鼠神经管畸形(NTDs)模型。通过实时定量PCR检测miR-322-5p在ARTA诱导的大鼠胚胎脊髓中的表达情况;通过Western blotting检测NOX4及凋亡蛋白的表达情况;采用免疫组织化学技术和组织免疫荧光技术观察NOX4在胚胎神经管中的定位和表达情况;通过对C17.2神经干细胞转染miRNA-空白对照(miR-NC)、mimic-322-5p及NOX4高表达质粒,明确NOX4和miR-322-5p之间的调控作用,采用实时定量PCR检测转染后miR-322-5p的表达,并通过Western blotting检测转染后细胞NOX4以及凋亡蛋白的表达情况。结果在ATRA诱导的大鼠NTDs模型中,NOX4表达上调,miR-322-5p表达下调。在C17.2神经干细胞中,转染miR-322-5p抑制了NOX4的表达,也抑制了凋亡蛋白的表达。结论miR-322-5p可抑制NOX4的表达,并抑制大鼠NTDs的发生。 展开更多
关键词 神经管缺陷 miR-322-5p 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4 细胞凋亡
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成纤维细胞生长因子13通过ROS/Caspase-3通路调控非小细胞肺癌A549细胞的凋亡 被引量:2
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作者 刘天宇 唐铖铖 +4 位作者 冯光 雷静静 孙晨皓 王令 路宏朝 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期451-459,共9页
目的:探讨成纤维细胞生长因子13(fibroblast growth factor 13,FGF13)对非小细胞肺癌A549细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS)的生成和凋亡的影响及其调控机制。方法:WB法检测FGF13在人正常肺上皮细胞BEAS-2B和肺癌A549、H460细胞... 目的:探讨成纤维细胞生长因子13(fibroblast growth factor 13,FGF13)对非小细胞肺癌A549细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS)的生成和凋亡的影响及其调控机制。方法:WB法检测FGF13在人正常肺上皮细胞BEAS-2B和肺癌A549、H460细胞中的本底表达量。采用FGF13过表达载体转染BEAS-2B和A549细胞;设计两组靶向FGF13的shRNA序列,构建慢病毒干扰载体,包装病毒后侵染A549细胞,采用qPCR和WB法检测干扰效果,DCFH-DA探针结合荧光酶标仪分析敲减FGF13对A549细胞内ROS水平的影响,MitoSOX与WB法检测对线粒体ROS水平及烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(nicotinamide adenine dinucleotide phosphate oxidase 4,NOX4)蛋白表达量的影响,Annexin V-FITC-PI双染法检测对细胞凋亡和Caspase-3及Cleaved Caspase-3蛋白表达的影响。结果:与BEAS-2B细胞相比,FGF13蛋白在两种肺癌细胞中均高表达(均P<0.05)。成功构建FGF13过表达、低表达的A549细胞系。过表达FGF13后,BEAS-2B和A549细胞内ROS水平显著降低(P<0.05);敲减FGF13表达后,A549细胞内ROS水平显著升高(P<0.05);然而过表达及干扰FGF13对A549细胞内线粒体ROS水平无显著影响,但NOX4蛋白表达量显著下调(P<0.05)及显著上调(P<0.05)。FGF13干扰后A549细胞凋亡率显著升高(P<0.01),Caspase-3及Cleaved Caspase-3蛋白表达量显著上调(P<0.05)。结论:FGF13可能通过NOX家族途径调控ROS的生成,并通过ROS/Caspase-3通路调控A549细胞凋亡。 展开更多
关键词 成纤维细胞生长因子13 A549细胞 活性氧 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4 CASPASE-3 凋亡
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不同月龄C57BL/6J小鼠耳蜗线粒体和NAD^(+)水平比较 被引量:2
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作者 冯宝怡 董庭婷 +2 位作者 郑晓飞 陶永 吴皓 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期980-986,共7页
目的·研究不同月龄小鼠耳蜗中线粒体及烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamide adenine dinucleotide,NAD^(+))水平的变化,探索年龄相关性听力下降可能的机制。方法·分别选取1月龄、4月龄、8月龄及12月龄4组C57BL/6J雄性小鼠各10... 目的·研究不同月龄小鼠耳蜗中线粒体及烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamide adenine dinucleotide,NAD^(+))水平的变化,探索年龄相关性听力下降可能的机制。方法·分别选取1月龄、4月龄、8月龄及12月龄4组C57BL/6J雄性小鼠各10只,采用听性脑干反应(auditory brain response,ABR)和畸变产物耳声发射(distortion product otoacoustic emission,DPOAE)测定4组不同月龄小鼠听觉功能;通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)比较4组不同月龄小鼠耳蜗中线粒体能量代谢相关基因Ndufb5(NADH:ubiquinone oxidoreductase subunit B5)、Sdha(succinate dehydrogenase complex flavoprotein subunit A)、Sdhc(succinate dehydrogenase complex subunit C)和Atp5b(ATP synthase,H+transporting mitochondrial F1 complex,beta subunit)的mRNA表达水平;通过免疫荧光染色分别观察1月龄和12月龄小鼠耳蜗毛细胞中的线粒体数量变化;通过透射电子显微镜(电镜)观察1月龄和12月龄小鼠耳蜗中内毛细胞、外毛细胞、螺旋神经节细胞及神经纤维中的线粒体形态结构;通过定量比色法检测并比较不同月龄小鼠耳蜗中的NAD^(+)水平。结果·小鼠的ABR和DPOAE阈值呈现随月龄增长而升高的趋势,其中12月龄小鼠的ABR阈值在5.66~45.00 kHz的频率段较1月龄小鼠均显著升高(均P<0.01),DPOAE阈值在11.32~32.00 kHz的频率段较1月龄小鼠也显著升高(均P<0.01)。与1月龄小鼠相比,4、8、12月龄小鼠中4个线粒体功能相关基因(Ndufb5、Sdha、Sdhc和Atp5b)mRNA的表达水平呈现随月龄增长而下降的趋势,并在8月龄开始与1月龄的差异有统计学意义(均P<0.05)。免疫荧光染色结果显示12月龄小鼠耳蜗内毛细胞中的线粒体数量较1月龄明显减少。另外透射电镜在12月龄小鼠内毛细胞、螺旋神经节细胞及神经纤维中观察到空泡样变性的线粒体以及螺旋神经节细胞中出现较大的脂褐素。小鼠内耳NAD^(+)水平呈现随月龄增长而下降的趋势,8月龄和12月龄小鼠NAD^(+)水平较1月龄显著下降(均P<0.01)。结论·随月龄增长,C57BL/6J小鼠外周听觉关键细胞的线粒体功能下降、结构异常,耳蜗NAD^(+)水平下降,这与小鼠听力阈值随着月龄增长而下降的表现一致。 展开更多
关键词 年龄相关性听力下降 耳聋 线粒体 衰老 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸
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NOX4、IL-6、hs-CRP与非瓣膜性房颤相关性研究 被引量:1
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作者 朱明利 康品方 +6 位作者 徐庆梅 谢彩侠 刘晨阳 宣玲 张恒 陈若璇 唐碧 《淮海医药》 CAS 2021年第1期9-12,共4页
目的:探究还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶4(NOX4)、炎症细胞因子IL-6、hs-CRP水平与房颤的关联性及其对房颤的诊断价值,并分析房颤发病的危险因素。方法:选取某院心内科诊断的非瓣膜性心房颤动患者80例作为病例组,其中阵... 目的:探究还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶4(NOX4)、炎症细胞因子IL-6、hs-CRP水平与房颤的关联性及其对房颤的诊断价值,并分析房颤发病的危险因素。方法:选取某院心内科诊断的非瓣膜性心房颤动患者80例作为病例组,其中阵发性房颤患者40例(PaAF组),持续性房颤患者40例(PeAF组),另选取同期医院健康体检者(窦性心律)38例作为对照组。检测研究对象血清NOX4、IL-6、hs-CRP水平,评估血清NOX4、IL-6、hs-CRP水平与房颤的关联性,采用二元Logistic回归分析影响房颤发病的危险因素,ROC曲线评估血清NOX4、IL-6、hs-CRP水平诊断房颤发病的效能。结果:血清NOX4、IL-6、hs-CRP水平在对照组、阵发性房颤组、持续性房颤组依次升高,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。二元Logistic回归分析显示NOX4、IL-6、hs-CRP是房颤发病的影响因素(P<0.05)。研究对象外周血NOX4、IL-6、hs-CRP表达水平与LAD呈正相关性(r=0.376、0.638、0.258,P<0.05)。血清NOX4、IL-6、hs-CRP值诊断房颤发病的ROC曲线下面积分别为0.774、0.894、0.700。结论:NOX4、IL-6、hs-CRP表达水平与房颤的持续时间有关,是房颤发病的影响因素,对房颤发生具有一定预测价值。 展开更多
关键词 心房颤动 NOX4 白介素6 高敏C反应蛋白
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NAD类似物吸附电极的循环伏安研究 被引量:1
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作者 张黎征 魏芳 +1 位作者 赵新生 杨华铨 《物理化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2000年第4期370-373,共4页
An NAD analogue, N-(2-thiol-ethyl)-nicotinamide (TENA), was synthesized. TENA was used to modify the Au electrode through self-assembled monolayer.The cyclic voltammetry study of the electrode was carried out. The int... An NAD analogue, N-(2-thiol-ethyl)-nicotinamide (TENA), was synthesized. TENA was used to modify the Au electrode through self-assembled monolayer.The cyclic voltammetry study of the electrode was carried out. The interference of dimerization of the NAD analogues reported in the literature was successfully avoided. The results support a mechanism of an electron transfer followed by chemical reaction during part of the redox process of TENA. Some useful reaction parameters were obtained. 展开更多
关键词 nad 吸附电极 循环伏安 烟酰胺核苷酸
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