^(60)Co-NTG复合诱变选育丁烯基多杀菌素高产菌株及其杀虫活性

为获得稳定高产的丁烯基多杀菌素生产菌株并明确其对农业害虫的杀灭效果,以前期研究获得的须糖多孢菌Saccharopolyspora pogona ASAGF19为初始菌株,通过^(60)Co-γ射线和亚硝基胍复合诱变得到1株遗传性状稳定的高产突变株ASAGF30A11,较初始菌株产量提高了61.26%,3次传代产量变化幅度小于10.00%。对高产菌株发酵液进行分离纯化获得了丁烯基多杀菌素粗品,配制成1.5 g/L浓度的母液进行稀释,对蓟马、蚜虫以及小菜蛾进行室内毒力测定,得出其对3种供试害虫的LC_(50)分别为1.92 mg/L、1.23 mg/L和0.27 mg/L。经过比较,丁烯基多杀菌素对蓟马的杀灭效果优于多杀菌素(LC_(50)为0.57 mg/L)和乙基多杀菌素(LC_(50)为0.64 mg/L);对蚜虫的杀灭效果优于多杀菌素(LC_(50)为72.60 mg/L),低于阿维菌素(LC_(50)为0.14 mg/L);对小菜蛾的杀灭效果优于多杀菌素(LC_(50)为2.87 mg/L),低于乙基多杀菌素(LC_(50)为0.05 mg/L)。本研究首次探索了^(60)Co-γ射线和亚硝基胍复合诱变对须糖多孢菌的影响,并获得了丁烯基多杀菌素对3种农业害虫的防效,为新型生物杀虫剂对农业害虫的防治提供了一些理论依据。

微波与NTG复合诱变育种Klebsiella高产异淀粉酶突变株

从原始菌克雷伯氏菌(Klebsiella)出发,经过微波与NTG复合诱变后,筛选、初筛分离得高产异淀粉酶的菌株NCP-03,酶活力由原来的28U/mL提高到210U/mL,比原始菌种产酶活力提高了近7倍。并对NCP-03发酵产酶条件进行了初步优化。

亚硝基胍(NTG)对雨生红球藻的诱变效应

用浓度分别为0,0.5,1,1.5,2,2.5,3,3.5g/L的亚硝基胍 (NTG)处理雨生红球藻(Haematococcuspluvialis) ,处理后的藻细胞分别置于100mL三角烧瓶培养 ,3d后用细胞计数测定抑制率。结果表明 ,NTG浓度为2.5g/L时生长K值最大 ,为0.389 ;藻液的细胞干质量最大 ,为0.711g/L ;虾青素含量也最多 ,为1.86975mg/L,之后随着浓度的增加反而下降。

NTG诱变选育埃博霉素高产菌株的研究

纤维堆囊菌产生的次级代谢产物埃博霉素是受医学界广泛关注的抗癌良药,由于其较低的产量阻碍了其工业化的发展。本文采用纤维堆囊菌DSM11999作为出发菌株,通过NTG化学诱变的方法,诱变浓度300μg/mL,处理时间30min,来筛选优良菌种,最终得到两株埃博霉素A的产量分别为17.3mg/L和17.4mg/L优良菌株。

NTG-LiCl复合诱变选育链霉菌702菌株

为筛选出产新农抗702的高产链霉菌702突变株。分别以链霉菌702菌株为试验材料和以庆大霉素为敏感抗生素,NTG-LiCl复合诱变链霉菌702菌株,获得抗庆大霉素突变株。NTG处理90min对菌株的致死率可达71.56%,抗药性突变率高达19.46%,获得的抗药性突变株经过摇瓶初筛和复筛,获得高产突变株13-18-52菌株,产抗新农抗702的摇瓶发酵单位达到1946μg/mL,比出发菌株发酵单位1416μg/mL提高了37.43%。采用抗药性致死突变标志的NTG-LiCl复合诱变筛选模型可以获得产新农抗702的链霉菌702高产菌株。

NTG对E.coli突变株聚唾液酸产量的影响

在不同的 pH条件下 ,用NTG连续处理E .coli,得到突变菌株JYⅡ 74 ;摇瓶培养 ,发酵液中聚唾液酸产量达 2 80 0mg/L ,比出发菌株提高了 130 0mg/L ,提高幅度为 72 .5 % ,且生产能力稳定 .提取发酵液中的聚唾液酸 ,红外光谱鉴定其纯度 ,13C核磁共振图谱表明 ,该多糖是一种α 2 ,8糖苷键连接的唾液酸同聚物 .

NTG诱变农抗702产生菌链霉菌702的研究

目的:筛选出产抗真菌活性物质的高产链霉菌702突变株。方法:分别以链霉菌702菌株为试验材料,以庆大霉素为敏感抗生素,NTG诱变链霉菌702菌株,获得抗庆大霉素突变株。结果:NTG处理90min对菌株的致死率可达73.46%,突变率高达23.64%,经过摇瓶筛选获得高产突变株20-29-12,产素单位达到1 443μg/mL,比出发菌株提高了38.08%。结论:采用抗药性致死突变标志的NTG诱变筛选模型可以获得产抗真菌活性物质的链霉菌702高产菌株。

NTG对南昌霉素产生菌的诱变选育

采用不同浓度的NTG诱变剂,对南昌霉素产生菌南昌链霉菌80-5.3-116菌株的孢子进行处理。结果表明,500μg/ml的诱变浓度对孢子致死率达79.92%,具有较好的诱变效果;初筛摇瓶产量比出发菌株提高20%以上的菌株有54株,占菌株的54%;连续3批进一步摇瓶复筛,并对复筛结果进行分析,发现116-5.8-64菌株所产南昌霉素活性单位高达9571.4mg/ml,比出发菌株提高了116.7%,差异达到极显著水平。

NTG诱变选育抗逆性蜡蚧轮枝菌及其生物学特性测定

采用NTG对杀虫真菌蜡蚧轮枝菌进行诱变选育,期望获得抗逆性显著增强的菌株,以提高其在田间应用的适应性。以VL-18为出发菌株,用4mg/mL的NTG诱变处理120min,得到耐热性明显提高的诱变菌株NTG-2。抗逆性研究结果表明,NTG-2菌株经40℃水浴处理20min,孢子萌发率比原始菌株提高了251.4%,0.5min内的紫外耐受力提高了145.7%,酸碱耐受力无显著变化。毒力测定结果显示,第5天突变菌株NTG-2对蚜虫的致死中浓度(LC50)比原始菌株降低了98.4%,表明突变菌株的杀虫毒力增强。经多代培养检测,突变菌株的抗逆遗传性能相对稳定。研究表明,通过NTG诱变获得的NTG-2菌株在抗逆方面较原始菌株有所提高。

诱变剂NTG致弱的日本血吸虫尾蚴免疫效果的进一步观察

为了进一步了解诱变剂(NTG)致弱尾蚴的免疫效果,以NTG(30μg/ml)致弱15min后,经皮感染免疫小鼠两次,间隔一周,观察免疫后不同时间攻击感染(2、4、6、8和10wk)对免疫鼠存活时间,减虫率,肝、脾肿大及肝、脾虫卵肉芽肿程度的影响。同时,还对免疫鼠体内血吸虫进行虫体表面皮层的电镜扫描观察。实验结果表明:NTG致弱尾蚴初次免疫后,8wk攻击感染时减虫率最高(77％),且肝、脾肿大及虫卵肉芽肿病变程度最轻.小鼠存活时间也长。从而提示NTG致弱尾蚴免疫小鼠后,对攻击感染确产生免疫力。但免疫后不同时间所产生的免疫力不同,初次免疫后8wk可能是最适攻击感染时间。对免疫后不同时间所产生的免疫力不同的原因进行了讨论,NTG致弱尾蚴诱导保护性免疫力产生的机制尚待进一步研究阐明。

UV和NTG复合诱变柠檬酸生产菌种黑曲霉

为了提高柠檬酸的生产水平,利用紫外线(UV)和亚硝基胍(NTG)对柠檬酸生产菌种黑曲霉进行了复合诱变,通过溴甲酚绿选择性平板初筛和摇瓶复筛,获得了一株遗传性能稳定的高产菌株UN-08,产酸率为15.80%.与出发菌株相比,产酸增幅达到26.40%,糖酸转化率为98.75%,发酵指数为1.32 kg/(m3·h).此外,通过对高产菌株UN-08的发酵条件进行研究,确定了此菌株生产接种的适宜孢子数量为106～108个/mL,发酵温度应控制在34～36℃内,溶氧应采用分段控制,前期(0～40 h)应控制在0.12 m3/(m3.min)左右、后期(40～96 h)应控制在0.15 m3/(m3·min)左右.

NTG诱变筛选赖氨酸缺陷型大肠杆菌

为了获得产赖氨酸益生菌所需的指示菌株,以大肠杆菌(E.coli)野生型为出发菌株,用0.25 mg/m L的亚硝基胍(NTG)进行诱变,采用青霉素浓缩法淘汰野生型菌株,采用点植对照法在基本培养基(MM)和赖氨酸补充培养基([Lys])上对赖氨酸营养缺陷型(Lys-)E.coli进行初筛,再采用划线对照法在MM和[Lys]上对Lys-疑似菌株进行复检,[Lys]斜面5次传代后,采用划线对照法检测Lys-菌株遗传稳定性。结果表明,0.25 mg/m L NTG处理菌液40 min,对应的致死率为82.4%,经初筛和复检后获得4株Lys-菌株,其中L-3和L-5菌株经5次传代后仍为Lys-菌株,Lys-菌株的检出率为2.70%。

NTG和UV复合诱变米曲霉A·O-2原生质体选育米蛋白分解菌的研究

以米曲霉A·0—2原生质体为对象,采用NTG和UV作为诱变剂进行单因子和多因子复合诱变处理,在以米渣为主要原料的固体培养基上培养,选育出中性蛋白酶活力较高,生长快,易于培养的变异株N—4.原料配比为:米渣:麦麸:=2:1;培养时间为48小时;培养温度为30℃的培养条件下,变异株N—4的中性蛋白酶活力最高、与出发菌株A·O—2相比,中性蛋白酶活力提高32.6%。

NTG诱导及核辐射改良稗草生防潜力菌研究

用亚硝基胍 (nitrosoguanidine ,NTG)诱变稗草生防潜力菌禾长蠕孢稗草专化型菌株(HGE) ,获得诱变菌株I2 62 ,其孢子产量比原始菌株 (HGE)提高 5 2 6%。以I2 62 为出发菌株 ,用60 Coγ射线 65 0Gy辐照 5 7min ,有 7 75 %的菌株产孢量高于出发菌株高 ,其中辐照菌株FⅡ12 1、FⅡ116和FⅡ14 0 的产孢量分别比I2 62 提高 5 4 4%、5 1 5 %和 41 7%。化学和物理技术相结合处理稗草生防潜力菌 ,获得的突变菌株产孢量比原始菌株提高 1倍以上。但高产孢突变菌株对稗草的致病性、防效与原始菌株相当。

NTG系列电子信息技术综合训练系统的研制

本文在总结我国电子信息技术实验教学经验的基础上 ,吸取电子教学仪器研究的最新成果 ,构建了一个能满足电子信息类专业多门实验课程及自主性、创新性实验需求的新型实验教学与训练系统———NTG系列电子信息技术综合训练系统 ,该系统有助于从根本上提高电子实验室的使用效率。本文分析了电子信息技术综合训练系统的重要性和科学根据 ,介绍了NTG系列电子信息技术综合训练系统的组成、结构及功能 ,给出了具体的技术方案和技术措施 ;同时介绍了系统在实际教学中使用的良好效果 。

纳豆芽孢杆菌产VK_2菌株的NTG与N^+注入复合诱变选育

以纳豆芽孢杆菌BN_2-6为出发菌株,利用亚硝基胍(NTG)和N^+注入复合诱变选育产维生素K_2的突变株。经过NTG诱变后得到突变株BN-N30-1,其维生素K2的产量提高了53%,继而采用低能N^+注入技术进行处理得到突变株BN-P15-11-1,维生素K_2的产量比BN-N30-1提高了96%,比原始菌株提高了166%。结果表明,对纳豆芽孢杆茵BN-2-6进行NTG和低能N^+注入复合诱变的效果明显,突变菌株维生素K_2的产量显著提高。

虾青素产生菌单线态氧NTG诱变育种

采用了单线态氧和亚硝基胍相结合对法夫酵母进行三次诱变处理,经过多次的初筛、复筛,得到了高产虾青素的菌株3-139,和出发菌株L-01相比,其类胡萝卜素总量提高了40%,从7.03 μg·mL^(-1)提高到9.83μg·mL^(-1)。虾青素的比率也从72%提高到78%.并且稳定性良好。

优化亚硝基胍(NTG)诱变条件选育低产蛋白酶A菌株的研究

通过优化亚硝基胍(NTG)对啤酒酵母的化学诱变条件,得出NTG的最佳实验条件,选育低产蛋白酶A的菌株,比较了两种初筛方法--羧肽酶Y平板实验和酸变性血红蛋白实验的筛选效果,筛选出6株蛋白酶A活力较低的菌株,并进行多次重复性实验检验其稳定性。

ARTP-NTG复合诱变选育高产中性蛋白酶菌株

以枯草芽孢杆菌A-06为出发菌株,利用ARTP-亚硝基胍(NTG)复合诱变方法对该菌株进行遗传改造。经过平板初筛,摇瓶复筛,最终筛选出一株酶活提高明显、遗传稳定的菌株N-36。其摇瓶发酵酶活达29 500 U/mL,较出发菌株酶活提高90%左右。

NTG对侧耳的诱变效应

采用正交试验设计以菌落直径为指标研究了NTG对侧耳8405的诱变效应.实验结果表明:当NTG的最终浓度为300μg/mL,处理前孢子先培养14h,于24℃黑暗条件下处理40min时,突变率和正变率高,变异幅度大.