白花前胡丙素和紫花前胡苷祛痰作用研究

目的观察白花前胡丙素和紫花前胡苷对小鼠的祛痰作用。方法利用酚红作为祛痰效果指示剂,观察白花前胡丙素和紫花前胡苷的祛痰作用。结果白花前胡丙素和紫花前胡苷能增强小鼠气管排泌酚红的作用。结论白花前胡丙素和紫花前胡苷具有祛痰作用。

高效液相色谱法测定不同产地羌活中紫花前胡苷的含量

目的 :测定不同产地羌活中紫花前胡苷含量。方法 :高效液相色谱法。结果 :紫花前胡苷回归方程为Y =- 95 0 9.1+1912 70 9.8X ,r =0 .9998,线性范围 0 .16～ 0 .6 4μg ,平均回收率 99.3% ,RSD 2 .6 4%。 结论 :方法简单、快速、重现性好。

紫花前胡苷抑制哮喘小鼠气道炎性反应和NF-κB信号传导通路

目的观察紫花前胡苷抗过敏性哮喘鼠气道炎性反应作用。方法 BALB/c小鼠被随机分为对照、模型、紫花前胡苷和地塞米松4组。除对照组外,所有小鼠腹腔注射和雾化吸入卵清蛋白以致敏和诱导气道炎性反应。于每次雾化前1h,给紫花前胡苷组灌胃10 mg/kg紫花前胡苷;给地塞米松组腹腔注射1 mg/kg地塞米松。动物肺功能仪分析气道高反应性;细胞计数器和Diff-Quick染色计数支气管灌洗液中白细胞总数及分类;酶联免疫吸附法检测血清或BALF中炎性介质的水平;苏木精-伊红染色法观察气道病理改变;电泳迁移率和免疫印迹法检测肺组织NF-κВ信号通路中蛋白的活力和表达。结果与对照组比较,模型组呈现明显的气道炎性反应,气道反应性显著增高(P<0.05);血清或BALF中IgE、IL-4、IL-5和IL-13的水平显著增加(P<0.01);细胞系P65、p-P65的水平显著增加(P<0.05);细胞质P65和IκBα显著减少,NF-κB DNA-结合力显著增加(P<0.05)。与模型组比较,紫花前胡苷能够显著抑制气道炎性反应和气道高反应(P<0.05);降低血清或BALF中IgE、IL-4、IL-5和IL-13的水平(P<0.01);抑制细胞系P65、p-P65水平(P<0.05);增加细胞质P65、IκBα蛋白和减弱NF-κB DNA-结合力(P<0.05)。结论紫花前胡苷具有抗过敏性哮喘鼠气道炎性反应。

紫花前胡苷在大鼠体内的药代动力学研究

目的研究中药狭叶羌活和宽叶羌活主要化学成分之一的紫花前胡苷(ND)在大鼠体内的药代动力学。方法♂SD大鼠(200～220)g随机分组,每组5只,单次尾静脉注射,给药量为80mg.kg-1,从眼眶静脉丛分时取血、处理。采用反相高效液相色谱法、恒速洗脱,应用外标法测定ND在SD系大鼠血浆中的浓度,应用3P87软件计算主要药代动力学参数。结果在所建立的方法学下,ND的保留时间为6.7min;标准曲线为Y=2.0×10-4X+0.4(r=0.9999),在0.2～80mg.L-1的血浆浓度范围内呈良好的线性关系;血浆中最低检测浓度为0.01mg.L-1(S/N=3),最低定量浓度为0.1mg.L-1(S/N=10);在1.0、10.0和40.0mg.L-1低、中、高3个浓度下的提取回收率为76.23～83.72;日内和日间RSD均小于5.60%(n=3)。在室温和冷冻—解冻试验中,ND具有良好的稳定性。按80mg.kg-1单剂量单次静脉给药后,ND在大鼠体内的药代动力学过程符合开放二房室模型,主要药代动力学参数t1/2α、t1/2β、AUC、Vc、Vp、Vss和CL分别为7.02min、219.27min、1384.34mg.min.L-1、0.92L.kg-1、6.04L.kg-1、6.96L.kg-1和0.06L.kg-1.min-1。结论所建立的方法快速、准确、简便,能够满足ND药代动力学研究要求。按80mg.kg-1单剂量单次静脉给药后,ND在大鼠体内分布广泛,消除速度中等。

HPLC法测定白花前胡中白花前胡丙素和紫花前胡中紫花前胡苷的含量

目的 :建立高效液相色谱法测定白花前胡根中白花前胡丙素 (dl-praeruptorinA ,Pd -Ia)和紫花前胡根中紫花前胡苷 (nodakenin ,NDK)含量的方法。方法 :色谱柱Shim -PackCLC -ODS ,Pd -Ia的流动相为甲醇 -水 (79∶2 1)和NDK的流动相为乙腈 -甲醇 -水 (2 0∶5∶75 ) ,流速为 1 0mL·min- 1 ,紫外检测波长分别为 32 3和 334nm。结果 :Pd -Ia及NDK的线性范围分别为 0 0 8～ 0 8μg和 0 0 1～ 0 10 μg ,相关系数均为 0 9999,平均回收率分别为 98 5 3%～ 99 2 7%和 97 6 0 %～99 87% ,RSD小于 2 %。结论 :方法准确 ,简便 ,快速 ,灵敏度高 ,对常用中药前胡的质量控制有较重要意义。

高效液相色谱法测定前胡属植物中紫花前胡苷的含量

目的 :建立高效液相色谱法测定前胡药材中紫花前胡苷的含量。方法 :Shim PackCLC ODS柱 ,流动相乙腈 甲醇 水 (2 0∶5∶75 ) ,紫花前胡苷为对照品 ,外标法峰面积定量 ,紫外检测 (λ =334nm)。结果 :6个不同品种前胡中的紫花前胡苷含量为 0 .0 0 5 %～ 3.0 90 %。结论 :紫花前胡苷不能作为评价前胡属植物的药用指标 ,但可以作为紫花前胡的质量控制标准。

紫花前胡苷抗宫颈癌细胞作用研究

目的探究紫花前胡苷抗宫颈癌HeLa细胞的作用效果及相关信号通路。方法HeLa细胞在0、0.1、1和10 mmol/L浓度的紫花前胡苷作用24 h后,通过CCK-8法检测细胞增殖活性,流式细胞术检测细胞凋亡水平;通过蛋白免疫印迹法检测细胞内凋亡相关cleaved-caspase 3(cle-caspase 3)、Cytochrome C(Cyto C)、Bax、Bcl2蛋白水平变化,以及自噬相关p-mTOR、mTOR、P62、Beclin1、LC3蛋白水平变化;结合Ad-GFP-LC3B腺病毒转染检测细胞内LC3B聚集状态。结果对照组(0 mmol/L)、0.1mmol/L组、1 mmol/L组、10 mmol/L组的HeLa细胞凋亡率依次升高,分别为(14.93±2.95)%、(15.43±2.13)%、(21.63±3.19)%、(31.42±5.01)%,且在10 mmol/L浓度处理下升高最为明显(P<0.05)。10 mmol/L的紫花前胡苷作用24 h后,HeLa细胞内的促凋亡cle-caspase 3、Cyto C、Bax蛋白水平升高,抗凋亡蛋白Bcl2表达下降,自噬相关蛋白p-mTOR/mTOR水平下降,Beclin1以及LC3-Ⅱ累积增多,自噬流相关蛋白P62表达下降,LC3B在紫花前胡苷处理组中呈颗粒性聚集,均差异有统计学意义(P<0.05)。结论紫花前胡苷具有较好的抗宫颈癌细胞作用,其机制可能与自噬相关细胞凋亡有关。

超临界二氧化碳萃取紫花前胡苷的工艺优化研究

目的以荧光分析法测定紫花前胡苷(NDK)含量为指标,比较紫花前胡中紫花前胡苷的溶剂热回流提取和超临界CO2萃取方法,优化最佳提取工艺。方法通过正交实验,采用超临界CO2提取技术对紫花前胡提取工艺条件进行考察,并与溶剂热回流提取结果比较,分析测定紫花前胡苷的含量。结果通过与传统提取方法进行比较,证明超临界CO2提取技术在紫花前胡苷的提取上具有明显优势。超临界CO2提取紫花前胡苷的最佳工艺为萃取压力20MPa,萃取温度50℃,CO2动态流量35L.h-1。结论不同工艺条件提取紫花前胡苷产率不同,萃取温度、萃取压力、CO2动态流量等工艺参数对实验指标有显著性影响。

应用2D NMR技术研究羌活苷的结构

从传统中药羌活中分离得到1个香豆素类化合物,应用1D和脉冲梯度场反相2DNMR检测技术(gCOSY,gNOESY,gHMQC,gHMBC)研究了其结构,鉴定为6-′O-(反式阿魏酰基)-紫花前胡苷,命名为羌活苷(Forbesoside).本文对其碳氢NMR信号进行了全归属.对从伞形花内酯衍生化为7-去甲基软木花椒素、紫花前胡苷元和6-′O-(反式阿魏酰基)-紫花前胡苷的NMR信号变化规律以及糖残基NMR信号归属方法进行了讨论和总结.

紫花前胡苷经通过PI3K/AKT通路对结直肠癌细胞生物学行为的影响

目的:探究紫花前胡苷(NK)经磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/丝氨酸/苏氨酸激酶(AKT)通路对结直肠癌(CRC)细胞生物学行为的影响。方法:将SW480细胞分为SW480组(SW480细胞未做任何处理)、NK低剂量组(L-NK组,40μmol/L NK)、NK中剂量组(M-NK组,60μmol/L NK)、NK高剂量组(H-NK组,80μmol/L NK)、H-NK+740Y-P组(80μmol/L NK+10μmol/L PI3K激活剂740Y-P处理SW480细胞)。平板克隆检测SW480细胞克隆能力;3-(4,5-二甲基噻唑-2)2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)法检测细胞增殖能力;流式细胞术和Hoechst 33258染色检测SW480细胞凋亡能力;细胞侵袭实验(Transwell)检测SW480细胞侵袭能力;MTT法检测SW480细胞黏附情况;蛋白质印迹法(Western blotting)检测黏附、凋亡以及通路相关蛋白水平。结果:与SW480组相比,L-NK组、M-NK组、H-NK组细胞核出现缩小、破碎现象,克隆数、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、Twist相关蛋白1(Twist1)蛋白表达、p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT比例依次显著降低(P<0.05),细胞生长抑制率、细胞凋亡率以及Bcl-2关联X的蛋白(Bax)、活化的半胱氨酸蛋白酶-3(cleaved-Caspase-3)、E-钙黏附蛋白(E-cadherin)蛋白表达以及细胞黏附抑制率依次显著升高(P<0.05);与H-NK组相比,H-NK+740Y-P组克隆数、Bcl-2、N-cadherin、Twist1蛋白表达、p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT比例显著升高(P<0.05),细胞生长抑制率、细胞凋亡率以及Bax、cleaved-Caspase-3、E-cadherin蛋白表达以及细胞黏附抑制率显著降低(P<0.05)。结论:NK可能通过下调PI3K/AKT通路抑制SW480细胞增殖和侵袭,促进其凋亡。

HPLC法测定羌活中紫花前胡苷的含量

目的:建立HPLC法测定羌活中紫花前胡苷含量的方法。方法:HPLC条件:色谱柱为Agilent HC-C18柱(5μm,4.6×250mm),流动相为甲醇-水(32∶68),流速为1.0ml.min-1,检测波长为335nm,柱温为35℃。结果紫花前胡苷范围为4.00μg.ml-1～100.00μg.ml-1,平均回收率为99.90%,RSD为1.50%。结论:该法操作简单,重现性好,结果准确,可作为羌活中紫花前胡苷的含量测定方法提供参考依据。

HPLC法测定紫花前胡中紫花前胡苷的含量

目的:建立HPLC法测定中药紫花前胡中紫花前胡苷含量的方法,为其质量控制提供依据。方法:采用反相高效液相色谱法,Agilent Zorbax SB-C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相为甲醇-水(40:60),流速为1mL·min-1,检测波长334nm,柱温40℃。结果:紫花前胡苷在此色谱条件下获得良好分离,线性范围为25.0～300.0ng(r2=0.9999),平均回收率为98.6%,RSD1.8%。结论:首次建立了两相系统HPLC法测定紫花前胡药材中紫花前胡苷含量的方法,该方法准确,可靠,对紫花前胡药材及其制剂的质量控制有较重要意义,已被2010版《中国药典》采纳。

薄层扫描法测定羌活中紫花前胡甙的含量

采用双波长薄层扫描法对３种不同产地的羌活中的紫花前胡甙进行含量测定，相关系数为０．９９９７，加样回收率为９７．５％，ＲＳＤ为１．９６％。

高效液相色谱梯度洗脱法同时测定灵龙感冒胶囊中9种成分含量

目的建立高效液相色谱(HPLC)梯度洗脱法同时测定灵龙感冒胶囊中龙胆苦苷、马钱苷酸、獐牙菜苦苷、獐牙菜苷、粉防己碱、防己诺林碱、紫花前胡苷、羌活醇和异欧前胡素的含量。方法采用ZORBAX SB-C 18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈-甲醇(1:1)-0.3%冰醋酸溶液,梯度洗脱;检测波长分别为240,280和315 nm;体积流量1.0 mL·min^-1;柱温30℃。结果龙胆苦苷、马钱苷酸、獐牙菜苦苷、獐牙菜苷、粉防己碱、防己诺林碱、紫花前胡苷、羌活醇、异欧前胡素分别在36.56~731.20,2.99~59.80,4.67~93.40,1.58~31.60,9.94~198.80,4.26~85.20,10.58~211.60,2.46~49.20,20.87~417.40μg·mL-1范围内与峰面积呈良好线性响应,平均加样回收率分别为100.03%,98.29%,98.54%,97.73%,99.14%,98.69%,99.30%,97.27%和99.62%,RSD分别为0.79%,1.36%,1.12%,1.61%,0.96%,0.81%,1.00%,1.27%和0.99%(n=9)。结论该方法对灵龙感冒胶囊中9种成分进行同时测定,准确可靠,重复性好,可用于灵龙感冒胶囊的质量控制。

包装、储藏条件对羌活饮片质量的影响

目的研究不同包装、储存条件对羌活饮片内在质量的影响。方法开展1年的留样观察实验,对不同包装、不同储藏条件下的羌活饮片进行含有量测定。UPLC法测定羌活醇、异欧前胡素、绿原酸、阿魏酸、紫花前胡苷和佛手柑内酯的含有量。结果包装材料中,绿原酸的含有量以纸袋包装的较高,紫花前胡苷的含有量以塑料袋包装的较高,羌活醇的含有量则以铝塑复合袋包装的较高,但以铝塑复合袋包装的羌活中异欧前胡素的含有量波动最大;储藏温度中,阿魏酸的含有量高低排序为常温>低温>阴凉,佛手柑内酯的含有量高低排序是阴凉>低温>常温。结论塑料袋包装、低温、光照条件下储存更适宜于羌活饮片内在质量的保存。

HPLC同时测定宽叶羌活药材中5种成分含量

目的:建立同时测定宽叶羌活药材中5种成分含量的高效液相色谱法。方法:采用GL Sciences Wondasil C18色谱柱(4.6mm×250 mm,5μm);乙腈(B)-0.3%醋酸水(A)为流动相;体积流量1 mL﹒min^(-1);梯度洗脱;柱温25℃;检测波长为315 nm;进样量10μL。结果:5种成分的分离度好,标准曲线在线性范围内相关性良好,r均大于0.9990,加样回收率均值为97.37%～102.59%,RSD为0.74%～3.36%。13批宽叶羌活紫花前胡苷的含量在0.661～20.059 mg﹒g^(-1),阿魏酸的含量在1.995～21.238 mg﹒g^(-1),佛手柑内酯的含量在0.425～20.990 mg﹒g^(-1),羌活醇的含量在0.398～45.303 mg﹒g^(-1),异欧前胡素的含量在7.079～102.393 mg﹒g^(-1)。结论:所建立的同时测定5种成分的方法操作简单、具有较好的重复性和稳定性,可以有效地评价宽叶羌活药材的质量。

RP-HPLC法测定5种剂型的九味羌活制剂中紫花前胡苷、异欧前胡素

目的建立九味羌活（羌活、防风、苍术、黄芩、川芎、白芷、地黄、细辛和甘草）5种不同剂型（大蜜丸、小蜜丸、浓缩丸、水丸、颗粒剂）中紫花前胡苷和异欧前胡素的测定方法。方法 HPLC分析采用Diamonsil C18色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）;乙腈-0.5%冰乙酸水溶液为流动相,非线性梯度洗脱;柱温30℃;体积流量1.0 mL/min;检测波长330 nm。结果采用的方法对5种剂型中紫花前胡苷和异欧前胡素的测定均适用,其中紫花前胡苷在9.38～469.20 ng、异欧前胡素在12.56～167.48 ng范围内线性良好,相关系数均为0.999 9。结论本法分离效果好,专属性强,准确,可用于九味羌活系列制剂的质量控制。

RP-HPLC法同时测定九味羌活丸、片、颗粒中4种成分

目的建立RP-HPLC法同时测定九味羌活丸、片、颗粒(羌活、防风、苍术等)中羌活醇、阿魏酸、异欧前胡素、紫花前胡苷的含有量。方法 3种药物甲醇提取液的分析采用TechMate C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相乙腈-0.1%冰醋酸,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;柱温35℃;检测波长317 nm。结果羌活醇、阿魏酸、异欧前胡素、紫花前胡苷分别在2.944 2~31.768 2μg/mL(r=0.999 8)、1.995 8~19.958 4μg/mL(r=0.999 8)、2.944 2~29.441 8μg/mL(r=0.999 7)、8.215 0~82.150 1μg/mL(r=0.999 7)范围内线性关系良好,平均加样回收率分别为94.9%、93.9%、91.2%、101.1%,RSD分别为0.9%、1.2%、1.4%、1.0%。结论该方法准确可靠,可用于九味羌活丸、片、颗粒的质量控制。

HPLC法筛查百花定喘制剂中前胡投料

目的:通过测定白花前胡甲素、白花前胡乙素和紫花前胡苷的含量,建立筛查百花定喘制剂中投料为前胡还是紫花前胡的HPLC方法。方法:采用Symmentry-C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,流动相:甲醇(A)-0.1%磷酸溶液(B),梯度洗脱,检测波长为321 nm,流速为1.0 m L·min-1。结果:5批药材的标示名称与试验判断结果不一致;47批百花定喘制剂的筛查结果表明,未见紫花前胡投料,前胡存在投料不足的情况。结论:该方法专属性良好,可作为定性筛查白花定喘制剂中投料前胡的方法。

紫花前胡苷通过调控CXCL5-ERK/MEK信号轴发挥抗肝癌作用

本文探讨紫花前胡苷(nodakenin,NK)对肝癌细胞的作用及机制。不同浓度紫花前胡苷处理HepG2和MHCC-97H细胞,CCK-8检测细胞增殖变化,细胞划痕和Trans-wells实验观察细胞迁移和侵袭能力变化。紫花前胡苷能够显著抑制HepG2和MHCC-97H细胞增殖、体外迁移和侵袭;RNA-seq分析紫花前胡苷给药前后各基因表达,qRT-PCR、Western blotting和细胞免疫荧光进行验证分析,结果表明紫花前胡苷给药后趋化因子5(CXCL5)的表达显著降低,同时ERK和MEK磷酸化被抑制。综上所述紫花前胡苷通过下调CXCL5抑制ERK/MEK信号通路从而发挥抗肝癌作用。