X射线对胃癌细胞和人脐静脉内皮细胞LOX家族成员的不同影响

目的比较不同剂量X射线对人低分化粘液样胃腺癌细胞MGC-803和人脐静脉内皮细胞(HUVEC)赖氨酰氧化酶(LOX)家族成员的影响,为了解X射线辐射后不同细胞中基因和蛋白的改变提供依据。方法0、2、4、6、8和10 Gy剂量X射线辐射MGC-803和HUVEC细胞,用细胞增殖实验检测细胞致死率并计算细胞半数致死量(LD 50),确定后序测试剂量组;Realtime PCR、Western blot、ELISA及Amplex Red过氧化氢法分别检测辐射后细胞LOX家族成员mRNA丰度、蛋白相对量、分泌量及LOX酶活性变化;Western blot方法分析X射线辐射对细胞p-p38MAPK和p-Erk1/2MAPK影响。结果X射线辐射后的LD 50胃癌MGC-803为8.2 Gy,HUVEC为6 Gy,后序试验选用0、2、4和6 Gy剂量组。MGC-803细胞经各剂量X射线辐射后LOXL1、LOXL2和LOXL4的mRNA均下调,而LOX的mRNA上调(P<0.05);2 Gy组LOX和LOXL4的蛋白和酶分泌水平低于0 Gy组(P<0.05);4 Gy组LOX、LOXL1、LOXL2和LOXL4的蛋白和分泌低于0 Gy组(P<0.05);6 Gy组LOXL1的蛋白和分泌低于0 Gy组(P<0.05);但LOXL3的mRNA、蛋白和分泌在2 Gy组均高于0 Gy组(P<0.05)。HUVEC中,2 Gy组LOXL1和LOXL3的mRNA、蛋白和酶分泌水平均显著高于0 Gy组(P<0.05);4 Gy组LOX、LOXL1、LOXL3和LOXL4的mRNA、蛋白和酶分泌水平均较0 Gy组升高(P<0.05);6 Gy组LOXL2和LOXL4的mRNA、蛋白和酶分泌水平均较0 Gy组升高(P<0.05)。2 Gy和6 Gy组HUVEC的LOX酶活性增强(P<0.05)。MGC-803细胞的2 Gy和6 Gy组p-p38、p-p42、p-p44较0 Gy组上调(P<0.05);HUVEC经各剂量辐射p-p38、p-p42和p-p44均上调(P<0.05)。结论X射线辐射对两种细胞作用不同,一定剂量X射线辐射上调HUVEC的LOX及其家族成员的产生、分泌和酶活性,下调胃癌细胞MGC-803的除LOXL3外其他成员的产生和分泌。

NADPH氧化酶NOX家族与疾病的关系

还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(nicotinamide adenine dinucleotide phosphate,NADPH)氧化酶的非吞噬细胞氧化酶(non-phagocytic cell oxidase,NOX)家族是许多非吞噬细胞中活性氧(reactive oxygen species,ROS)的主要来源。正常状态下,通过该途径产生的ROS作为信号分子参与了细胞分化、增殖、凋亡等的调节,但在环境胁迫下,NOX蛋白家族在感受细胞外信息刺激时,能够迅速活化产生过量的ROS,引起的氧化压力会诱导机体多种疾病的发生、发展。本文主要从NADPH氧化酶NOX家族蛋白的结构、活化、功能及与疾病发生、发展的关系等方面进行简述。

NADPH氧化酶NOX家族基因在肾透明细胞癌中表达的临床意义

目的利用TCGA数据库分析NADPH氧化酶NOX家族基因在肾透明细胞癌(ccRCC)中表达的临床意义。方法收集TCGA数据库肾透明细胞癌数据集(TCGA-KIRC)中NADPH氧化酶NOX家族基因NOX1–5和DUOX1–2mRNA表达谱资料及临床病例资料。通过Cox回归模型、K-M曲线log-rank检验分析NADPH氧化酶NOX家族基因表达的预后意义,通过卡方检验分析NOX家族基因与ccRCC患者临床病例参数的相关性。采用基因集富集分析(GSEA)方法探讨NOX家族基因调控ccRCC可能的作用机制。结果年龄、T分期、M分期、NOX1mRNA和DUOX1 mRNA表达为ccRCC预后的独立风险因素。NOX1表达增加与ccRCC患者TNM分期和M分期相关。NOX1或DUOX1表达增加患者总生存期均明显短于表达减少患者(P=0.003),NOX1低表达样本富集了黏合连接、背腹轴形成等多种基因集。结论在ccRCC中,NOX1或DUOX1高表达是一种预后不良因素,可能成为预测ccRCC患者转移发生、判断预后的有效生物标志物。