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16-23S rRNA Spacer Region Polymorphism in Gangetic River Water Isolates of Salmonella
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作者 Rubi Singh Mumtesh Kumar Saxena 《Journal of Water Resource and Protection》 2010年第8期756-761,共6页
Salmonella is one of the major pathogenic bacteria present in contaminated water. 16-23S rRNA spacer region has been reported to be polymorphic at serovar level in Salmonella. Salmonella isolates obtained from Ganges ... Salmonella is one of the major pathogenic bacteria present in contaminated water. 16-23S rRNA spacer region has been reported to be polymorphic at serovar level in Salmonella. Salmonella isolates obtained from Ganges river water were studied for 16-23S rRNA spacer region polymorphism. Thirty three isolates belonging to eight serovars (S. Typhimurium, S. Abuja, S. Pantypridd, S. Lagos, S. Chinkual, S. Zwickau, S. Goldenberg and S. Oritamerin) were studied for the polymorphism. Out of 33 isolates, 15 different profiles were observed no serovar specific profile. Our findings indicate that 16-23S rRNA spacer region is not specific at serovar level, but can be used for differentiation of different Salmonella isolates. 展开更多
关键词 GANGES River SALMONELLA spacer region POLYMORPHISM 16-23s RRNA
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基于SCAR标记和DNA条形码技术的苍术基原鉴别研究
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作者 陈研 冯露露 +1 位作者 黄荣 齐伟辰 《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 北大核心 2024年第2期490-501,共12页
目的开发出能同时鉴别北苍术和关苍术的分子标记方法,并探究不同种质资源苍术的遗传进化关系。方法对不同地区北苍术Atractylodes chinensis(Bunge)Koidz及关苍术A.japonica Koidz.ex Kitam基因组DNA的差异片段进行测序,结合SRAP、ISSR... 目的开发出能同时鉴别北苍术和关苍术的分子标记方法,并探究不同种质资源苍术的遗传进化关系。方法对不同地区北苍术Atractylodes chinensis(Bunge)Koidz及关苍术A.japonica Koidz.ex Kitam基因组DNA的差异片段进行测序,结合SRAP、ISSR、DAMD分子标记方法,优化PCR反应体系,筛选并转换成特异性标记,同时,采用条形码方法分析种间序列差异。结果通过SRAP、ISSR、DAMD三种分子标记方法的PCR扩增,共筛选出198对能稳定扩增且重现性好的引物,转换出7对能稳定、快速鉴别北苍术和关苍术的SCAR引物。条形码方法检测出北苍术ITS2序列长度为454 bp,关苍术ITS2序列长度为453 bp,与其他苍术属植物之间遗传距离较远。NJ树结果显示,北苍术、关苍术及其他苍术属植物均各自聚为一支,表现出良好的单系性。依据ITS2二级结构,4种苍术属植物在螺旋区的茎环数目、大小、位置均有明显差异,可以直观地进行区分。结论所开发的特异性SCAR标记为苍术属植物优良品种的筛选提供了新方法,DNA条形码能稳定、准确鉴别北苍术。 展开更多
关键词 北苍术 关苍术 Internal transcribed spacer 2(ITS2) Sequence-related amplified polymorphism(SRAP) Inter-simple sequence repeat(ISSR) Direct amplification of minisatellite region DNA(DAMD) Sequence characterized amplified regions(SCAR)
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The Potential of DNA Barcode-Based Delineation Using Seven Putative Candidate Loci of the Plastid Region in Inferring Molecular Diversity of Cowpea at Sub-Species Level
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作者 Patrick Okoth John Muoma +3 位作者 Mulaya Emmanuel Wekesa Clabe Dennis O. Omayio Paul O. Angienda 《American Journal of Molecular Biology》 2016年第4期138-158,共21页
The novelty and suitability of the mitochondrial gene CO1 in DNA barcoding as a reliable identification tool in animal species are undisputed. This is attributed to its standardized sequencing segment of the mitochond... The novelty and suitability of the mitochondrial gene CO1 in DNA barcoding as a reliable identification tool in animal species are undisputed. This is attributed to its standardized sequencing segment of the mitochondrial cytochrome c oxidase-1 gene (CO1) which has the necessary universality and variability making it a generally acceptable barcode region. CO1 is a haploid single locus that is uniparentally-inherited. Protein-coding regions are present in high-copy numbers making it an ideal barcode. The mitochondrial oxidase subunit I (COI) gene is a robust barcode with a suitable threshold for delineating animals and is not subject to drastic length variation, frequent mononucleotide repeats or microinversions. However, a low nucleotide substitution rate of plant mitochondrial genome [mtDNA] precludes the use of CO1 as a universal plant DNA barcode and makes the search for alternative barcode regions necessary. Currently, there exists no universal barcode for plants. The plastid region reveals leading candidate loci as appropriate DNA barcodes yet to be explored in biodiversity studies in Kenya. Four of these plastid regions are portions of coding genes (matK, rbcL, rpoB, and rpoC1), and three noncoding spacers (atpF-atpH, trnH-psbA, and psbK-psbL) which emerge as ideal candidate DNA loci. While different research groups propose various combinations of these loci, there exists no consensus;the lack thereof impedes progress in getting a suitable universal DNA barcode. Little research has attempted to investigate and document the applicability and extend of effectiveness of different DNA regions as barcodes to delineate cowpea at subspecies level. In this study we sought to test feasibility of the seven putative candidate DNA loci singly and in combination in order to establish a suitable single and multi-locus barcode regions that can have universal application in delineating diverse phylogeographic groups of closely related Kenyan cowpea variants. In this study, our focus was based on genetic parameters including analyses of intra- and infra-specific genetic divergence based on intra- and infra-specific K2P distances;calculation of Wilcoxon signed rank tests of intra-specific divergence among loci and coalescence analyses to delineate independent genetic clusters. Knowledge of DNA candidate loci that are informative will reveal the suitability of DNA barcoding as a tool in biodiversity studies. Results of this study indicate that: matK, trnH-psbA, psbK-psbL, and rbcL are good barcodes for delineating intra and infraspecific distances at single loci level. However, among the combinations, matK + trnH-psbA, rpoB + atpF-atpH + matK are the best barcodes in delineating cowpea subvariants. rbcL gene can be a suitable barcode marker at single locus level, but overall, multi locus approach appears more informative than single locus approach. The present study hopes to immensely contribute to the scanty body of knowledge on the novelty of DNA barcoding in cataloguing closely related cowpea variants at molecular level and hopes to open up future research on genomics and the possibility of use of conserved regions within DNA in inferring phylogenetic relationships among Kenyan cowpea variants. 展开更多
关键词 DNA Barcoding Plastid region DNA Sequencing Intergenic spacers cp DNA Mo-lecular Phylogenetics INTRASPECIFIC Infraspecific
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葡萄座腔菌Botryosphaeria dothidea胞内miRNA及siRNA的鉴定与分析 被引量:1
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作者 章鹏程 俞沁如 +4 位作者 刘瑶瑶 王寒怡 胡奕然 赖童飞 周婷 《杭州师范大学学报(自然科学版)》 CAS 2023年第2期158-166,共9页
通过ITS-rDNA检测和形态学典型特征观察确定葡萄座腔菌Botryosphaeria dothidea的遗传背景,并对其胞内小RNA测序.新预测10个miRNAs和298个siRNAs,并分析了预测的miRNAs和siRNAs的序列信息、结构、长度分布、碱基偏好性、表达情况,为在... 通过ITS-rDNA检测和形态学典型特征观察确定葡萄座腔菌Botryosphaeria dothidea的遗传背景,并对其胞内小RNA测序.新预测10个miRNAs和298个siRNAs,并分析了预测的miRNAs和siRNAs的序列信息、结构、长度分布、碱基偏好性、表达情况,为在分子水平了解葡萄座腔菌发育和致病机制提供了理论基础. 展开更多
关键词 葡萄座腔菌 内转录间隔区 微小RNA 小干扰RNA
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高寒地区500kV输电线路导线间隔棒损坏原因分析及治理 被引量:1
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作者 王宝成 王宇迪 《电工技术》 2023年第15期104-106,共3页
呼伦贝尔地区多条500 kV输电线路发生了导线间隔棒金具磨损缺陷,分析认为是该地区冬季气温低、导线年平均运行应力大、没有进行差异化防风设计导致的,并提出了通过加装防振锤、减小次档距、采用新型导线间隔棒等方式进行差异化改造,提... 呼伦贝尔地区多条500 kV输电线路发生了导线间隔棒金具磨损缺陷,分析认为是该地区冬季气温低、导线年平均运行应力大、没有进行差异化防风设计导致的,并提出了通过加装防振锤、减小次档距、采用新型导线间隔棒等方式进行差异化改造,提高线路抗风害水平。 展开更多
关键词 高寒地区 输电线路 导线间隔棒 磨损
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中国香菇自然种质的rDNA遗传多样性分析 被引量:19
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作者 徐学锋 林范学 +2 位作者 程水明 李安政 林芳灿 《菌物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期29-35,共7页
测定了全国范围内的59个野生香菇菌株rDNA的ITS区域的序列。所得序列的总长度在723-727个碱基之间,G+C含量也基本稳定在57.5%左右。用Phylip3.6软件包对59个ITS序列进行DNA数据分析。结果表明59个菌株被划分到3个不同的谱系中,其中谱系... 测定了全国范围内的59个野生香菇菌株rDNA的ITS区域的序列。所得序列的总长度在723-727个碱基之间,G+C含量也基本稳定在57.5%左右。用Phylip3.6软件包对59个ITS序列进行DNA数据分析。结果表明59个菌株被划分到3个不同的谱系中,其中谱系Ⅰ包括11个菌株,分布较为均衡,涉及东北、西北、西南和东部沿海等地区的8个省份;谱系Ⅱ包括14菌株,以西北、西南的4个省份为主;谱系Ⅲ包括34个菌株,覆盖范围最广,除东北和西北高原地区外,其它均有涉及。地缘关系分析表明以陕、甘为主的西北高原地区的菌株涉及Ⅰ、Ⅱ两个谱系;以闽、浙、赣和台湾为主的东部沿海地区的菌株涉及Ⅰ、Ⅲ两个谱系;而以云、贵、川为主的西南地区的菌株则覆盖到了所有的3个谱系。这三个地区的香菇遗传多样性最丰富,西南地区尤为突出,是香菇种质资源保护与利用的重点区域。 展开更多
关键词 香菇 菌株 遗传多样性分析 种质资源保护 省份 谱系 野生 DNA 西北高原 含量
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蜡梅科(Calycanthaceae)若干植物nrDNA ITS序列PCR反应条件分析 被引量:3
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作者 赵凯歌 陈龙清 《北京林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第S2期29-31,28,共4页
该文旨在探讨适合于扩增蜡梅科植物ITS序列的PCR反应条件。试验中设计了2个新引物来扩增整个核糖体RNA基因(nrDNA)的ITS序列,进行了4种引物组合、2种扩增程序、7种Mg^(2+)浓度、4种dNTP浓度和3种二甲基亚砜浓度的比较。结果表明:当反应... 该文旨在探讨适合于扩增蜡梅科植物ITS序列的PCR反应条件。试验中设计了2个新引物来扩增整个核糖体RNA基因(nrDNA)的ITS序列,进行了4种引物组合、2种扩增程序、7种Mg^(2+)浓度、4种dNTP浓度和3种二甲基亚砜浓度的比较。结果表明:当反应体系中Mg^(2+)浓度为1.8 mmol/L,dNTP为2 mmol/L,含5%二甲基亚砜,扩增时先进行两步预扩增,反应效果最好。文中还对引物的设计进行了探讨,认为当所选用的植物可能有寄生真菌时,最好不用与真菌同源的引物。最后提出了几点引物设计的注意事项。 展开更多
关键词 CALYCANTHACEAE NRDNA ITS (internal transcribed spacer) region PCR reaction condition
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5S-rRNA基因间区序列变异用于金银花药材道地性研究初探 被引量:59
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作者 李萍 蔡朝晖 邢俊波 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2001年第9期834-837,共4页
目的 研究金银花药材道地性形成的基因基础。方法 用 SDS法提取金银花 L onicera japonica不同居群、外类群细毡毛忍冬 L.similis和山银花 L.confusa的总 DNA,进行 5 S- r RNA基因间区的 PCR扩增和测序 ,并用软件 Mega进行分析。结果... 目的 研究金银花药材道地性形成的基因基础。方法 用 SDS法提取金银花 L onicera japonica不同居群、外类群细毡毛忍冬 L.similis和山银花 L.confusa的总 DNA,进行 5 S- r RNA基因间区的 PCR扩增和测序 ,并用软件 Mega进行分析。结果  L onicera L.属植物 5 S- r RNA基因间区约 2 10 bp,其中 G+C含量较高 ,达 70 %左右 ,不同居群的 L.japonica碱基序列有差别 ,通过测序可以进行鉴别。L.confusa与 L.japonica间的遗传距离较大。结论 种间 5 S- r RNA基因间区的序列差异大于种内 ;道地药材之间的遗传距离较小 ;道地与非道地药材之间的遗传距离大于道地药材之间的遗传距离。 展开更多
关键词 金银花 道地性 5S-rRNA基因间区序列变异 中药
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不同产地浙贝母的基因序列及生物碱含量比较 被引量:23
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作者 蔡朝晖 李萍 +2 位作者 李松林 董婷霞 詹华强 《中药材》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期157-159,共3页
目的:探讨道地药材形成的基因基础。方法:以AS和AS-1为引物对4个不同产地浙贝母的5S-rRNA基因间区进行了PCR扩增和测序,并采用酸性染料比色法测定了它们的总生物碱含量及用柱前衍生化气相色谱法测定了其中2个单体生物碱的含量。结果:不... 目的:探讨道地药材形成的基因基础。方法:以AS和AS-1为引物对4个不同产地浙贝母的5S-rRNA基因间区进行了PCR扩增和测序,并采用酸性染料比色法测定了它们的总生物碱含量及用柱前衍生化气相色谱法测定了其中2个单体生物碱的含量。结果:不同产地浙贝母的5S-rRNA基因间区具有相同的碱基序列,均为588bp;它们的总生物碱含量相当,气相色谱结果也表明,它们含有相同的单体生物碱,只是各单体生物碱的含量不同。结论:不同产地浙贝母的差异不是由碱基序列,而是由小环境因素引起的。 展开更多
关键词 浙贝母 道地药材 5S-rRNA基因间区序列 生物碱 基因序列
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临床常见毛孢子菌的鉴定 被引量:5
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作者 窦红涛 李若瑜 +5 位作者 万哲 陈伟 杨蓉娅 敖俊红 王文岭 王端礼 《临床皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第9期564-567,共4页
为了探讨临床常见毛孢子菌(Trichosporonspp.)的鉴定方法,在形态学、营养生理学试验的基础上对临床常见的毛孢子菌———皮瘤毛孢子菌(Trichosporoninkin)、皮毛孢子菌(Trichosporoncutaneum)及阿萨希毛孢子菌(Trichosporonasahii)进行... 为了探讨临床常见毛孢子菌(Trichosporonspp.)的鉴定方法,在形态学、营养生理学试验的基础上对临床常见的毛孢子菌———皮瘤毛孢子菌(Trichosporoninkin)、皮毛孢子菌(Trichosporoncutaneum)及阿萨希毛孢子菌(Trichosporonasahii)进行核糖体核糖核酸(rRNA)基因(rDNA)的内转录间区(ITS)扩增,用限制性内切酶Cfr13I、NcoI对聚合酶链反应(PCR)产物进行限制性片段长度多态性(RFLP)分析及序列测定,发现用Cfr13I做酶切,皮毛孢子菌的RFLP带型和阿萨希毛孢子菌、皮瘤毛孢子菌的不同;用NcoI做酶切,皮瘤毛孢子菌的带型与另两者不一致,序列分析的结果与形态学、营养生理学试验一致。结果提示,温度试验、API20C、RFLP及序列测定可望用于鉴定临床常见的毛孢子菌。 展开更多
关键词 毛孢子菌 内转录间区 限制性片段长度多态性 序列测定 细菌鉴定
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西流湖水体藻类污染现状和产毒蓝藻的全细胞PCR检测 被引量:12
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作者 班海群 庄东刚 +4 位作者 朱静媛 巴月 程学敏 张慧珍 崔留欣 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期165-167,共3页
目的了解西流湖水体浮游藻类尤其是产毒蓝藻的污染现状,并建立全细胞PCR检测产毒蓝藻的方法.方法从2004年3月开始,采集西流湖水体表层水样,用血细胞计数板法计数藻细胞;设计特异引物,采用全细胞PCR方法检测水样中藻青蛋白基因中间序列(... 目的了解西流湖水体浮游藻类尤其是产毒蓝藻的污染现状,并建立全细胞PCR检测产毒蓝藻的方法.方法从2004年3月开始,采集西流湖水体表层水样,用血细胞计数板法计数藻细胞;设计特异引物,采用全细胞PCR方法检测水样中藻青蛋白基因中间序列(PC-IGS)和微囊藻毒素多肽合成酶基因mcyB,并对mcyB扩增产物克隆测序.结果西流湖水体藻类主要是蓝藻、绿藻、硅藻和裸藻,夏秋季蓝藻为优势藻门;2004年7月7日~9月27日水样PC-IGS序列PCR检测阳性,7月29日~9月27日水样mcyB基因PCR检测阳性,扩增片断mcyB测序结果与Genbank报道的铜绿微囊藻mcyB同源性大于97%,氨基酸序列同源性大于94%.结论西流湖夏秋季有产毒蓝藻出现,全细胞PCR法可以检测水体中产毒蓝藻. 展开更多
关键词 蓝藻 全细胞PCR 藻青蛋白基因中间序列 微囊藻毒素多肽合成酶基因B
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四种臂尾轮虫rDNA16S-23S基因间隔区的序列测定与分析 被引量:8
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作者 席贻龙 陈月琴 +1 位作者 诸葛燕 黄祥飞 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期427-430,共4页
关键词 轮虫 萼花臂尾轮虫 双棘臂尾轮虫 裂足臂尾轮虫 角突臂尾轮虫 RDNA 基因间隔区
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冬瓜枯萎病菌核糖体rDNA ITS区的克隆与序列分析 被引量:7
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作者 王翠霞 徐金茹 +3 位作者 习雨琳 白雪菲 温晓蕾 段会军 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2010年第1期80-83,共4页
采用镰刀菌核糖体基因转录间隔区(ITS)通用引物,PCR扩增冬瓜枯萎病菌核糖体基因ITS区,并对产物进行克隆和序列分析;利用Mega 4.1软件对序列及GeneBank中以葫芦科为寄主的镰刀菌不同专化型ITS序列进行聚类。冬瓜枯萎病菌ITS全长1 063 bp... 采用镰刀菌核糖体基因转录间隔区(ITS)通用引物,PCR扩增冬瓜枯萎病菌核糖体基因ITS区,并对产物进行克隆和序列分析;利用Mega 4.1软件对序列及GeneBank中以葫芦科为寄主的镰刀菌不同专化型ITS序列进行聚类。冬瓜枯萎病菌ITS全长1 063 bp,其中包括18S rDNA一部分序列,5.8S rDNA,ITS1和ITS2全部序列及28S rD-NA部分序列。聚类结果将15个菌株ITS序列划分为2个类群,类群I包括4个菌株,分别为2个西瓜枯萎病菌株和2个甜瓜枯萎病菌株;类群II包括11个菌株,其中冬瓜枯萎病菌株就在该类群中,其余为甜瓜枯萎病菌株5个、西瓜枯萎病菌株3个、黄瓜枯萎病菌株、丝瓜枯萎病菌株和葫芦枯萎病菌株各1个。 展开更多
关键词 冬瓜 冬瓜枯萎病菌 ITS
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坛紫菜rbcS及rbcL-rbcS基因间隔区的序列分析 被引量:9
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作者 孙雪 杨锐 +1 位作者 刘必谦 裴鲁青 《水产科学》 CAS 北大核心 2006年第1期23-26,共4页
Rubisco是光合作用和光呼吸的关键酶,目前已成为高等植物中研究最深入的酶之一,而在低等藻类中关于该酶的相关研究却很少。以来自浙江和福建的6个坛紫菜(Porphyra haitanensis)无性系为研究对象,以江苏条斑紫菜(P.yezoensis)为参照,克... Rubisco是光合作用和光呼吸的关键酶,目前已成为高等植物中研究最深入的酶之一,而在低等藻类中关于该酶的相关研究却很少。以来自浙江和福建的6个坛紫菜(Porphyra haitanensis)无性系为研究对象,以江苏条斑紫菜(P.yezoensis)为参照,克隆了其Rubisco小亚基(rbcS)及大小亚基基因间隔区共516 bp的序列。序列分析结果表明,其中4个坛紫菜系(Hza、Hzf、Hpt、Hzz)的基因序列完全相同(以其作为标准),坛紫菜Hzb和Hzc与其均只有1个碱基差异,而条斑紫菜Yn55与其差别碱基为46个。将本实验的7条紫菜序列与GenBank数据库收录的17条紫菜Rubisco序列一起做系统分析,结果表明坛紫菜和条斑紫菜都分别归到了各自的类群中。以上结果说明,紫菜rbcS和rbcL-rbcS基因间隔区序列的同源性较高,可用于种以上水平的系统分析。 展开更多
关键词 坛紫菜 rbeS rbcL-rbcS基因间隔区 序列分析
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一株具霉菌抑制活性细菌的鉴定 被引量:6
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作者 曹冬梅 何成华 +2 位作者 景晟 张洪英 张海彬 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期467-469,共3页
为探讨菌株HB02对霉菌生长的影响,将HB02与霉菌孢子悬液同时加入到PYG肉汤,在28℃培养15d。在培养的第3、69、、12和15天测定培养液中的黄曲霉和禾谷镰刀菌菌丝重量。结果显示:与对照组相比,HB02可显著抑制黄曲霉和禾谷镰刀菌生长(P<... 为探讨菌株HB02对霉菌生长的影响,将HB02与霉菌孢子悬液同时加入到PYG肉汤,在28℃培养15d。在培养的第3、69、、12和15天测定培养液中的黄曲霉和禾谷镰刀菌菌丝重量。结果显示:与对照组相比,HB02可显著抑制黄曲霉和禾谷镰刀菌生长(P<0.01)。通过常规细菌学实验鉴定该菌株为一株乳酸杆菌。通过分子生物学方法测定了菌株的16S rRNA基因序列,进一步证实了HB02为一株乳酸杆菌。根据Berthier等的方法,通过HB0216S/23S rRNA基因间隔(Intergenic Spacer Regions,ISR)序列的扩增和测定,再通过基因文库中所有细菌基因序列比较分析,最终鉴定菌株HB02为一株弯曲乳酸杆菌(Lactobacillus curvatus)。 展开更多
关键词 霉菌 16S/23S RRNA 基因间隔序列 弯曲乳酸杆菌
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16S-23S rRNA基因区间细菌鉴定实验研究 被引量:11
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作者 傅君芬 卢美萍 +3 位作者 尚世强 洪文澜 陆淼泉 李建平 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 2002年第6期448-452,共5页
目的 :探讨 16 S- 2 3S r RNA基因区间对细菌鉴定的应用。方法 :以 16 S- 2 3S r RNA基因区间为靶序列设计引物 ,采用聚合酶链反应检测标准菌株及临床菌株 DNA。结果 :对 2 7株代表 2 7个菌种的标准菌株进行 PCR扩增 ,分别出现不同的 DN... 目的 :探讨 16 S- 2 3S r RNA基因区间对细菌鉴定的应用。方法 :以 16 S- 2 3S r RNA基因区间为靶序列设计引物 ,采用聚合酶链反应检测标准菌株及临床菌株 DNA。结果 :对 2 7株代表 2 7个菌种的标准菌株进行 PCR扩增 ,分别出现不同的 DNA图谱 ,该图谱能直接或经核酸内切酶处理后用于细菌分类 ,敏感性可达 2 .5 CFU/ml的细菌 ,与人外周血白细胞 DNA和真菌及病毒无交叉。 32株临床细菌标本均扩增出与相应标准菌株一致的图谱。结论 :16 S- 2 3S r RNA基因区间 PCR扩增技术检测细菌 ,具有敏感、特异、快速、准确的优点 。 展开更多
关键词 细菌 遗传学 基因rRNA 聚合酶链反应 16S-23SrRNA基因
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16S~23S rRNA基因序列在细菌鉴定中的应用 被引量:12
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作者 于超 郭海勇 +1 位作者 魏嘉良 钱爱东 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第2期57-60,共4页
近些年围绕16S~23SrRNA基因间隔区发展起来的分子生物学技术为细菌多样性的研究开辟了新的途径,使得人们在细菌多样性的研究中得以摆脱传统分离培养的束缚,进而使分析方法得以长足拓展,并为指导实践提供可靠的理论依据,作者就16S~23Sr... 近些年围绕16S~23SrRNA基因间隔区发展起来的分子生物学技术为细菌多样性的研究开辟了新的途径,使得人们在细菌多样性的研究中得以摆脱传统分离培养的束缚,进而使分析方法得以长足拓展,并为指导实践提供可靠的理论依据,作者就16S~23SrRNA基因间隔区序列的特点、应用及发展前景作一简述。 展开更多
关键词 16S^23SrRNA基因间隔区 细菌 多样性
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致病性外瓶霉的PCR-RFLP分类 被引量:4
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作者 李东明 李若瑜 +3 位作者 王端礼 王晓红 万哲 马圣清 《临床皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第1期10-12,共3页
应用PCR方法对致病性外瓶霉进行分类鉴定。以ITS3和ITS4为引物 ,对常见的7种致病性外瓶霉的模式株核糖体DNA转录间隔区(ITSⅡ)进行扩增 ,4种内切酶(HinFI、MspI、BsuRI和RsaI)酶切。各种间多态性显著 ,常规方法难以鉴别的皮炎外瓶霉和... 应用PCR方法对致病性外瓶霉进行分类鉴定。以ITS3和ITS4为引物 ,对常见的7种致病性外瓶霉的模式株核糖体DNA转录间隔区(ITSⅡ)进行扩增 ,4种内切酶(HinFI、MspI、BsuRI和RsaI)酶切。各种间多态性显著 ,常规方法难以鉴别的皮炎外瓶霉和甄氏外瓶霉较易区分。PCR RFLP准确可靠 ,可用于形态及其他方法难以确定的致病菌种的鉴别。 展开更多
关键词 外瓶霉 分类 皮肤霉菌病 PCR-RFLP
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纳米金基因芯片结合通用引物1次PCR法同时检测多个病原菌的研究 被引量:6
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作者 顾大勇 鲁卫平 +1 位作者 王华 周元国 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期29-32,共4页
目的基于基因分型技术构建通用引物1次PCR法的样品制备技术,并结合纳米金基因芯片检测系统实现1次对多个病原菌的检测分析。方法针对rDNA保守序列设计通用引物,实现1次PCR完成对各靶细菌ISR序列的扩增;设计针对各靶细菌的特异探针,构建... 目的基于基因分型技术构建通用引物1次PCR法的样品制备技术,并结合纳米金基因芯片检测系统实现1次对多个病原菌的检测分析。方法针对rDNA保守序列设计通用引物,实现1次PCR完成对各靶细菌ISR序列的扩增;设计针对各靶细菌的特异探针,构建纳米金新型基因芯片,并用芯片进行实际检测。结果设计的通用引物可实现对12种待检靶细菌的正确扩增;选用的各探针特异性强、可靠性好;芯片具有较好的灵敏度、特异性及可靠性;检测敏感性达到50 fmol/L;临床检测显示本方法准确可靠。结论与多重PCR样品制备法芯片比较,本芯片检测的步骤和复杂性大为减低,且有较好的检测性能,可用于各靶病原菌的检测。 展开更多
关键词 纳米金 基因芯片 病原菌 16S-23S rDNA区间
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Q热立克次体中国株的16S-23SrDNA间区序列分析 被引量:3
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作者 胡廷徽 温博海 +2 位作者 万泽生 俞树荣 张雪 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期30-34,共5页
用PCR扩增了 7株中国分离株 (七医、新桥、雅安、李、YS 8、YS 9和YH 1 1 )和2株国际参考株 (Henzerling和Grita)的 1 6S 2 3SrDNA基因间区 ,对扩增产物进行了序列分析。结果发现它们仅在少数几个碱基位上有不同。在第 6 0位上 3个云南... 用PCR扩增了 7株中国分离株 (七医、新桥、雅安、李、YS 8、YS 9和YH 1 1 )和2株国际参考株 (Henzerling和Grita)的 1 6S 2 3SrDNA基因间区 ,对扩增产物进行了序列分析。结果发现它们仅在少数几个碱基位上有不同。在第 6 0位上 3个云南分离株YS 8、YS 9、YH 1 1和Grita株与Stein等报道的序列 (包括九里、其它国际参考株和一些法国临床分离株 )的碱基序列一致 ,为“C” ;其他 5株为“A” ,此位点的不同可能与适应不同的地理环境相关。另外 ,YS 9株在第 8和 2 0 8位、新桥株在第 43 2位也分别出现缺失 ,可能与适应不同的动物宿主或在实验室传代情况不同有关。 展开更多
关键词 贝氏柯克斯体 16S-23S rRNA基因 基因间区 序列分析 Q热 立克次体
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