人子宫在位及异位内膜细胞的体外培养及生物学特性比较

１６例人子宫内膜及２０例子宫内膜异位组织进行了体外分离培养，并比较了两种组织中上皮细胞及间质细胞的形态学特点及分泌功能。结果显示：两种组织的两类细胞在细胞角蛋白、波形蛋白和ＰＲＬ免疫细胞化学染色均有相似的阳性反应特点；并且也分别分泌相似量的ＣＡ １２５和ＰＲＬ，但是异位内膜间质细胞分泌的ＩＬ ６量明显高于正常内膜的间质细胞（Ｐ＜ ０．０１）。作者认为这种体外培养方法，对子宫内膜异位症细胞的生物学特性，以及进一步揭示子宫内膜异位症发病机制的实验室研究。

雌孕激素受体在子宫内膜癌、子宫内膜不典型增生及正常子宫内膜中不同表达的临床意义

为探讨子宫内膜雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)检测的方法及意义,用抗ER、PR单克隆抗体免疫组化SP法检测了26例子宫内膜癌、23例子宫内膜不典型增生、22例正常子宫内膜石蜡切片ER、PR的表达,结果显示,免疫组化SP法检测ER,PR阳性率在正常子宫内膜、不典型增生子宫内膜、子宫内膜癌组织中的分布不同。内膜癌ER、PR含量明显低于正常子宫内膜及不典型增生子宫内膜,正常内膜与不典型增生内膜ER、PR的表达无统计学差异,正常内膜与内膜癌、不典型增生与内膜癌ER、PR表达有统计学差异,反映了肿瘤的生物学行为。免疫组化ER、PR含量SP法测定对临床预后判断,指导治疗有一定的意义。

CXCL14在子宫内膜异位症增生期内膜中的表达

目的:分析CXCL14在子宫内膜异位症增生期在位内膜及异位内膜中的表达情况。方法:采取Real-time PCR和免疫组织化学染色法对手术和病理确诊增生期子宫内膜异位症的18例在位内膜、24例异位内膜及20例因行卵巢囊肿、子宫肌瘤手术的增生期正常子宫内膜(术后病理除外子宫内膜异位症)进行CXCL14表达的检测。结果:1与正常内膜比较,I-IV期子宫内膜异位症在位内膜的CXCL14 m RNA和蛋白表达水平明显下调,差异有统计学意义(P<0.05);2与正常内膜比较,I-II期子宫内膜异位症在位内膜的CXCL14 m RNA和蛋白表达水平有下调,但差异无统计学意义(P>0.05);3与I-IV期子宫内膜异位症在位内膜比较,I-IV期子宫内膜异位症异位内膜的CXCL14 m RNA和蛋白表达水平明显下调,差异有统计学意义(P<0.05);与I-II期在位内膜比较,I-II期异位内膜的CXCL14 m RNA和蛋白表达水平有下调,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论:CXCL14可能参与子宫内膜异位症的发生、发展,可能与子宫内膜异位症患者妊娠率低有关。

孕激素对子宫内膜异位症患者在位内膜T淋巴细胞分泌的受激活调节因子表达的影响

目的探讨正常T淋巴细胞表达和分泌的受激活调节因子(RANTES)与子宫内膜异位症(EM)发病的关系以及孕激素治疗的可行性。方法采集子宫内膜异位症患者术前以及放置左炔诺孕酮宫内节育系统(LNG-IUS)、口服甲羟孕酮(MPA)或注射促性腺激素释放激素类似物(GnRHa)后以及对照组的在位内膜,以半定量RT-PCR方法检测内膜组织中RANTES mRNA的表达。以100U/ml肿瘤坏死因子-α(TNFα)和不同浓度的孕酮(Po)与内膜细胞共孵育24h,观察Po对TNFα刺激RANTES分泌效应的影响。以不同浓度Po预处理细胞48h后,加入TNFα(100U/ml,16h),观察Po对TNFα刺激细胞分泌RANTES的抑制作用。采用ELISA方法检测细胞培养上清中RANTES的分泌量。结果药物干预前,EM组RANTES mRNA的相对表达量显著高于对照组(28.0±9.0vs.22.0±5.6,P<0.05)。放置LNG-IUS(24.0±4.2vs.25.9±4.2,P>0.05)或注射GnRHa(23.0±12.9vs.26.9±5.2,P>0.05)后,子宫内膜RANTES mRNA的表达差异无显著性;MPA组RANTES mRNA表达较用药前显著升高(42.6±3.1vs.24.3±5.7,P<0.05)。单纯Po刺激,培养子宫内膜细胞RANTES的分泌量无明显变化;同时以Po和TNFα刺激细胞,RANTES的分泌显著增加;Po预处理48h后,RANTES的分泌对TNFα的反应性显著减弱。结论EM患者在位内膜本身具有高趋化活性,孕激素防治EM有一定可行性。

子宫内膜内树突状细胞的免疫组化分析

目的利用免疫组织化学技术探讨子宫内膜内树突状细胞(dendriticcall,DC)免疫学发生机理。方法2005～2008年长沙市中心医院病理科的60例标本进行常规HE染色,进行免疫组化分析。结果增殖期子宫内膜,分泌期子宫内膜和绝经期子宫内膜HLA-DR免疫组化染色阳性率分别为69.2%、33.3%和10%;CDIa染色阳性率分别为61.5%、33.3%和0%,两两比较均有显著性差异(P<0.05),其中绝经期子宫内膜中阳性率最低。结论增殖期子宫内膜组织HLA-DR和CDIa阳性率均高于分泌期子宫内膜组织。

子宫内膜癌组织中Maspin、P53水平的表达及其相关性研究

目的通过检测子宫内膜癌,子宫内膜不典型增生,正常子宫内膜中的丝氨酸蛋白酶抑制剂(Mammary serine proteaseinhibitor,Maspin),突变型P53基因的表达,以探索它们在子宫内膜癌发生、进展过程中的作用,给临床诊断、治疗及预后判断提供新的理论依据。方法采用链霉菌素抗生物素-过氧化物酶法(S-P法)研究子宫内膜不典型增生20例、子宫内膜癌42例、同期正常子宫内膜15例中Maspin和P53的表达情况。结果 1.Maspin在三组的阳性表达率分别为40.5%、55.0%和86.7%;P53在三组的阳性表达率分别为69.0%、40.0%和13.3%;2.Maspin与P53的蛋白表达呈负相关。3.Maspin蛋白的表达与患者肿瘤分化程度、手术-病理分期、肌层浸润深度相关,与淋巴结转移无关。结论 Maspin与P53均参与了子宫内膜癌的发生及发展过程且二者相互作用,相互影响。

Skp2和P27^(kip1)蛋白在子宫内膜癌中的表达及其与临床病理的关系

目的:研究S期激酶相关蛋白2(Skp2)与P27kip1在子宫内膜癌中的表达水平与临床病理特征的关系,探讨其在子宫内膜癌发生、发展过程中的作用。方法:采用免疫组化SP法检测42例子宫内膜癌组织和12例正常子宫内膜组织中Skp2和P27kip1的表达。结果:42例子宫内膜癌组织中Skp2的阳性表达率为30.95%(13/42),显著高于正常内膜组织0.00%(0/12)(P<0.01);P27kip1的阳性表达率为54.76%(23/42),低于正常内膜组织91.67%(11/12)(P<0.05);统计分析还显示:Skp2和P27kip1的表达与肿瘤的分化程度、FIGO分期、淋巴结转移有关(P<0.05),与患者年龄无关(P>0.05),且Skp2和P27kip1在子宫内膜癌中的表达存在负相关(rs=-0.38,P<0.01)。结论:Skp2和P27kip1在子宫内膜癌的发生、发展中有一定协同作用,对其研究可为子宫内膜癌的基因治疗和预后评估提供有益线索。

子宫内膜良恶性组织中K-ras癌基因的表达

目的:探讨Kras癌基因在子宫内膜良恶性组织中的表达及与子宫内膜癌发生、发展的关系。方法:采用抗生物蛋白链菌素标记(LSAB)法检测33例子宫内膜癌、31例子宫内膜非典型增生、39例子宫内膜单纯型增生及31例正常子宫内膜标本中Kras癌基因的表达。结果:Kras癌基因在正常子宫内膜、单纯型增生、非典型增生及子宫内膜癌中的阳性表达率分别为35.48%、35.90%、41.94%、69.70%,其阳性表达率随着病变程度的加重而升高(r=0.2853,P<0.05),正常子宫内膜及单纯型增生与非典型增生及子宫内膜癌之间差异有统计学意义(P<0.05)。低分化子宫内膜癌中Kras癌基因阳性表达率明显高于中高分化者,Ⅱ、Ⅲ期子宫内膜癌中Kras癌基因阳性表达率明显高于Ⅰ期(P均<0.05)。Kras癌基因阳性表达率与其年龄及绝经情况无关。结论:Kras癌基因在子宫内膜癌发生、发展中起重要的作用,Kras癌基因的检测对于子宫内膜癌早期诊断、估计预后有一定的意义。

激活素A、抑制素A在正常子宫内膜的表达

目的探讨激活素A(ACTA)、抑制素A(INHA)在正常子宫内膜的表达及其临床意义。方法 30例患者的正常子宫内膜组织分为增生期16例(增生期组)、分泌期14例(分泌期组)。采用免疫组织化学链霉素抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法检测两组子宫内膜ACTA、INHA的表达;电化学发光法检测血清性激素雌二醇(E2)、孕酮(P)水平;酶联免疫吸附测定法检测血清ACTA、INHA水平。结果 ACTA、INHA表达阳性细胞的着色部位主要是在子宫内膜腺体上皮细胞的细胞浆内,呈淡黄色、深棕色或褐色。分泌期组ACTA、INHA的表达均强于增生期,差异有统计学意义(t分别=-5.16、-4.19,P均<0.05)。增生期组ACTA、INHA表达水平与血清E2均呈正相关(r分别=0.53、0.61,P均<0.05);与血清P无相关性(r分别=-0.19、-0.30,P均>0.05);分泌期组ACTA、INHA表达水平与血清E2、P均呈正相关(r分别=0.54、0.74;0.54、0.68,P均<0.05)。增生期组和分泌期组ACTA、INHA表达水平均与血清ACTA、INHA呈正相关(r分别=0.52、0.57;0.59、0.69,P均<0.05)。结论 ACTA、INHA在正常子宫内膜增生期分泌期均有表达,但分泌期表达明显增强。ACTA、INHA表达与血清E2、P密切相关,可能参与子宫内膜的成熟,在旁分泌/自分泌机制中起作用。

SKP^2在子宫内膜癌组织中的表达和意义

目的:评价SKP2在子宫内膜癌中的临床意义。方法:采用免疫组化S-P法,检测45例子宫内膜癌中SKP2蛋白的表达情况,分析其和临床各病理指标之间的关系。结果:SKP2在子宫内膜癌中呈高表达,其阳性率为78.4%(34/45),明显高于正常子宫内膜、子宫内膜增生过长(P<0.01);SKP2的表达与组织学分级和淋巴结转移关系密切(P<0.05);与临床分期、肌层浸润深度和年龄均无关(P>0.05)。结论:SKP2在子宫内膜癌的发生、发展中起重要作用,可能与子宫内膜癌的恶化进展有关,有可能成为判断预后的指标之一。

子宫内膜癌的雌激素、孕激素受体含量及其与临床和病理的关系

作者采用Lee荧光组织学法测定29例子宫内膜癌及其中9例癌旁内膜的雌激素受体(ER)和孕激素受体(PR)含量。结果发现:术前未经放、化疗的子宫内膜癌都含有ER,PR;腺鳞癌中腺癌成分的ER和PR含量高于鳞癌成分。雌二醇(E_2)和孕酮(P)阻断试验证实ER和PR具有特异性。癌旁内膜的ER和PR含量高于子宫内膜癌。ER和PR阳性水平在早期癌、子宫颈管无累及和高分化癌内较高,与肌层浸润程度及月经状况无关。在19例追踪半年至1年半的病例中,显示ER、PR阳性水平较高的病人预后较好,内分泌治疗也初见效果,但尚需要积累更多病例观察分析。

子宫内膜良恶性组织中雌、孕激素受体检测的临床意义

目的:探讨雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)在子宫内膜良恶性组织中的表达及其临床意义。方法:采用LSAB法对33例子宫内膜癌、39例子宫内膜单纯型增生、31例子宫内膜非典型增生及31例正常子宫内膜标本进行ER、PR的检测。结果:ER、PR在子宫内膜单纯型增生(46.15%、66.67%)、非典型增生(48.38%、64.52%)及子宫内膜癌(60.61%、60.61%)中的阳性表达率明显高于正常子宫内膜(19.35%、25.82%),P<0.05。且ER、PR阳性表达强度在单纯型增生、非典型增生、子宫内膜癌与正常内膜之间差异有统计学意义(P<0.05)。ER阳性表达率在子宫内膜癌组织分化之间的差异有统计学意义(P<0.05)。但ER、PR阳性表达率在其年龄、临床分期及绝经情况方面的差异均无统计学意义。结论:子宫内膜癌发生发展中可出现ER、PR异常表达,为临床内分泌治疗提供理论依据。

RANTES在子宫内膜异位症在位内膜及异位内膜的表达及其意义

目的:探讨调节活化正常T细胞表达与分泌的趋化因子(RANTES)在子宫内膜异位症在位内膜及异位内膜的表达及在子宫内膜异位症发病中的作用。方法:以2010年1～10月因子宫内膜异位症在我院行手术治疗的30例患者的在位内膜及异位内膜为研究组,以同期在我院就诊取IUD的30例患者的正常子宫内膜作为对照组,检测3组标本中RANTESmRNA表达及蛋白水平。并检测3组培养上清液对单核细胞趋化活性的影响。结果:①IL-1β刺激48小时,异位内膜组细胞RANTESmRNA表达及蛋白水平均增加,与在位内膜组和正常内膜组细胞比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。IL-1β刺激72小时,异位内膜组、在位内膜组细胞RANTESmRNA表达及蛋白水平均增加,异位内膜组细胞与在位内膜组和正常内膜组细胞比较,差异均有统计学意义(P<0.05);在位内膜组细胞与正常内膜组细胞比较,差异也有统计学意义(P<0.05)。②异位内膜组及在位内膜组单核细胞趋化指数明显高于正常内膜组(P<0.05)。结论:子宫内膜异位症患者的在位内膜及异位内膜RANTESmRNA表达及蛋白水平均增加。RANTES通过促进单核细胞的趋化活性,可能在子宫内膜异位症的发病中发挥作用。

趋化因子在子宫内膜异位症患者中的表达及临床意义

目的：探讨调节活化正常T细胞表达与分泌的趋化因子（ RANTES）在子宫内膜异位症患者血清、在位/异位内膜组织中的表达水平及临床意义。方法选择确诊为盆腔子宫内膜异位症的患者89例为研究对象（观察组）,以武汉市江夏区第一人民医院妇产科同期取宫内节育器且盆腔结构正常的60例女性为对照组,收集所有患者临床资料。采用酶联免疫吸附（ ELISA）法检测血清、异位/在位内膜RANTES水平,并进行分析。结果观察组血清RANTES水平显著高于对照组（t=3.06,P〈0.05）,且观察组中Ⅰ～Ⅱ期、Ⅲ～Ⅳ期血清RANTES水平均显著高于对照组（t值分别为2.68、4.13,均P〈0.05）。在位内膜组和异位内膜组RANTES水平均较正常内膜组显著升高（t值分别为3.26、4.05,均P〈0.05）；Ⅰ～Ⅱ期、Ⅲ～Ⅳ期异位内膜组RANTES水平均较Ⅰ～Ⅱ期、Ⅲ～Ⅳ期在位内膜组显著升高（t值分别为3.15、4.23,均P〈0.05）。子宫内膜异位症血清RANTES水平与盆腔粘连范围评分呈显著正相关（r=3.986,P〈0.05）,与痛经评分无显著相关性（r=0.287,P〉0.05）。结论 RANTES可能在子宫内膜异位症的发生发展中起重要作用。

ER、PR、p53和HER2在正常子宫内膜和子宫内膜癌中的表达相关性分析

目的研究ER、PR、p53和HER2在正常子宫内膜和子宫内膜癌中的表达。方法分别用HE染色和免疫组化SP法,对91例未接受过放、化疗及性激素治疗的子宫内膜癌患者标本,30例正常增生期子宫内膜标本进行染色,观察ER、PR、P53和HER2二者中的表达,并对这两种方法染色阳性表达进行比较。结果本研究中正常子宫内膜组织的30例,ER、PR阳性表达率分别为100%、90.0%,二者的双阳性率为90.0%,91例子宫内膜癌中,二者的双阳性率为47.2%。同时,ER在正常子宫内膜组织的阳性表达率为100%,ER在子宫内膜癌组织的阳性表达率为52.7%,提示与正常组比较,ER在子宫内膜癌组中表达减少,对实验数据进行量化分析表明:其差异有统计学意义(χ2=21.99,P<0.05,表2);PR在正常子宫内膜组织的阳性表达率为90.0%,PR在子宫内膜癌组织的阳性表达率为56.0%,提示与正常组比较,PR在子宫内膜癌组表达减少,对实验数据进行量化分析表明:其差异有统计学意义(χ2=11.36,P<0.05)。结论 ER、PR在子宫内膜癌组中蛋白表达降低。p53在子宫内膜癌组中的高表达,且其差异具有统计学意义(χ2=30.24,P<0.05)。HER2在子宫内膜癌组中的高表达,且其差异具有统计学意义(χ2=30.24,P<0.05)。