HPLC法同时测定双活风湿凝胶贴膏中5种成分

目的建立HPLC法同时测定双活风湿凝胶贴膏中升麻素苷、羟基红花黄色素A、羌活醇、蛇床子素、异欧前胡素的含量。方法该药物60%甲醇提取液的分析采用Waters Symmetry Shield-C_(18)色谱柱(5μm,4.6 mm×250 mm);流动相乙腈-0.1%磷酸,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;柱温20℃;检测波长310、400 nm。结果5种成分在各自范围内线性关系良好(r>0.9990),平均加样回收率98.04%~99.29%,RSD 1.19%~2.27%。结论该方法稳定,重复性好,分辨率高,可用于双活风湿凝胶贴膏的质量控制。

一种羌活醇衍生物的合成和其抗类风湿关节炎活性及作用机制研究

目的 设计合成一种新的羌活醇(Notopterol, Not)衍生物(NotC),对其抗炎、抗风湿性关节炎(Rheumatoid arthritis, RA)的作用进行评价,探讨其作用机制。方法 以Not结构为基础,采用化学合成的方法合成出羌活醇二氧化硫供体衍生物(NotC)。通过测量脂多糖诱导的RAW264.7细胞炎症模型的NO含量,λ-角叉菜胶引起的急性足肿胀大鼠模型的足肿胀度和胶原诱导的大鼠关节炎模型(CIA)的足肿胀度和炎症因子等指标,系统地评价了NotC抗炎和抗RA的作用。通过网络药理学的GO和KEGG分析以及分子对接等方法对NotC的作用机制进行探讨。结果 通过化学合成的方法成功合成出了目标化合物(NotC),核磁结果表明其结构与目标结构一致,高效液相测得其纯度为95.4%。体内外药效实验结果显示,NotC明显抑制了LPS诱导的RAW264.7细胞中NO的表达,抑制了λ-角叉菜胶诱导的大鼠急性炎症,能缓解CIA大鼠的关节炎并抑制炎症细胞因子的表达。网络药理学分析和分子对接表明,NotC可通过调节MAPK信号通路,发挥比Not更好的抗RA作用。结论 在抗炎和治疗RA方面,NotC比Not更有效。

HPLC测定羌活药材中羌活醇和异欧前胡素含量的效果分析

目的研究高效液相色谱（HPLC）测定不同产地和不同采收期羌活药材中羌活醇和异欧前胡素含量的效果。方法采用HPLC仪,色谱条件：色谱柱采用Waters symmetry C18（4.6mm×250.0mm,5μm）,流动相为乙腈-水（45∶55）,流速为1mL/min,柱温30℃,检测波长为310nm。结果羌活醇和异欧前胡素的线性范围分别为0.240 8-1.505 0μg和0.117 6-0.735 0μg,平均加样回收率（n=6）分别为0.98%和1.42%。不同产地羌活药材中羌活醇和异欧前胡素含量差别较大,采收期和生长年限对这2种成分的含量均有影响。结论 HPLC测定简单快捷,为确定羌活药材的最佳产地及采收期提供了依据。

高效液相色谱法测定沉香曲中羌活醇、异欧前胡素、木香烃内酯和去氢木香内酯的含量

目的 建立HPLC法测定沉香曲中羌活醇、异欧前胡素、木香烃内酯和去氢木香内酯的含量。方法 色谱柱为Hypersil C18柱（4.6 mm×250 mm,5μm）;流速：0.9 mL min-1;检测羌活醇和异欧前胡素的流动相为乙腈-0.5%磷酸溶液（67：33）,检测波长：312 nm;检测木香烃内酯和去氢木香内酯的流动相为乙腈-甲醇-1%冰醋酸溶液（45：24：31）,检测波长：225 nm。结果 羌活醇和异欧前胡素进样量分别在0.018 6～0.372 0μg（r=0.999 2）、0.011 2～0.224 0μg（r=0.999 1）与峰面积呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为96.6%、98.0%,RSD分别为1.6%、1.2%（n=6）;木香烃内酯和去氢木香内酯进样量分别在0.041 4～0.828 0μg（r=0.999 5）、0.010 8～0.216 0μg（r=0.999 7）与峰面积呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为98.0%、96.2%,RSD分别为1.4%、1.1%（n=6）。结论 该方法测定结果准确性强、灵敏度高、重复性好。

丁桂凝胶膏剂的处方筛选及体外评价

目的:对丁桂凝胶膏剂进行处方筛选及体外评价。方法:采用正交试验法,以初黏力、持黏力及剥离强度为指标筛选丁桂凝胶膏剂的处方,并采用改进的Franz扩散池及Strat-M膜进行体外释放度、透皮试验,用高效液相色谱法定量分析接受液中主药羌活的有效成分羌活醇含量,测定其体外释放度、透皮量及透皮率。结果:丁桂凝胶膏剂的最佳处方为NP-700∶卡波姆∶甘油∶甘羟铝∶酒石酸∶水(2∶0.8∶30∶0.1∶0.1∶61),其体外累积释放度、透皮量、透皮率分别为85.34%、0.6618 mg/g、65.67%。结论:丁桂凝胶膏剂的体外释放速率大于透皮速率,透皮过程不受释放的限制,透皮性能较好,应用前景广阔。

不同商品等级羌活中羌活醇和异欧前胡素的含量测定

目的:比较羌活不同商品等级中羌活醇和异欧前胡素的含量,探讨中药材商品等级与药材化学成分含量的相关性。方法:采用高效液相色谱法测定羌活药材中羌活醇、异欧前胡素的含量。结果:各等级羌活中的羌活醇含量均高于异欧前胡素,二者的总量为蚕羌>尾羌>竹节羌>疙瘩头>条羌。结论:此测定方法为今后修订羌活药材商品规格标准提供了实验依据。

高效液相色谱法测定养血生发胶囊中羌活醇和异欧前胡素的含量

[目的]建立高效液相色谱法（HPLC）测定养血生发胶囊中羌活醇和异欧前胡素的含量测定方法。[方法]色谱柱：Agilent Zorbax Eclipse XDB-C18（250 mm×4.6 mm,5μm）,流动相：乙腈-0.1%磷酸水溶液（45∶55）,流速：1 m L/min,检测波长：310 nm,柱温：25℃。[结果]羌活醇和异欧前胡素分别在0.204～1.224μg（r=0.999 7）和0.103～0.616μg（r=0.999 8）线性关系良好,平均回收率分别为99.24%（RSD=0.74%）和99.86%（RSD=1.36%）。[结论]该方法简便易行、重复性好,可用于养血生发胶囊中羌活醇和异欧前胡素的质量控制。

HPLC同时测定天麻片中羌活醇和异欧前胡素的含量

目的：建立高效液相色谱法（HPLC）同时测定天麻片中羌活醇和异欧前胡素的含量.方法：色谱柱：Shimadzu C18柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,流动相：乙腈-水（44：56）,流速为1.0 mL/min,柱温：30℃,检测波长：310 nm.结果：羌活醇和异欧前胡素选样浓度分别在2.4～120 μg/mL（r=0.999 9）,1.21～60.5 μg/mL（r=0.999 9）范围内线性关系良好,平均加样回收率分别为98.22％、97.82％（n=9）.结论：本法简便,准确,重现性好,能排除其他成分的干扰,提供了更好的控制该药质量的方法.

羌活提取物微乳剂制备及体外抗真菌活性

采用乙醇溶液热萃取方法提取羌活根茎活性成分,通过稳定性等物理性能测试进行评价并确定微乳剂最优配方。微乳剂由质量分数(下同)为15%的羌活提取物(含羌活醇0.34%)、9%的环己酮、16%的HMK-2100、10%的乙醇、49.9%的水和0.1%的AF1506组成。理化性质测试结果表明,所制备的羌活提取物微乳剂各项指标均符合国家标准。为了比较研究其抑菌活性,同时还制备了5%羌活提取物(含羌活醇0.11%)微乳剂和30%羌活提取物(含羌活醇0.68%)乳油。采用菌丝生长速率法研究了羌活提取物不同剂型产品对小麦纹枯病菌Rhizoctonia cerealis、辣椒疫霉Phytophthora capsici、水稻稻瘟病菌Pyricularia grisea和水稻纹枯病菌Rhizoctonia solani的抑制作用。结果显示,15%羌活提取物微乳剂的抑菌效果显著,在用水稀释500倍(羌活提取物质量浓度为300 mg/L,羌活醇质量浓度为6.75 mg/L)后施用,其对水稻稻瘟病菌和水稻纹枯病菌菌丝生长的抑制率均在90%以上。应用性能测试结果表明,羌活提取物微乳剂在绿萝叶片表面具有优异的铺展和润湿能力。

异地栽培对羌活生长及有效成分含量的影响

研究异地栽培对羌活生长指标及有效成分含量的影响。采用药典法和HPLC法测定比较两地羌活中异欧前胡素和羌活醇含量。结果表明,8月前羌活主要以地上生长为主,有效成分的积累量较少;9月中旬地上部分的生长量不再变化,有效成分积累加快,且达到最大量;10月过后,随着气温的降低,地上部分开始枯萎,植物代谢消耗能量主要由根提供,有效成分有所降低。因此,确定羌活的最佳采收期为9月中旬。异地羌活异欧前胡素含量高于当地羌活,而羌活醇含量差异不大,当地略高。

羌活醇及异欧前胡素对脂多糖诱导大鼠成纤维样滑膜细胞增殖抑制的影响

目的探讨羌活醇及异欧前胡素对大鼠成纤维样滑膜细胞增殖抑制的影响。方法复制经脂多糖(LPS)诱导的大鼠成纤维样滑膜细胞(CIA-FLS)模型,分别给予不同浓度的羌活醇(25、50、100、200、400μg·mL^-1)、异欧前胡素(25、50、100、200、400μg·mL^-1)及阳性药泼尼松龙(400μg·mL^-1),另设空白对照组,观察给药前后成纤维样滑膜细胞形态差异;采用噻唑蓝(MTT)法测定不同给药时间、不同给药浓度下成纤维样滑膜细胞的抑制率,计算半数抑制浓度(IC 50);硝酸还原酶法测定羌活醇和异欧前胡素对大鼠成纤维化滑膜细胞中一氧化氮(NO)水平的影响;酶联免疫吸附实验(ELISA)法测定肿瘤坏死因子α(TNF-α)表达的影响。结果造模细胞较正常细胞增殖力强,细胞粗大,纤维样,呈层叠状生长;羌活醇组给药后细胞增殖力减弱,生长良好;异欧前胡素给药后细胞增殖力锐减,生长状况不佳。给药12 h,羌活醇未测出半数抑制浓度值,异欧前胡素半数抑制浓度值为160μg·mL^-1;给药36 h,羌活醇、异欧前胡素半数抑制浓度值分别为190、120μg·mL^-1;给药60 h,分别为80、45μg·mL^-1,异欧前胡素的增殖抑制能力强于羌活醇(P<0.01)。给药羌活醇与异欧前胡素对一氧化氮总体含量和细胞因子肿瘤坏死因子α含量均有显著性降低(P<0.01),且异欧前胡素的降低更显著。结论羌活醇及异欧前胡素对大鼠成纤维样滑膜细胞均有增殖抑制作用(P<0.05),均使一氧化氮含量和细胞因子肿瘤坏死因子α的含量显著减少(P<0.01),二者都有很好的增殖抑制能力,且异欧前胡素的抑制效果优于羌活醇。

HPLC测定大鼠体内羌活醇血药浓度及药代动力学研究

目的研究羌活提取物中羌活醇在大鼠体内的药代动力学规律。方法羌活醇分别以60、30和15mg·kg-1剂量大鼠灌胃给药,给药后于不同时间点采血,血浆样品经乙腈处理后,用高效液相色谱(HPLC)-荧光法测定血药浓度,色谱柱:Spherisorb 10ODS(1)(250mm×4.6mm);流动相:甲醇-乙腈-0.025mol·L-1磷酸三乙胺溶液(15∶45∶40);流速:1mL·min-1;检测波长:EM=480nm。不同时间点的数据采用DAS 2.0药代动力学软件拟合处理,计算该药的药代动力学参数,分析羌活醇在体内药代动力学特点。结果血浆样品中,羌活醇的线性范围为1.164×10-4～1.164×10-2 mg·mL-1(r=0.997);各血药浓度的提取回收率均大于80%,日内或日间精密度实验RSD<4%,血浆中回收率>90%。经DAS 2.0药代动力学软件进行自动拟合处理不同时间点的药物血浆浓度,药物药代动力学参数显示:高、中、低3个剂量组(分别为11.64×10-3、5.82×10-3、1.164×10-3 mg·mL-1的血浆样品)中,羌活醇的平均高峰血药浓度(Cmax)分别为(5.243±3.116)、(1.892±0.888)、(0.764±0.120)mg·L-1,血药浓度-时间面积(AUC)(0-∞)相应分别为(32.658±31.202)、(17.511±2.287)、(3.246±2.432)mg·L-1.h-1,说明随着药物剂量的增加,Cmax与AUC也相应的增加。羌活醇高、中、低3个剂量组消除半衰竭(T1/2z)分别为(3.184±1.959)、(3.207±3.036)、(3.013±3.225)h,表明剂量不同,其T1/2z差异无统计学意义(P>0.05)。结论利用HPLC-荧光法对中药羌活中羌活醇进行药代动力学研究,方法稳定、灵敏度高、专属性强。药代动力学试验显示药物在动物体内吸收、消除较快,代谢迅速,所得结果可为下一步新药试验研究提供参考。

包装、储藏条件对羌活饮片质量的影响

目的研究不同包装、储存条件对羌活饮片内在质量的影响。方法开展1年的留样观察实验,对不同包装、不同储藏条件下的羌活饮片进行含有量测定。UPLC法测定羌活醇、异欧前胡素、绿原酸、阿魏酸、紫花前胡苷和佛手柑内酯的含有量。结果包装材料中,绿原酸的含有量以纸袋包装的较高,紫花前胡苷的含有量以塑料袋包装的较高,羌活醇的含有量则以铝塑复合袋包装的较高,但以铝塑复合袋包装的羌活中异欧前胡素的含有量波动最大;储藏温度中,阿魏酸的含有量高低排序为常温>低温>阴凉,佛手柑内酯的含有量高低排序是阴凉>低温>常温。结论塑料袋包装、低温、光照条件下储存更适宜于羌活饮片内在质量的保存。

高效液相色谱梯度洗脱法同时测定灵龙感冒胶囊中9种成分含量

目的建立高效液相色谱(HPLC)梯度洗脱法同时测定灵龙感冒胶囊中龙胆苦苷、马钱苷酸、獐牙菜苦苷、獐牙菜苷、粉防己碱、防己诺林碱、紫花前胡苷、羌活醇和异欧前胡素的含量。方法采用ZORBAX SB-C 18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈-甲醇(1:1)-0.3%冰醋酸溶液,梯度洗脱;检测波长分别为240,280和315 nm;体积流量1.0 mL·min^-1;柱温30℃。结果龙胆苦苷、马钱苷酸、獐牙菜苦苷、獐牙菜苷、粉防己碱、防己诺林碱、紫花前胡苷、羌活醇、异欧前胡素分别在36.56~731.20,2.99~59.80,4.67~93.40,1.58~31.60,9.94~198.80,4.26~85.20,10.58~211.60,2.46~49.20,20.87~417.40μg·mL-1范围内与峰面积呈良好线性响应,平均加样回收率分别为100.03%,98.29%,98.54%,97.73%,99.14%,98.69%,99.30%,97.27%和99.62%,RSD分别为0.79%,1.36%,1.12%,1.61%,0.96%,0.81%,1.00%,1.27%和0.99%(n=9)。结论该方法对灵龙感冒胶囊中9种成分进行同时测定,准确可靠,重复性好,可用于灵龙感冒胶囊的质量控制。

HPLC同时测定宽叶羌活药材中5种成分含量

目的:建立同时测定宽叶羌活药材中5种成分含量的高效液相色谱法。方法:采用GL Sciences Wondasil C18色谱柱(4.6mm×250 mm,5μm);乙腈(B)-0.3%醋酸水(A)为流动相;体积流量1 mL﹒min^(-1);梯度洗脱;柱温25℃;检测波长为315 nm;进样量10μL。结果:5种成分的分离度好,标准曲线在线性范围内相关性良好,r均大于0.9990,加样回收率均值为97.37%～102.59%,RSD为0.74%～3.36%。13批宽叶羌活紫花前胡苷的含量在0.661～20.059 mg﹒g^(-1),阿魏酸的含量在1.995～21.238 mg﹒g^(-1),佛手柑内酯的含量在0.425～20.990 mg﹒g^(-1),羌活醇的含量在0.398～45.303 mg﹒g^(-1),异欧前胡素的含量在7.079～102.393 mg﹒g^(-1)。结论:所建立的同时测定5种成分的方法操作简单、具有较好的重复性和稳定性,可以有效地评价宽叶羌活药材的质量。

羌活炮制工艺研究

目的:优化及量化羌活饮片炮制工艺参数,为工业化生产提供依据。方法:以切片情况、吸水增重率为评价指标,单因素试验考察吸水量、闷润温度、闷润时间;以浸出物含量百分率、羌活醇、异欧前胡素、挥发油为评价指标,正交试验优化饮片厚度、铺层厚度、鼓风干燥温度、翻动次数对羌活饮片质量的影响。首先将羌活原药材除去杂质泥沙,淋洗5min,沥干,再置30℃培养箱中闷润2h。结果:最佳炮制工艺为40℃干燥,切4mm厚片,堆放1cm厚,翻动2次。结论:羌活饮片与羌活原药材比较,其挥发油、浸出物、羌活醇、异欧前胡素评价指标的量值传递率均达到90%以上,表明优选出来的羌活饮片炮制工艺科学、合理、稳定、可靠。

羌活醇对葡聚糖硫酸钠诱导的结肠炎小鼠作用的研究

背景:免疫功能失调在炎症性肠病(IBD)的发病机制中起着关键作用。羌活醇是中药羌活的主要活性成分,具有抗炎的作用。目的:探究羌活醇对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的小鼠结肠炎的作用。方法:将C57BL/6小鼠随机分为正常组、阴性对照组、模型组、羌活醇组。模型组、羌活醇组小鼠自由饮用2%DSS溶液诱导结肠炎模型。阴性对照组、羌活醇组小鼠给予腹腔注射羌活醇溶液40 mg/kg,正常组、模型组小鼠给予腹腔注射等体积0.9%NaCl溶液。10 d后处死小鼠,行疾病活动指数(DAI)评分、结肠长度和组织病理学评分,ELISA法检测结肠组织中TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-17A水平,定量PCR法检测结肠和脾脏组织中IL-17A、RORγt mRNA表达。结果:与正常组相比,模型组DAI评分、组织病理学评分、结肠组织中TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-17A水平、结肠和脾脏组织中IL-17A、RORγt mRNA表达均显著增高(P<0.01),结肠长度明显缩短(P<0.01)。与模型组相比,羌活醇能明显降低小鼠DAI评分、组织病理学评分(P<0.01),下调TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-17A水平(P<0.01),抑制IL-17A、RORγt mRNA表达(P<0.01),明显恢复结肠长度(P<0.01)。结论:羌活醇对小鼠结肠炎有保护作用,其机制可能与减少促炎细胞因子的产生、抑制Th17细胞的功能和分化相关。

高效液相色谱法测定退障眼膏中4种活性成分的含量

目的建立HPLC法同时测定退障眼膏中的红镰霉素-6-O-β-龙胆二糖苷、决明子苷、橙黄决明素-6-O-葡萄糖苷和羌活醇的含量。方法采用Diamonsil C18色谱柱,流动相A:乙腈,流动相B:0.5%冰醋酸溶液,梯度洗脱;流速:0.9 m L·min-1;柱温:30℃,进样量10μL;红镰霉素-6-O-β-龙胆二糖苷、决明子苷、橙黄决明素-6-O-葡萄糖苷的检测波长为278 nm,羌活醇的检测波长为310 nm。结果红镰霉素-6-O-β-龙胆二糖苷、决明子苷、橙黄决明素-6-O-葡萄糖苷和羌活醇分别在4.85~97.00μg·m L^(-1)(r=0.9993)、3.92~78.40μg·m L^(-1)(r=0.9999)、5.15~103.00μg·m L^(-1)(r=0.9999)、6.47~129.40μg·m L^(-1)(r=0.9997)与峰面积具有较好的线性关系,平均加样回收率和相应的RSD分别为98.8%(1.7%)、97.4%(1.2%)、98.4%(0.94%)、99.2%(1.4%)。结论该方法可同时测定退障眼膏中多组分,操作简便、准确,可作为退障眼膏的质量控制方法。

中药羌活的化学成分研究

目的:对中药羌活进行化学成分研究,寻找其活性成分。方法:将干燥的羌活药材先用95%乙醇提取,再分别用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取,对乙酸乙酯萃取物进行硅胶柱层析分离,得到纯化合物后用核磁共振、质谱结合物理化学常数进行结构鉴定。结果:从羌活中分离得到5个化合物,即哥伦比亚苷元、哥伦比亚苷、羌活醇、异欧前胡素和b-谷甾醇。结论:香豆素类是羌活的主要化学成分。

宽叶羌活的化学成分研究

中药羌活为伞形科植物羌活(Notopterygium incisum Ting.)和宽叶羌活(N.forbesii Boiss),干燥根茎和根具有解毒、祛风、胜湿、止痛等作用。羌活的挥发油对布鲁氏杆菌有抑制作用。宽叶羌活中的挥发油成分已有报道,但其它成分尚未见报道。今从宽叶羌活的非挥发油部分中分得4种成分,其中3个为呋喃香豆素类化合物,经鉴定为异欧前胡素(isoimperatorin)(晶 A)二氢欧山芹醇(columbianetin)(晶 B)。