NF-кB与COX-2在胃癌及转移淋巴结中的表达研究

目的:探讨NF-кB与COX-2在胃癌原发灶及淋巴结转移灶中的表达关系及临床意义。方法:采用免疫组织化学方法(S-P法)对胃癌原发灶,第一站淋巴结转移灶中的NF-кBp65及COX-2蛋白表达进行检测。结果:胃癌组织中NF-кBp65和COX-2蛋白表达在有淋巴结转移组的阳性表达率分别为79.55%和72.73%,大于无淋巴结转移组48.28%和41.38%,二者比较差异有显著性(P<0.01);NF-кBp65及COX-2蛋白在第一站淋巴结转移灶中的阳性表达率分别为95.45%和88.64%,高于胃癌原发灶81.82%和70.45%,两者比较差异有显著性(P<0.05)。结论:NF-кB和COX-2对于胃癌可能是一个与转移相关因子,通过调节相应的基因共同参与了胃癌的淋巴转移。

解毒活血方对经皮冠状动脉介入术后患者NF-κB、IL-1β、TNF-α变化及支架内再狭窄的影响

【目的】观察解毒活血方干预经皮冠状动脉介入(PCI)术后患者外周血中核因子kappaB(NF-κB)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的变化及支架内再狭窄(ISR)的发生情况,以期阐明解毒活血方防治ISR的远期疗效及机制。【方法】选择符合PCI术后纳入标准的患者40例,将PCI术后给予基础治疗者设为对照组,将PCI术后给予基础治疗+解毒活血方治疗者设为中药组,每组各20例。治疗结束后,观察2组临床疗效。于PCI术前及术后24 h、14 d,采用流式细胞仪检测2组患者外周血单个核细胞NF-κB活性,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测2组患者血浆IL-1β及TNF-α表达水平。观察患者术后6个月内心血管事件及ISR的发生情况。【结果】中药组患者的临床疗效显著优于对照组(P<0.05),证候积分及PCI术后6个月内心血管事件和ISR的发生率显著低于对照组(P<0.05或P<0.01)。2组患者PCI术后24 h NF-κB阳性表达率及TNF-α、IL-1β表达水平较治疗前显著升高(P<0.01),但2组差异无统计学意义(P>0.05);2组患者PCI术后14 d NF-κB阳性表达率及TNF-α、IL-1β表达水平较术后24 h显著降低(P<0.01),且中药组降低效果明显优于对照组(P<0.05)。【结论】解毒活血方可降低ISR的发生率,其机制可能与降低NF-κB活性及血浆IL-1β、TNF-α表达水平有关。

双歧杆菌对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的小鼠结肠炎肠道黏膜的保护作用及其对NF-κB的影响

目的随着对炎症性肠病(inflammatory bowel disease,IBD)发病机制的深入研究,肠道微生态与免疫系统的密切关系日益受到重视。本研究旨在评价双歧杆菌单一活菌制剂对葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate sodium,DSS)诱导的小鼠结肠炎肠道黏膜的保护作用及其可能作用机制。方法 BALB/c小鼠饮用含7%DSS的饮用水10d,诱导小鼠亚急性结肠炎的模型,模拟人类溃疡性结肠炎。空白对照组(n=6)饮用未添加DSS的饮用水。饮用DSS的小鼠(n=37)随机分为5组,分别给予不同的药物治疗:①提前给予双歧杆菌治疗组(Pre-BIF):在小鼠暴露于DSS前10d及暴露过程中给予双歧杆菌治疗;②强的松治疗组(PRED):在小鼠暴露于DSS同时给予强的松治疗;③双歧杆菌治疗组(BIF):小鼠暴露于DSS的同时给予双歧杆菌治疗;④强的松+双歧杆菌联合治疗组(PRED+BIF):小鼠暴露于DSS的同时给予强的松和双歧杆菌联合治疗;⑤生理盐水对照组(NS):小鼠暴露于DSS的同时给予生理盐水作为对照。不同药物皆以溶液形式灌胃给药。从4方面评价各组的处理反应:①一般情况:包括体重、结肠长度、大体评分;②组织病理评分;③化学比色法检测病变组织髓过氧化物酶(MPO)活性;④免疫组织化学方法检测活化的NF-κB。结果 Pre-BIF治疗组和BIF治疗组的大体评分、组织病理评分、MPO活性与NS对照组相比明显改善(P<0.01;P<0.05)。Pre-BIF治疗组、BIF治疗组和PRED+BIF治疗组的NF-κB活性评分显著低于NS对照组(P均<0.01)。结论双歧杆菌对小鼠DSS结肠炎肠道黏膜具有保护作用,提前应用保护效果更好。双歧杆菌对肠道黏膜的保护作用与抑制NF-κB的活化有关。

益生菌对实验性结肠炎大鼠肠黏膜TLR2、TLR4表达及NF-κB活性的影响

目的通过检测益生菌对实验性结肠炎大鼠肠黏膜上皮细胞(IECs)Toll样受体(Toll Like recefor,TLR)、TLR4表达及肠黏膜核因子,kappa B活化的影响,探讨益生菌预防与辅助治疗溃疡性结肠炎的作用机制。方法将30只雄性SD大鼠随机分为3组,即正常对照组(N)、模型组(M)、益生菌组(P)。正常对照组正常饲养,不予任何处理;模型组给予含5%葡聚糖硫酸钠dextransulfate sodium的饮用水10 d建立亚急性结肠炎模型,第11 d开始常规饲养观察2周;益生菌组则在建立模型后给予双歧三联活菌500 mg.kg-1.d-1灌胃,1次/d,共2周;2周后处死所有大鼠,观察疾病活动指数(DAI),进行组织学评分(HPS)和分离ICEs并提取ICE中的总RNA,用RT-PCR法检测TLR2、TLR4的表达;采用免疫组织化学方法检测NF-κB的活性情况。结果益生菌组的症状、组织损害程度均较模型组明显减轻;模型组和益生菌组TLR2和TLR4的表达均明显高于正常对照组(P<0.001);与模型组比较,益生菌组TLR2的表达增加(P<0.05),而TLR4的表达则明显下降(P<0.001);模型组NF-κB活性明显高于益生菌组和正常对照组(P<0.001),益生菌组与正常对照组NF-κB活性比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论益生菌通过促使TLR2表达进一步增加,并可抑制TLR4的表达,进而控制NF-κB的活性,并在缓解肠道炎症中发挥作用。

银杏叶调控TNF/NF-κB信号通路干预血栓闭塞性脉管炎的网络药理学研究

目的 利用网络药理学思路和实验研究探讨银杏叶治疗血栓闭塞性脉管炎的机制。方法 检索中药系统药理学数据库与分析平台获取银杏叶有效成分和作用靶点,检索基因卡片和人类在线孟德尔遗传平台获取血栓闭塞性脉管炎相关靶点,构建银杏叶干预血栓闭塞性脉管炎的“药物-成分-靶点-疾病”网络,利用Cytoscape软件对银杏叶干预血栓闭塞性脉管炎的关键靶点进行蛋白质相互作用分析。基于R语言“Bioconductor”数据包进行基因组百科全书信号通路富集分析。复制血栓闭塞性脉管炎大鼠模型,验证银杏叶治疗血栓闭塞性脉管炎的机制。结果 筛选获得27种银杏叶有效成分、186个银杏叶干预血栓闭塞性脉管炎的潜在靶点和肿瘤坏死因子(TNF)、白细胞介素17(IL-17)、缺氧诱导因子1(HIF-1)、Toll样受体(ILR)以及核转录因子κB(NF-κB)等信号通路。动物实验结果证明,银杏叶可显著下调血栓闭塞性脉管炎模型大鼠股动脉肿瘤坏死因子α(TNF-α)、核转录因子kappa B(NF-κB)、血管细胞黏附因子1(VCAM-1)、核因子kappa B抑制因子α(IκBα)的表达量(P<0.05),验证了网络药理学部分预测结果。结论 银杏叶可通过下调肿瘤坏死因子α、核转录因子kappa B、血管细胞黏附因子1、核因子kappa B抑制因子α的表达干预血栓闭塞性脉管炎。

氨磷汀对急性放射性肠炎小鼠NF-κB通路和VCAM-1、ICAM-1基因表达的影响

目的:研究氨磷汀对急性放射性肠炎小鼠小肠组织中核转录因子kappaB(NF-κB)通路和血管间粘附分子-1(VCAM-1)、细胞间粘附分子-1(ICAM-1)基因表达的影响和意义.方法:将小鼠分成对照组、实验组、氨磷汀腹腔注射干预组,采用6Gy 60Coγ-射线全身辐射,于第1、7、14天分批处死小鼠观察病理改变.实时荧光定量PCR(Q-PCR)方法检测不同时间点对照组、实验组和氨磷汀干预组NF-κB、VCAM-1、ICAM-1基因mRNA表达水平的变化.结果:辐射后实验组、干预组均可见明显黏膜下层微血管损伤,干预组损伤较实验组轻.辐射后第1天实验组、干预组小鼠小肠组织中NF-κB、VCAM-1、ICAM-1基因mRNA表达水平均显著升高(P<0.05),干预组升高水平显著低于实验组(P<0.05);第7天实验组各基因mRNA水平均呈下降趋势但仍高于对照组(P<0.05),干预组达到或接近对照组水平;第14天实验组、干预组各基因mRNA表达水平与对照组比较无统计学差异(P>0.05).结论:急性放射性肠炎早期即发生NF-κB、VCAM-1、ICAM-1基因mRNA的表达上调,可能在辐射后微血管损伤中发挥作用,氨磷汀可能通过下调上述基因表达对微血管起到保护作用.

一次性力竭运动后心肌核转录因子Kappa B的变化及其在运动性心肌微损伤发生中的作用

目的:研究一次性力竭运动后大鼠心肌NF-κB在基因与蛋白水平的分布及变化规律。方法:100只健康成年雄性SD大鼠,随机分为一次性力竭游泳运动组及安静对照组。应用RT-PCR和免疫荧光组化技术,从mRNA及蛋白水平研究大鼠心肌NF-κBp65的在力竭运动后不同时相的分布及表达变化。结果:对照组NF-κB主要分布于细胞质、细胞膜及血管内膜,偶见于细胞核内,力竭运动后NF-κB主要分布于细胞核、细胞膜和血管内膜。一次性力竭后6 h左心室NF-κB p65蛋白含量显著高于对照组、12 h组、24 h组(P<0.05);运动后即刻室间隔NF-κB p65蛋白含量显著高于对照组(P<0.05),非常显著高于12 h组、24 h(P<0.01),运动后6 h非常显著高于12 h组(P<0.01);运动后即刻右心室NF-κBp65蛋白含量即显著高于安静对照组、24 h组(P<0.05),运动后6 h组显著高于安静对照组(P<0.05)。一次性力竭运动后即刻心肌总的NF-κBp65蛋白含量显著高于对照组(P<0.05),6 h组非常显著地高于对照组水平(P<0.01),运动后12 h组显著低于即刻组和6 h组。一次性力竭即刻NF-κBp65mRNA含量显著高于一次性力竭24 h组(P<0.05);6 h显著高于对照组、24 h组(P<0.05);12 h显著高于24 h组(P<0.05)。结论:一次力竭运动后不同时相心肌NF-κBmRNA和蛋白表达增加,可介导一系列炎症反应对细胞造成损伤,构成运动性心肌微损伤中发生机制之一。一次力竭运动后心脏各部位改变存有一定差异,其中室间隔及右心室NF-κB蛋白含量升高速度快,以室间隔NF-κB蛋白峰值水平最高,且右心室NF-κB蛋白改变恢复最慢。

核转录因子-κB与喉癌相关性

喉癌是耳鼻咽喉头颈外科最常见的恶性肿瘤之一。核转录因子-κB（nuclearfactor—kappaB，NF-κB）是具有多向性调节作用的核转录因子，可调控多种基因的转录表达，是一种重要的核转录因子。它作为信号传导途径的枢纽，与喉癌的发生、发展及细胞凋亡的调节等有着密切联系。本文就NF-κB与喉癌关系的研究进展进行综述。