核酸适配体在卵巢癌诊断中的研究进展

卵巢癌发病机制复杂,前期症状隐匿,早期诊断困难,辅助治疗易耐药,且晚期治疗缺乏有效手段,导致其预后较差,因此卵巢癌患者的早期诊断显得十分重要。核酸适配体相较于传统抗体具有显著优势,在癌症的基础研究和诊断治疗方面应用较为广泛。目前,已通过筛选获得多个适配体,并以此为基础设计了传感器用于卵巢癌诊断。本文综述了近年来卵巢癌适配体的筛选及基于适配体开发的传感器在卵巢癌诊断中的研究及应用进展。

天津地区HBsAg阴性NDR献血者HBV感染状态的研究

目的 分析应用单个标本核酸检测(ID-NAT)后,联检反应性鉴别阴性即鉴别非反应性(NDR)且HBsAg-献血者HBV感染状态。方法 将本中心2021年9月—2022年3月的52 608份无偿献血者标本经常规检测和ID-NAT检测后,共检出HBsAg ELISA-TMA核酸检测联检反应性而鉴别非反应性献血者标本(NDR可疑标本)50份。并进行罗氏MPX 2.0单检,采用电化学发光法检测HBV血清学标志物(HBsAg、抗-HBs、抗-HBc、HBeAg、抗-HBe)。结果 50份HBsAg-NDR可疑标本中确认HBV感染标本11份22%(11/50)。血清学标志物分析:NDR可疑标本中抗-HBc+比例达76%,抗-HBs+占比为44%;HBV感染确认组和未确认组间抗-HBc+(81.8%和74.4%)和抗-HBs+(36.4%和46.2%)的占比,差异无统计学意义(P>0.05),但确认组抗-HBs检测值的分布[中位数14.44 IU/L,范围(10.57~33.74)IU/L]明显低于未确认组。在HBV感染确认组中鉴定出血清学阳性隐匿性乙型肝炎病毒感染者(OBI)10份(90.9%),1份血清学阴性献血者因未能追踪而疑似HBV窗口期感染。结论 HBsAg-NDR可疑标本中仍能检出部分标本为HBV DNA阳性,多种方法联合检测能提高检出率;NDR标本抗-HBc检出率较高,可能存在HBV传播的潜在风险,应提高目前NAT检测灵敏度,确保输血安全性。

组分动态网络触发的杂交链式反应——超灵敏检测肿瘤标志物

目前肿瘤在发病前期,某些生物分子的表达水平可能出现上调或下调,但是含量仍处于微量或痕量状态,干扰物的存在很难实现对于微小变化肿瘤标志物(mirRNA)的准确检测,需要构建高灵敏、高准确度、高特异性的检测方法实现对微小变化目标物的有效溯源。常规的荧光生物传感器可以选择性地识别不同浓度目标物但无法实现对于微量、痕量分子的准确分析,因此需要将微量的目标物进行扩增。核酸放大策略通过对低浓度的目标物进行有效转化,启动核酸反应,使检测体系的灵敏度得到显著的提高。杂交链式反应(HCR)是一种新型的体外核酸等温扩增技术,主要是基于启动子DNA和发卡探针之间的杂交反应,来达到放大检测信号的效果。该综述主要总结了基于组分动态网络触发的杂交链式反应在肿瘤标志物的传感分析中的研究与应用进展,阐明了未来肿瘤标志物传感分析应用的前景和挑战,旨在为构建新型组分动态网络触发的杂交链式反应肿瘤标志物生物传感器提供参考。

乙型肝炎病毒核酸抗原相关的检测及临床意义

目的评价乙型肝炎病毒核酸相关抗原(HBV NRAg)在乙肝诊疗中的价值。方法 FQ-PCR、ELISA测定378例乙肝患者HBV含量、五项血清标志物、HBV NRAg,采用巢式PCR对乙肝患者进行确认,并检测300例健康人群HBV NRAg作为对照。结果 HBV NRAg灵敏度、特异性分别为91.3%、99.7%;与巢式PCR比较,HBV NRAg阳性和总符合率均显著高于FQ-PCR、HBeAg(P=0.00)。HBsAg-隐匿性乙肝组,HBV NRAg阳性检出率为60%。乙肝患者抗病毒治疗的监测表明,HBV NRAgS/CO值与HBV含量动态变化趋势基本一致。结论 HBV NRAg作为HBV感染血清标志物的一个新的补充,在乙肝临床诊断、献血员筛选、病情判断及治疗监测均有很高的临床价值。

TMA联检反应性而鉴别非反应性献血者标本HBV血清学标志物分析

目的探讨TMA核酸检测联检反应性而鉴别非反应性献血者标本HBV感染状态,是否存在低浓度HBV DNA。方法 2020年1月~2021年3月期间用Procleix Panther核酸检测系统共检测51 996份标本,收集TMA核酸检测联检反应性而鉴别非反应性献血者标本86份,采用电化学发光法检测HBV血清学标志物(HBsAg、抗-HBs、抗-HBc、HBeAg、抗-HBe),对部分鉴别非反应性献血者标本进行罗氏核酸单检。结果 86份TMA核酸检测联检反应性鉴别非反应性献血者标本中:抗-HBc阳性率为89.53%(77/86),抗-HBe阳性率为27.90%(24/86),抗-HBs阳性率为65.12%(56/86)。抗-HBs/抗-HBe/抗-HBc阳性15份,抗-HBs/抗-HBc阳性34份,抗-HBs/抗-HBe阳性1份,抗-HBe/抗-HBc阳性8份,单独抗-HBs阳性6份,单独抗-HBc阳性20份,HBV血清学标志物阳性率97.67%(84/86)。10份标本经罗氏单检定性检测HBV DNA有5份,1份HBV DNA定量<20 IU/mL。结论 TMA核酸检测联检反应性而鉴别非反应性献血者多为低浓度的隐匿性乙肝感染。

猕猴桃分子生物学研究进展

本文综述了猕猴桃的核酸提取、基因克隆和分子标记研究进展。重点介绍相关功能基因在延缓果实衰老、提升果实品质及分子标记技术在品种鉴定、亲缘关系分析中的应用。

血筛ALT临界值变更对血液安全影响的分析

目的分析兰州地区血液筛查ALT临界值变更前后检测结果的变化情况,探讨ALT临界值变更对血液安全的影响。方法收集2010-2013年无偿献血者的血液检测结果,分析ALT临界值变更前后不合格率的变化情况和ALT异常与肝炎标志物的相关性。结果 ALT临界值变更后,单项ALT不合格率明显下降;ALT数值介于(40-50)U/L的标本经核酸检测,HBV DNA和HCV RNA结果均为阴性;ALT合格组与不合格组中肝炎标志物阳性率的差异无统计学意义。结论 HBV/HCV的感染不是献血者ALT异常的主要原因;结合核酸检测结果,本次血筛ALT临界值的变更不会对血液安全造成影响,同时降低了血液的报废率。

洛阳地区无偿献血人群中HBV DNA检测及追踪情况分析

目的了解洛阳地区无偿献血人群中HBV DNA检测及感染情况。方法对2016年2月1日—2018年12月31日期间洛阳市采集的无偿献血标本采用2种酶联免疫(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)试剂和1种核酸(nucleic acid testing,NAT)试剂同时进行检测,并对ELISA检测结果无反应性、HBV/HCV/HIV核酸联合检测有反应性的献血者至少进行2次跟踪检测,检测项目包括核酸和乙肝五项(HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc)。最后根据2次追踪检测结果判定献血者的感染状态。结果 169 205份无偿献血者血液标本中共检出363份ELISA检测无反应性、核酸联检有反应性的标本,进一步对这363份标本进行病毒种类的鉴别,最后鉴别出HBV DNA阳性152份,HIV RNA阳性1份,HCV RNA阳性0份。最终追踪随访到37名HBV DNA阳性献血者,根据标本追踪检测结果,确定隐匿性HBV感染33名(89.19%)、"窗口期"感染1名(2.70%)、核酸初始检测假阳性3名(8.11%)、一过性HBV感染0名(0%)。结论 HBV DNA检测可以有效地检出乙肝OBI和缩短病毒免疫测定的"窗口期",从而降低输血感染风险。但在工作中我们也要正确对待核酸检测过程中可能存在假阴性(病毒载量极低)和假阳性的问题,要正确认识防范偏差带来的风险,制定适合本血站的检测策略,为临床提供安全的血液。

乙型肝炎病毒DNA定量检测的临床应用

目的:探讨乙型肝炎患者HBV-DNA含量与其乙型肝炎血清学标志物的关系。方法:采用微板核酸杂交技术对200例乙型肝炎血清学标志物阳性的患者和20例正常健康人群,进行HBV-DNA PCR定量检测。结果:根据血清学标志物分为五组,HBs Ag、HBe Ag、抗-HBc均阳性患者HBV-DNA含量高于其他患者,比较差异有统计学意义(P<0.05),HBs Ag、抗-HBe、抗-HBc均阳性患者与HBs Ag、抗-HBc均阳性患者DNA拷贝数比较差异无统计学意义。结论:乙肝血清学标志物作为乙肝病毒有无感染的指标不能完全反映患者体内HBV的复制情况,HBV-DNA定量检测对监测乙肝病毒感染的病情发展及抗HBV复制药物的治疗具有重要意义。

血清乙型肝炎病毒核酸定量检测及临床意义

目的:探讨血清HBV DNA水平与HBV标志物(HBVM)表现模式、肝损害程度的关系。方法:采用荧光定量PCR分析系统检测126例乙肝病毒感染者HBV DNA,采用ELISA法检测HBVM。结果:在HBsAg阳性+HBeAg阳性+抗HBc阳性的血清中HBV DNA阳性率和含量最高,血清HBeAg与HBV DNA含量有一定关系(P<0.01),血清丙氨酸氨基转移酶水平与HBV DNA含量亦有一定关系(P<0.05)。结论:HBV DNA含量与HBeAg有一定关系,肝脏损害程度与血清HBV DNA亦有一定关系。

乙型肝炎血清免疫标志物、乙型肝炎病毒核酸水平变化与HBV的关系及临床意义

目的：探讨乙型肝炎血清免疫标志物、乙型肝炎病毒核酸水平变化与HBV的关系及临床意义。方法选取本院2013年2月∽2014年2月收治的108例乙型肝炎患者为研究对象,按HBV DNA含量高低分为A（〈103拷贝/ml）、B（103∽105拷贝/ml）、C（106∽108拷贝/ml）3组,分别检测3组的乙型肝炎血清免疫标志物（HBV M）与乙型肝炎病毒核酸（HBV DNA）含量。结果 A组的HBeAg为（3.971±14.47）S/CO,B组为（446.7±785.8）S/CO,两组比较,差异有统计学意义（P〈0.05）；A组的抗-HBe、HBeAg、HBsAg与C组比较,差异均有统计学意义（P〈0.05）；B组的HBeAg与C组比较,差异有统计学意义（P〈0.05）；3组的抗-HBs、抗-HBc比较,差异均无统计学意义（P〉0.05）。HBV M阳性标本中抗-HBs、抗-HBc与HBsAg含量与HBV DNA无相关性,抗-HBe与HBV DNA呈负相关,HBeAg与HBV DNA呈正相关。结论定量检测HBV DNA可真实反映HBV的复制情况,对于传染性评价、乙型肝炎诊治及疗效观察均具有指导意义；定量检测HBV M虽在HBV复制程度的判断及传染性评价方面无明显价值,但可为乙型肝炎数据管理奠定基础。

献血人群隐匿性乙型肝炎病毒感染的血清学特征分析

旨在研究献血人群隐匿性乙型肝炎病毒感染(occult hepatitis B virus infection,OBI)的血清学特征。收集上海市血液中心2013-2018年经核酸检测合格血液样本523例,不合格样本395例,分别采用荧光定量聚合酶链反应(fluorescence quantify polymerase chain reaction,FQ-PCR)和转录介导的扩增(transcription mediated amplification,TMA)技术对阳性样本进行HBV DNA鉴定;化学发光法对所有样本HBV表面抗体(抗-HBs)进行定量检测,对HBV e抗原(HBeAg)、HBV e抗体(抗-HBe)和HBV核心抗体(抗-HBc)进行定性检测。结果发现197例HBsAg阴性样本的HBV DNA呈阳性,为OBI。其抗-HBc阳性率为85.79%,抗-HBs阳性、抗-HBc阳性及抗-HBc单独阳性为OBI的主要血清学模式。核酸检测阴性的合格献血者组以乙型肝炎两对半阴性及抗-HBs阳性为主。OBI组抗-HBs水平分布以<100 mIU/mL水平为主,明显低于合格献血者组。合格献血者组>1000 mIU/mL的比例高于OBI组。以上结果表明上海地区献血人群中OBI者血清学分布特征与合格献血者组之间存在差异,为进一步研究OBI提供了数据参考。

基于核酸放大技术和DNA结构的电化学生物传感器在肿瘤标志物检测的应用进展

生物传感器的出现在诸多领域引发了一场革命。它是利用生物或者生化反应检测目标分析物的分析装置,主要由生物元件和传感器组成。而与电化学结合而发展起来的电化学生物传感器因为具有简单、成本低、灵敏度高等优点,成为近些年来临床诊断、环境监测、食品分析和病原微生物探究等领域的研究热点。在构建电化学生物传感器时,借助一些新方法和新技术提高电化学生物传感器的各项性能实现对各种生物分子特异、灵敏的检测具有十分重要的科学意义和使用价值。

10 173例检测乙型肝炎标本的血清学与核酸结果分析

目的探讨临床乙型肝炎表面抗原HBsAg无反应性标本中开展乙型肝炎病毒(HBV)核酸检测的意义。方法收集2019年10月~2020年6月期间,全国23家医院10 173例标本HBV血清学和核酸检测结果,首次纳入HBsAg无反应性标本,分析血清HBV DNA定性检测结果。从中再次纳入HBV DNA阳性,且进行了乙型肝炎表面抗体(HBsAb)、乙型肝炎e抗原(HBeAg)、乙型肝炎e抗体(HBeAb)和乙型肝炎核心抗体(HBcAb)血清学标志物检测标本,进行Ct值区间总体分布和HBV血清学标志物模式分析。结果纳入的9186例HBsAg无反应性标本中,血清HBV DNA阳性例数为254例(2.77%)。再次纳入的HBV DNA阳性且进行HBV血清学标志物检测的168例标本中有8种HBV血清学标志物模式。其中,166例(98.81%)可能是隐匿型乙型肝炎感染(Occult hepatitis B infection,OBI)患者。结论HBV核酸检测能从HBsAg无反应性标本检出一定比率的乙型肝炎患者,特别对OBI患者具有较好的检出效果。HBV核酸筛查对OBI检出以及防止HBsAg漏检具有重要的意义。

丙型肝炎病毒抗原、抗体及核酸标志物检测结果的关联性研究

目的探讨丙型肝炎病毒抗原、抗体和核酸标志物检测结果的相关性。方法对302份血浆样本的HCV RNA载量、HCV Ag和抗-HCV指标分别使用HCV RNA定量试剂、HCV核心抗原试剂盒、HCV抗体试剂进行检测。结果 HCV RNA载量上升,HCV Ag和抗-HCV阳性符合率上升,各血清指标在不同HCV RNA载量的阳性率对比,差异具有统计学意义(P<0.05)。HCV RNA阳性样本中,基因分型检测率为46.51%。结论 HCV RNA基因分型试剂的检测能力不高,效果差,需进一步筛查,应联合早期确诊进行HCV感染诊断。

乳腺癌血液肿瘤标志物研究及应用进展

乳腺癌是当今世界上最为普遍的恶性肿瘤之一,同时也是造成女性肿瘤患者高死亡率的主要因素。尽管在临床中影像学检查广泛用于乳腺癌筛查,但仍存在着假阳性、假阴性与过度诊断等问题。血液生物标志物检测,因其方便快捷、安全无创、可反复多次采样等优点,逐渐受到人们的关注并进入临床应用。目前,在临床广泛使用的血液肿瘤标志物主要为蛋白类标志物。随着研究的不断深入,循环核酸、代谢物等潜在标志物也显示出较好的应用前景。本文从蛋白、核酸、代谢产物三方面总结了乳腺癌血液标志物的研究及应用进展,并讨论它们面临的问题与挑战,为乳腺癌的诊疗提供理论依据。

结核病临床诊治进展年度报告（2013年）（第一部分 结核病临床诊断）

近一年来,结核病的诊断方面继续深入进行相关方面的研究,取得了不少进步.在细菌学诊断方面,使用新技术如新型移动数字化荧光显微镜痰检涂片技术可清晰显示并保存图像,发光二极管（LED）性能的荧光显微镜（FM）检查能够明显缩短常规涂片的染色时间,明显提高检出率.影像学诊断在结核病诊断的难点方面进行了详细的研究,如肺癌合并肺结核的临床分期、耐多药结核病与非结核分枝杆菌病的鉴别等.γ干扰素释放试验诊断结核分枝杆菌感染具有很大优势,今年对其诊断价值进行再评价.分子生物学诊断发展迅速,继续对XpertMtb/RIF诊断系统进行深入研究,超支化滚环扩增（hyperbranched rolling circle amplification,HRCA）技术简单、经济、省时,在贫困地区具有广泛的应用前景.介入诊断方面,将气管镜、腔镜技术与分子生物学、超声引导技术、细菌学、病理学检测技术相结合,使得结核病的诊断效率得到显著的提高,如气管镜下支气管冲洗液进行XpertMtb/RIF的检测等.病理学诊断方面以分子病理技术的发展较引人注目,使用活检标本行基因检测提高了结核病的检出率.

PreS1抗原和HBV血清学标志物与HBV DNA的相关性及临床意义

目的研究前S1抗原(Pre S1)、乙型肝炎病毒核酸(HBVDNA)及HBV血清标志物(HBV-M)之间关联,探讨三者在在HBV感染诊疗的临床应用价值。方法回顾性分析2016年1月～2018年6月本院1184例HBV感染疑似患者Pre S1、HBVDNA及HBV-M的检测情况。结果大三阳组Pre S1与其他6组比较,差异均存在统计学意义(χ~2=87. 597,111.736,216.866,168.015,421.362,324.532,202.062,P <0.05);"大三阳"组HBVDNA阳性率与其他6组比较,差异均有统计学意义(χ~2=131.174,254.110,216.866,158.416,402.563,306.883,181.859,P <0.05);PreS1及HBV DNA阳性率远高于其他各组;PreS1与HBeAg的关联有统计学意义(χ~2=478.981,P <0.001),PreS1与HBVDNA的关联也有统计学意义(χ~2=909.450,P <0.001);PreS1与HBeAg诊断符合率为85.13%;Pre与HBVDNA的诊断符合率为94.93%。HBeAg阳性乙肝患者HBVDNA平均病毒载量高于HBeAg阴性乙肝患者,差异有统计学意义(P <0.05)。结论传统HBV血清学检测HBeAg与PreS1及HBV DNA具有一定的相关性,PreS1及HBV DNA更能准确的反映HBV的复制状态及传染性。

核酸扩增技术在血清HIV、HBV、HCV检测中的应用

目的分析核酸扩增技术在血清病学标志物人类免疫缺陷病毒(HIV)、乙肝病毒(HBV)、丙肝病毒(HCV)检测中的应用效果。方法选取2019年1月至2020年12月梅州市中心血站采集的36422名无偿献血者的血液样本,每位献血者均留取两管血液样本,其中一管采用核酸扩增技术检测,另一管采用酶联免疫法,对比两种方法的检测结果,分析其检测符合率。结果经酶联免疫法检测HBV、HCV、HIV阳性率分别为0.33%、0.005%、0.005%,核酸扩增检测HBV、HCV、HIV阳性率分别为0.35%、0.014%、0.011%,两种检测方法比较差异无统计学意义(P>0.05);36422份血液样本经二次重复检查汇集池数量6071个,其中30个汇集池存在反应,后将其拆分单个检测样本,16个汇集池样本拆分17个阳性样本,拆分率为0.047%;17个阳性样本经再次鉴定,HBV、HCV、HIV反应阳性样本数分别为15个、1个、1个。结论核酸扩增技术在血清病学标志物HIV、HBV、HCV检测中有显著效果,符合率与酶联免疫法相当。

河源地区无偿献血人群乙型肝炎病毒感染标志物检测结果分析

目的探讨河源地区实施核酸检测后无偿献血人群乙型肝炎病毒感染标志物检出情况,为血液安全策略提供参考。方法对2016年1月~2018年12月我站无偿献血者样本的HBsAg及HBV DNA检测结果进行统计分析,对不合格样本按献血者献血年份、年龄和是否重复献血进行分组比较。对128例HBsAg-/HBV DNA+样本进行QPCR病毒载量测定。结果河源地区60351例无偿献血样本中检出HBsAg 667例,检出率为1.11%;57594例ELISA及ALT检测结果阴性的样本中检出HBsAg-/HBV DNA+128例,检出率为0.22%。不同年份HBsAg、HBsAg-/HBV DNA+检出率差异均无统计学意义(χ^2=3.846、8.402;P=0.145、0.150)。不同年龄、不同献血次数间的HBsAg检出率差异均有统计学意义(χ^2=51.513、492.800;P均=0.000)。不同年龄、不同献血次数间HBsAg-/HBV DNA+检出率差异均有统计学意义(χ^2=34.217、15.617;P均=0.000)。128例HBsAg-/HBV DNA+样本,其中95例病毒载量范围为0.210~1383.929IU/mL,中位数26.786 IU/mL,其余33例均不可定量。结论河源地区无偿献血者乙肝病毒感染标志物检出率较高,ELISA联合NAT检测有效降低了输血传播HBV风险。从固定献血人群特别是低年龄段人群采集血液,可有效降低输血传播HBV风险。