核孔蛋白p62促进非受体酪氨酸激酶c-Abl进入细胞核

非受体酪氨酸激酶c-Abl广泛表达于各组织细胞中,其序列高度保守,它的亚细胞定位与其功能密切相关。c-Abl借助其C端的3个核定位信号(NLS)和1个核输出信号(NES)完成细胞核-细胞质间的穿梭过程。关于c-Abl核-质穿梭的详细机制还不清楚。通过酵母双杂交系统,以人类Ib型c-Abl作为诱饵蛋白进行HeLa细胞cDNA文库的筛选,获得了可能在c-Abl核-质穿梭过程中具有调控作用核孔蛋白p62。核孔复合物(NPC)是大分子物质进行核-质运输的惟一通道,p62是NPC的重要组成部分,它位于中央通道内侧,在许多物质的核-质穿梭过程中具有调节作用。免疫共沉淀和体外结合实验证实,c-Abl和p62之间具有相互作用,而且这种相互作用是通过c-Abl的SH3结构域与p62的P299位点之间的结合实现的;p62可被c-Abl部分磷酸化。此外,在293和DKO细胞株中共转染c-Abl和p62,发现核内的c-Abl分布增多。以上结果表明,p62具有促进c-Abl进入细胞核的作用。

基于AMPK信号通路探讨薯蓣粥对2型糖尿病大鼠胰腺自噬相关蛋白LC3-Ⅱ、p62的影响

目的:探讨薯蓣粥对2型糖尿病大鼠胰岛β细胞自噬功能及胰岛素抵抗(IR)的影响,为阐明薯蓣粥的降糖机制及推广应用提供科学依据。方法:将48只SPF级Wistar雄性大鼠按随机数表法分为空白组8只(普通饲料喂养)和造模组40只(高脂高糖饲料喂养)。6周后,造模组腹腔注射链脲佐菌素。以连续非同日2次空腹血糖(FBG)≥11.1 mmol/L为糖尿病大鼠成模标准。32只成模大鼠随机分为模型组、薯蓣粥组(薯蓣粥)、联合治疗组(薯蓣粥和二甲双胍)、二甲双胍组(二甲双胍),每组8只。灌胃干预6周后检测大鼠FBG、血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、空腹胰岛素(FINS)的变化,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。HE染色观察胰岛β细胞腺形态结构;Western blot检测AMPK、LC3-Ⅱ、p62蛋白表达。结果:HE染色结果显示:薯蓣粥组、联合治疗组以及二甲双胍组胰岛β细胞形态结构较模型组有不同程度的改善。与空白组比较,模型组大鼠FBG、TC、LDL-C、FINS、HOMA-IR水平显著升高(P<0.01),AMPK、LC3-Ⅱ蛋白表达显著下降(P<0.05),p62蛋白表达显著增加(P<0.05)。与模型组比较,薯蓣粥组、联合治疗组、二甲双胍组FBG、TC、LDL-C、FINS、HOMA-IR水平显著下降(P<0.01),AMPK、LC3蛋白表达显著升高(P<0.05,P<0.01);薯蓣粥组LC3-Ⅱ蛋白表达显著升高(P<0.01);薯蓣粥组与二甲双胍组p62蛋白表达显著下降(P<0.05)。结论:薯蓣粥能调节糖尿病大鼠糖脂代谢,改善其IR及胰岛β细胞功能,其机制可能与薯蓣粥以AMPK为作用靶点,激活胰岛β细胞自噬有关。