糖酵解供能运动后“超量恢复区间”的研究

超量恢复理论自提出以来争议颇多,在运动实践中的成功应用更为鲜见。以一周作为一个训练单元,安排了单、双、三周期训练致大鼠疲劳时机体72小时恢复过程的恢复规律研究。发现大鼠在双周期训练后各指标36小时左右的恢复期间内有超量恢复的现象和在三周期训练后72小时恢复期间内存在内脏恢复过程滞于外周恢复的情况。因此,研究认为:运动实践中存在超量恢复的现象;由于恢复是一个过程,外周与内脏的恢复具有不同步性,所以超量恢复不能仅有能量代谢指标恢复的变化,更要重视外周运动能力、生化指标、内脏等器官系统疲劳恢复指标的相关变化;本研究还提出了运动后恢复过程存在"超量恢复区间"及真、假超量恢复区间的概念以及包含真假超量恢复的"超量恢复区间"理论的构想。

丙酮酸激酶M2型(PKM2)入核机制和核内作用的研究进展

传统观点认为丙酮酸激酶M2型(pyruvate kinase M2,PKM2)通过催化肿瘤细胞糖代谢来促进肿瘤细胞生长。近年来研究发现除了酶催化功能外,PKM2还能通过多种途径进入细胞核,在核内作为蛋白激酶广泛参与转录调控、蛋白修饰等过程。本文将就这方面的研究成果作一综述。

脱氢枞胺衍生物DHAA-urea对人肝癌HepG2细胞糖代谢的抑制作用(英文)

探讨脱氢枞胺衍生物DHAA-urea对有氧和乏氧状态的HepG2细胞的生长及糖代谢的影响。150μmol/L浓度氯化钴的无血清DMEM预培养24h致乏氧细胞模型,使用MTT法检测DHAA-urea(1～50μmol/L)分别对常氧和乏氧HepG2细胞的生长抑制情况。分别使用试剂盒检测DHAA-urea作用常氧与乏氧HepG2后细胞内ATP浓度,乳酸脱氢酶(LDH)以及葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)活性的变化。与正常对照组比较,DHAA-urea对常氧乏氧HepG2细胞的生长都具有明显的抑制作用,胞内ATP,LDH和G6PD含量与活性均受到抑制,且与DHAA-urea剂量和作用时间呈依赖性。DHAA-urea对HepG2细胞的生长抑制很可能与其抑制糖代谢导致能量耗竭相关。DHAA-urea是抗肿瘤领域较具发展潜力的新化合物。

介绍一种简便的红细胞无氧糖酵解率测定方法

目的 :为了简化现有的华伯氏呼吸仪检测红细胞无氧糖酵解的方法 ,进行此项研究。方法 :实验用葡萄糖试剂盒 ,高氯酸 ,可见光分光光度计 ,氮气瓶和摇床。实验分 4步进行 :任氏液。Trls -HCI溶液等试液的配制 ,任氏血的制备 ,红细胞无氧糖酵解率的测定和红细胞无氧糖酵解率的计算。结果 :用SOD保养液。在 4℃条件下保存入红细胞 75d时糖酵解率为 86 .2 %± 5 .0 % ,明显优于GMA保养液 39.2 %± 8.9%。结论 :不用华伯氏仪的红细胞无氧糖酵解率的测定方法 ,操作简便 ,方法准确可靠 。

1.6-二磷酸果糖对缺血再灌注心肌能量代谢和超微结构的影响

目的 :研究 1.6-二磷酸果糖 ( FDP)对缺血再灌注心肌能量代谢和超微结构的影响 ,并探讨其作用机制。方法 :2 4只家兔随机平分为两组 ,1组 (体外循环组 12只 ) , 组 (体外循环 +1.6-二磷酸果糖组 12只 ) ,常规建立兔体外循环模型 ,用高效液相色谱法 ( HPLC)检测兔心肌缺血前后 ( ATP)含量的变化 ,并观察心肌超微结构的改变。结果 :缺血再灌注后 , 组心肌 ATP含量明显低于 组 ,分别是 1.65± 1.10 nmol/ g·心肌组织和 3 .91± 1.45 nmol/ g心肌组织 ,两组比较差异有极显著性 ( P<0 .0 1) ;心肌超微结构观察显示 , 组保存优于 组。结论 :FDP对缺血再灌注心肌能量代谢和超微结构有显著的保护作用。

白藜芦醇对生长肥育期宁乡猪肉品质的影响

本试验旨在研究饲粮中添加白藜芦醇对生长肥育期宁乡猪肉品质的影响。选用体重(43±1)kg的宁乡猪24头,随机分为2个组,每组6个重复,每个重复2头(公母各占1/2)。对照(CON)组饲喂基础饲粮,白藜芦醇(RES)组饲喂在基础饲粮中添加300 mg/kg白藜芦醇的试验饲粮。试验期80 d。饲养结束后,每栏取1头体重接近平均体重的猪进行屠宰,并采集背最长肌、股二头肌及腰大肌样品,用于肉品质指标检测。结果表明:1)饲粮中添加白藜芦醇对宁乡猪的生长性能和肌肉主要营养成分含量均无显著影响(P>0.05)。2)与对照组相比,白藜芦醇组宁乡猪宰后24 h背最长肌的红度(a^(*))显著提高(P<0.05),宰后24 h背最长肌和股二头肌的黄度(b^(*))有降低趋势(0.05≤P<0.10)。3)与对照组相比,白藜芦醇组宁乡猪背最长肌的磷酸果糖激酶(PFK)活性极显著降低(P<0.01),股二头肌的丙酮酸激酶(PK)活性和乳酸(LA)含量显著降低(P<0.05);肌肉pH无显著变化(P>0.05)。4)与对照组相比,白藜芦醇组宁乡猪背最长肌的谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性、总抗氧化能力(T-AOC)及股二头肌的GSH-Px活性均极显著提高(P<0.01),股二头肌的丙二醛(MDA)含量极显著降低(P<0.01)。由此可见,饲粮中添加白藜芦醇可以提高宁乡猪肌肉的抗氧化能力,降低宰后肌肉的糖酵解速率,对肉品质具有一定的改善作用。

3-磷酸甘油酸脱氢酶促进丝氨酸合成在肿瘤进展中的机制

丝氨酸生物合成途径活性的上调是许多癌症明显的共同特征。该途径的第一种限速酶3-磷酸甘油酸脱氢酶(PHGDH)在黑色素瘤、乳腺癌和肾癌等癌组织中高表达,对肿瘤细胞增殖、转移、侵袭有着重要作用。糖酵解中间产物3-磷酸甘油酸在PHGDH作用下,氧化为磷酸羟基丙酮酸并最终合成丝氨酸。丝氨酸转化为甘氨酸,然后在核苷酸、s-腺苷甲硫氨酸(SAM)和还原型谷胱甘肽(GSH)的合成中起着重要的作用。PHGDH有望成为肿瘤治疗的新靶点。

能量合成障碍在阿尔茨海默病发病中的作用

阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)是一种多病因导致的疾病,因无有效根治的药物,其早期的病理变化备受关注。大脑作为高能量需求器官,对燃料供应和能量变化非常敏感,葡萄糖代谢紊乱和线粒体功能缺陷是大脑老化的重要标志,也是能量合成障碍的重要环节,早于AD的认知障碍和病理特征,被认为是AD发病的关键环节。该文从脑血流量和脑内葡萄糖摄取、利用以及代谢调控等方面,综述了能量合成障碍在AD发病中的研究进展。

抑制FoxM1基因表达对甲状腺乳头状癌TPC-1细胞糖酵解途径的影响

目的探讨抑制FoxM1基因表达对甲状腺乳头状癌(PTC)细胞葡萄糖摄取和乳酸产量的影响及FoxM1与PTC细胞糖酵解途径的相关性。方法用慢病毒rLv-hFoxM1转染PTC TPC-1细胞,检测转染后的TPC-1细胞中Fox M1 mRNA及蛋白表达水平的变化;应用噻唑蓝(MTT)比色法检测抑制FoxM1基因对TPC-1细胞活性的影响;检测转染慢病毒rLv-hFoxM1后的TPC-1细胞在葡萄糖摄取量和乳酸产量方面的变化以及糖酵解途径关键酶己糖激酶1(HK1)、己糖激酶2(HK2),葡萄糖转运体蛋白1(Glut1)含量的变化。结果在TPC-1细胞中,慢病毒rLv-hFoxM1转染可明显抑制TPC-1细胞中FoxM1基因mRNA及蛋白水平的表达,且转染慢病毒rLv-hFoxM1后TPC-1细胞的活性明显下降(P<0.05),随着FoxM1基因表达降低,TPC-1细胞的葡萄糖摄取量及乳酸产量均明显下降(P<0.01),抑制FoxM1基因后,其葡萄糖转运蛋白(Glut1)、己糖激酶1(HK1)和己糖激酶(HK2)含量明显降低。结论抑制FoxM1基因的表达能降低PTC细胞的糖酵解水平。

再生障碍性贫血红细胞膜(Na^+·K^+)-ATP酶活性变化

用酶学比色法测定10例再生障碍性贫血慢性期患者红细胞膜(Na^+·K^+)-ATP酶活性,结果为每小时2.577±0.86微克分子磷/毫克蛋白(均值±标准差),明显高于正常组。红细胞膜(Na^+·K^+)-ATP酶活性与糖酵解相偶联。再障慢性期(Na^+·K^+)-ATP酶活性升高,可作为病情变化的辅助指标。

越鞠丸干预DMBA诱导乳腺癌模型大鼠的效应及机制研究

探究越鞠丸对乳腺癌的抑制作用及其机制。92只SPF级SD雌性大鼠随机选14只为对照组;其余78只采用7,12-二甲基苯并蒽(DMBA)建立乳腺癌模型。将模型建立成功的大鼠随机分为模型组、他莫昔芬组(1.9 mg·kg^(-1)·d^(-1))、越鞠丸低剂量组(17 g·kg^(-1)·d^(-1))、越鞠丸高剂量组(34 g·kg^(-1)·d^(-1))。每日观察大鼠精神、饮食、活动,隔日称量体质量,给药12周后处死动物,称量瘤重;酶联免疫吸附实验(ELISA)检测血清雌激素、孕酮水平;HE染色观察乳腺和肿瘤组织病理学改变;蛋白质免疫印迹法(Western blot)测定葡萄糖转运蛋白1(glucose transporter 1,GLUT1)、乳酸脱氢酶A(lactate dehydrogenase A,LDHA)、磷酸果糖激酶(phosphofructokinase muscle,PFKM)、丙酮酸激酶M2(pyruvate kinase isozyme type M2,PKM2)、己糖激酶2(hexokinase 2,HK2)和核因子-κB(nuclear facter-κB,NF-κB)、磷酸化NF-κB表达情况;采用16S rRNA高通量测序检测肠道微生物组。结果显示,与模型组相比,越鞠丸高、低剂量组肿瘤抑制率分别为15.8%、64.5%,低剂量组抑制作用更为显著;与对照组相比,模型组血清中雌激素、孕酮水平明显升高,越鞠丸给药后血清中雌激素、孕酮水平相较于模型组呈下降趋势,且越鞠丸低剂量组作用显著(P<0.05);HE染色结果显示,与模型组比较,越鞠丸给药组乳腺组织增多的腺体减少,乳腺导管扩张程度减轻,腺泡数量与腺泡腔面积减少,分泌物减少,乳腺上皮细胞的复层排列层次减少;同时研究发现越鞠丸干预后糖酵解相关蛋白GLUT1、LDHA、PFKM、PKM2、HK2和炎症因子NF-κB的表达显著下调(P<0.05),并使乳腺癌大鼠肠道微生物群落多样性、微生物组成和结构及群落丰度发生改变。研究结果表明,越鞠丸对乳腺癌具有抑制作用,其作用机制可能与调节雌激素、孕激素分泌,调控糖酵解和炎症因子以及影响肠道微生物组成密切相关。

急性髓系白血病患者缺氧诱导因子-1α和糖酵解相关基因表达及意义

目的观察急性髓系白血病(AML)患者缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)及糖酵解相关基因表达情况,探讨HIF-1α对AML患者预后的影响及可能机制。方法2015年7月—2018年7月郑州大学第一附属医院、郑州大学附属儿童医院初诊AML患者90例为AML组,健康异基因造血干细胞移植供者18例为对照组,采用实时荧光定量PCR法检测2组骨髓单个核细胞HIF-1αmRNA相对表达量及糖酵解相关基因HK2、PFKM、ALDOA、PGK1、PDK1、LDHA mRNA相对表达量,采用Spearman相关法分析AML患者HIF-1αmRNA相对表达量与HK2、PFKM、ALDOA、PGK1、PDK1、LDHA mRNA相对表达量的相关性。AML组患者采用“3+7”方案诱导化疗,1个疗程后达完全缓解者45例,未达完全缓解者45例,比较完全缓解者与未完全缓解者HIF-1αmRNA相对表达量。以HIF-1αmRNA相对表达量中位数(2.040)为界,将AML患者分为低表达组(HIF-1αmRNA相对表达量<2.040)45例与高表达组(HIF-1αmRNA相对表达量≥2.040)45例,比较2组FAB分型、白细胞计数、血小板计数、血红蛋白、骨髓原始细胞比例、预后危险度分层及1个疗程达完全缓解比率等,采用单因素及多因素Cox回归分析AML患者预后不良的影响因素。随访1~72个月,记录高、低表达组生存情况;绘制Kaplan-Meier生存曲线,采用log-rank法比较2组无事件生存期、总生存期。结果AML组HIF-1α、HK2、PFKM、ALDOA、PGK1、PDK1、LDHA mRNA相对表达量[2.040(0.836,4.750)、1.743(0.946,3.752)、1.200(0.595,2.701)、4.212(2.980,6.941)、3.254(1.612,5.443)、2.160(1.140,5.724)、2.621(1.425,6.094)]均高于对照组[1.000(0.945,1.074)、1.000(0.881,1.095)、1.000(0.600,1.238)、1.000(0.841,1.256)、1.000(0.921,1.220)、1.035(0.842,1.200)、1.035(0.829,1.209)](P<0.05)。AML患者HIF-1αmRNA相对表达量与HK2、PFKM、ALDOA、PGK1、PDK1、LDHA mRNA相对表达量均呈正相关(P<0.05)。诱导化疗1个疗程达完全缓解者HIF-1αmRNA相对表达量[1.800(0.793,3.075)]低于未完全缓解者[2.919(0.838,5.812)](Z=2.719,P=0.008)。高表达组性别比例、年龄、FAB分型、白细胞计数、血小板计数、血红蛋白、骨髓原始细胞比例、预后危险度分层及诱导化疗1个疗程达完全缓解比率与低表达组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。预后危险度分层(HR=1.840,95%CI:1.245~2.719,P=0.002)、诱导化疗1个疗程达完全缓解(HR=2.074,95%CI:1.155~3.725,P=0.015)、HIF-1αmRNA相对表达量(HR=1.863,95%CI:1.063~3.265,P=0.030)是AML患者预后不良的影响因素。中位随访时间21个月,高表达组无事件生存期[(10.67±9.26)个月]、总生存期[(12.78±11.39)个月]均短于低表达组[(21.60±15.29)、(21.22±15.47)个月](χ^(2)=22.450,P<0.001;χ^(2)=4.720,P=0.030)。结论AML患者HIF-1α表达增高,HIF-1α高表达、治疗前预后危险度分层为预后不良、诱导化疗1个疗程未达完全缓解的AML患者预后不良的风险较大,HIF-1α可能通过激活糖酵解途径促进AML进展及耐药。

LncRNA D5在卵巢癌组织中的表达及其功能研究

目的:探讨LncRNA D5在卵巢癌组织中的表达及其对卵巢癌细胞糖代谢的影响和与卵巢癌患者预后的关系。方法:采用实时定量聚合酶链反应法(q RT-PCR)测定62例卵巢癌患者组织LncRNA D5表达,Kaplan-Meier生存分析其表达与患者预后的关系,设计合成LncRNA D5/p EX-2真核过表达质粒,分别在卵巢癌细胞SKOV3、A2780中进行转染,实验分为空白对照组及转染组,48 h后测定卵巢癌细胞SKOV3、A2780的葡萄糖摄取能力、糖酵解速率、氧耗以及乳酸排除率。结果:LncRNA D5在良性卵巢肿瘤或正常卵巢组织中表达比较均一,其在卵巢癌中的表达与良性卵巢肿瘤或正常卵巢组织相比,具有显著差异(P<0.05)。LncRNA D5表达下调的卵巢癌患者总生存期和无瘤生存期均较LncRNA D5表达上调的卵巢癌患者明显缩短(P<0.05)。通过转染上调A2780、SKOV3中的LncRNA D5,细胞的葡萄糖摄取能力、糖酵解速率以及乳酸排出显著上调,而细胞的氧消耗明显下降(P<0.05)。结论:LncRNA D5在卵巢癌中表达异常,与卵巢癌患者的预后不良相关,LncRNA D5对卵巢癌细胞的糖酵解能力具有一定的调控作用。

长链非编码RNA调节肿瘤细胞糖代谢的研究进展

细胞内能量代谢异常是肿瘤的十大特征之一。肿瘤细胞主要通过Warburg效应提供能量,从而实现快速增殖和侵袭,这是目前肿瘤诊断的一个重要理论基础。长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)可以在基因转录、表观遗传学和转录后水平等方面发挥重要的调控作用,并且通过与其他大分子相互作用来调控细胞的增殖、迁移、侵袭和凋亡等生物学过程。近年来,随着研究深入,人们发现lncRNA对肿瘤微环境具有调节作用,其中主要影响肿瘤的糖代谢水平。本文从信号通路、代谢酶及基因3个方面总结近年来有关肿瘤糖代谢中lncRNA作用机制的研究进展,以期为肿瘤临床治疗提供新的靶点及预后标志物。